B组链球菌的耐药性及红霉素耐药基因检测研究

目的探讨北京和广州地区B组链球菌（GBS）抗生素耐药菌谱及对红霉素耐药机制。方法GBS菌193株,其中140株和47株GBS分别来自北京和广州地区正常妇女阴道拭子标本,6株GBS菌株来自北京地区新生儿感染性肺炎和脑膜炎患儿体液标本中培养分离。应用标准的KB纸片法对临床常用7种抗生素耐药性检测。应用PCR法对102株（包括57株敏感株及45株耐药株）GBS进行红霉素耐药基因ermB、mefA检测。结果193株GBS菌均对青霉素类、头孢菌素类抗生素敏感;但青霉素和氨苄青霉素中介率均为17％;北京地区GBS的红霉素和林可霉素耐药率从1998年到1999年分别从8％增加到16％和从20％增加到28％;广州地区1999年分离的GBS菌株对红霉素和林可霉素耐药率分别为45％和26％,与北京地区1998、1999年分离的GBS菌株的红霉素耐药率比较,差异有统计学意义（P=0．000）。在45株红霉素耐药GBS菌中有40株同时对林可霉素耐药,5株表现为红霉素耐药而林可霉素敏感。20株GBS红霉素耐药仅含有ermB基因;13株红霉素耐药株仅含有mefA基因;同时含有ermB和mefA基因有6株。6株耐药株未能检测到ermB和mefA基因。结论青霉素、氨苄青霉素可作为治疗GBS感染首选药物;头孢菌素类抗生素可作为二线的选择药物。而红霉素和林可霉素作为预防和治疗GBS感染的药物应用价值应重新给予评价。在我国ermB基因介导的核糖体靶位点改变在GBS耐药机制中可能起主要作用。     

儿童肺炎链球菌分离株红霉素耐药性与相关耐药基因研究

目的检测儿童肺炎链球菌(SP)红霉素耐药性和相关耐药基因。方法对肺炎儿童进行痰培养,分离、鉴定SP菌株,经红霉素药敏试验检测SP药敏,通过PCR检测红霉素核糖体甲基化酶基因(ermB、ermA/B)、主动外排转运基因(mefA)3种基因表达。结果临床分离的31株SP,29株对红霉素耐药(93.5%),ermB基因阳性12株(38.7%),ermA/B基因阳性19株(61.3%),mefA基因阳性7株(22.6%),24株检出erm或和mef基因(77.4%),其中1株ermA/B、mefA基因表达均为阳性,1株ermB、ermA/B、mefA基因表达均为阳性。结论erm基因在SP有高表达,mef基因也有相当的表达,SP对红霉素具有高度耐药。     

A族链球菌对红霉素敏感性的研究

Ａ族链球菌对红霉素敏感性的研究沈叙庄，袁林，李振芳，杨永弘为了解我国Ａ族链球菌（ＧＡＳ）感染菌株对红霉素药物的敏感性，我们对北京儿童医院１９９３年５月至１９９４年２月的部分临床分离ＧＡＳ菌株，采用标准琼脂稀释法进行红霉素最小抑菌浓度测定（ＭＩＣ），现...     

儿童肺炎链球菌分离株青霉素、红霉素耐药性与耐药相关基因研究

目的了解苏州地区儿童肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae,Sp)临床分离株青霉素、红霉素耐药的状况。方法对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的26株Sp进行青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、红霉素E test药敏试验,和与青霉素、红霉素耐药相关的pbp2B、ermB、ermA/B、mefA基因PCR检测,测得pbp2B基因产物进行测序并与SpR6株(青霉素敏感株,登录号:NC003098)序列比较。结果(1)pbp2B基因突变15株(58%),均为点突变,突变类型有A型11株(73%)、B型2株(13%)、C型1株(7%)、D型1株(7%);(2)11株无突变菌中青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟敏感株分别为9株(82%)、10株(91%)、11株(100%)、11株(100%);15株突变菌中青霉素、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟不敏感株分别为13株(87%)、11株(73%)、1株(7%)、1株(7%);11株A型突变株对青霉素均不敏感,10株对二代头孢不敏感;(3)ermB基因阳性9株(35%)、ermA/B基因阳性16株(62%)、mefA基因阳性7株(27%)、erm或(和)mef基因阳性21株(81%);(4)erm或(和)mef基因阳性株红霉素最低抑菌浓度为2～>256mg/L。结论pbp2B基因突变是本地区Sp青霉素耐药机制的主要遗传学基础之一;突变株中,A类突变率最高,表现对青霉素、二代头孢不敏感;ermA、ermB和mefA3种红霉素耐药基因单独或共同表达     

12种抗生素对B族链球菌体外抗菌活性研究

目的：探讨B族链球菌（GBS）对十二种常用抗生素的敏感性，以指导临床用药，方法：采用K－B法测定117株GBS菌对12种抗生素的敏感性。结果，所有GBS菌对青霉素和氨苄青霉素敏感或中度敏感，对头孢霉素类及阿莫西林／棒酸，苯唑青霉素均敏感，红霉素，庆大霉素，克林霉素药率分别为8．5％，12．0％，20．5％，对丁胺卡那的耐药率为90．6％。结论：青霉素，氨苄青霉素，阿莫西林／棒酸可作为治疗GBS感染首选药物，头孢霉素类抗生素可作为二线的选择药物，实验室常规准确报告GBS敏感性结果对指导临床医师合理选择抗生素治疗GBS感染具有重要意义，加强抗生素对GBS菌株连续药敏感监测，了解耐药变迁，对临床具有重要指导意义。     

B族链球菌基因分型与新生儿侵袭性感染临床表现的相关性研究

目的分析新生儿B族链球菌(GBS)感染基因型分布特点,探讨GBS基因型与新生儿侵袭性感染临床表现的相关性。方法收集本院及深圳市人民医院新生儿科2008年1月至2014年8月新生儿侵袭性GBS感染病例。采用多位点序列分型技术,对分离收集GBS的7个管家基因序列进行测序,并与BLAST数据库中的序列进行比对,确定菌株序列型(ST)。结果共纳入26例患儿,收集到26株GBS。26株GBS基因型中ST17 13株、ST12 4株、ST19 4株、ST171、ST456、ST485、ST23及未知型各1株。新生儿GBS感染临床表现为化脓性脑膜炎者9例,其中ST17 4例,ST12、ST19各2例,ST23 1例;临床表现为败血症者17例,其中ST17 11例,ST12 2例,ST19 3例,ST23 1例。结论新生儿GBS侵袭性感染的基因型以ST17为主;GBS基因型ST17与临床表现为脑膜炎及败血症均有相关性。     

何谓B族链球菌

答:GBS,又名无乳链球菌(S.agalactiae)。由于该菌引起的感染不只限于牛乳房炎,其细胞壁中含有多糖物质又属于抗原构造分类中的B族(或B组),也称为B族链球菌(或B组链球菌)。该菌为革兰阳性链球菌,大多数菌落在血平皿形成透明的溶血环,但有11%的GBS不溶血。GBS可正常寄居于阴道和直肠,它是一种条件致病菌,是引起新生儿感染性疾病的重要病因,具有高发病率和高死亡率的特征。     

儿童A族β溶血性链球菌耐药及其原因分析

<正>A族β溶血性链球菌简称A族链球菌(group A streptococcus,GAS),又称为酿脓链球菌(streptococcus pyogenes),是引起儿科感染性疾病的重要致病菌。是一种常见的致病性化脓性革兰阳性球菌,健康人群呼吸道内对     

儿童呼吸道感染肺炎链球菌耐药性及pbp2B与TEM基因的研究

目的：了解广州地区儿童呼吸道感染肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)的耐药情况以及SP中青霉素耐药相关基因TEM与pbp2B的流行分布及突变情况。方法：采用E-test和K-B纸片法对44株SP分离株进行药敏试验;PCR扩增SP中的TEM基因及pbp2B,并对pbp2B基因进行测序,结果与SP青霉素敏感株R6进行序列比对分析。结果：①44株SP对青霉素的敏感率仅为11.4％,不敏感率高达88.6％。对红霉素耐药率已达100％,对克林霉素、复方新诺明的耐药性也在90％以上。但对头孢曲松、阿莫西林、亚胺培南仍敏感,耐药率分别为0,2.6%和3.9%。未发现对氧氟沙星、万古霉素耐药菌株。②44株SP的pbp2B基因扩增序列与R6敏感株相比较,5株青霉素敏感株99%以上的核苷酸序列相同,未发生氨基酸的替换。39株青霉素不敏感株均发生核苷酸序列的改变,核苷酸序列突变率为13.2％～23.1%,约6.5％～10.9%的氨基酸发生了替换。根据氨基酸在Ser391-Thr492片段之间的突变情况,可将39株青霉素不敏感株分为四型,其中Ⅰ型突变30株,Ⅱ型突变7株,Ⅲ型和Ⅳ型各1株。44株SP均未检出TEM型β-内酰胺酶耐药基因。结论：广州地区儿童呼吸道感染SP多重耐药情况较严重,青霉素、红霉素已不适宜作为SP感染的临床一线用药,阿莫西林及第三代头孢菌素可作为SP感染的经验用药。pbp2B基因突变是广州地区儿童SP对青霉素耐药的主要机制之一。［中国当代儿科杂志,2009,11（8）：623-626］     

Ⅲ型 B族链球菌结合疫苗对新生小鼠致死性感染的保护作用

目的研究B族链球菌(GBS)荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗主动免疫孕鼠产生型特异性IgG抗体对新生小鼠致死性GBS感染的保护作用.方法以Ⅲ型GBS荚膜多糖-破伤风类毒素结合物免疫孕鼠,用ELISA法测定母鼠型特异性IgG抗体的产生情况及新生鼠体内抗体水平,然后以同型GBS诱导新生鼠致死性感染,观察其死亡率.孕鼠注射生理盐水,新生鼠以致死剂量GBS 攻击组作为感染对照组,孕鼠及新生鼠不给任何处理组作为正常对照组.结果 接受免疫的孕鼠在临产前型特异性抗体水平大幅度升高,几何均数由0.039 mg/L 升至0.728 mg/L (P＜0.001),其所产新生鼠体内抗体含量显著高于感染对照组,二者的几何均数分别为0.538 mg/L、0.043 mg/L (P＜0.001) ; GBS致死性感染后死亡率显著低于感染对照组,分别为37%、97% (P＜0.001).正常对照组中新生鼠存活率为100%.结论 GBS荚膜多糖蛋白结合物疫苗主动免疫孕鼠能诱导型特异性抗体大量产生,新生小鼠从母体获得的特异性抗体能保护其免受同型GBS致死性感染,体液免疫在新生小鼠的抗GBS感染免疫中起重要作用.     

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目的了解广州地区对红霉素耐药的肺炎链球菌中ermB及mefE基因的分布,比较ermB基因与mefE基因对红霉素耐药的肺炎链球菌的耐药性。方法2001—2004于广州市儿童医院用克林霉素纸片法检测239株对红霉素耐药的肺炎链球菌,并用浓度梯度法检测其耐药性。结果239株对红霉素耐药的肺炎链球菌中,ermB、mefE基因介导的耐药率分别为70·3%(168/239)和29·7%(71/239)。168株ermB基因介导对红霉素耐药的肺炎链球菌,对青霉素(MIC500·19μg/mL、MIC901·5μg/mL)、阿莫西林/克拉维酸(MIC500·19μg/mL、MIC901·0μg/mL)、头孢曲松(MIC500·19μg/mL、MIC900·75μg/mL)、头孢呋辛(MIC500·38μg/mL、MIC902·0μg/mL)、头孢克洛(MIC502·0μg/mL、MIC9032·0μg/mL)的不敏感率分别为58·4%、1·2%、20·8%、46·5%和51·7%。71株mefE基因介导对红霉素耐药的肺炎链球菌,对青霉素(MIC500·5μg/mL、MIC901·5μg/mL)、阿莫西林/克拉维酸(MIC500·38μg/mL、MIC901·0μg/mL)、头孢曲松(MIC500·38μg/mL、MIC900·75μg/mL)、头孢呋辛(MIC501·0μg/mL、MIC903·0μg/mL)、头孢克洛(MIC506·0μg/mL、MIC9048·0μg/mL)的不敏感率分别为67·6%、0、19·7%、59·2%和61·9%。结论广州地区对红霉素耐药的肺炎链球菌其耐药机制以ermB基因介导为主;ermB基因介导的红霉素耐药性高于mefE基因介导的耐药性;ermB和mefE基因介导对红霉素耐药的肺炎链球菌对β-内酰胺类药物存在不同程度的耐药。     

新生儿肺炎死亡病例中B族链球菌的检测

目的对北京儿童医院新生儿肺炎死亡病例进行B族链球菌（GBS）回顾性检测,旨在初步揭示GBS感染在新生儿重症肺炎中的地位。方法收集200例1953年到2004年间新生儿肺炎死亡病例（研究组）和34例非感染性疾病新生儿死亡病例（对照组）的尸检病理标本,提取石蜡组织DNA,通过PCR和Southem blot技术检测GBS特异性基因片断咖基因。同时对所选病例的临床资料进行复习。结果（1）研究组200例中,PCR对GBS检出率为26％,Southern blot检出率为65％,检出率均明显高于对照组（PCR3％,x^2=8．82,P〈0．01;Southern blot,18％,x^2=26．77,P〈0．01）。（2）研究组中,年龄小于7d的病例（早发型）103例,年龄大于7d的病例（晚发型）97例,小于7d的患儿GBS检出率明显高于大于7d的患儿,其中PCR检出率在前者为37％,后者为13％（x^2=15．537,P〈0．01）,Southern blot检出率在前者为72％,后者为52％（x^2=4．37,P〈0．05）。早发型阳性病例中,39％为早产儿（29／74）。（3）研究组中,75例有完整临床资料,其中35例可查到一项或多项与GBS感染有关的危险因素,如早产,低体重,胎膜早破,羊水异常等,GBS检测结果均为阳性。阳性病例中,早发型最常见的表现有青紫、窒息,呼吸困难,晚发型最常见的表现有咳喘,呼吸困难。对照组中,1例PCR检测阳性者患恶性畸胎瘤,其他5例仅Southern blot检测阳性者分别为核黄疸、肝癌、先天性无肛合并膀胱尿道瘘、新生儿自然出血、先天性低位无肛合并直肠会阴瘘患者。结论GBS是新生儿肺炎死亡病例中的重要病原,尤其在早发型肺炎病例中GBS感染占很大比重。Southern blot是在石蜡标本中检测GBS的较为敏感方法。     

Relationship between antenatal group B streptococcal vaginal colonization and premature labour

OBJECTIVE:

To determine whether a population of pregnant women with group B streptococcal (GBS) vaginal colonization had an increased risk of specific epidemiological and intrapartum risk factors for early onset GBS disease.

SETTING:

Tertiary university centre in Ottawa, Ontario.

DESIGN:

Hospital-based retrospective cohort study.

METHODS:

Pregnant women who gave birth during a four-month period in 1994 were included in the study. Potential GBS risk factors were obtained from a review of medical records. The prevalence of each risk factor in colonized and noncolonized women was examined using χ² or Fisher’s exact test. Multiple logistic regression was performed.

RESULTS:

A total of 986 women, including 94 (9.5%) women colonized with GBS, were studied. The proportion of women younger than 20 years of age in the colonized group was 2.1% (two of 94) versus 4.6% (41 of 891) in the noncolonized group (P=0.28). Similar rates of multiple births were observed among the colonized and noncolonized groups (2.1% [two of 94] versus 2.5% [22 of 891], respectively) (P=0.94). Likewise, there were no significant differences in either group in the prevalence of a previous pregnancy affected by GBS or diabetes mellitus (P=0.82 and P=0.79, respectively). Multivariable analyses indicated that women who were colonized with GBS were more than twice as likely to deliver prematurely (below 37 weeks’ gestational age) (odds ratio [OR] 2.43, 95% CI 1.39 to 4.23). Similarly, colonized women were more likely to be febrile during labour (at least 38°C) (OR 5.05, 95% CI 1.70 to 15.02).

CONCLUSION:

GBS vaginal colonization was associated with premature labour and intrapartum pyrexia in the population studied. According to Canadian and American guidelines, women with GBS vaginal colonization qualify for intrapartum chemoprophylaxis. The study results suggest that the identification of women at risk of premature labour may be one advantage of early prenatal screening for GBS.     

不同青霉素红霉素敏感性组合模式肺炎链球菌的抗生素敏感性特征

目的分析不同青霉素和红霉素敏感性组合模式的肺炎链球菌对其他常用抗生素敏感性分布的特征,探讨监测青霉素和红霉素敏感性是否具有代表性意义。方法对2000—2002年每年2～5月北京、上海、广州三家儿童医院门诊就诊(年龄1个月至5岁)的急性上呼吸道感染儿童鼻咽部分离肺炎链球菌,采用纸片扩散法和E-test最小抑菌浓度(MIC)法检测其对8种常用抗生素的敏感性。结果将青霉素敏感性分为R(耐药)、I(中介)和S(敏感),红霉素敏感性分为NS(不敏感)和S(敏感),按青霉素敏感性/红霉素敏感性组合模式可分为6组(没有分离到R/S模式菌株)。R/NS组29·8%(17/57)对头孢曲松不敏感;对头孢呋辛和头孢克洛均不敏感;阿莫西林/克拉维酸不敏感株只出现于R/NS组。I/NS组仅0·03%(8/288)对头孢曲松不敏感;头孢呋辛和头孢克洛不敏感率分别为38·2%(110/288)和52·4%(151/288)。头孢克洛不敏感菌株还出现于I/S组。复方新诺明敏感性主要与红霉素是否敏感有关。氯霉素耐药株在各组分布的差异没有统计学意义。R/NS和I/NS几乎都是联合耐药株,S/S组无联合耐药株。结论不同青霉素和红霉素敏感性组合模式的肺炎链球菌对其他常用抗生素敏感性分布具有各自不同的特点,青霉素和红霉素是肺炎链球菌耐药性监测的代表性药物。     

Systemic group B streptococcal disease in neonates and young infants in Norway 1985-94

In the period 1985-94, 237 out of 575 248 (0.41 per 1000) live born infants in Norway were reported to suffer culture-confirmed systemic group B streptococcal disease before their 90th day of life. The annual incidence increased from 0.20 per 1000 live births in 1985 to 0.64 in 1994, due solely to an increase in cases with an onset before the seventh day of life. Future studies should address the possible causes of this increase.