BALB／C小鼠感染卫氏并殖吸虫后血清中循环抗原的动态

用滤纸血以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠血中循环抗原（ＣＡｇ），结果显示：小鼠感染卫氏并殖吸虫囊蚴后第３天检出ＣＡｇ，其阳性率为３８％，第１５天起ＣＡｇ达高峰，阳性率１００％，２６～５６天ＣＡｇ维持高水平，第７１天ＣＡｇ滴度下降，以后维持在一定水平，说明滤纸血可以代替血清作ＣＡｇ检测。以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体Ｇ２Ｂ３间接双抗体夹心－ＥＬＩＳＡ检测感染卫氏并殖吸虫小鼠血中ＣＡｇ时，具有简便，敏感和特异的优点，可试用于肺吸虫感染的早期诊断和流行病学调查。     

不同动物宿主感染卫氏并殖吸虫后的抗体动态变化

【摘要】 目的 以卫氏并殖吸虫囊蚴感染适宜和非适宜宿主，观察感染后的抗体动态变化情况。 方法  从安徽省休宁县采集溪蟹捣碎并收集囊蚴，以卫氏并殖吸虫囊蚴感染适宜宿主犬和非适宜宿主大鼠，收集感染后 ０ ～ １６ 周血清；以卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原为探针，建立 ＥＬＩＳＡ 方法检测不同宿主感染后的血 清抗体。 结果 检测卫氏并殖吸虫囊蚴感染动物的血清，均有抗体出现。 其中感染犬 ３ 周可检测抗体阳性，抗体水平达高峰的时间最早为 ５ 周；感染大鼠 １ 周检出抗体阳性，２ ～ ３ 周抗体水平达到高峰，至 ８ 周时抗体水平降低并维持在平衡状态。 结论 不同宿主感染卫氏并殖吸虫囊蚴后抗体变化有区别，在非适宜宿主体内短期抗体水平下降较快且维持在弱阳性水平。     

诱发猫和大鼠抗体形成的卫氏并殖吸虫抗原的特性和定位

卫氏并殖吸虫在不适宜宿主体内以童虫形式长期滞留在肌肉组织内,难以发现,所以诊断常采用免疫学方法检测抗体。但由于童虫太小人们无法获得足够抗原,因而常用成虫抗原代替。本文评价了成虫抗原检测感染大鼠抗童虫抗体的价值,分析与鼠抗血清反应的成虫抗原特性以及抗原在虫体上的定位。实验动物家猫和Wistar大鼠每只分别经口感染20个和10个卫氏并殖吸虫囊蚴,并分别在感染后140天和70天从心脏取血,血清保存于-80℃,自感染38天起每天粪中查卵,最后解剖动物检出虫体。成虫抗原制作按Yokogawa(1956)法,用Yokogawa等(1983)ELISA技术检测血清抗体浓度,用SDSPAGE和免疫印渍技术分析与血清反应的抗     

卫氏并殖吸虫感染犬循环抗原的动态观察

应用Dot-ELISA,以抗卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫McAbG_2B_3、A_3D_3检测了4只Pw囊蚴感染犬吡喹酮治疗前后血清CAg动态。感染后第4d,4只犬囊蚴CAg均为阳性,1只犬成虫CAg为阳性。至第19d,4只犬囊蚴和成虫CAg均为阳性。第101～105d,4只犬中2只以每只3.2g总量吡喹酮进行治疗,治疗后短期内囊蚴和成虫CAg滴度明显升高,其中尤以成虫CAg升高显著。至治疗后第6d,囊蚴和成虫CAg达高峰,其后便逐步下降。1号犬在治疗后55d、2号犬于治疗后26d囊蚴CAg滴度为0.1号犬于治疗后65d、2号犬于治疗后36d成虫CAg滴度为0。未治疗犬成虫CAg维持于1:16～1:640,囊蚴CAg为1:20～1:40,CAg的动态呈现明显的期特异性。治疗后80d剖检2只治疗犬,其肺部均有多个陈旧性虫囊,虫囊内多为变性坏死虫卵,未发现成虫。未治疗犬于死后即行解剖检获Pw成虫60条。上述研究结果提示:1.感染Pw犬囊蚴CAg的动态具有明显的期特异性,与虫体在宿主体内的发育情况是一致的;2.有效治疗后囊蚴和成虫尤其是成虫CAg的滴度在短期内明显升高;3.可联合或单独应用抗囊蚴McAbG_2B_3、抗成虫McAbA_3D_3进行并殖吸虫病的虫期诊断和疗效考核。     

卫氏并殖吸虫尾蚴经口感染的传播途径研究

目的 了解皖南山区卫氏并殖吸虫尾蚴经口感染家犬及SD大鼠后特异抗体、虫卵及虫体变化情况,探索卫氏并殖吸虫感染新传播途径。方法 自安徽省休宁县收集卫氏并殖吸虫尾蚴和囊蚴,分别经口感染家犬和SD大鼠,常规饲养。收集感染动物血清,ELISA法检测特异性IgM和IgG抗体;收集粪便,检测并殖吸虫虫卵。感染后30周剖杀,检获肺脏或肌肉中并殖吸虫成虫或童虫,比较分析尾蚴实验组和囊蚴对照组得虫率的差异。结果 实验组家犬感染并殖吸虫尾蚴后血清IgM和IgG抗体与囊蚴对照组的抗体变化规律一致,仅IgM抗体存在时间较短;实验组SD大鼠感染并殖吸虫尾蚴后血清IgM抗体存在时间和IgG的OD值高水平维持时间均较囊蚴对照组大鼠短。实验组和囊蚴对照组家犬粪便中均检出并殖吸虫虫卵,肺脏中查到并殖吸虫成虫,两组得虫率差异有统计学意义(P<0.05)。实验组和囊蚴对照组SD大鼠粪便中均未查到虫卵,在其肌肉中均发现并殖吸虫童虫,两组得虫率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 皖南山区卫氏并殖吸虫尾蚴可经口感染家犬和SD大鼠,为当地居民并殖吸虫感染新途径的探索和防治措施的制定奠定了理论基础。     

McAbDot-ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并殖吸虫感染犬血清循环免疫复合物动态。感染后１～２ｗｋ可以检测到免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高水平，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降。研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感染的诊断。     

抗华支睾吸虫单克隆抗体的制备和鉴定

目的：建立分泌抗华支睾吸虫成虫的单克隆抗体杂交瘤细胞株并进行鉴定。方法：用华支睾吸虫成虫可溶性抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，筛选分泌高滴度单克隆抗体的杂交瘤细胞株，测定单抗免疫球蛋白亚类和单抗效价，检测单抗与日本血吸虫虫卵抗原、卫氏并殖吸虫成虫抗原和猪囊尾蚴抗原的交叉反应，用ＩＦＡＴ进行单抗识别的抗原定位。结果：获得５株分泌高滴度抗华支睾吸虫成虫单抗的杂交瘤细胞株，其分泌的抗体与日本血吸虫、卫氏并殖吸虫和猪囊尾蚴抗原均不发生交叉反应；５株单抗均属ＩｇＭ；单抗所识别的抗原定位于华支睾吸虫肠管壁。结论：制备的抗华支睾吸虫成虫的杂交瘤细胞株能分泌高滴度和高特异性的单抗。     

抗华支睾吸虫代谢抗原单克隆抗体的制备及鉴定研究

目的建立分泌抗华支睾吸虫代谢抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株。方法用华支睾吸虫成虫代谢抗原免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2／0融合，筛选分泌高滴度单克隆抗体的杂交瘤细胞株，测定单抗免疫球蛋白亚类和单抗效价，检测单抗与日本血吸虫全虫可溶性抗原、卫氏并殖吸虫成虫抗原和猪囊尾蚴抗原的交叉反应。结果获得3株分泌高滴度抗华支睾吸虫代谢抗原的杂交瘤细胞株，其分泌的抗体与日本血吸虫、卫氏并殖吸虫和猪囊尾蚴抗原均不发生交叉反应，3株单抗均属IgG。结论制备的抗华支睾吸虫代谢抗原的杂交瘤细胞株能分泌高滴度和高特异性的单抗，为制备免疫诊断试剂盒奠定了基础。     

McAb Dot—ELISA检测卫氏并殖吸虫循环免疫复合物

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体ＩＦ８Ａ３检测了卫氏并及虫感染犬血清循环免疫复合物动态，感染后１～２ｗｋ可以检测免疫复合物，３～４ｗｋ阳性滴度逐渐上升，５～６ｗｋ处于较高汪洋，第８ｗｋ达高峰，然后较快地下降，研究结果表明，卫氏并殖吸虫囊蚴抗原特异的循环免疫复合物具有明显的期特异性；单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测特异的循环免疫复合物，可用于卫氏并殖吸虫病的早期诊断和活动性感     

卫氏并殖吸虫(三倍体型)成虫的主要抗原组分的免疫化学特性

卫氏并殖吸虫成虫提取物可用作免疫诊断抗原,但对其抗原各组分的免疫化学特性研究甚少,作者用该虫(三倍体型)囊蚴实验感染猫后抽取血清作为抗体,并解剖猫从其肺中取虫制备成虫粗提物、排泄分泌物(ES)和虫卵提取物作为抗原。将成虫粗提物通过     

应用判别方程分析永嘉卫氏并殖吸虫大型囊昆

应用卫氏并殖吸虫两种类型(二倍体型和三倍体型)囊蚴和虫卵判别方程及临界值分析永嘉溪蟹体内卫氏并殖吸虫大型囊蚴及由其感染犬发育为成虫所产的虫卵,呈现本应属一种类型的卫氏并殖吸虫囊蚴、虫卵、成虫却得分别归入两种不同类型     

抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体的研制及初步应用

目的制备抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体并研究其初步应用。方法用广州管圆线虫成虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,经融合,筛选分泌高滴度、高特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。使用所得的单克隆抗体以Western blotting检测广州管圆线虫病患者血清,并建立双抗体夹心ELISA法检测感染大鼠血清。结果获得3株分泌高滴度抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株(2A2、3F1、4H2),其分泌的抗体与日本血吸虫、卫氏并殖吸虫、猪囊尾蚴、旋毛虫抗原均不发生交叉反应。3株单克隆抗体均可识别广州管圆线虫成虫可溶性抗原蛋白Mr 15 000,以及患者血清中两种循环抗原Mr24 000和Mr15 000。双抗体夹心ELISA检测阳性率为76.5%。结论制备的抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原的杂交瘤细胞株能分泌高滴度、高特异性的单克隆抗体,且在循环抗原的检测方面有应用前景。     

卫氏并殖吸虫可溶性虫卵抗原的抗原性

为了评价未成熟虫卵作为诊断抗原的效果,从104条卫氏并殖吸虫中取得约百万虫卵制成盐水浸液,即成卫氏并殖吸虫可溶性虫卵抗原(Pw SEA),以其及卫氏并殖吸虫十二周龄的成虫全虫浸液(PwWWE),对实验感染并殖吸虫病的病犬进行微量ELISA检测,观察了IgG及IgM抗体的水平,并用盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析了Pw SEA的蛋白组成。结果发现,抗Pw SEA的特异IgG抗体于实验感染后8周开始上升,直至观察的13周仍处于高水平,     

关于扁囊并殖吸虫的研究

自1985年起作者发表了系列研究文章，详细观察了扁囊和卫氏并殖吸虫生活史中的囊蚴、后尾蚴、成虫、虫卵等阶段的形态，上述两种囊蚴的结构相似，后尾蚴的脱囊率、成虫在犬体内的寄生部位、成熟时间等均相似。后尾蚴、成虫的形态及成虫各部位的大小经统计学处理无明显差异。对这两种成虫相应的六个部位的体棘进行了扫描电镜观察未见明显差异。对扁囊、卫氏并殖吸虫的囊蚴和成虫的全虫蛋白分别进行了盘状电泳和等电点聚焦电泳分析，发现这两种虫盘状电泳和等电点聚焦电泳的蛋白质区带数目与模式均一致。并用等电点聚焦电泳的方法检测了这两种虫的苹果酸脱氢酶、酯酶、过氧化物酶等三种同工酶，结果显示这两种虫的三种同工酶的酶带数目及等电点分布完全一致。此外还对扇囊和卫氏并殖吸虫的基因组DNA限制性内切酶酶谱和PWB19片段探针的Southern印迹杂交进行了分析，结果基本相同。上述各项研究结果均显示扁囊和卫氏并殖吸虫之间无明显差异，鉴于此，我们认为扁囊并殖吸虫似应为卫氏并殖吸虫的同物异名。     

关于扁囊并殖吸虫的研究

自１９８５年起作者发表了系列研究文章，详细观察了扁囊和卫氏并殖吸虫生活史中的囊蚴，后尾蚴，成虫，虫卵等阶段的形态，上述两种囊蚴的结构相似，后尾蚴的脱囊率，成虫在犬体内的寄生部位，成熟时间等均相似。后尾蚴，成虫的形态及成虫各部位的大小经统计学处理无明显差异，对这两种成虫相应的六个部位的体棘进行了扫描电镜观察见未明显差异。对扁囊卫氏并殖吸虫的囊蚴和成虫的全虫蛋白分别进行了盘状电泳和等电点聚焦电泳分析，     

广东省部分地区卫氏并殖吸虫分布与DNA序列分析

目的 调查广东省卫氏并殖吸虫分布现状。方法 解剖采集自广东省从化市良口、 龙门县南昆山、 乐昌市大洞和平远县木溪与郭屋等5个调查点山溪的螺蛳及溪蟹, 检查卫氏并殖吸虫尾蚴、 囊蚴。以所获囊蚴人工感染家猫、 犬, 解剖查找并殖吸虫成虫。取成虫样本, 进行线粒体细胞色素C氧化酶亚单位I基因 （COI基因） 和核糖体基因第二间隔区 （ITS2 基因） 基因序列分析, 并与GenBank中现存并殖吸虫的COI、 ITS2基因序列进行比对。结果 良口、 南昆山、 大洞、 木溪和郭屋5处疫源地的第一中间宿主螺蛳鉴定均为放逸短沟蜷, 其尾蚴感染率分别为0.33%、 0.15%、 0.058%、 0.10%和0.05%; 第二中间宿主溪蟹鉴定均为平和华溪蟹, 其囊蚴感染率分别为100%、 100%、 38.09%、 55.36%和65.26%。良口、 南昆山、 大洞、 木溪和郭屋平均每只蟹检出囊蚴数量分别为79.4、 105.66、 9.16、 16.18个和15.6个, 平均每克蟹含囊蚴数量分别为11.12、 7.87、 0.58、 0.69个及0.85个, 囊蚴鉴定均为卫氏并殖吸虫。人工感染家猫、 犬体内检获卫氏并殖吸虫成虫与虫卵。良口、 南昆山、 大洞、 木溪和郭屋5处调查点卫氏并殖吸虫成虫样本COI基因序列与GenBank中的AF219379.21、 AF540958.1号基因序列同源性分别为99%、 99%、 99%、 98%、 99%, ITS2基因序列与DQ836243.1、 DQ351845.1、 AB354217.1号同种基因同源性分别为98%、 99%、 98%、 98%、 98%。结论 广东省新发现2处卫氏并殖吸虫超高度疫源地和3处卫氏并殖吸虫高度疫源地, 5 地虫种间无明显差异。     

辽宁省凤城县两型卫氏并殖吸虫的发现及其分布

<正> 为了解本县卫氏并殖吸虫的类型及其分布状况,选择4条河流,9个自然村对卫氏并殖吸虫类型观查了囊蚴,成虫、虫卵形态及成虫的染色体核型,以及蛄、犬及居民感染染情况,调结果如下。 一、蝲蛄感染吸虫囊蚴情况 4条河流,9个自然村共检查蝲蛄193只,阳性率为31.09％(60/193),阳性蝲蛄含囊蚴数从1(最低)至224(最含)。 二、成虫的大小及染色体观察 在伙荣沟村、三合村及秋岭村各解剖1只犬,在犬肺中均发现有感染。三合村的犬肺中仅发现2条未成熟的童虫。对伙荣沟及秋岭两地的成虫封片染色进行比较测量,并以空干法对单个虫体生殖腺进行培养后检查染色体,确切证实靉河上游金家河的伙荣沟村的卫氏并殖吸虫为三倍体型,靉河下游秋岭村的卫氏并殖吸虫为二倍体     

卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的筛选和免疫反应性分析

目的 初步探讨卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的免疫反应性。方法 应用卫氏并殖吸虫病患者血清免疫粗球蛋白(Pw-Ig)筛选噬菌体随机12肽库,对筛选到的抗原模拟表位用ELISA检测其免疫反应性,并与卫氏并殖吸虫成虫抗原(PwA)进行比较。结果 获得的6个卫氏并殖吸虫抗原模拟表位(即P5、P6、P7、P8、P13、P16)特异性和敏感性与PwA相比差异均无显著性(P>0.05),其中P5、P6和P7交叉反应性明显较PwA低(x2=4.630,P<0.05),其余则与PwA无明显差异(P>0.05)。结论 卫氏并殖吸虫抗原模拟表位对卫氏并殖吸虫病的诊断具有潜在的应用价值,有望代替天然抗原用于卫氏并殖吸虫病的诊断。     

并殖吸虫病的免疫──宿主循环抗原和抗体动力学

并殖吸虫病（Paragonlmiasis）是由一类并殖吸虫（ParagonimussPP．）引起的寄生虫病。由于其虫种不同、寄生部位各异,从而所致的症状和体证也就极为复杂多变。为图阐明寄生虫与宿主之间的关系,近年来,我们进行了一系列的研究探索,并择要述之如下。l实验动物中抗卫并殖吸虫抗体动力学观察1．l犬体实验观察”犬是卫氏井殖吸虫（PW）的适宜宿主。犬感染＊。囊动2一3个月后,PW在犬肺组织中发育为成虫并居于虫囊中。我们用制备的囊迹抗原（MAg）和成虫抗原（AAg）于不同间隔时间用IHA法检测犬血清中的抗囊锄抗体（MAb）和抗成虫抗体…     

广东地区卫氏并殖吸虫后尾蚴的扫描电镜观察

广东地区卫氏并殖吸虫后尾蚴扫描电镜的观察,尚朱见有报道。从广东省和平县热水公社捕捉的锯齿华溪蟹的肌肉中收集囊蚴,喂饲小犬获成虫,证实为卫氏并殖吸虫。将囊蚴脱囊获得尾蚴,清洗后经过戊二醛和锇酸双固定,梯度脱水,醋酸异戊酯置换,临界点干燥,喷金,日立S-450扫描电镜观察。