雌激素受体基因多态性与江西籍汉族女性SLE相关性研究

目的 探讨雌激素受体α（ERα）基因多态性与江西籍汉族女性SLE患者是否存在相关性。方法 95例江西籍汉族女性SLE患者（18例月经初潮前起病和77例月经初潮后起病）及100例江西籍健康女性,通过PCR－限制性片段长度多态性技术,对其全血ERα PvuⅡ和XbaⅠ位点进行分型,并分析SLE患者月经初潮前与初潮后起病组等位基因及基因型频率分布差异。结果 P等位基因频率SLE组（35.8%）高于对照组（27%）,两组差异有统计学意义（P < 0.05）;月经初潮前起病组（19.4%）低于初潮后（39.6%）起病组（P < 0.05）。月经初潮前起病组Xxpp基因频率（16.7%）明显高于正常对照组（1%）和初潮后起病组（1.3%）。结论 江西籍汉族女性SLE患者ERα基因的P基因频率表达增高,Xxpp基因型SLE女性患者更易出现初潮前起病的特征。     

女性SLE患者骨桥蛋白基因rs2853750及rs6811536突变差异与发病风险及不同并发症的相关性

目的探讨女性SLE患者骨桥蛋白(OPN)基因rs2853750及rs6811536突变差异与发病风险及不同并发症的相关性。方法随机选取2013-2015年经广西右江民族医学院附属医院确诊的200例女性SLE患者作为病例组,并选取同期在本院进行体检的200名同性别健康人作为对照组,采用单碱基延伸PCR技术和DNA测序法检测OPN基因多态性,对比SLE组与健康组、SLE组与SLE并发症组的OPN基因rs2853750和rs6811536位点的基因型和等位基因分布频率,并分析OPN基因单倍型频率。结果广西人群中SLE组和健康对照组OPN rs2853750和rs6811536位点的基因型和等位基因频率以及基因单倍型频率差异均无统计学意义,rs2853750基因型AG和等位基因(A/G)频率与SLE合并关节炎相关,发病风险差异具有统计学意义(P=0.035,0.04);rs6811536基因型和等位基因在伴并发症及不伴并发症组间发病风险差异无统计学意义(P0.05)。结论广西女性OPN rs2853750和rs6811536基因多态性与SLE的发病风险无关,rs2853750可能是SLE女性患者并发关节炎的易感位点。     

SLE患者过氧化氢酶基因-330位点单核苷酸多态性研究

目的 探讨过氧化氢酶(CAT)-330位点单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法 用聚合酶链反应（PCR）-限制性片段长度多态性法对CAT基因-330多态性位点作基因分型。结果 患者组和正常对照组间CAT-330CC、-330CT及-330TT基因型频率均无统计学差异,但活动期SLE患者中CAT-330CC基因型频率显著高于静止期SLE患者和正常人对照组,且CAT-330CC基因型与SLE患者肾损害、血液学改变以及抗U1RNP抗体和抗dsDNA抗体产生有关。结论 CAT-330CC基因型与SLE的一些临床特征相关联,拥有CAT-330CC基因型的患者病情严重,预后差。     

白细胞免疫球蛋白样受体A2基因多态性与上海地区汉族系统性红斑狼疮相关性的研究

目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)患者LILRA2基因多态性位点(rs2241524)的基因型频率,探讨其与SLE易感性的相关性。方法:采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对SLE患者组(230例)及对照组(260例)LILRA2基因rs2241524位点进行基因分型。结果:SLE患者组LILRA2(rs2241524)基因型AA频率(6.5%)高于对照组(1.9%),差异有统计学意义(P0.05);基因型AG频率(36.1%)和GG频率(57.4%)分别与对照组(34.6%、63.5%)比较,差异均无统计学意义(P均0.05);SLE患者组等位基因A基因频率(24.6%)高于对照组(19.2%),差异有统计学意义(P0.05)。结论:上海地区汉族LILRA2基因多态性位点rs2241524(GA)与SLE发生相关。     

补体C1q基因簇rs631090多态性与女性系统性红斑狼疮的相关性研究

目的:确定补体C1q基因簇单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与中国女性人群系统性红斑狼疮(SLE)的易感性。方法:111例女性SLE患者及120名女性正常对照者。提取样本基因组DNA后,经普通PCR扩增目的基因,采用二代测序分析C1q基因簇上三个位点(rs631090、rs292001、rs294223)的基因型及等位基因分布。在不同的遗传模式下分析三个位点基因多态性与SLE的相关性。结果:位点rs631090(C1qB)病例组与对照组基因型频率和等位基因分布比较差异均具有统计学意义(P=0.034和P=0.008)。位点rs292001(C1qA)和rs294223(C1qB)的基因型频率及等位基因分布结果在两组间不具统计学差异(P值均大于0.05)。位点rs631090在显性遗传模型下CT/CC基因型在统计学上具有显著保护性作用(OR=0.470,95%CI=0.268-0.823,P0.05)。rs292001和rs294223在三种遗传模型下分析均未发现相关性(P值均大于0.05)。结论:在中国女性人群中rs631090位点SNPs与SLE相关,基因型CT/CC可能为女性SLE保护基因型。     

TNFSF4基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的 探讨湖北汉族人群OX40配体蛋白基因rs844648位点和rs3850641位点基因多态性与SLE的相关性.方法 SLE患者82例和正常人对照组100例,采用PCR及限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测TNFSF4基因rs844648和rs3850641位点多态性分布.结果 ①SLE组rs844648位点AA、AG和GG基因型频率分别为20.7％、62.2％、17.1％,正常人对照组为14.0％、55.0％、31.0％.SLE组rs844648多态性位点A等位基因携带者显著高于正常人对照组[73.2％比69.0％％,x2=4.69,P＜0.05,OR值=2.182( 1.068～ 4.458)],SLE组与正常人对照组间差异有统计学意义;②SNP位点rs3850641的正常人对照组AA、AG和GG基因型频率分别是76.0％、21.0％和3.0％,而SLE组分别为62.2％、31.7％和6.1％,SLE组rs3850641位点G等位基因携带者显著高于正常人对照组[37.8％比24.0％,x2=4.07,P＜0.05,OR值=1.925 (1.015 ～ 3.651)],SLE组与正常人对照组间差异有统计学意义.结论 TNFSF4基因rs844648和rs3850641位点存在单核苷酸多态性变异,该多态性与湖北地区汉族人群SLE的发病有相关性.     

广西壮族、汉族系统性红斑狼疮与Toll样受体9基因多态性研究

目的 探讨TLR9单核苷酸多态性与广西系统性红斑狼疮（SLE）患者发病的相关性,以及其在壮族、汉两个民族间的差异。 方法 聚合酶链反应-限制性酶切技术、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术（PCR-RFLP）对97例广西SLE患者和202例广西健康对照者的TLR9基因多态性进行检测,分析其基因型和等位基因频率与SLE部分临床实验室指标的关联性,并比较两民族间的差异。 结果 TLR9 rs352140CC、CT、TT基因型频率在汉族SLE组与汉族对照组中分别为42.9%、41.1%、16.1%和38.3%、55.8%、5.8%,差异有统计学意义（P < 0.05）,其C、T等位基因频率差异无统计学意义（P > 0.05）。TLR9rs352140 C/T基因型频率和等位基因频率在壮族SLE组与壮族健康对照组间、壮族SLE组与汉族SLE组间差异无统计学意义（均P > 0.05）。TLR9 rs352140TT基因型频率在ds-DNA阳性组比阴性组高（P < 0.05）,而T等位基因频率在两组间差异无统计学意义（P > 0.05）。TLR9 rs352140TT基因型频率和T等位基因的频率在SLEDAI ≥ 9组比SLEDAI < 9组高,差异有统计学意义（均P < 0.05）。TLR9 rs352140TT基因型频率和T等位基因的频率在ANA阳性组与阴性组间差异无统计学意义（均P > 0.05）。 结论 TLR9 rs352140基因多态性可能与广西汉族人SLE的易感性有关, TLR9基因多态性与部分SLE指标可能具有相关性。     

白介素27基因多态性与广西壮族系统性红斑狼疮的相关性研究

目的 探讨白介素27（IL-27）基因单核苷酸多态性与广西壮族系统性红斑狼疮（SLE）易感性之间的关系。方法 以135例SLE患者和150例正常人对照者为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和DNA测序的方法对IL-27基因-964 A/G、2905 T/G单核苷酸多态性进行基因分型。结果 SLE组和正常人对照组中IL-27基因2905 T/G多态性分布差异无统计学意义（χ2 = 1.63,P > 0.05）,而IL-27基因-964 A/G多态性的分布差异有统计学意义（χ2 = 9.88,P < 0.01）。等位基因频率的相对风险分析发现,-964 G等位基因携带者患SLE的风险是-964 A等位基因的1.725倍（OR = 1.725,95% CI：1.227 ～ 2.425）。联合基因型分析发现,IL-27的-964 G /2905 G等位基因频率SLE组（10.7%）显著高于对照组（5.3%）（P < 0.01）,-964 G/2905 G等位基因携带者显著增加了SLE的发病风险（OR = 2.351,95% CI：1.228 ～ 4.501）。结论 IL-27基因-964 A/G多态性与SLE的发病具有相关性,其中-964 G等位基因可能是SLE的遗传易感基因。     

骨桥蛋白SNPrs9138和rs11730582与女性SLE发病风险的相关性研究

目的:探讨骨桥蛋白SNP rs9138和rs11730582与女性系统性红斑狼疮(SLE)发病风险的相关性研究。方法:选取200例SLE患者作为患者组以及200例健康人作为对照组,分析rs9138和rs11730582与SLE相关性,并分析两组骨桥蛋白基因单倍型分布频率。结果:患者组和对照组rs138和rs11730582的基因型和等位基因分布频率差异无统计学意义,并且两组骨桥蛋白基因单倍型频率分布差异无统计学意义。结论:该研究人群OPN基因rs9138和rs11730582位点与SLE发病风险无关。     

GABRP基因多态性与系统性红斑狼疮发病易感性的相关性

目的:明确γ氨基丁酸A受体π亚基(GABRP)基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮(SLE)发病易感性之间的关系。方法:PCR扩增111例SLE患者和120名正常对照者外周血目的基因片段,通过二代测序对目的基因片段进行测序检测rs929763位点和rs3805455位点的多态性。结果:GABRP rs929763TT、AT基因型频率在SLE组与对照组中分别为99.1%、0.9%和95.8%、4.2%,差异无统计学意义(P0.05)。GABRP rs3805455AG、AA、GG基因型频率在SLE组与对照组中分别为45.0%、9.9%、45.0%和45.8%、8.3%、45.0%,差异无统计学意义(P0.05),A、G等位基因频率在SLE组与对照组中分别为32.4%、67.5%和50.0%、50.0%,差异无统计学意义(P0.05)。结论:GABRP基因SNP位点rs929763和rs3805455多态性可能与SLE的发病无关。     

SLE患者T淋巴细胞IL-13受体α1基因表达及其调节序列甲基化状态的研究

目的 研究SLE患者外周血T淋巴细胞IL-13受体α1（IL-13Rα1）基因mRNA的表达及IL-13Rα1基因调节序列甲基化状态。方法 免疫磁珠法（MACS）分离10例SLE患者和6例正常人外周血CD4+和CD8+ T细胞，采用实时荧光定量PCR检测T细胞中IL-13Rα1 mRNA的表达，并用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测IL-13Rα1基因调节序列的甲基化水平。结果 活动期SLE患者CD4+ T细胞中IL-13Rα1 mRNA表达水平为2.224 ± 0.251，非活动期SLE患者为1.712 ± 0.132，正常人组为1.104 ± 0.044，三组间比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）；CD8+ T细胞中IL-13Rα1 mRNA表达水平活动期、非活动期及正常人组分别为1.672 ± 0.142，1.410 ± 0.154，1.238 ± 0.106，活动期组与正常人组比较差异有统计学意义（P < 0.05），而非活动期组与正常人组、活动期组与非活动期组比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。CD4+ T细胞中IL-13Rα1基因甲基化指数活动期SLE患者为0.454 ± 0.023，非活动期为0.635 ± 0.065，正常人为0.844 ± 0.097，三组间比较，差异均有统计学意义（P < 0.05）；CD8+ T细胞中IL-13Rα1基因甲基化指数三组间比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。SLE患者外周血CD4+，CD8+ T细胞IL-13Rα1 mRNA的表达与疾病活动度（SLEDAI评分）呈正相关（r = 0.79，P < 0.01；r = 0.76，P < 0.05）；CD4+ T细胞的IL-13Rα1基因的甲基化水平与疾病活动度（SLEDAI评分）呈负相关（r = -0.89，P < 0.01）；CD4+ T细胞IL-13Rα1 mRNA表达与其调节序列的甲基化水平呈负相关（r = -0.84，P < 0.01）。结论 SLE的发生发展可能与DNA低甲基化导致SLE患者T细胞过度表达IL-13Rα1有关。     

汉族寻常性银屑病患者IFN-γ受体2基因多态性研究

目的 探讨IFN-γ受体2(IFN-γR2)基因氨基酸位点Gln64Arg多态性与中国汉族寻常性银屑病的相关性.方法 采用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法及DNA测序方法,检测苏皖地区182例汉族寻常性银屑病患者和114例正常人对照IFN-γR2基因Gln64Arg位点多态性.结果 寻常性银屑病患者与正常人对照组IFN-γR2基因Gln64Arg多态性位点各基因型及等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05).伴甲损害银屑病组与无甲损害银屑病组之间Gln64/Gln64基因型分布频率分别为57.5%和38.1%.差异有统计学意义(X~3=5.33,P=0.02);Arg4等位基因(Gin64等位基因)分布频率分别为19.3%(80.7%)和30%(70%),差异也有统计学意义(X~2=5.03,P=0.02).伴甲损害的银屑病患者组Gln64/Arg64基因型分布频率为29.8%,正常人对照组为49.1%,两组间分布差异有统计学意义(X~2=5.48,P=0.01);Gln64/Gln64基因型分布频率在两组间分别为57.5%和35.1%,差异有统计学意义(X~2=6.23,P=0.01);无甲损害组与正常人对照组之间差异则无统计学意义.在以上呼吸道感染为诱因或加重因素的银屑病组与非上呼吸道感染银屑病组之间Arg64/Arg64基凶型分布频率分别为33.3%和15.5%,差异有统计学意义(X~2=4.94,P=0.03);Arg64等位基因(Gin64等位基因)分布频率为51.9%(48.1%)和35.2%(64.8%),差异也有统计学意义(X~2=5.46,P=0.02).结论 IFN-γR2基因Gln64Arg多态性位点可能与寻常性银屑病患者是否伴有甲损害有关,也可能与以上呼吸道感染为诱因或加重因素的寻常性银屑病有关.     

白介素10基因启动子多态性与广西壮族系统性红斑狼疮的关系

目的 探讨广西壮族人白介素10(IL-10)基因启动子区单核苷酸多态性与广西壮族SLE的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测90例SLE患者和110例正常对照者IL-10基因启动子-1082A/G、-819T/C和-592A/C位点基因型.结果 IL-10基因-819T/C和-592A/C多态性在SLE组和正常人群中的分布差异无统计学意义(P>0.05),而IL-10基因-1082A/G多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P<0.05),基因型频率的相对风险分析发现,AG基因型携带者患SLE的风险是AA基因型的2.076倍(OR=2.076,95%CI:1.052～4.100);基因单倍型分析发现,GCC单倍型携带者显著增加了SLE的发病风险.结论 白介素10基因启动子-1082A/G多态性和它的单倍型与SLE具有相关性,其中-1082G等位基因可能是SLE的遗传易感基因.     

系统性红斑狼疮与亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的相关性

目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因第四外显子第677位C→T突变与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法 检测40例SLE患者和20例正常人对照组血浆同型半胱氨酸水平,用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性法作MTHFR基因分型。结果 SLE患者组血浆同型半胱氨酸水平明显高于正常人对照组.而活动期SLE患者与非活动期SLE患者之间血浆同型半胱氨酸水平差异无统计学意义。SLE患者组MTHFR基因TT型占62.5%,明显高于其他两种基因型和正常人对照组(15%)。MTHFR基因677位发生C→T突变可导致血浆同型半胱氨酸水平明显升高,且TT型的效应要明显强于CT型的效应。结论 MTHFR基因多态性是影响SLE患者同型半胱氨酸水平的主要因素之一。MTHFR基因第677位TT型是SLE的易感基因或与易感基因紧密连锁。     

SLE患者雌激素受体-α与相关细胞因子的表达及临床相关性研究

目的 探讨SLE患者雌激素受体(ER)对T、B淋巴细胞的作用机制以及T、B淋巴细胞在SLE发病中的协同作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测40例SLE患者与40例正常人外周血单核细胞(PBMC)ER-α、IL-10、B淋巴细胞刺激因子(BLyS)mRNA表达水平;分析ER-α、IL-10和BLyS mRNA表达与临床及实验室指标的相关性.结果 SLE组ER-α、IL-10、BLyS mRNA相对表达量显著高于正常人对照组(P＜0.05或P＜0.01),SLE活动期较静止期明显增高(P＜0.05或P＜0.01),且其表达水平与肾损害、蛋白尿、关节炎等临床及实验室指标有相关性.男女SLE组以及男女正常对照组的表达比较差异无统计学意义.结论 IL-10和BLyS与SLE的病情活动性和严重程度相关,ER-α可能在SLE T、B淋巴细胞的作用机制中有重要作用.

Abstract：

Objective To study the mechanism of effects of estrogen receptor (ER) on T and B lymphocytes in patients with SLE and synergistic effect of T and B lymphocytes in the pathogenesis of SLE.Methods Real-time fluorescence quantitative PCR was performed to detect the mRNA expressions of ER-α,interleukin 10 (IL-10) and B lymphocyte stimulator (BLyS) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)from 40 SLE patients and 40 normal human controls. The clinical and laboratory correlation with the levels of these parameters was analyzed. Results A significant increase was observed in the relative expression levels of ER-α, IL-10 and BLyS mRNA in SLE patients compared with the normal human controls (P ＜ 0.05 or 0.01 ), in active SLE patients compared with inactive SLE patients (P ＜ 0.05 or 0.01 ). Additionally, the mRNA expression levels of the 3 parameters were significantly correlated with the presence of renal damage, proteinuria, arthritis, etc. No statistical difference was observed in the mRNA expression levels of these parameters between female and male patients or between female and male normal controls. Conclusions IL-10 and BLyS appear to be correlated with the disease activity and severity of SLE, and ER-α may play an important role in the action mechanism of T and B lymphocytes in SLE.     

云南汉族痤疮与CYP11α基因微卫星多态性相互关系的研究

目的研究雄激素相关基因CYP11α基因多态性与云南汉族痤疮发病危险性的关系,从分子遗传学角度探讨痤疮的发病机制。方法对206例云南汉族痤疮患者和200例健康对照者外周血的DNA样本采用PCR-genescan法检测CYP11α基因的tttta微卫星多态性位点,同时对两组患者的多态性位点基因型分布频率进行比较。结果男性重型痤疮中215-和215+基因型频率(59%,41%),与男性对照组(40.1%,59.1%)相比差异有显著性(P<0.05),但在女性痤疮组以及男性轻型痤疮组中这两种基因型频率分布与各自对照组相比未发现差异(P>0.05)。结论CYP11α基因的tttta微卫星重复多态性与云南汉族男性重型痤疮相关,CYP11α基因215-基因型可能是男性重型痤疮的遗传易感因素之一。     

趋化因子CCL22/CCR4在SLE发病中的作用

目的 探讨趋化因子CCL22及其受体CCR4在SLE发病中的作用和临床意义。方法 SLE患者48例和体检正常人26例为检测对象。采用酶联免疫吸附试验测定血浆中CCL22的浓度,流式细胞仪分析法测定外周血趋化因子受体CCR4的水平。结果 SLE患者血浆中CCL22的水平（227.03 ± 122.84 ng/L）较正常人对照组（369.53 ± 79.10 ng/L）降低（P < 0.05）;SLE患者有肾损组CCL22水平（168.0 ± 61.83 ng/L）较无肾损组（292.77 ± 163.45 ng/L）明显降低（P < 0.05）。SLE患者外周血中表达CCR4的细胞百分比（20.24% ± 13.86%）较正常人对照组（10.44% ± 3.07%）升高（P < 0.01）,且CD3+CCR4+细胞百分比高于CD3-CCR4+细胞百分比。与正常人对照组比较,重度活动的SLE患者 CCL22水平降低（P ＜ 0.05）,SLE患者CCR4的表达水平随着SLEDAI评分的升高而升高。SLE患者CCL22与SLEDAI评分呈负相关（r = -0.308,P < 0.05）。结论 CCL22/CCR4在SLE发生、发展及器官损害中可能起一定的作用。     

雌激素、肼苯哒嗪和紫外线对SLE患者甲基转移酶活性的影响

目的 探讨雌激素、肼苯哒嗪、紫外线（UVB）照射诱导SLE发病的作用机制。方法 分离、培养10例SLE患者和9例正常人外周血单核细胞（PBMC）,分别进行雌激素、肼苯哒嗪和UVB照射等干预。采用甲基转移酶（DNMT）激活/抑制法检测PBMC的DNMT1活性。 结果 SLE患者DNMT1活性（0.36 ± 0.24）较正常人对照（0.46 ± 0.17）差异无统计学意义（P > 0.05）,雌激素干预后SLE患者DNMT1活性显著低于正常人对照（0.32 ± 0.18比0.46 ± 0.17,t = 1.725,P < 0.05）,肼苯达嗪干预后SLE患者DNMT1活性显著低于正常人对照（0.33 ± 0.13比0.46 ± 0.17,t = 1.739,P < 0.05）,UVB干预后SLE患者DNMT1活性显著低于正常人对照（0.30 ± 0.14比0.46 ± 0.17,t = 1.739,P < 0.05）。另外,肼苯达嗪干预的正常人 DNMT1活性（0.38 ± 0.12）也显著低于正常人（0.46 ± 0.17）对照（P < 0.05）。结论 雌激素、肼苯哒嗪和UVB照射等因素具有抑制SLE患者DNMT1活性的作用,提示三个诱发因素可能通过改变DNMT活性来诱导SLE发病。