草苁蓉对损伤肝枯否细胞免疫活性的影响

将Ｗｉｓｔａｒ系大鼠乳鼠肝枯否细胞体外培养，选生长良好的细胞培养瓶分为正常组、损伤组、实验组及阳性对照组，除正常组外均以四氯化碳损伤细胞，实验组再加草苁蓉乙醇提取物，阳性对照组加ＰＨＡ。然后在各培养瓶中加入已吸附兔抗绵羊红细胞抗体ＩｇＧ和ＳＲｂＣ，做花环形成实验和吞噬试验，镜下计数并算出枯否细胞在特异抗体介导下的花环形成率、蚕噬率及吞噬指数。结果，实验组比损伤组均显著增（Ｐ＜０．０１）。     

姬松茸多糖抗肿瘤作用研究

目的:研究姬松茸多糖(ABP)对肝癌细胞生长的抑制作用。方法:采用MTT法检测ABP体外与肝癌细胞Bel-7402作用48小时的直接细胞毒作用、ABP与小鼠脾细胞共培养上清(ABP-SL-CM)体外与Bel-7402细胞作用48小时的抑制作用;用流式细胞仪分析诱导肿瘤细胞凋亡情况;腹腔注射给药观察对移植性H22小鼠腹水型肝癌模型的抑瘤率。结果:ABP体外无直接细胞毒作用;不同浓度的ABP-SL-CM体外对Bel-7402细胞生长均有抑制作用,其中低剂量组(ABP-SL-CM-L)作用最显著,抑制率为39.65%;诱导Bel-7402细胞凋亡率为21.68%,DNA直方图上可见到亚二倍体峰;体内实验对肿瘤的生长的抑瘤率为45.83%。结论:姬松茸多糖对肝癌细胞生长有一定的抑制作用,其作用机制不是直接的细胞毒作用,而是通过增强小鼠的细胞免疫功能诱导肿瘤细胞凋亡实现的。     

姬松茸多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤作用的影响

目的:研究姬松茸多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤功能的影响,为临床应用提供理论依据。方法:体外培养小鼠骨髓来源DC,加入ABP溶液,流式细胞仪检测DC表面CD86和CD11a的表达,混合淋巴细胞反应检测ABP对DC抗原提呈能力的影响,MTT法检测ABP对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对H22肝癌细胞杀伤功能的影响。结果:中剂量ABP组(100μg/mL)DC表面CD86、CD11a表达上调;CTL对肿瘤细胞的杀伤率升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:适当浓度的ABP能促进DC分化成熟,增强DC的抗肿瘤作用。     

姬松茸多糖的分离纯化与理化性质研究

姬松茸Agaricus blazei Murill又叫巴西蘑菇,是一种珍贵的药食兼用真菌[1],其子实体中含有多种具有高抗肿瘤活性[2~5]和刺激T细胞作用[6]的多糖。但热水浸提得到的是各种多糖组分的混合物,而不同的多糖的生物活性是不同的,为了研究各种多糖组分的性质,本研究采用分级醇沉、凝胶     

低分子量姬松茸多糖提取分离及抗肿瘤活性筛选的研究

姬松茸(agaricus blazei murill,ABM)是一种药食兼用的真菌,其抗癌作用被认为居抗癌真菌之首[1-3]。多糖是发挥抗肿瘤作用的主要活性成分,目前,对姬松茸粗多糖研究较多,对分子量在10万以下的多糖研究很少。笔者认为,低分子量多糖也含有活性集团,应该具有药理活性,具有深入研究价值。本实验对姬松茸粗多糖进行分离纯化,得到4种低分子量多糖,通过脾淋巴细胞增殖实验和对肿瘤细胞抑制实验,筛选出抗肿瘤活性高的多糖ABMⅡ。材料1·取材姬松茸粗提物,购于浙江庆元博瑞药业有限公司(多糖含量为46·7%)。2·仪器和药品、试剂UV-2550型紫外分光…     

富硒姬松茸提取物硒蛋白多糖对荷瘤小鼠的影响

目的:提取及分析富硒姬松茸硒蛋白多糖活性成分,初步探讨富硒姬松茸硒蛋白多糖的抗肿瘤作用。方法:分别应用Lowry-酚试剂法、用苯酚-硫酸法和2,3-二氨基萘荧光分光比色法测定蛋白质、多糖及硒含量。建立荷瘤小鼠模型,观察富硒姬松茸硒蛋白多糖的体内抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果:富硒姬松茸硒蛋白多糖能明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,并显著提高荷瘤小鼠NK细胞活性、淋巴细胞转化率。其活性成分蛋白质、多糖及硒含量分别为16.32%、81.2%、7.01 mg/g。结论:富硒姬松茸提取物硒蛋白多糖具有良好的抗肿瘤生长作用。     

姬松茸多糖对大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的:观察姬松茸多糖对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱发大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响.方法:Wistar大鼠随机分为4组:正常组,模型组,姬松茸多糖低、高剂量组,每组10只.正常组和模型组灌胃(ig)生理盐水,姬 松茸多糖低、高剂量组ig姬松茸多糖溶液(60,120 mg·kg-1),1次/d,连续7d.模型组和姬松茸多糖低、高剂量于第7日腹腔注射DEX(0.02 g·kg-1).3h后处死各组动物,迅速无菌取胸腺,采用显微观察、流式细胞技术观察胸腺细胞形态学改变,胸腺细胞凋亡、脱氧核糖核酸(DNA)断裂百分率及线粒体膜电位变化,胸腺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化.结果:与模型组比较,姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体嵴肿胀明显减轻;姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞凋亡率[低、高剂量(5.96±1.14)％,(5.07±1.02)％],DNA断裂率[低、高剂量(3.67±0.49)％,(3.24±0.45)％]及胸腺组织MDA含量[低、高剂量(1.87±0.25),(1.72±0.23)μg·mg-1]均明显低于模型组[(7.14±1.62)％,(4.25±0.86)％,(2.16±0.38) μg·mg-1];姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体膜电位(荧光指数:低剂量38.57±6.29,高剂量41.36±7.18)及胸腺组织SOD活性量[低、高剂量(25.78±3.94),(27.36 ±4.21)U.mg-1]明显高于模型组(32.76 ±5.48)荧光指数,(21.45±3.52) i g· mg-1.结论:姬松茸多糖可阻断胸腺细胞DNA断裂和线粒体膜电位的下降,有效抑制DEX诱导的胸腺细胞凋亡,其作用机制与姬松茸多糖提高胸腺组织抗氧化功能有关.     

姬松茸多糖对肥大细胞脱颗粒的影响

目的:观察姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharides,ABP)的抗过敏作用并探讨其可能的作用机制。方法:通过IgE诱导大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验,用比色法测定姬松茸多糖在体内对肥大细胞影响。体外实验观察姬松茸多糖对IgE诱导组胺释放、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素6及p38MAPK的影响。结果:体内实验显示,姬松茸多糖高(400mg/kg)、中(200mg/kg)剂量明显抑制大鼠PCA。姬松茸多糖高(100μg/L)、中(50μg/L)剂量了肥大细胞脱颗粒、组胺的释放、以及肿瘤坏死因子-α、白细胞介素6的释放以及p38MAPK、NF-κB p65蛋白的表达。结论:姬松茸多糖抗过敏作用部分可能与抑制p38MAPK、NF-κB p65信号通路有关。     

地龙蛋白和姬松茸多糖的药理研究

现代研究表明中药地龙除具有定惊、清热、通络、平喘、利尿的传统功效外,其主要有效成分地龙蛋白还具有抗血栓、溶栓和改善血液循环、抗肿瘤、调节免疫、抗辐射、降压、抗心律失常及镇痛消炎等多种现代药理作用;姬松茸多糖具有降血糖、抗肿瘤、抗突变、抗辐射,提高免疫力等主要药理活性。二者都能增强机体免疫功能,对辐射引起的细胞损伤,免疫力低下等不良反应,具有改善作用。     

姬松茸多糖的分离纯化及其初步鉴定

目的：从姬松茸中分离纯化多糖并对其进行初步鉴定。方法：将姬松茸粗多糖配成均匀的5％糖溶液反复冻融离心,Sevage法除蛋白,H2O2脱色,DEAE-纤维素和Sepharose CL-4B凝胶柱色谱,酚-硫酸法检测糖峰的存在。采用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝G-250法对多糖和蛋白质含量进行测定。结果：从姬松茸粗多糖分离得到AB-Ⅰ、AB—Ⅱ-b和AB-Ⅲ-b3个组分,分别为淡黄色、黄色、褐色粉末,经鉴定后均为单一分子量组分,总糖含量分别为91．8％,90．4％,89．2％,蛋白质含量分别为7．1％,8．8％,9．3％。结论：有效分离纯化出姬松茸多糖单一组分,这为姬松茸多糖的应用奠定了一定的实验基础。     

膜法分级纯化姬松茸子实体多糖的研究

目的通过微滤和超滤对姬松茸子实体粗多糖分级纯化,获得最佳试验操作条件,考察各级相对分子质量范围内的多糖分布情况及所得制品的纯度。方法使用微滤和不同截留相对分子质量的超滤串联工艺。结果试验按相对分子质量将其分成>3×105、3×105~8×104,8×104~1×104以及<1×1044个级别,所得多糖质量分布比例约为5∶1∶3∶1。试验确定操作条件为室温,操作压力0.08~0.1MPa,微滤和各级超滤分别将各级多糖最高浓缩至45、35和25g/L。在低温下干燥制备的姬松茸多糖制品,质量分数高于70%,多糖总回收率高达83.7%。结论该工艺简单可行,姬松茸子实体多糖相对分子质量主要分布于>3×105和8×104~1×105。     

巴西蘑菇抗肿瘤药理研究进展

目的阐述近年来巴西蘑菇抗肿瘤药理研究进展,为其深入研究和开发提供参考。方法查阅1994~2006年美国Medline、荷兰Elsevier及中国期刊全文数据库(CNKI)中有关巴西蘑菇抗肿瘤等药理文献进行分析综述。结果巴西蘑菇具有抗肿瘤、抗突变、调节免疫功能、辅助放化疗等药理作用。结论巴西蘑菇在抗肿瘤方面具有多种药理作用,具有广泛的开发前景。     

低分子姬松茸多糖对Bel-7402细胞端粒酶-RNA mRNA表达的影响

目的探讨低分子姬松茸多糖(a low molecular weight polysaccharide isolated from Agaricus blazei,LMPAB)对人肝癌细胞Bel-7402端粒酶-RNA mRNA表达的影响。方法5,10和20μg.ml-1浓度的LMPAB处理体外培养的Bel-7402细胞48 h后,采用原位杂交法检测端粒酶-RNAmRNA表达。结果LMPAB下调体外培养Bel-7402端粒酶-RNAmR-NA的表达,呈剂量依赖性。与空白对照组比较,端粒酶-RNA mRNA的表达差异具有统计学意义(P<0.01)。结论LMPAB具有下调端粒酶-RNA mRNA表达的作用,进而降低端粒酶活性,抑制肿瘤细胞生长。     

姬松茸中挥发性风味物质的GC-MS分析

利用顶空GC-MS技术对姬松茸新鲜子实体和固体发酵的菌丝体挥发性风味物质进行了分析。在子实体中检测出7种主要的挥发性风味物质，其中以苯甲醛和苯甲醇为主，相对含量分别达到43．20％和28．98％；在菌丝体中检测出16种主要的挥发性风味物质，其中苯甲醛相对含量最高，达38．50％。苯甲醛和苯甲醇是姬松茸中的主要风味物质。     

姬松茸菌孢多糖对胃癌大鼠IL-2、NK细胞的调节及抑瘤作用

目的 探讨中药姬松茸菌孢多糖对胃癌大鼠IL-2、NK细胞的调节及抑瘤作用。方法 将Wistar大鼠 随机分为5组,除空白对照组外,其余4组均经免疫抑制处理(注射阿糖胞苷与60Co全身照射),皮下接种胃癌细胞 悬液,制成胃癌大鼠模型。其中3组分别用姬松茸菌孢多糖大、小剂量及香菇多糖灌胃治疗,正常对照组和模型对照 组分别用相等剂量的生理盐水灌胃。10 d后,观察各实验组肿瘤生长情况及相关免疫指标IL-2、NK细胞的含量或 活性。结果 胃癌大鼠模型组与正常对照组比较,IL-2含量及NK细胞杀伤活性均显著降低(P<0．01)。用药灌胃 后,IL-2含量及NK细胞杀伤活性均显著提高(P<0．01),瘤块明显减小(P<0．01);姬松茸菌孢多糖组的治疗效果 优于香菇组(P<0．05)。结论 姬松茸菌孢多糖有促进胃癌大鼠IL-2、NK细胞免疫功能及抑制肿瘤生长的作用。     

芪蚣汤对免疫性肝纤维化的治疗作用

目的探讨中药复方对免疫性肝损伤的治疗作用。方法采用猪血清注射法复制大鼠肝纤维化动物模型,利用大、小剂量芪蚣汤灌胃治疗6周,检测血清学指标。结果模型组较正常组对照PT延长,ALT,LN,HA增高,A/G下降,经芪蚣汤治疗后,大剂量组PT,ALT,LN,HA和A/G均接近正常。小剂量组PT,LN和HA虽较模型组下降,但仍明显高于正常组。结论芪蚣汤对免疫性肝纤维化有治疗作用,并有量-效关系。     

苦参碱对大鼠肝脏冷保存再灌注损伤中枯否细胞的影响

目的探讨苦参碱对大鼠原位肝移植供肝冷保存再灌注损伤中枯否细胞影响及其作用机理。方法应用延长保存的大鼠原位肝移植模型,将160只大鼠随机分为对照组、苦参碱小剂量治疗组、大剂量治疗组和假手术组,分别检测移植术后血中内毒素和肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,并观察移植肝脏病理形态学的改变。结果与对照组比较,治疗组术后各时点血浆内毒素及肝组织内的TNF-α的含量均明显减轻,同时肝细胞和肝内皮细胞损伤的病理表现也明显改善。结论苦参碱可以通过降低再灌注后内毒素水平,有效抑制枯否细胞激活及释放,TNF-α等炎症性损伤介质,保护肝细胞及肝窦内皮细胞,从而减轻供肝冷保存再灌注损伤。     

黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞的作用

目的: 探讨黄芪多糖对黑色素瘤小鼠调节性T细胞(Treg)免疫活性的影响。方法: 建立B16-F10荷瘤小鼠模型,C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺(CTX)组、黄芪多糖低剂量组(0.15 g·kg^-1)、黄芪多糖高剂量组(0.3 g·kg^-1)。造模后第2天开始ig给药,给药14 d后处死各组小鼠,取肿瘤称重计算抑瘤率,取脾脏制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Treg的比例,通过实时定量PCR检测小鼠脾脏中转化生长因子-β (TGF-β)mRNA,白细胞介素-10(IL-10) mRNA的表达。结果: 黄芪多糖能够抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长(P<0.05),降低脾脏中Treg的比例(P<0.01),降低脾脏中TGF-β mRNA, IL-10 mRNA(P<0.05)的表达。结论: 黄芪多糖可能通过降低荷瘤鼠脾脏中Treg数目,抑制TGF-β, IL-10分泌,从而实现其抑瘤作用。     

大黄素及番泻甙和大黄多糖对培养大鼠肝细胞内游离钙浓度的影响

应用钙荧光指示剂乙酰羟甲酯研究大黄素（ＥＭＤ）、番泻甙（ＳＥＮ）和大黄多糖（ＲＰＰ）对大鼠肝细胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度的影响。结果表明，在静息状态下肝细胞内［Ｃａ２＋］ｉ为１３１．６０±３７．７９ｎｍｏｌ／Ｌ。依次加入ＣａＣｌ２（２ｍｍｏｌ／Ｌ）和ＫＣｌ（１２０ｍｍｏｌ／Ｌ）后，肝细胞内［Ｃａ２＋］ｉ较静息时显著增加（Ｐ＜０．０１）。预先经ＥＭＤ（０．０３７ｍｍｏｌ／Ｌ）作用的肝细胞，在静息状态或加入同上剂量的ＣａＣｌ２和ＫＣｌ后，细胞内［Ｃａ２＋］ｉ均较去离子水对照组明显增加（Ｐ＜０．０１）；相反，ＳＥＮ和ＲＰＰ使肝细胞内［Ｃａ２＋］ｉ明显降低（Ｐ＜０．０１），且抑制效应与剂量呈负相关。从大黄不同有效成分ＥＭＤ、ＳＥＮ和ＲＰＰ对细胞内游离钙水平的不同影响提示，大黄对肝细胞功能具有多种调节作用。     

前列通片促进免疫功能的实验研究

目的:探讨前列通片对小鼠免疫功能的影响。方法:1)脾淋巴细胞转化试验:将60只小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、前列通片低、中、高剂量组,每组12只。灌胃给药,1次/d,连续给药30 d后各组动物无菌取脾,提取脾淋巴细胞进行脾淋巴细胞转化试验。2)NK细胞活性影响试验:将60只小鼠随机分为阴性对照组、模型对照组、阳性对照组、前列通片低、中、高剂量组。除阴性对照组外,其余各组腹腔注射环磷酰胺建立免疫功能低下的小鼠模型。造模同时给药,连续给药30 d后,各组动物无菌取脾,提取脾淋巴细胞进行NK细胞活性影响试验。结果:1)与阴性对照组比较,前列通片高剂量组淋巴细胞转化能力显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。2)与模型对照组比较,阳性对照组及前列通片高剂量组NK细胞活性显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:在本实验条件下,前列通片能够提高机体淋巴细胞转化能力以及NK细胞的活性,具有一定的免疫促进作用。