水飞蓟宾-丹参素钠复方注射剂中水飞蓟宾和丹参素在大鼠体内的药动学研究

目的:建立同时测定大鼠血浆中水飞蓟宾和丹参素浓度的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),并用于水飞蓟宾-丹参素钠复方注射剂在大鼠体内的药动学研究。方法:血浆样品经乙酸乙酯液-液萃取后,以甲醇-0.2%甲酸水溶液(80∶20)为流动相,Zorbax Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱分离,采用电喷雾离子化源(ESI)三重四极杆串联质谱,以选择反应监测模式(SRM)进行检测。用于定量分析的离子反应m/z分别为481.1→300.9(水飞蓟宾)、196.9→135.1(丹参素)和153.0→109.1(内标,原儿茶酸)。结果:水飞蓟宾和丹参素分别在10~10 000 ng.mL-1和20~20 000 ng.mL-1浓度范围内呈良好的线性关系,最低定量下限(LLOQ)分别为10和20 ng.mL-1。方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。大鼠静脉注射低、中、高3个剂量的水飞蓟宾-丹参素钠复方注射剂后水飞蓟宾的主要药动学参数为:t1/2分别为(2.30±0.45)、(2.11±0.43)、(2.40±0.36)h,Ke分别为(0.31±0.06)、(0.34±0.07...     

盐酸坦洛新缓释胶囊在犬体内的药动学

目的建立犬血浆中坦洛新浓度的测定方法,并应用于盐酸坦洛新缓释胶囊中坦洛新犬体内的药动学研究。方法液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定犬血浆中的坦洛新浓度。坦洛新血浆样品经乙酸乙酯萃取,Agilent ZORBAX SB-C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离,阿立哌唑为内标,流动相A为体积分数为0.1%的甲酸水溶液,B为乙腈,线性梯度洗脱,电喷雾电离源(ESI),以多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式进行正离子检测,用于分析的定量离子分别为m/z409→m/z228(坦洛新),m/z 447.5→m/z 284.8(内标:阿立哌唑)。结果犬血浆中坦洛新的线性为0.1～20.0μg.L-1,定量下限为0.1μg.L-1,日内和日间精密度(RSD)均小于13.59%,准确度(relative error,RE)为-2.54%～4.27%。结论本方法适用于盐酸坦洛新缓释胶囊在犬体内的药动学研究。     

犬血浆中氨氯地平和阿托伐他汀的LC-MS／MS测定

建立了LC-MS/MS法同时测定犬血浆中氨氯地平和阿托伐他汀的含量.用甲醇沉淀血样中的蛋白质.采用C18色谱柱,2 mmol/L醋酸胺溶液(含0.5%甲酸).甲醇(32:68)为流动相,以地西泮为内标,电喷雾离子化,正离子多反应监测,检测离子分别为m/z409.2→m/z 238.1(氨氯地平)、m/z 559.2→m/z 440.5(阿托伐他汀)和m/z285.1→m/z 193.1(地西泮).结果氨氯地平和阿托伐他汀在0.1～20ng/ml和0.2～50 ng/ml度范围内线性关系良好,定量限为0.1和0.2 ng/ml,方法回收率均大于94%,日内、日间RSD均小于9%.     

Beagle犬血浆中非索非那定和伪麻黄碱的LC-MS/MS测定

建立了LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中的盐酸非索非那定及盐酸伪麻黄碱.采用C18色谱柱,以5 mmol/L乙酸铵溶液-甲醇(35∶65)为流动相,盐酸曲马多为内标,采用多离子反应监测方式,监测离子对分别为m/z 502.3→466.3(非索非那定)、m/z 166.5→148.1(伪麻黄碱)和m/z 264.1→58.2(内标).盐酸非索非那定及盐酸伪麻黄碱分别在5～4 000ng/ml和5～2 000ng/ml范围内线性关系良好,批内、批间RSD均小于15%.     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中氯法拉滨的浓度

目的 建立一种测定人血浆中氯法拉滨浓度的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,并用于氯法拉滨的药代动力学研究.方法 血浆样品经乙腈沉淀蛋白,以替米沙坦为内标.色谱柱:Aglient TC-C18柱(150.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-1 mmol·L-1乙酸铵溶液,梯度洗脱,流速:1.0 m...     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氧氯普胺的浓度

目的建立测定人血浆中甲氧氯普胺浓度的LC-MS/MS方法。方法采用Alltech Alltima C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3μm),以5 mmol.L-1乙酸铵-乙腈-甲醇(体积比为50∶40∶10)为流动相,流速为0.2 mL.min-1,血浆样品在碱性条件下液-液萃取,通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多离子反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m/z300.20→m/z227.00(甲氧氯普胺)和m/z152.20→m/z134.00(内标,苯丙醇胺)。结果甲氧氯普胺线性范围为0.5~200.0μg.L-1,最低定量限为0.5μg.L-1,平均回收率为(71.38±6.35)%,日内和日间精密度均小于15%。结论该法适用于临床药物浓度监测和药物动力学的研究。     

LC-MS/MS法测定犬血浆中华法林钠的浓度及其应用

目的建立LC-MS/MS联用的方法测定犬血浆中华法林钠的浓度并进行药动学研究。方法以卤米松作为内标,犬血浆经甲醇蛋白沉淀处理后稀释进样。色谱柱为Venusil XBP苯基柱(100 mm×2.1 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(含2 mmol·L-1醋酸铵)-甲醇(含0.1%甲酸)(25∶75),流速0.3 m L·min-1;进样体积5μL。采用电喷雾离子源,负离子方式多反应监测(MRM)扫描分析。检测离子通道分别为m/z 307.1→161.3(华法林钠)和m/z 489.5→413.1(卤米松)。结果华法林钠的线性范围为5~1 500μg·L-1(r=0.997 8),批内和批间精密度RSD均<8%,高、中、低浓度的方法回收率为103.33%~107.29%。结论本方法操作简捷,灵敏度高,专属性好,适用于华法林钠的药动学研究。     

氟代同系物内标在LC-MS/MS法测定人血浆中苯烯莫德浓度的应用

目的:降低基质效应,建立测定人血浆中苯烯莫德的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法。方法:以氟代苯烯莫德为内标,血浆样品用四硼酸钠碱化后,用甲基叔丁基醚(MEBE)萃取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行LC-MS/MS分析。色谱条件:采用Ultra C18(50 mm×2.1 mm,5.0μm)色谱柱,以乙腈-0.2 mmol·L-1甲酸铵为流动相,流速300μL·min-1,柱温20℃;质谱条件:电喷雾离子化源(ESI),负离子模式多重反应选择离子检测(MRM),用于定量的离子对分别为苯烯莫德m/z 253.1→210.9和内标氟代苯烯莫德m/z 270.9→229.2。结果:人血浆中苯烯莫德的线性范围为0.1~10 ng·m L-1(r>0.99),定量下限为0.1 ng·m L-1;日内、日间精密度(RSD)均小于15%;相对误差为-1.03%~0.01%;提取回收率大于85%;稳定性良好,血浆基质对苯烯莫德测定无干扰。结论:该方法适用于人血浆中苯烯莫德浓度的测定。氟代同系物内标能部分取代稳定同位素内标,应用在生物样品的检测中。     

HPLC法测定水飞蓟素滴丸的含量

目的建立水飞蓟素滴丸中的水飞蓟宾的HPLC含量测定法。方法采用HPLC法,以Shimadzu VP-ODS C18为色谱柱,以甲醇-水-0.5 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(260 ml∶240 ml∶25 ml)为流动相,用0.2 mol.L-1磷酸调节pH至5.3,流速为1 ml.min-1。检测波长为288 nm。结果水飞蓟宾的量在0.152~0.912μg范围内线性良好,回收率为102.0%,RSD为0.72%。结论该方法简便、可靠,适用水飞蓟素滴丸的质量控制。     

LC-MS/MS法测定恒河猴血浆中巴替非班的浓度及药代动力学研究

目的:建立恒河猴血浆中巴替非班浓度的高效液相-串联质谱(Liquid Chromatography-TandemMass Spectrometry,LC-MS/MS)测定法,并研究其在恒河猴体内的药代动力学。方法:取恒河猴血浆200μL,加入含2μg.mL-1内标依替巴肽的乙腈-甲醇(70∶30)混合溶剂600μL沉淀蛋白,取上清液吹干,残留物加100μL流动相复溶,取上清液进行LC-MS/MS分析。色谱柱为ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-20 mmol.L-1甲酸铵(50∶50),流速为0.4 mL.min-1;质谱采用电喷雾离子化,正离子检测,巴替非班和内标的选择性检测离子分别为m/z 818.3→632.4和m/z 832.0→646.2。结果:巴替非班的线性范围为25～5 000 ng.mL-1,最低定量下限(lower limit of quantitation,LLOQ)为25 ng.mL-1,准确度、精密度及回收率均符合要求。结论:本方法专属性强,检测限低,灵敏度高,线性关系良好,方法简便快捷,适用于巴替非班临床前药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法测定健康人体内阿德福韦浓度及其药动学研究(英文)

目的建立人血浆和尿样中阿德福韦浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法。方法10名健康受试者单剂量口服阿德福韦10mg。于服药前(0h)和服药后抽取静脉血及留取尿样。采用BDS-Phenyl column(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.35mol·L-1冰醋酸梯度洗脱,流速为0.3mL.min-1;电喷雾离子化正离子选择性反应检测;检测离子为m/z274.1→162.1(阿德福韦),m/z254.1→135.0(喷昔洛韦,内标)。结果LC-MS/MS测定阿德福韦血浆样品线性范围为0.50～200μg.L-1,尿样线性范围为50～20000μg·L-1,线性关系良好。血浆样品分析的回收率、精密度和准确度均良好,定量限为0.50μg·L-1。主要药动学参数为:ρmax(24±s4)μg·L-1,tmax(1.0±0.6)h,AUC0～t(278±45)h.μg·L-1,AUC0～∞(285±45)h.μg·L-1,t1/2(8.8±1.6)h,CL(F)(36±6)L.h-1,Vd(F)(456±136)L,0～48h的尿累计排泄量为(48±12)%。结论建立的LC-MS/MS测定法专属性强、灵敏度适宜,可以用于阿德福韦的药动学研究。     

人血浆中非洛地平的LC-MS测定法及其在药动学研究中的应用

目的建立人血浆中非洛地平浓度的液相色谱-质谱联用的测定方法。方法以尼莫地平为内标,血浆样品经100μL1.0mol·L-1NaOH溶液碱化,采用乙醚-正己烷(4∶1)萃取后进行LC-MS分析。色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸(84∶16),流速为0.8mL·min-1;离子源为电喷雾离子化源(ESI源),正离子方式检测;扫描方式为选择离子监测(SIM),用于定量分析的离子分别为m/z406(非洛地平)和m/z441(尼莫地平)。结果非洛地平在0.2～20.0μg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9948),定量下限为0.2μg·L-1,低、中、高浓度的提取回收率均大于81.9%,日内、日间精密度(RSD)均小于14.9%。结论该方法准确可靠,灵敏度高,适用于血浆中非洛地平浓度的测定及其药动学研究。     

测定人血浆中齐多夫定的液相色谱-串联质谱法及生物等效性的应用

目的:建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法(LC／MS／MS)测定人血浆中齐多夫定,并用于制剂生物等效性研究。方法:血浆样品经液-液萃取后,以甲醇-水(70:30,用1％氨水调节pH至6．0)为流动相, Zorbax Extend C18柱分离,采用电喷雾离子源四极杆串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z 268→m/z 127(齐多夫定)和m／z 225→m／z 127(内标,司他夫定)。结果:齐多夫定测定方法的线性范围为1．0-2 500μg·L-1;日内、日间精密度(RSD)均小于8．0％,准确度 (RE)在±2．0％以内。应用此法研究比较了18名健康受试者单剂量口服齐多夫定参比制剂和受试制剂 200 mg后的主要药动学参数。以AUC0-8计算受试制剂相对生物利用度。结论:该法选择性强、灵敏度高,适用于齐多夫定制剂的生物等效性评价及临床药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定培美曲塞的血药浓度

目的建立培美曲塞血药浓度反向高效液相色谱测定方法。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为50 mmol.L-1磷酸钠缓冲液(用磷酸调节至pH=3.35)-乙腈(84∶16,V/V),流速为1.0 mL.min-1,检测波长250 nm。结果血浆样品的线性范围为1～100 mg.L-1(r=0.999 9)、10～1 000μg.L-1(r=0.999 7);最低检测浓度为5μg.L-1;绝对回收率为53.9%～60.8%,相对回收率为97.2%～105.0%;日内及日间精密度<10%。结论本方法简单、快速,灵敏度和准确度较高,能满足临床培美曲塞血药浓度测定的需要。     

RP-HPLC荧光法测定人尿中巴洛沙星的含量

目的建立反相高效液相色谱荧光法测定人尿中巴洛沙星质量浓度。方法采用DiamonsilODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),柱温:室温,流动相:乙腈-0.05 mol.L-1KH2PO4缓冲液(体积比为25∶75,三乙胺和H3PO4调pH为3.4),流速:1.0 mL.min-1。尿液样品用0.1 mol.L-1KH2PO4(KOH调pH为7.0)缓冲液稀释100倍,然后与二氯甲烷旋涡混合后,提取有机层,在40℃条件下氮气吹干,残渣用流动相溶解进样,荧光检测器(λex=295 nm,λem=500 nm)检测,以加替沙星作内标,按内标法定量。结果标准曲线在50~6 000μg.L-1内线性良好,最低检测限为10μg.L-1,巴洛沙星及内标的保留时间分别为5.42、4.05 min,日内和日间RSD均小于10.0%,提取回收率和方法回收率分别在93%~96%和98%~108%。结论本法适用于人尿液中巴洛沙星质量浓度测定及药物动力学研究。     

液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用法测定大鼠血浆中柴胡皂苷a浓度及其药代动力学

目的建立测定柴胡皂苷a血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用的分析方法(LC-ESI-MS),探讨其在大鼠体内的药代动力学研究中的应用。方法SD大鼠12只,随机分为2组,分别单剂量静注(5mg·kg-1)和灌胃(50mg·kg-1)柴胡皂苷a,用LC-MS法测定给药后大鼠血浆中药物浓度,利用DAS软件拟合并计算其药代动力学参数。结果柴胡皂苷a的血药浓度在0.025～5mg·mL-1范围内线性关系良好,最低检测限为25μg.L-1,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于80%,日间和日内精密度小于10%,符合生物样品分析要求。大鼠单剂量静注柴胡皂苷a5mg·kg-1后,血药浓度-时间曲线呈二室模型。主要药动学参数Tmax,Cmax,AUC0-t,T12β,CL,Vd分别为:5min,1907μg.L-1,64370mg.h-1.L-1,100.6min,0.0867L·min-1.kg-1,21.89L.kg-1。结论该方法操作简便、快速、灵敏、专属性强,可用于柴胡皂苷a的体内大批量样品定量分析及药代动力学研究。     

电纺纳米纤维固相微萃取犬血浆中维拉帕米

目的建立电纺纳米纤维为萃取介质,填装固相微萃取小柱,用于犬血浆中维拉帕米的提取净化,用高效液相色谱-紫外检测犬血浆中维拉帕米的浓度。方法采用Bea-gle犬为试验对象,口服单剂量的盐酸维拉帕米片(20mg·kg-1),0.1ml血浆样品经处理后注入固相微萃取小柱,50μl甲醇洗脱,收集洗脱液进液相色谱分析。结果维拉帕米的线性范围为50～10000μg·L-1(r=0.9999),最小检测限为25μg·L-1,提取回收率为88.1%(RSD=4.55%),精密度为4.15%～6.01%。结论此法简单方便,可替代液-液萃取法,能够用于犬血浆中维拉帕米的测定。     

液相色谱串联质谱法测定人血浆中文拉法辛及其代谢物的浓度

目的建立测定血浆中文拉法辛及其代谢物O-去甲基文拉法辛的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法血浆样品中加入内标(氘6-文拉法辛和氘6-O-去甲基文拉法辛),直接沉淀法处理样品。色谱柱为CAPCELL PAK C18 MGⅢ分析柱(100 mm×2.0 mm,5μm),流动相为含0.3%甲酸的水溶液-含0.3%甲酸的乙腈溶液(78∶22,V/V),流速为0.3 mL.min-1。正离子多离子反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 278→58(文拉法辛)、m/z 264→58(O-去甲基文拉法辛)、m/z 284→58(氘6-文拉法辛)、m/z 270→58(氘6-O-去甲基文拉法辛)。结果文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的线性范围均为2～1 000μg.L-1,定量下限均为2μg.L-1,提取回收率在90.14%～97.33%,批内、批间RSD均小于8%。结论本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于人血浆内文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的含量测定研究。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中黄芪甲苷及其药动学

目的建立大鼠血浆中黄芪甲苷的测定方法。方法以尼群地平为内标,采用LC-MS/MS方法,以Kiomasil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱为分析柱,甲醇-0.1%甲酸水(70∶30,V/V)为流动相,梯度洗脱,流速为700μL.min-1,柱温为恒温,进样量为20μL。质谱检测采用多反应监测(MRM)模式,ESI源,分别监测离子反应m/z 785.6m/z 143.1(黄芪甲苷)和m/z 361.3m/z329.2(内标尼群地平)。结果在0.202～202.000μg.L-1浓度范围内具有良好的线性关系,典型回归方程为:Y=0.004 9c+0.070 6,r=0.997 0(n=9)。回收率为(91±8)%(n=9)。准确度、精密度均符合生物样品的测定要求,最低定量浓度为0.202μg.L-1。大鼠尾静脉注射和口服黄芪甲苷(20μg.g-1)体内主要药动学参数:t1/2(1.37±0.02)h、tmax(0.08±0.00)h、AUC0-t(4 717.54±178.20)μg.h.L-1、AUC0-∞(6 444.68±521.25)μg.h.L-1和t1/2(1.84±0.17)h、tmax(1.00±0.00)h、AUC0-t(499.27±10.14)μg.h.L-1、AUC0-∞(1 593.52±217.19)μg.h.L-1。结论该检测方法简便、准确、专属性强,能够满足黄芪甲苷在大鼠体内药动学研究的需要。     

两种伊马替尼制剂的人体生物等效性

目的建立人血浆中伊马替尼及其代谢物浓度的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定方法,并评价伊马替尼胶囊的药动学特征及生物等效性。方法 24名男性健康受试者随机分成两组,分别交叉给予伊马替尼受试制剂和参比制剂各400 mg,采用LC-MS/MS测定伊马替尼及伊马替尼代谢物的浓度,色谱柱为Thermo BDS HYPERSIL C18(100 mm×4.6 mm,2.4μm),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸0.2%醋酸铵溶液(B)(55:45,V/V),流速为0.7 mL·min-1;质谱采用电喷雾电离,正离子多离子反应监测模式,检测离子伊马替尼为m/z 494.10→393.85,伊马替尼代谢物为m/z 480.10→393.80,帕洛诺司琼(内标物)为m/z 297.10→109.80,估算伊马替尼及代谢物的药动学参数,评价两种制剂的人体生物等效性。结果伊马替尼受试制剂与参比制剂的各主要药动学参数:tmax分别为(2.8±1.2)h和(3.1±1.1)h,ρmax分别为(1 928.94±478.84) μg·L-1和(1 738.94±237.30) μg·L-1,t1/2分别为(17.65±1.71)h和(17.80±1.99)h,用梯形法计算AUC0-120 h分别为(37 715.80±7 625.84)μg.h.L-1和(33 961.65±6 218.64)μg.h.L-1,其代谢物的药动学参数:tmax分别为(2.8±1.2)h和(2.8±1.1)h,ρmax分别为(194.21±58.85) μg·L-1和(198.16±52.49) μg·L-1,t1/2分别为(37.59±3.53)h和(38.45±5.28)h,用梯形法计算AUC0-120 h分别为(5 274.57±1 379.87)μg.h.L-1和(5 128.31±1 119.75)μg.h.L-1。结论建立的测定方法可用于伊马替尼及其代谢物的药动学研究,伊马替尼两种制剂生物等效。