血清胱抑素C在AU2700系统上测定的方法学评价

目的：探讨胶乳凝集法在奥林帕斯AU2700非原装试剂自建系统中测定血清胱抑素C的性能评价。方法：方法评价血清胱抑素C测定的精密度、回收率、检测限、干扰因素、线性范围。结果：胶乳凝集法测定血清Cys C批内变异系数为1．52％（低值）、1．25％（高值）日间变异系数为2．73％（低值）、1．77％（高值）平均回收率为97．3％检测线性范围为0．1-6．00mg／L。总胆红素正干扰在573mol／L,血红蛋白负干扰6g／L,甘油三酯负干扰12mmol／L以下对Cys C偏差〈5％。基本不受溶血、黄疸和脂血干扰。结论：胶乳凝集法测定血清Cys C快速、准确、精密度高,可作为肾脏功能损伤的指标。     

免疫比浊法PGⅠ/PGⅡ试剂在全自动生化分析仪上检测性能验证分析

目的:在临床开展血清胃蛋白酶原Ⅰ和Ⅱ(PGⅠ/PGⅡ)检测前,对PGⅠ/PGⅡ试剂盒在全自动生化分析仪上检测性能进行评价。方法:以厂家配套的高、低值浓度样品为样本,进行批内精密度和批间精密度验证。以厂家配套的质控标准品为样本,进行正确度验证。将质控标准品稀释,PGⅠ范围为2.5~160.0 ng/mL,PGⅠI范围为2.0~70.0 ng/mL,将结果做回归与相关分析。以厂商提供干扰物进行抗干扰能力验证。结果:PGⅠ和PGⅡ的低值浓度样品批内精密度的分别为3.23%CV和2.93%CV,批间精密度分别为2.87%CV和2.80CV%。PGⅠ和PGⅡ的高值浓度样品批内精密度的分别为1.75%CV和2.60%CV,批间精密度分别为1.75%CV和2.46%CV。PGⅠ和PGⅡ准确度偏倚均在±5%以内。在PGⅠ范围为2.5~160.0 ng/mL,线性系数r=0.999;PGⅡ范围为2.0~70.0 ng/mL,线性系数r=0.996,均到达要求。结论:免疫比浊法PGⅠ/PGⅡ检测试剂盒在日立7600-010全自动生化分析仪上检测性能符合临床要求。     

免疫透射比浊法测定肿瘤特异性生长因子的价值

目的评价免疫透射比浊法测定肿瘤特异性生长因子(TSGF)的准确性及重复性,并与微粒子酶免疫法进行比较。方法采用免疫透射比浊法和微粒子酶免疫法测定100份血清样本TSGF表达量,评价两种检测方法的阳性符合率和阴性符合率,并采用免疫透射比浊法检测低浓度和高浓度TSGF血清,评价免疫透射比浊法的批内CV和批间CV。结果免疫透射比浊法和微粒子酶免疫法测定TSGF无统计学差别(p=0.167),两种检测方法阳性符合率为94.3%,阴性符合率为93.3%,总符合率为94.0%;免疫透射比浊法重复检测低浓度和高浓度TSGF批内CV分别为3.5%和3.9%,低浓度和高浓度TSGF批间CV分别为3.8%和4.0%。结论免疫透射比浊法与微粒子酶免疫法检测TSGF,具有较好的阳性符合率和阴性符合率,同时免疫透射比浊法批内CV和批间CV均较低,值得临床推广。     

胶体金免疫法测定血清胱抑素C的方法学评价

[目的]血清胱抑素C(cystatin C)是检测肾小球滤过功能最灵敏的内源性指标.通过对胶体金免疫法血清cystatin C测定试剂盒进行评价,以了解其临床应用的可靠性.[方法]在日立7600-020全自动生化分析仪上对该试剂盒的精密度、线性、回收率、抗干扰性、稳定性、临床测定的灵敏度和特异性等指标进行评价,并与市场常用的胶乳增强免疫比浊法试剂盒进行相关性比较.[结果]该试剂盒批内及批间精密度分别小于3.0%和4.0%;0.68～7.51mg/L范围内线性良好(R2=0.999);回收率95.0%～106.8%;血清中抗坏血酸在4.5 s/L以下,胆红素在500 μM以下,血红蛋白在5 g/L以下,脂肪乳剂在0.3%以下,肝素钠在62.5 U/ml以下,类风湿因子在100 IU/ml以下,不影响测定;30℃加速稳定实验证明该试剂盒在此条件下可储存14 d以上;正常人群体的参考值范围:男性0.63～1.25 mg/L,女性0.54～1.15 mg/L.在实验群体内对肾功的检测灵敏度可达100%,检测特异性可达96.9%.与胶乳增强免疫比浊法试剂盒相关性良好.[结论]本方法不仅实现了血清cystatin C的快速、全自动化测量,而且化学性能优良、剂型合理、操作简单、对样品杯及仪器污染程度低,值得在医院推广使用.     

迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪检测系统性能验证

目的验证迈瑞CL-6000I化学发光分析仪检测系统的性能。方法参照国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)等相关文件对迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪检测系统检测甲状腺激素:三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、促甲状腺素(TSH)5个项目的精密度、准确度、线性范围、生物参考区间进行验证。结果检测的5个项目批内精密度变异系数CV%在1.837%~4.07%,批间精密度变异系数CV%在2.634%~7.49%,准确度比对偏倚范围为6.289%~9.62%,线性范围斜率在0.9812~1.013,r2在0.9517~0.9992,均满足相关文件的要求;参与生物参考区间验证的样本检测结果均在厂家标注的范围内。结论迈瑞CL-6000I化学发光分析仪检测系统精密度、准确度、线性范围、生物参考区间验证通过。满足临床诊断与预后监测的需要。     

尿微量白蛋白检测试剂盒性能评价

目的评价深圳迈瑞免疫比浊法检测尿微量白蛋白的性能。方法评价深圳迈瑞免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白的正确度、日内不精密度、日间不精密度、线性范围以及最大稀释度。结果迈瑞尿微量白蛋白检测试剂盒与西门子特定蛋白分析仪及配套试剂检测结果的偏倚为0.017 5 mg/L,相关系数(r)为0.996,决定系数(r2)为0.993。精密度试验显示,迈瑞尿微量白蛋白检测试剂盒的日内不精密度为1.04%~1.17%,日间不精密度为1.74%~2.71%。线性试验显示,该试剂盒在浓度为4 mg/L~300 mg/L时呈线性。如果以回收率≤(100%±20%)作为判定标准,则最大稀释度试验显示该试剂盒的最大稀释度为30倍。结论深圳迈瑞尿微量白蛋白检测试剂盒正确度高、精密度好、线性范围宽、最大稀释度高,其性能完全能满足临床的使用要求。     

免疫透射比浊法测定成人血清视黄醇结合蛋白的参考值建立

目的:建立本实验室应用免疫透射比浊法测定成人血清视黄醇结合蛋白(RBP)的参考值范围。方法:使用全自动生化分析仪和免疫透射比浊法试剂盒检测广州地区500名健康成年男性和女性新鲜空腹静脉血清中RBP,按照年龄和性别分别统计其结果,将均数±1.96标准差确定为参考值范围。结果:检测结果在任意两个年龄段之间差异均无统计学意义(t=1.972,P>0.05),但男、女性别之间差异有统计学意义(t=1.965,P<0.05):男性为49.3±11.8mg/L,女性为46.2±12.3mg/L。结论:本实验室应用免疫透射比浊法测定成人血清RBP的参考值范围确定为:男性49.3±23.1mg/L,女性46.2±24.1mg/L;在建立参考值范围时应考虑和分析仪器、检测方法、地域、年龄、性别等影响因素。     

3种血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C试剂的比较

目的:对3种血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C试剂盒性能进行评价。方法:比较3种试剂盒的稳定性、精密度、准确度、线性范围及抗干扰能力。结果:3种Cys C试剂盒试剂空白CV分别为:2.56%、5.71%、0.62%;总精密度的CV分别为2.39%、8.50%、5.17%,不同试剂盒检测结果差异明显(P<0.001);平均回收率分别为96.65%、104.41%、62.80%;校准验证的偏差分别为:3.44%、-7.17%、3.05%;在0.5~6.0 mg/L范围内线性良好;黄疸、溶血和脂血对CysC测定均无明显干扰。结论:3种Cys C试剂盒性能均存在不足之处,尚不能满足临床实验室需求。     

胱抑素联合尿微量白蛋白肌酐比值在60例糖尿病早期肾损害中的应用

目的：分析血清胱抑素C（Cys-C）、尿微量白蛋白/肌酐比值（mAlb/Cr）联合检测在糖尿病患者早期肾损伤的诊断中的应用。方法：选取60例糖尿病患者（研究组）与60例健康体检者（对照组）,分别使用免疫透射比浊法、散射比浊法、苦味酸动力学法测定两组的Cys-C、尿微量白蛋白、肌酐水平。结果：研究组Cys-C、mAlb/Cr值分别是（1.43±0.43）mg/L、（12.57±8.13）mg/mmol,均明显高于对照组（P〈0.05）;研究组Cys-C水平〉1.4 mg/L者16例,阳性率为26.7%,mAlb/Cr水平〉3 mg/mmol者19例,阳性率为31.7%;两项指标联合检测结果高于正常范围共22例,联合检测阳性率为36.7%,高于两项指标单独检测（P〈0.05）;本组实际肾损伤22例,联合检测准确率100%。结论：Cys-C、mAlb/Cr比值联合检测可明显提升糖尿病早期肾损伤诊断准确度与敏感度。     

日立7600检测血清淀粉样蛋白A的实验室性能验证

目的：日立7600型全自动生化分析仪检测血清淀粉样蛋白A的性能验证。方法：参照CLSI及CNAS有关检测系统性能验证文件方法通过实验对血清淀粉样蛋白A的精密度、正确度、线性范围、临床可报告范围、参考区间进行评价。结果：批间精密度变异系数分别为5.38%,2.29%，小于规定声称值10%；批内精密度变异系数分别为4.87%、1.82%，均小于规定声称值8%。正确度偏倚为-2.1%,<10%；临床可报告范围上限为3072mg/L；厂家说明书的线性范围、参考范围符合要求。结论：日立7600全自动生化分析仪搭载重庆中元生物技术有限公司血清淀粉样蛋白A试剂盒检测血清淀粉样蛋白A符合质量要求，能够为临床提供可靠的依据。     

反向溶出极谱法检测尿碘的方法学评价

目的:参照CLSI推荐的标准化评价方案对反向溶出极谱法检测尿碘进行方法学评价。方法:对反向溶出极谱法检测尿碘的精密度、准确度、线性范围分析,并比较与硫酸铵消化—砷铈催化分光光度法的相关性。结果:方法具有良好的精密度(批内、批间、日间、总变异系数均10%)、准确度(回收率90.9%~104.9%、平均回收率98.1%);线性范围45~850μg/L;与硫酸铵消化—砷铈催化分光光度法的相关性良好(r=0.988)。结论:反向溶出极谱法检测尿碘具有重复性好、准确度高、线性范围宽,与砷铈催化分光光度法有良好的相关性,操作简便,适合于各级基层医院使用。     

血清脂蛋白a、胱抑素C和尿酸的联合检测在高血压并发脑梗死早期诊断中的意义

目的探讨联合检测脂蛋白a[LP(a)]、胱抑素C(Cys-C)和尿酸(UA)在高血压并发脑梗死诊断中的价值。方法分别采用胶乳增强免疫透射比浊法和URO-PAP法检测85例高血压并发脑梗死患者、71例单纯高血压患者及80例健康者血清中LP(a)、Cys-C和UA的含量。结果 LP(a)、Cys-C和UA在高血压并发脑梗死患者血清中的浓度均高于单纯高血压组和正常对照组,差异有统计学意义(P0.05);且高血压并发脑梗死组LP(a)、Cys-C和UA阳性率高于单纯高血压组,LP(a)、Cys-C和UA 3项指标联合检测阳性率明显高于各指标单项检测,差异有统计学意义(P0.05);且高血压并发脑梗死组血清3项指标表达水平两两之间均呈正相关(P0.05)。结论 LP(a)、Cys-C和UA联合检测可显著提高高血压并发脑梗死诊断的阳性率,对于脑梗死的早期预防和诊断具有十分重要的临床指导意义。     

免疫比浊法检测梅毒螺旋体抗体的应用研究

目的评价免疫比浊法在梅毒螺旋体特异性抗体检测中的临床应用效果。方法在自动生化分析仪上利用免疫比浊法测定梅毒阴性和阳性血清样本,确定该方法的精密度、线性范围和常见干扰因素对检测结果的影响,并对1 286份血清样本进行检测,比较该方法与明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测结果的一致性。结果免疫比浊法批内变异系数为2.95%~5.43%,批间变异系数为4.55%~7.06%;检测线性为0~350U/ml;一定程度胆红素和溶血对检测结果无明显影响,乳糜血对检测结果影响较大。免疫比浊法与TPPA法具有良好的一致性(Kappa=0.994),检测结果总符合率为99.8%。结论免疫比浊法精密度好、线性范围宽,具有一定的抗干扰性,同时具有自动化分析、简便快速可定量的优势,适用于梅毒螺旋体抗体的大批量样本筛查。     

免疫透射比浊法测定血清CP

目的为简便快速地进行血清CP测定,对免疫透射比浊法测定CP进行方法学评价.方法用抗人CP特异性血清与待测血清中CP结合成复合物,测定其形成速率.结果批内重复试验CV 2.9%,批间CV 5.3%;平均回收率98.7%(95%～103%);线性相关分析r0.993,回归方程y=0.824X-0.011;方法比较试验P＞0.05,无显著差异.结论该法快速简便,准确度、精密度高,适用于各级医疗单位,有推广应用价值.     

胶乳凝集反应法测定糖化血红蛋白的方法学评价

目的：对胶乳凝集反应法测定糖化血红蛋白A1c（HbA1c）进行方法学评价。方法：用该法测定HbA1c,并对其精密度、准确度、线性范围、干扰因素和相关性加以评价。结果：该法正常值和高值总CV〈5.00%;平均回收率为96.5%;线性范围为2.0%～14.0%;884umol/L胆红素和0.5g/L维生素C均无显著干扰（P〉0.05）;与胶乳凝集抑制法测定结果有极显著的差异（P〈0.01）,但两种方法测定结果有良好的相关性（r=0.9798）。结论：胶乳凝集反应法测定HbA1c的技术性能符合临床要求,并且操作简便、检测快速;因此在具备自动生化分析仪的临床实验室可推广使用。     

采用全自动生化分析仪检测高浓度尿碘的方法研究

目的建立应用全自动生化分析仪低砷快速测定高质量浓度尿中碘含量的测定方法,实现尿碘高于300μg/L样品的直接测定,适用于高碘地区高效开展大批量尿碘的实验室检测。方法结合生化分析仪,自动进样、加试剂和比色检测的优势,进行尿中碘含量的测定,开展相应的线性范围、精密度和准确度等验证实验。结果标准曲线线性范围为300~1 200μg/L,取样量500μL,对低、中、高3种不同含量的尿样,精密度实验CV%范围分别为1.86%、1.25%、1.84%。加标回收率分别为104.0%、98.3%、104.5%(n=6),平均回收率为102.3%。结论该方法仪器操作简单,环境适应性好,检测线性范围合理;亚砷酸的使用量仅为国标法的2%,自动化实验操作减轻了检测人员的工作负担及与有毒试剂的直接接触,使得检测工作安全、高效。该方法实现了自动化检测,检测速度快,适用于高碘地区尿样碘含量的检测。     

循环酶法检测血清同型半胱氨酸的性能评价及临床应用

目的:探讨循环酶法检测血清同型半胱氨酸(Hcy)的性能评价。方法:系统研究循环酶法检测血清Hcy的灵敏度、精密度及干扰因素。结果:循环酶法检测血清Hcy批内平均变异系数(CV)为1.54%,批间平均变异系数(CV)为3.14%,平均回收率98.1%。与日立7170全自动生化分析仪的循环酶法比较有良好的相关性。其抗干扰能力强,VC在10 mmol/L以内,胆红素浓度低于380μmol/L,血红蛋白1.5 g/L以下无干扰。结论:循环酶法检测血清Hcy具有较高的灵敏度,精密度,适于大批量及临床常规使用。     

Sysmex XN-9000全自动血液体液分析仪性能评价

目的：对Sysmex XN-9000全自动血液体液分析仪的主要性能进行初步评价。方法根据美国临床和实验室标准化协会（CLSI）指南文件EP15-A2、EP6-A2的要求,对XN-9000仪进行精密度、携带污染率、线性范围和准确度验证,以Beckman LH750全自动血液分析仪的检测结果作为评估依据,将验证结果与厂商声明的性能指标或公认的质量标准进行比较。结果 XN-9000仪测定白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）和血小板（PLT）主要参数的批内变异系数（CV%）为0.11%~2.42%,批间CV%为0.12%~2.50%,线性相关性分析r为0.99991~0.99999,携带污染率为0.00%~0.38%。对比相关性分析,各项指标r均〉0.999。准确度验证各项指标的偏倚为-0.67%~0.96%。结论 XN-9000仪的精密度、携带污染率、线性范围和准确度等主要评估指标均符合要求。     

甘胆酸均相酶免疫检测方法的建立及性能评估

目的建立一种均相酶免疫检测甘胆酸(glycocholic acid hydrate,CG)方法。方法采用竞争法,均相酶免疫分析技术,建立甘胆酸(CG)均相酶免疫检测方法,并对本方法进行了检出限、精密度、准确度、线性、干扰和相关性试验。结果本法试剂最佳pH值为7.8,最优兔抗人甘胆酸多克隆抗体浓度为25μg/ml。检测限为0.3μg/ml;精密度用低、高2种浓度的质控品检测,重复性精密度分别为3.43%、2.12%,中间精密度分别为5.43%、4.06%;准确度检测低、高2种浓度的质控品,相对偏差分别为-5.71%、-2.42%;线性范围为0.00μg/ml～50.00μg/ml。3种干扰物在试验浓度内(胆红素≤800μmol/L,血红蛋白≤0.500 g/L,维生素C≤6 mmol/L)的偏差分别为3.2%、2.2%、1.6%。与甘胆酸(CG)放射免疫检测试剂盒的决定系数(r~2)为0.992。以放射免疫法为标准,均相酶免疫法敏感度为97.53%,特异度为83.33%,符合率为94.95%。结论该研究建立了CG均相酶免疫检测方法,其测定结果准确、稳定、可靠,与参比试剂盒的测定结果具有较高的相关性。     

高通量酶联免疫吸附试验测定血清甲胎蛋白的方法学评价

目的评价高通量酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)定量检测血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)的方法学性能及临床应用价值。 方法收集2013年3月至12月,青岛市中心医院住院的肝癌、肝炎、肝硬化患者新鲜血清标本170份,医院体检中心健康查体者新鲜血清标本200份。参考美国临床和实验室标准化协会EP5-A2、EP15-A2文件及相关文献,评价高通量ELISA测定血清AFP的线性范围、精密度、正确度、参考区间及其对原发性肝癌的诊断性能,并与电化学发光法比对,评价其检测准确度和临床应用价值。 结果高通量ELISA测定AFP的线性范围为0.0~200.0 μg/L。低、中、高浓度的批内变异系数(coefficient of variation, CV )分别为4.9%、3.1%、3.7%,批间CV分别为3.8%、1.5%、2.1%;总CV分别为5.0%、6.0%、5.0%。与电化学发光法比对,相对平均偏倚为7.9%。回收率为91%~109%,平均97.76%。高通量ELISA测定本实验室血清AFP的参考区间为 0.00~7.20 μg/L,绘制ROC曲线,确定原发性肝癌的诊断临界值为195.7 μg/L,敏感度39.5%,特异度93.3%。 结论本研究所用的高通量ELISA定量检测血清AFP的标准操作规程,检测血清AFP结果稳定,可用于诊断原发性肝癌。