精液白细胞与精子形态学参数的关系

目的：探讨精液白细胞与精子形态学参数之间关系。 方法：对278例不育患者采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,采用精液白细胞计数法检测精液白细胞,采用改良巴氏染色法分析精子顶体形态。结果：白细胞精子症组形态正常精子率和顶体完整率均低于非白细胞精子症组（P<0.05）;形态正常精子率与精液白细胞浓度呈负相关关系（r=-0.243,P<0.01）;顶体完整率与精液白细胞浓度亦呈显著负相关关系（ r=-0.248,P<0.01）。结论：精液白细胞增多可能影响精子的形态和顶体的完整。     

不同染色法对精子顶体染色效果及适用性的比较

目的:通过比较瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精子顶体染色的效果,寻找有效、更易于判读精子顶体的染色方法.方法:100份精液标本同时采用瑞氏-吉姆萨染色法、改良巴氏染色法、Diff-Quik法及吉-姆萨染色法对精液涂片进行染色,分析四种染色方法的结果.结果:四种染色方法对Ⅰ型、Ⅳ型精子顶体的评估结果无显著性差异(P＞0.05);改良巴氏染色法相对其他三种染色法对精子顶体染色效果稳定.结论:改良巴氏染色法相对其他三种染色法在精子顶体完整率的判读上具有染色效果稳定的优势,且染液价格经济,适于精子顶体完整率的判读.     

顶体形态与精子活力、活率关系分析

目的探讨精子顶体形态与精子活力、活率关系.方法123例男性不育患者,采用精子自动分析质量检测系统检测精液常规,采用伊红Y水实验分析精子活率,采用联苯胺染色计数精液白细胞浓度,用改良巴氏染色法分析精子形态及顶体形态.结果精子活率正常组顶体完整率明显高于精子活率异常组(P＜0.05);精子活力正常组与精子活力异常组顶体完整率比较差异无显著性(P＞0.05);精液参数正常组顶体完整率明显高于精液参数异常组(P＜0.05);顶体完整率与正常形态精子百分率、精子活率呈显著正相关关系(P＜0.05,P＜0.01),与白细胞浓度呈显著负相关关系(P＜0.05).结论顶体形态分析可以在一定程度上反映男性生育力,是男性不育症诊断的一个有价值指标.     

三种精子染色法的染色效果比较

目的评价一种新的精子染色方法BASO（改良Diff-Quik）法在精子顶体检测中的应用。方法收集60例不育症男性精液,用BASO法、改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,同时进行染色,比较其固定和染色时间均数,并分析其精子顶体不完整率检测的差异。结果BASO法固定和染色约需7min,明显短于改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,而精子顶体不完整率检测的差异无显著性。结论BASO法操作步骤简单省时,可用于临床精子标本的染色,分析精子形态及精子顶体完整性。     

Diff-Quik与改良巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的:比较Diff-Quik染色法与改良巴氏染色法对精子形态染色效果,寻找简单、快速、准确的精子形态染色方法,替代传统的改良巴氏染色法。方法:选取83份精液标本,每份标本同时采用上述两种染色法对精液图片进行染色,分析两种染色方法的结果。结果:两种染色方法对精子形态评估结果差异无统计学意义(P>0.05);且两种方法对精子正常形态率的评估具有显著正相关性(r=0.926,P<0.01)。结论:Diff-Quik染色法是一种简单、快速、准确的精子形态染色方法,可以替代改良巴氏染色法。     

瑞氏-姬姆萨与巴氏染色法对精子形态染色效果比较

目的 比较瑞氏-姬姆萨染色法和巴氏染色法对精子形态染色的效果,寻找可替代巴氏染色法的简单、有效的精子形态染色方法.方法 随机选取21份精液标本,每份标本同时采用瑞氏姬姆萨染色法和巴氏染色法对精液涂片进行染色,分析两种染色方法的结果.结果 两种染色方法对精子形态的评估结果无显著性差异(P>0.05);且对正常形态精子和异常形态精子的评估分别具有正相关性,r值为0.984、0.986(P均<0.01).结论 瑞氏-姬姆萨染色法是一种简单有效的精子形态染色方法,可替代巴氏染色法.     

膜联蛋白A1在小鼠精子的定位

目的对小鼠精子膜联蛋白A1(AnxA1)进行定位,了解其与精子睾丸后成熟、获能、顶体反应的关系。方法用间接免疫荧光染色对睾丸、附睾精子以及诱导获能、顶体反应的精子进行膜联蛋白A1定位,同时用考马斯亮蓝染色法鉴定顶体反应率。结果取自睾丸、附睾头、体、尾部的精子膜联蛋白A1均分布于顶体帽区及尾部;诱导获能、顶体反应的精子头部荧光呈现2种类型:顶体帽型(Cap),赤道段-顶体后区型(Ep)。获能组精子Cap型(97.3±1.0)%,Ep型(2.7±1.0)%;顶体反应组精子Cap型(41.8±4.1)%,Ep型(58.2±4.1)%。考马斯亮蓝染色呈顶体反应(AR)型精子获能组为(5.4±2.5)%,顶体反应组为(64.7±3.7)%。相关分析表明AnxA1荧光标记Ep型百分率与考马斯亮蓝染色AR型百分率呈高度正相关(P<0.001)。结论在附睾成熟过程中及获能后小鼠精子膜联蛋白A1分布无明显变化,顶体反应后转移至赤道段、顶体后区,可能参与精子的钙依赖事件如顶体反应、精卵融合过程。     

不同染色方法对精子形态学评估的影响

目的:探讨Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈部和中段缺陷精子百分率、尾部缺陷精子百分率、畸形精子形态指数(TZI)、精子畸形指数(SDI)等。结果:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中,正常形态率、各种类型的缺陷率(头部、颈部与中段、尾部)、畸形精子指数、精子畸形指数等均无统计学意义(P>0.05)。结论:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中具有较为一致的结果;改良巴氏染色法虽经典,但过于繁琐;在病人多且急需出具精子形态学检验报告的情况下,可以考虑使用Diff-Quik染色法作为精子形态评估染色方法。     

双向电泳两种凝胶染色方法的比较

目的比较肾脏蛋白质双向电泳凝胶银染色法与考马斯亮蓝G-250染色方法的染色效果。方法利用蛋白质固相pH梯度双向电泳技术分离SD大鼠肾脏组织蛋白,应用银染色和考马斯亮蓝G-250染色两种染色方法,及ImageMaster 2D5．0凝胶分析软件对凝胶进行染色分析。结果银染后的可见蛋白点比考马斯亮蓝染色法多,银染色法与考马斯亮蓝染色法平均匹配率为49．42％。结论银染法比考马斯亮蓝染色法的灵敏度高。     

精子顶体酶活性与顶体图像定量的相关性研究

目的探讨精子顶体酶活性与精子头部顶体面积、灰度值之间的相关性.方法用改良Kennedy法测定精子顶体酶活性,采用图像定量分析软件Scoion Image测量以改良巴氏染色法染色的精子头部顶体面积及灰度值.结果顶体酶活性与灰度值之间存在相关性(P<0.05),顶体酶活性与顶体面积不相关(P>0.05).结论精子顶体图像定量分析结合顶体酶活性,在男性不育症因素分析中可提高参考价值.     

两种精子优选法对精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率的影响

目的：评价Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法对人精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率影响。方法：收集12例男性不育症患者精液样本,分别采用Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法(简称上游法)进行精子优选,应用伊红-Y染色分析优选前后精子活率和尾部低渗肿胀率,应用改良巴氏染色法分析优选前后精子形态。结果：①Percoll法和上游法优选后精子活率和尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较精子活率和尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。Percoll法和上游法优选后B-G型精子尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较B-G型精子尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。②Percoll密度梯度离心法和上游法优选后形态正常精子百分率均明显高于优选前（P<0.05）,上游法优选后形态正常精子百分率明显高于Percoll法优选后形态正常精子百分率（P<0.05）。上游法优选后锥型头、无定型头和颈/中段缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;Percoll法优选后锥型头、无定型头和尾部缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;上游法优选后无定型头、颈/中段缺陷和尾部缺陷形态异常精子百分率明显低于Percoll优选后（P<0.05）。结论：Percoll法和上游法优选后精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率较优选前明显改善, 此两种优选法均可广泛应用于生殖医学,其中上游法优于Percoll法。     

抗精子抗体阳性大鼠动物模型的建立

目的　建立抗精子抗体 (AsAb)阳性大鼠动物模型。方法　同种Wistar大鼠精子抗原人工免疫法建立模型 ,通过ELISA法检测血清AsAb ;光镜HE染色观察大鼠附睾组织形态学改变 ;考马斯亮蓝顶体染色法检测精子的顶体反应率 ;化学比色法检测精子的ATP酶活性。结果　模型AsAb阳性大鼠血清样品的AsAb符合实验要求 ,其精子的顶体反应率、Na+ -K+ ATP酶、Ca2 + -ATP酶活性与对照组相比均显著降低 (P <0 0 1;P <0 0 5 ;P <0 0 5 )。结论　成功建立抗精子抗体阳性大鼠动物模型。     

精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率与卵子体外受精率的相关性研究

目的:通过检测常规体外受精中(in vitro fertilization IVF)精液常规分析正常男性的精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率并分析其与卵子的体外受精率之间的关系,旨在为辅助生殖技术提供几种可靠的判断精子生育力的参数与指标。方法:选择2008年7月1日到2009年12月30日间在广西医科大学第三附属医院生殖医疗中心进行控制性长方案超排卵下行常规IVF-ET的100对夫妻,共100个周期的资料做前瞻性分析,男方精液常规分析属正常范围,分析100份标本精子正常形态率、精子顶体完整率以及精子顶体反应率;观察并记录获卵个数、成熟卵个数、受精卵个数、未受精卵个数,计算其受精率。然后应用计量资料t检验,F检验以及线性相关等统计学方法对精子各项参数与卵子受精率之间的相关性进行分析。结果:实验组1,精液标本按其正常精子形态百分率分为3组,A组:≥5%而<10%、B组:≥10%而<15%、C组:≥15%,卵子体外受精率分别为67.05%、74.51%、82.49%,各组间两两相比差异有统计学意义(P<0.05)。实验组2,按顶体完整率分为两组,A组:≤85%组、B组:>85%组,卵子体外受精率分别为74.25%和82.14%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组3,按顶体反应率分为三组,A组:<14%、B组:≥14%而≤25%、C组:>25%,其卵子体外受精率分别为73.45%、77.19%、82.74%,各组间的差异有统计学意义(P<0.05)。实验组4,按精子正常形态百分率分为两组<15%和>15%组,所对应的顶体完整率分别为79.51%、87.27%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组5,用多重线性回归分析,精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率的标准化系数和P值分别为0.352、0.497、0.271;0.045、0.005、0.017,各个系数均有统计学意义。其中又以顶体完整率的标准化系数最大。结论:1.对于精液常规分析正常的男性,约有50%存在着不同程度的精子形态异常。卵子的受精率随正常形态精子所占百分率的升高而增高;其正常精子形态率≥5%,仍可得到一个较好的体外受精率,因此可行常规体外受精助孕。2.对于精液常规分析正常的男性,约有65%男性的精子顶体完整率>85%,随着精子顶体完整率的增加,卵子的受精率也明显增高;3.对于精液常规分析正常的男性,其78%男性精子顶体反应率≥14%,在体外受精中卵子的受精率随着精子顶体反应率所占百分比的增加而增高;4.上述三者都是影响卵子受精的重要因素,卵子体外受精率与以上三项指标间存在较强的相关关系,而其中又以顶体完整率对卵子体外受精率的影响程度最大。5.对于精液常规分析正常的男性,若正常精子形态率≥5%,在体外受精助孕前,精子顶体完整率和精子顶体反应率的检测,可不作为常规检查项目。     

巴氏染色法在精子顶体研究中的应用

目的应用巴氏染色方法对临床上精子顶体区是否正常进行区分。方法分别对该研究所门诊111例精子标本进行巴氏染色后，每例标本在显微镜油镜下记数200个精子，观察顶体区。结果111例标本中，5例为无顶体圆头精子，23例为小顶体区精子，83例顸体区正常精子。结论巴氏染色法在临床上可对精子顸体区是否正常作出准确的判断。     

运动血压变异性与蛋白尿、动脉硬化的关系

目的探讨原发性高血压患者运动血压变异性与尿蛋白、动脉硬化的关系。方法 50例健康人,男性女性各半,平均年龄64.5±5.1岁,作为对照组。高血压患者80例,平均年龄65.3±5.7岁,男性女性各半,作为高血压组。分别测运动血压与24h尿蛋白、踝臂动脉脉搏波传导速度(baPWV)。结果高血压组运动血压变异性明显大于对照组(P<0.05)。高血压组的24h尿蛋白含量、baPWV均大于对照组(P<0.05)。运动血压变异性与24h尿蛋白含量、baPWV均正相关(P<0.05)。结论运动血压变异性增大是高血压病的重要特征。运动血压变异性增大易导致动脉硬化及肾功能损害。     

聚乙二醇修饰多肽的电泳分析方法

目的 建立聚乙二醇修饰多肽的电泳分析方法。方法 采用不同浓度和不同交联度的凝胶进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后依次进行碘化钡染色和考马司亮蓝染色,并采用图像分析仪对所得结果进行处理。结果 采用5％浓缩胶,15％分离胶(C=3％),可以将不同分子量聚乙二醇与聚乙二醇修饰的小分子多肽分离;采用3.125％浓缩胶(C=20％),15％分离胶(C=5％),可以将聚乙二醇与小分子多肽分离。结论 建立了有效分离聚乙二醇修饰的小分子多肽的SDS-PAGE分析方法。