灰色关联分析评价不同产地金果榄质量

摘要：目的:应用灰色关联分析（GRA）与主成分分析（PCA）评价不同产地金果榄药材质量。方法:收集来自15个不同产区金果榄药材,测定各批药材的灰分、酸不溶性灰分、浸出物,以及盐酸巴马汀和盐酸药根碱含量,采用GRA法、构建金果榄质量评价模型并与PCA法进行比较。结果:对不同批次金果榄药材中的各成分进行GRA,得出湖北武当山八仙观产金果榄药材与最优参考序列的相对关联度最高（0.64）质量最优,湖北荆州产金果榄药材与最优参考序列的相对关联度最低（0.32）质量最差,PCA法与GRA法的分析结果基本一致,说明结果可重复性较好,较为可靠。结论:GRA所建立的金果榄质量评价模型可作为金果榄药材质量评价的参考依据。     

高效液相色谱法测定金果榄中盐酸巴马汀和盐酸药根碱的含量

目的:优选金果榄回流提取法最佳提取工艺.方法:运用高效液相色谱法,以盐酸巴马汀、盐酸药根碱为指标成分,采用均匀设计法对药材粉碎度、甲醇用量、回流提取时间等条件进行优选.结果:金果榄药材回流提取法最佳工艺为药材粉碎粒径为250～355 μm,甲醇用量为60 mL(以1 g药材计算),回流提取时间1 h.结论:确立了金果榄回流提取法最佳提取工艺.     

金果榄水提液与醇提液指标成分相关性考察

目的 考察金果榄煎剂中盐酸巴马汀与盐酸药根碱含量，探索与《中华人民共和国药典》2005年版标准检测方法醇提液中盐酸巴马汀与盐酸药根碱含量的相关性。方法 采用高效液相色谱法，以盐酸巴马汀、盐酸药根碱为指标成分作比较。结果 金果榄煎剂中盐酸巴马汀与盐酸药根碱的含量仅为醇提液中盐酸巴马汀、盐酸药根碱含量的40%。结论 二者存在较大的差异，质量控制对象与药效物质基础缺乏紧密联系，应进一步加强质量控制。     

高效液相色谱法测定金果榄中盐酸药根碱与盐酸巴马汀含量

［摘要］目的建立测定金果榄中盐酸药根碱与盐酸巴马汀含量的高效液相色谱法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱：Diamonsiltm C18柱；流动相：甲醇：水（1：1）（含四甲基乙二胺3.5 mL·L 1，用磷酸调pH值至7.5）；流速：1.0 mL·min 1；检测波长：345 nm；柱温：25 ℃。结果盐酸药根碱在0.009 8～0.316 0 mg·mL 1范围内呈良好的线性关系（r=0.999 95），盐酸巴马汀在0.011 5～0.368 0 mg·mL 1范围内呈良好的线性关系（r=0.999 96）。结论采用高效液相色谱法测定金果榄中盐酸药根碱与盐酸巴马汀含量操作简便，准确，专属性强。     

不同产地金果榄药材中古伦宾含量测定

目的：以古伦宾含量为指标比较不同产地金果榄药材的质量。方法采用 C18柱（4.6 mm ×250 mm,5μm）为固定相,以乙腈－水（40∶60）为流动相,检测波长为210 nm,流速为1.0 mL·min －1,柱温为30℃。结果各地所产金果榄药材中古伦宾含量均符合《中国药典》标准规定,其中重庆、广西崇左、陕西汉中和四川万源等地所产者含量相对较高。结论本试验可为金果榄药材的选择和应用提供依据。     

均匀设计法优选金果榄半仿生提取工艺

目的:优选金果榄药材半仿生提取(SBE)法的最佳工艺。方法:以盐酸巴马汀含量、盐酸药根碱含量和干浸膏得率的综合评价为指标,以3次煎煮用水的pH值和煎煮时间为考察因素,采用均匀设计法优选SBE法的最佳工艺。结果:优选的工艺为3次煎煮用水的pH值依次为4.0、6.5、9.0,煎煮时间依次为1.0、0.5、0.5h。结论:该工艺科学、合理,可为金果榄药效物质的提取工艺提供理论依据。     

不同产地黄连中6个生物碱含量测定

目的测定不同产地黄连药材加工品中盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量,为黄连药材的真伪鉴别提供依据。方法色谱条件为Phenomenex Gemini-NX C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-30 mmol.L-1碳酸氢铵溶液（每1 000 mL碳酸氢铵溶液含7 mL氨水,1 mL三乙胺）梯度洗脱;流速1.0 mL.min-1;检测波长270 nm;柱温30℃。结果黄连药材中6个生物碱含量均较高,且其中盐酸药根碱、盐酸防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量分别不低于0.30%,0.40%,1.10%,2.02%,1.45%,6.58%。结论方法准确、可行,可作为黄连药材质量的定量依据。     

正交设计法优选金果榄提取工艺

目的：优选金果榄的最佳提取工艺。方法：以盐酸药根碱与盐酸巴马汀含量和浸膏率为评价指标，采用高效液相色谱法测定含量，采用正交试验考察乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、回流次数对提取效果的影响。结果：金果榄的最佳提取工艺为6倍量的95%乙醇回流3次，每次0．5h。结论：该提取工艺设计合理。结果可靠。为提取金果榄提供理论基础。     

RP-HPLC测定金果榄药材中巴马汀和药根碱的含量

目的　采用RP -HPLC测定金果榄药材中巴马汀和药根碱的含量。方法　采用ODS柱 ,流动相为水 -乙腈 (1∶1) (含磷酸二氢钾 3.4g·L-1、十二烷基磺酸钠 1.7g·L-1) ;检测波长 345nm ;流速 1ml·min-1;外标法峰面积定量。结果　药材中巴马汀和药根碱的平均回收率分别为 97.6 4 %和 98.77%。结论　所用方法准确、简便、灵敏度高。     

UPLC-MS/MS法测定不同产地延胡索中原阿片碱、盐酸巴马汀、脱氢紫堇碱、延胡索乙素和延胡索甲素

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定不同产地延胡索药材中原阿片碱、盐酸巴马汀、脱氢紫堇碱、延胡索乙素和延胡索甲素。方法 采用Waters UPLC HSS T3 C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）,以乙腈–0.1%醋酸铵为流动相,梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温40℃,进样量5μL。ESI正离子模式采集,采集模式：MRM（多反应检测）,离子源温度150℃,毛细管电压3.0 kV,锥孔电压50 V,脱溶剂气流量800 L/h,脱溶剂气温度400℃。结果 原阿片碱、盐酸巴马汀、脱氢紫堇碱、延胡索乙素和延胡索甲素分别在0.20～10.12、0.25～12.58、1.02～51.20、0.85～42.64、0.39～19.44 ng线性关系良好;平均回收率分别为97.48%、100.16%、101.61%、96.05%、104.17%,RSD值分别为1.70%、2.05%、2.55%、0.74%、3.24%。不同产地的延胡索药材中5种生物碱的含量有明显差异,浙江产地延胡索药材中5种生物碱的含量相对其他产地较高,5种生物碱中脱氢紫堇碱的含量最高。结论 UPLC...     

新疆特色药材黑果小檗薄层鉴别方法研究

目的建立新疆特色药材黑果小檗的薄层鉴别系统。方法以盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱为对照品,对黑果小檗药材进行薄层鉴别,并考察不同展开系统、不同点样量、不同薄层板、不同检视方式、不同温度、不同湿度对黑果小檗药材薄层色谱的影响。结果以盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱为对照品,以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-氨水(6∶3∶2∶1.5∶0.5)为展开系统,黑果小檗药材薄层鉴别特征明显,专属性强。结论该方法可行,重复性好,可作为黑果小檗药材的薄层鉴别方法。     

两种植物来源金果榄药材降血糖作用比较

目的比较两种植物来源金果榄药材降血糖作用。方法选用四氧嘧啶复制糖尿病小鼠模型,以二甲双胍作为阳性对照药,将青牛胆、金果榄两种植物来源的金果榄药材的半仿生煎煮提取液灌服小鼠,通过检测模型小鼠给药前后血糖水平,计算血糖下降百分率,对二者降糖作用进行比较。结果青牛胆与金果榄均具有显著的降血糖作用,其血糖下降百分率均明显高于模型对照组,且青牛胆高剂量组血糖下降百分率高于金果榄高剂量组。结论青牛胆降血糖作用优于金果榄。     

HPLC同时测定不同产地延胡索中的6种生物碱

目的 采用HPLC法同时测定延胡索药材中原阿片碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、脱氢紫堇碱和延胡索乙素等6种生物碱的含量,并比较不同产地、不同商品等级中6种生物碱含量的差异.方法 采用Durashell C18色谱柱(250mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2％冰乙酸溶液(B,三乙胺调pH5.05),梯度洗脱,检测波长280 nm,流速1.0 mL·min-,柱温35℃;用上述方法对48批延胡索药材进行测定,并对结果进行聚类分析.结果 测定了延胡索药材中6种生物碱类成分的含量,在线性范围内的线性关系良好(r2＞ 0.9993),平均回收率为96.19％～97.59％,RSD为1.19％ ～2.81％;48批延胡索样品中6种生物碱均可检测到,不同产地的延胡索中6种生物碱的含量有明显的差异,部分达到显著性差异(P＜0.05).总体来说,不同商品等级延胡索中生物碱的含量无明显差异,二级延胡索质量优于一级;采用聚类分析能将不同产地的48批延胡索药材分为3类.结论 所用方法操作简单、准确、稳定、分离效果好,适用于同时测定延胡索药材中6种生物碱的含量;生物碱的含量受产地、环境因素影响较大,延胡索的品质表现出一定的地域及生境依赖性,商品等级对生物碱的含量无显著影响.     

不同栽培条件黄连的质量分析与评价

目的建立黄连药材HPLC指纹图谱分析方法及含量测定方法，比较分析不同栽培条件、不同产地和不同炮制方法制备的黄连药材的质量。方法采用HPLC-UV方法建立了黄连药材指纹图谱，应用HPLC-MS联用技术指认了主要色谱峰；并对黄连药材中的小檗碱、巴马汀和药根碱进行含量测定。结果指认了黄连药材指纹图谱中7个主要的色谱峰，含量测定结果表明不同的栽培条件中，遮荫条件、生长年限对黄连中小檗碱、巴马汀和药根碱的含量影响较大，而种植密度的影响不是很明显；现代生态技术栽培的黄连中这3种生物碱的含量均高于对照药材或与之基本相当。不同产地的黄连中这3种生物碱的含量差别较大。应用不同炮制方法制备的黄连中这3种生物碱的含量差别不明显。结论现代生态栽培技术替代传统人工搭棚方式栽培黄连是可行的，同时为科学炮制黄连提供依据。     

高效液相色谱法测定不同产地功劳木中药根碱与巴马汀及小檗碱的含量

目的 建立药根碱、巴马汀和小檗碱的含量测定的高效液相色谱法,并测定不同产地功劳木中药根碱、巴马汀和小檗碱含量.方法 样品用盐酸-甲醇（体积比1∶100）混昆合溶液超声提取,采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（150mm×2.1 mm,5μm）,以甲醇-0.1％甲酸为流动相,流速为0.4 ml/min,柱温为40℃,检测波长为345 nm.配制一系列质量浓度（X）梯度的药根碱溶液（1.00、5.00、25.00、50.00、75.00、100.00 mg/L）、小檗碱溶液（l.00、2.50、5.00、25.00、75.00、100.00 mg/L）和巴马汀溶液（0.11、0.55、2.20、11.00、22.00、44.00 mg/L）.分别取5μl注入高效液相色谱仪并记录药根碱、小檗碱和巴马汀的峰面积（Y）.以浓度（X）为横坐标,色谱峰面积（y）为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程.取庆元百山祖、五凤垟麻宅村、泽雅源口、瓯海泽雅4个不同产地的功劳木药材,测定药根碱、小檗碱、巴马汀峰面积,每个样品测定3次.结果 上述色谱条件下,药根碱、巴马汀和小檗碱可以较好地分离,线性范围分别是0.005 00 ～0.500 00μg（r =0.999 9）、0.00500～ 0.750 00μg（r =0.999 8）、0.000 55 ～0.22000μg（r =0.999 5）,平均回收率分别为98.47％[相对标准偏差（RSD）=2.84％]、98.58％ （RSD=3.34％）、99.58％（RSD=3.76％）.不同产地功劳木3种生物碱总量有差异,庆元百山祖阔叶功劳木、五凤垟麻宅村功劳木、泽雅源口阔叶功劳木、瓯海泽雅阔叶功劳木的药根碱、巴马汀和小檗碱的总含量分别为7.42、16.18、13.20、20.36 mg/g,最高相差3倍;药根碱含量分别为3.91、8.06、3.78、7.91 mg/g,小檗碱含量分别为1.42、7.64、8.61、10.55 mg/g,巴马汀含量分别为2.10、0.48、0.80、1.90 mg/g.3种生物碱含量高低与原植物品种、温度、日照强度及产地有关.结论 高效液相色谱法测定药根碱、巴马汀和小檗碱的含量简便、快速、重现性好,适用?     

HPLC测定黄柏中的盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱

目的测定黄柏中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱的含量,为完善质量评价提供依据。方法采用HPLC法。结果与结论四川9个产区黄柏的盐酸小檗碱含量平均为50.5840 mg.g-1,关黄柏为6.8583 mg.g-1;其中荥经产黄柏中盐酸小檗碱的含量最高,为86.5381 mg.g-1,说明荥经是黄柏的道地药材产区;9个产区黄柏的盐酸巴马汀含量很低,平均为0.1296mg.g-1,而关黄柏为3.1310 mg.g-1;黄柏盐酸药根碱平均含量是0.2956 mg.g-1,关黄柏中是0.2883 mg.g-1,二者较接近。     

延胡索HPLC指纹图谱评价及含量测定研究

目的 建立延胡索药材的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,对不同产地6批延胡索药材进行比较。同时对其中的6种生物碱进行色谱研究并测定其在延胡索药材中的含量。方法 使用Inertsil ODS-SP(4.6 mm×150 mm, 5μm)色谱柱,30℃柱温,流速1.0 mL·min^-1,检测波长280 nm,以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)(三乙胺调pH值至6.1)为流动相进行梯度洗脱。结果 建立了延胡索药材的指纹图谱并通过单个生物碱对照品确认了其中的6个生物碱,分别为原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、脱氢紫堇碱、延胡索乙素、延胡索甲素,这6种生物碱在对应线性范围内与其峰面积均呈现较好的线性关系(r≥0.9),并且分别测定出了其在延胡索药材中的含量。结论 此种方法操作简便、方法准确可行、耗时较短、稳定、重复性好,能够为延胡索药材的遴选提供一定的评判依据。     

黄连-左氧氟沙星联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外抗菌活性研究

目的： 研究左氧氟沙星与黄连中成分联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外抑制作用。方法： 选择从临床标本中检出的多重耐药大肠埃希菌,分别测定黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀及左氧氟沙星对多重耐药大肠埃希菌最小抑菌浓度（MIC）,采用微量肉汤棋盘稀释法分别测定黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀与左氧氟沙星的体外联合抑菌作用。结果： 实验结果表明黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀与左氧氟沙星联合用药后对大部分耐药菌（90.9%）均表现为协同或相加作用,其中盐酸巴马汀与左氧氟沙星的联合应用最有效。结论： 盐酸巴马汀、盐酸小檗碱或黄连提取物分别与左氧氟沙星联合对多重耐药大肠埃希菌都有较好的体外抗菌作用,临床应用价值高,值得进一步研究。     

功劳木药材特征图谱研究和生物碱含量测定

目的建立不同产地功劳木的高效液相色谱特征图谱检测方法。方法采用大连依利特Hypersil BDS C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,柱温为25℃;以乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调pH值至3.0)(30∶70)为流动相等度洗脱;流速为1mL.min-1;检测波长为265nm。结果功劳木HPLC特征图谱中有6个特征成分峰,其中有3个生物碱峰,分别为盐酸药根碱、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀。结论 HPLC特征图谱可以对功劳木中3个特征生物碱进行准确的定性分析和定量检测,综合评价功劳木药材质量。     

黄连成分与阿米卡星联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外活性研究

目的 研究硫酸阿米卡星与黄连中成分黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀联合用药对多重耐药大肠埃希菌的体外抑制作用。 方法 选择 2013—2014 年间对头孢噻肟耐药的 100 株大肠埃希菌, 筛选多重耐药大肠埃希菌, 并采用纸片扩散确证法进行超广谱 β-内酰胺酶（ESBLs）检测。 采用微量肉汤稀释法分别检测黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、硫酸阿米卡星对产 ESBLs 耐药大肠埃希菌的最小抑菌浓度（MIC）值, 再以 ATCC 25922 为质控菌株, 以棋盘式微量稀释法检测黄连提取物、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀与硫酸阿米卡星联合用药对耐药大肠埃希菌的抑菌效果, 并计算联合用药的部分抑菌浓度（FIC）值。 结果 共筛选出 10 株产 ESBLs 耐药大肠埃希菌, 黄连提取物、盐酸小檗碱与硫酸阿米卡星联合用药后对 9 株耐药菌均表现为协同或相加作用, 而盐酸巴马汀与硫酸阿米卡星联合用药后对全部耐药菌均表现为协同或相加作用。 结论 盐酸巴马汀或盐酸小檗碱或黄连提取物与硫酸阿米卡星联合用于多重耐药大肠埃希菌感染, 具有较好的应用价值, 值得进一步研究。