系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的检测及意义

目的 探讨用膜表面标志CD4+ CD25+ CD127low/-作为检测调节性T(Treg)细胞标记的可行性,并探讨其在系统性红斑狼疮(SLE)中的临床意义.方法 用流式细胞术检测SLE组及健康对照组外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg细胞及CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞的比例,并分析两组CD4+ CD25+ CD127low/-Treg细胞与CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞比例之间的相关性.结果 SLE组外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg细胞比例为(3.31±0.82)％CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞比例为(2.28±0.47)％,均显著低于健康对照组的(6.07±1.59)％和(5.01±1.09)％(P＜0.01).SLE组及健康对照组外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg细胞比例与CD4+ CD25+FoxP3+ Treg细胞比例之间呈显著正相关(r=0.713、r=0.709,P＜0.01).结论 膜表面标志CD4+ CD25+ CD127low/-可以用来鉴定Treg细胞;SLE患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-Treg细胞的显著减少可能与SLE的发病有关.     

变应性鼻炎患者外周血CD+4CD+25Treg细胞检测及临床意义

目的 了解变应性鼻炎患者外周血CD+4 CD+25 Treg细胞含量并探讨其临床意义.方法 采用流式细胞仪分别检测变应性鼻炎15例外周血淋巴细胞中CD+4 T细胞占T细胞比例以及CD+4 CD+25 Treg细胞占CD+4 T细胞的比例,并与15例健康对照者进行比较.结果 变应性鼻炎患者外周血CD+4 T细胞占T细胞比例与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);变应性鼻炎患者外周血中CD+4 CD+25 Treg细胞、Foxp3+ CD+4 CD+25 T细胞占CD+4 T细胞的比例与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),2组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 变应性鼻炎患者CD+4 CD+25 Treg细胞在外周血中比例明显减少,这可能在变应性鼻炎的发病机制中起重要作用.     

过敏性紫癜患儿外周血CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞表达及意义

目的探讨过敏性紫癜(schonlein-henoch purpura,HSP)患儿治疗前后外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达及其临床意义。方法采用免疫荧光流式细胞技术检测56例HSP患儿治疗前后及20例健康儿童外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值。结果 HSP患儿治疗前CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值明显低于治疗后组和正常对照组(P<0.01),HSP治疗后组CD4+CD25+CD127-调节性T细胞表达值与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSP治疗前患儿外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值较正常对照组明显降低,而在治疗有效后升高,说明调节性T细胞可能参与了HSP的发病和病情的发展。而CD4+CD25+CD127-Treg细胞水平的检测可作为对HSP患儿预后判断的一个有效指标。     

胃癌患者外周血CD4+CD25+CD127lo/-调节性T细胞的表达及意义

目的:探讨胃癌患者外周血中CD4 CD25 CD127lo/-调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的表达及意义。方法:采用流式细胞术检测26例胃癌患者、30例胃溃疡患者和20例健康志愿者外周血中CD4 CD25 CD127lo/-Treg、细胞毒性T细胞(cytotoxic T lympho-cytes,CTL)和NK细胞,采用ELISA法检测血清中γ-干扰素(interferon γ,IFN-γ)的表达水平。结果:胃癌患者外周血中CD4 CD25 CD127lo/-Treg占CD4 T淋巴细胞的百分比为(6.12±2.08)%,高于胃溃疡患者和健康志愿者(P均<0.05)。胃癌患者外周血中CD4 CD25 CD127lo/-Treg水平与CTL、NK细胞及IFN-γ呈负相关。结论:胃癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4 CD25 CD127lo/-Treg水平较高,对胃癌患者具有肿瘤免疫抑制作用。     

不同剂量雷帕霉素对小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的研究不同剂量雷帕霉素对小鼠体内Treg细胞的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素1、2、3 mg.kg-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比)。结果实验组(B、C、D)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(9.62±1.43)%(、13.76±1.97)%(、15.41±2.45)%和(12.23±4.56)%(、23.03±6.18)%(、25.17±6.42)%,对照组(A)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(3.52±0.65)%和(6.53±3.01)%,无论是在外周血还是脾细胞中,B、C、D组CD4+CD25+Treg细胞水平明显高于A组(P0.05),C、D组与B组之间CD4+CD25+Treg细胞水平也有明显差异性(P0.05),C组和D组之间CD4+CD25+Treg细胞水平无明显差异性(P0.05)。结论雷帕霉素能够诱导昆明系小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞增殖,其使用剂量可以影响CD4+CD25+Treg细胞的增殖程度。     

肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的 探讨检测肺癌患者手术前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义.方法 原发性肺癌患者43例(肺癌组),健康体检者20例(健康对照组).应用流式细胞术检测其外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平.结果 肺癌组患者手术前外周血CD4+CD25+调节性T细胞表达高于健康对照组(P<0.01);肺癌组患者术后30 d时外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平较术前明显下降(P<0.05).结论 肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平增高;肺癌患者术后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平下调,提示术后机体抗肿瘤免疫功能有了一定程度恢复.     

支原体肺炎儿童外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平的变化及维生素A的调节作用

目的 探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)、T细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CDs水平的变化及临床意义;探讨体外实验时维生素A体内活性代谢产物视黄酸对MPP患儿外周血淋巴细胞CD4+ CD25+ Treg细胞、T细胞亚群CD3+、CD4+表达及CD4+/CD8+比率的调节干预作用.方法 选择2012年10-12月在空军总医院儿科确诊为MPP的20例住院患儿作为研究对象,其中10例患儿作为病例试验组,另10例患儿作为病例对照组(即未与视黄酸孵育),同期10例同龄健康儿童作为正常对照组.收集患儿及正常对照儿童外周血标本,分离单个核细胞,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ Treg细胞、T细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平,病例试验组提取其淋巴细胞在体外培养基中加入一定量视黄酸共同培养孵育,再次测定CD4+ CD25+ Treg细胞、T细胞亚群CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平,将上述指标进行比较分析.结果 病例组患儿外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ Treg细胞、CD4+/CD8+、CD3+百分比分别为(4.5±1.9)％、(1.3±0.9)％、(38.9±11.4)％,正常对照组儿童分别为(13.2±2.5)％、(7.9±3.0)％、(65.1±8.8)％,病例对照组明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),而与视黄酸共同孵育后病例试验组以上指标明显升高,分别上升至(9.2±3.8)％、(5.9±2.5)％、(81.3±11.6)％,与病例对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MPP患儿外周血淋巴细胞中CD4+ CD25+ Treg细胞、CD3+T细胞表达明显受抑,CD4+/CD8+亚群比例异常,T细胞亚群数量及功能明显紊乱,而体外试验时维生素A体内活性代谢产物视黄酸干预后能增强淋巴细胞CD4+ CD25+ Treg细胞、CD3+ T细胞表达,恢复CD4+/CD8+亚群比例,纠正T细胞亚群功能失衡,从而增强、协调机体免疫、抗感染能力,为维生素A辅助治疗MPP提高参考.     

甲泼尼龙对哮喘患者外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞影响的体外研究

目的观察哮喘患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)功能状态及甲泼尼龙对其的影响。方法清晨取静脉血5 mL,常规分离外周血单个核细胞,分为健康组、哮喘组及1×10-7 mol·L-1甲泼尼龙哮喘干预组,刺激培养48 h,用ELISA法测定IL-10及TGF-β1的浓度;流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg的比例及细胞内Foxp3表达,用SPSS 17.0进行分析。结果哮喘组,外周血CD4+ CD25+ Treg细胞比例降低,CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞减少,TGF-β1分泌减少,IL-10分泌有增高趋势,但与健康组比较无统计学意义;甲泼尼龙可以明显增加哮喘急性发作期患者CD4+ CD25+ Treg比例,Foxp3表达明显增强;但未能增加TGF-β1及IL-10的分泌。结论哮喘患者CD4+ CD25+ Treg功能低下,可能是哮喘发病机制之一;甲泼尼龙可能通过上调CD4+ CD25+ Treg数量,起到控制哮喘急性发作的作用。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在晚期肺癌中的表达及临床意义

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)在晚期肺癌中的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析30例晚期肺癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平,与10例健康人比较。结果晚期肺癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞数量增加(17.9±6.1)%,表达高于正常人(6.81±0.4)%(P<0.001)。肺癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关(P>0.05),但与临床分期和组织学分化程度有关(P<0.01)。结论Treg细胞在肺癌患者中比率明显升高,并与临床进展有关。     

SLE患者外周血CD4+CD25+Treg细胞、IFN-γ及IL-17的表达及意义

目的 通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞计数、IFN-γ及IL-17的表达水平,探讨其在SLE发病中的作用.方法 选取SLE患者24例及健康对照者22例作为研究对象,并根据SLEDAI评分将SLE患者分为活动组和非活动组,运用流式细胞技术检测外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞的水平变化;运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IFN-γ及IL-17的含量,并进行相关性分析.结果 ①SLE患者外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞占CD4+T细胞的比例显著低于对照组(P＜0.05);②SLE患者血清IFN-γ及IL-17水平较对照组明显升高(P＜0.05),且活动组血清IL-17水平较非活动组明显升高(P＜0.05);③SLE患者CD4+ CD25+ Treg细胞水平与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.673,P＜0.05);血清IL-17水平与SLEDAI平分成正相关(r=0.467,P＜0.05).结论 SLE患者外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞数量的减少和血清中IL-17、IFN-γ水平的升高,可能与SLE患者的细胞免疫紊乱有关,且CD4+ CD25+ Treg细胞数量减少或IL-17水平升高可引起疾病活动.     

CD4~＋CD25~＋调节性T细胞在肺癌患者中的表达及临床意义

目的探讨肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析45例肺癌患者与15例健康对照组外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞的比例。结果肺癌患者外周血CD4＋CD25＋Treg细胞占CD4＋T细胞比例为（17.8±6.6）%,表达高于对照组（6.49±0.5）%（P〈0.001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量在不同临床分期和组织学分化程度中的差异有统计学意义（P〈0.01）,但与患者的病理类型无关（P〉0.05）。结论 Treg细胞在肺癌患者中表达明显升高,是肺癌患者免疫功能紊乱的一个证据。     

慢性乙型重型肝炎患者外周血调节性T细胞表达

目的通过观察外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）水平,探讨其在慢性乙型重型肝炎患者中的作用。方法流式细胞仪技术检测30例慢性乙型重型肝炎患者（CSHB）、30例慢性乙型肝炎患者（CHB）和15例健康志愿者（正常对照组）PBMCs中Treg的比例。结果慢性乙型重型肝炎患者外周血Treg细胞的平均百分率为（2．45±0．23）％,较慢性乙型肝炎患者的（9．48±0．48）％有极其显著差异（P〈0．01）,较健康对照组（5．65±0．61）％则有显著差异（P〈0．05）。结论Treg在慢性乙型重型肝炎的病情进展及病毒抑制清除等方面起着重要的作用。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在晚期肺癌中的表达及临床意义

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在晚期肺癌中的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术分析30例晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达水平,与10例健康人比较。结果晚期肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量增加（17．9±6．1）％,表达高于正常人（6．81±0．4）％（P〈0．001）。肺癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关（P〉0．05）,但与临床分期和组织学分化程度有关（P〈0．01）。结论Treg细胞在肺癌患者中比率明显升高,并与临床进展有关。     

CD4^＋CD25^＋Treg细胞、TGF-β和IL-10在反复自然流产中的变化

目的探讨外周血CD4＋CD25＋Treg细胞数量和抑制性细胞因子TGF-βI、L-10含量变化在反复自然流产中的作用。方法采用ELISA法检测30例反复自然流产患者3、0例正常妊娠妇女和30例正常非孕妇女外周血抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量,三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4＋CD25＋T细胞比例。结果反复自然流产组妇女外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的百分率（6.66±1.30）%明显低于正常非孕组（10.99±2.64）%（P〈0.05）和正常妊娠组（12.63±3.05）%（P〈0.05）。反复自然流产组妇女外周血TGF-β（123.64±27.31）pg/L明显低于正常非孕组对照组TGF-β（179.25±24.67）pg/L（P〈0.05）和正常妊娠组TGF-β（211.72±63.49）pg/L（P〈0.05）;反复自然流产组妇女外周血IL-10（145.37±42.45）pg/L明显低于正常非孕组对照组IL-10（203.47±42.56）pg/L（P〈0.05）和正常妊娠组IL-10（234.45±51.21）pg/L（P〈0.05）。结论外周血CD4＋CD25＋Treg细胞的比例低下以及抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量降低可能参与反复自然流产的发生。     

Treg细胞在儿童过敏性哮喘SIT治疗过程中的变化

目的：本研究通过观察对室尘螨（HDM）过敏的儿童哮喘患者,过敏原特异性免疫治疗（allergen specific immunotherapy, SIT）后外周血CD4＋CD25＋CD127-Treg细胞（regulatory T cell, Treg）细胞）占CD4＋T cell的百分比的变化,以及它们在SIT治疗中的作用,初步探讨儿童过敏性哮喘SIT的机制,从而为哮喘的防治提供新思路。方法选取郑州大学第一附属医院儿科门诊48例儿童过敏性哮喘患者分两组,一组进行标准化SIT 1.5-2年后,采集两组患者的外周静脉血。用流式细胞仪检测每组标本中CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比,结果采用统计学软件进行统计学分析。结果CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比在HDM-SIT组显著增高。结论本实验进一步证实了哮喘患者SIT治疗有效;在HDM-SIT组CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比升高,提示CD4＋CD25＋CD127-T细胞可能在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗中起重要作用。     

特异性免疫治疗对哮喘大鼠白细胞介素-10和CD_4~＋CD_（25）~＋调节性T细胞的影响

目的：探讨特异性免疫治疗（specific immunotherapy,SIT）对哮喘大鼠白细胞介素-10（IL-10）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Tr）的影响。方法：40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组、哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组,每组10只。通过卵蛋白（OVA）雾化吸入的方法对致敏大鼠进行SIT干预,观察各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞分类及计数结果、血清和BALF中IL-10水平及外周血CD4＋CD25＋Tr百分率变化。结果：正常对照组BALF和血清中IL-10浓度分别高于哮喘组和SIT对照组（均为P〈0.01）,哮喘组和SIT对照组BALF和血清中IL-10浓度低于SIT治疗组（P〈0.01,P〈0.05）;正常对照组外周血CD4＋CD25＋Tr百分率显著高于哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组（P〈0.01）,而SIT治疗组CD4＋CD25＋Tr百分率分别高于哮喘组和SIT对照组（P〈0.05）。结论：通过上调体内IL-10和CD4＋CD25＋Tr趋于正常状态可能是SIT治疗哮喘有效的重要机制。     

肝癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞的检测意义及冷冻消融对其表达的影响

目的探讨肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化意义及冷冻消融治疗对其表达的影响。方法采用流式细胞技术分别检测18例原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞的变化,并与健康对照组比较。同时检测10例原发性肝癌患者冷冻消融术前和术后3个月外周血CD4+CD25+T细胞水平的变化。结果肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞占总CD4+T淋巴细胞百分比高于健康对照组[(15.1±1.6)%vs(7.3±1.2)%,t=15.56,P=0.000]。其升高与患者血清AFP浓度(t=2.16,P<0.05)、肿块大小(t=2.73,P<0.05)和临床分期(t=3.00,P<0.01)显著相关,而与患者性别(t=0.23,P>0.05)、年龄(t=1.61,P>0.05)和结节数量(t=1.00,P>0.05)无显著相关。冷冻消融治疗能使CD4+CD25+T细胞显著性降低[(14.5±1.6)%vs(11.3±1.4)%,t=4.37,P<0.01]。结论原发性肝癌患者外周血CD4+CD25+T细胞水平较高,检测外周血CD4+CD25+T细胞表达可作为肝癌患者荷瘤状况和疗效评估的方法之一。     

恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25的测定与临床检验学研究

目的探讨恶性肿瘤患者T淋巴细胞CD25＋水平的临床意义。方法用流式细胞仪检测70名正常人和274例恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25＋和CD8＋CD25＋水平。结果恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25＋水平比正常人高,差异有统计学意义（P〈0.05）;恶性肿瘤患者外周血CD8＋CD25＋水平与正常人比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。其中,食管癌、肝癌和肺癌的CD4＋CD25＋水平与正常人比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;肠癌、胃癌和鼻咽癌的CD4＋CD25＋水平与正常人比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论恶性肿瘤患者外周血CD4＋CD25水平的增高可作为恶性肿瘤免疫诊断的参考指标。