用纯化肝片吸虫12KD交叉反应抗原成功地免疫鼠抗曼氏血吸虫感染

已有实验证明肝片吸虫成虫的亚细胞组份能诱导鼠产生交叉抗曼氏血吸虫感染的免疫反应。作者用凝胶过滤以及离子交换层析法从肝片吸虫成虫分离了一种12KD 的抗原。用该抗原免疫的小鼠能产生与曼氏血吸     

肝片吸虫抗原免疫小鼠后曼氏血吸虫成虫负荷的减少

曾报道肝片吸虫和血吸虫之间存在交叉反应抗原或是共同抗原,为了进一步了解用肝片吸虫免疫的小鼠对曼氏血吸虫尾蚴攻击感染所产生的保护作用,作者作了如下研究。从牛肝取肝片吸虫成虫,洗涤,匀化,冰冻干燥,然后将干虫粉与 pH7. 1,0. 01M 的磷酸缓冲盐水制成肝片吸虫成虫抗原(Fhw-     

可溶性曼氏血吸虫抗原和照射减弱疫苗对小鼠血吸虫病的免疫作用

本文比较了接种单剂肝片吸虫或曼氏血吸虫成虫可溶性提取物与照射减弱曼氏血吸虫尾蚴或童虫对小鼠曼氏血吸虫病的保护作用。并对吸虫抗原提取物与减弱尾蚴疫苗结合应用的免疫效果进行了评价。肝片吸虫成虫(Fhww)或曼氏血吸虫成虫(Smww)可溶性抗原提取物:肝片吸虫、曼氏血吸虫分别经生理盐水反复洗涤后制成匀浆,悬于Hank’s平衡盐溶液中。经超声处理后,在4℃、3000g离心30′,最后收集其可溶性部分。免疫时抗原提取物的蛋白浓度为     

埃及血吸虫感染的血清诊断和化学治疗对血清诊断试验的影响

作者以曼氏血吸虫、日本血吸虫、肝片吸虫和猪蛔虫的成虫以及曼氏血吸虫尾蚴作抗原进行间接红细胞凝集试验和补体结合试验,以曼氏血吸虫新鲜尾蚴作尾蚴膜反应,以感染曼氏血吸虫的小鼠肝冰冻切片为抗原作间接免疫荧光试验,以及用曼氏血吸虫成虫抗原进行琼脂双扩散试验,检查了取自利比里亚曼氏和埃及血吸虫病流行区某医院的埃及血吸虫病人血清。受检者按尿中有无埃及     

肝片吸虫谷胱甘肽转移酶对宿主的反应效应和无反应效应

谷胱甘肽转移酶(GST)在寄生虫实验疫苗研究中有重要意义。本研究旨在确定肝片吸虫(Fh)或曼氏血吸虫(Sm)免疫的不同种动物是否对肝片吸虫成虫GST(FhGST)产生抗体,并估价Fh的其它保护性抗原与FhGST间的关系。用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析法从Fh分离纯化FhGST,用SDS-PAGE,EITB及免疫扩散技术对FhGST进行生化及免疫学鉴定,并用ELISA及快速ELISA检测抗FhGST抗体和Fh排泄分泌抗原(FhES)     

用纯化成虫抗原免疫牛获得对肝片吸虫感染的抵抗力

作者从肝片吸虫成虫分离到肝片吸虫/曼氏血吸虫交叉免疫抗原(称为Fh_(smⅢ(M))),并研究了这一抗原免疫小牛后的免疫应答和对肝片吸虫攻击的抵抗力。从病牛胆道中收集肝片吸虫成虫,在冰冷0.01M磷酸缓冲液及蒸馏水中反复洗涤多次,在组织捣碎器中制成匀浆,50000×g离心1小时,收集上清液,通过亲和层析柱分离得到Fh_(smⅢ(M))。感染用的肝片吸虫囊蚴在显微镜下观察活力后计数,以滤纸裹成小丸,经口给予。实验用3～4月龄小牛,均经粪便检查未     

用肝片吸虫抗原使小鼠和仓鼠对曼氏血吸虫产生获得性免疫力

作者用肝片吸虫干粉浸出液(粗抗原)与佐剂按等体积比例制成乳剂,每周3次连续3周免疫接种小鼠和仓鼠。在末次免疫接种后1周用1%琼脂糖双向扩散试验测定小鼠血清中的沉淀抗体,证明全部接种的小鼠的血清中均有对同种抗原的沉淀素,而对照组则无。此外,用肝片吸虫成虫粗抗原接种的小鼠血清中,还存在着与曼氏血吸虫成虫抗原起反应的抗体,用间接血凝试验测定,其倒     

四种吸虫成虫抗原的酶联免疫印迹分析

应用酶联免疫印迹分析姜片吸虫、肝片形吸虫、华支睾吸虫和日本血吸虫成虫抗原,结果显示,各种抗原的蛋白多肽均多达数十个成分,四种吸虫抗原与同源兔免疫血清产生颜色较深、数量较多(20～40条)的免疫反应区带,与其他三种异源免疫血清及日本血吸虫感染血清显示数量不等的交叉反应性区带。四种抗原共有10个特异的抗原性多肽。     

巨片形吸虫26～28 kDa循环抗原的鉴定与特性分析

巨片形吸虫感染主要在亚洲、非洲、欧洲和澳洲部分地区的食草类动物中流行。以往主要用粪便检查虫卵的方法进行诊断,虽然有些血清学方法对其诊断有价值,但因与其它虫种有交叉反应使特异性降低。Attallah等利用特异性兔抗鼠血清抗体检测家畜血清中的循环抗原,并对其进行鉴定和纯化,建立了一种简便、快速、敏感、特异的检测巨片形吸虫的方法。从欧洲Damietta地区的一个屠宰场收集了36头牛血清,并保留其粪便和胆汁标本,先后制备巨片形吸虫成虫抗原、排泄 分泌抗原、曼氏血吸虫成虫抗原、人蛔虫成虫抗原、弓形虫抗原及巨片形吸虫抗原的兔抗鼠多…     

用光学与电子显微镜观察吡喹酮对体外培养的曼氏血吸虫、支双腔吸虫和肝片吸虫的作用

作者等报道了曼氏血吸虫、支双腔吸虫和肝片吸虫在体外经毗噢酮作用后表皮超微结构的变化。自感染曼氏血吸虫的小鼠,感染肝片吸虫的大鼠及感染支双腔吸虫的家畜体内取虫,置于每ml含0、1、10或100协g毗哇酮的培养液中,在s7OC中培养5、15、30和60分钟,然后置于4oC的pH7 .4的5%戊二醛二甲砷酸钠缓     

肝片吸虫排泄-分泌型谷胱甘肽-S-转移酶的潜在作用

谷胱甘肽-S转移酶(GSTs)是与细胞解毒和许多生理及生物异源物质排泄有关的一多功能酶家族,已从如下蠕虫鉴定并纯化出GSTs,包括日本血吸虫、曼氏血吸虫、牛血吸虫、埃及血吸虫和肝片吸虫。肝片吸虫成虫     

酶联免疫吸附试验可检出感染曼氏血吸虫小鼠的抗虫卵和成虫特异性抗体

本文应用曼氏血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(AWA)作酶联免疫吸附试验检测小鼠曼氏血吸虫感染。用250条尾蚴感染小鼠,于70～80天后收集成虫及虫卵,加PBS(pH7.2)分别匀浆。匀浆物搅拌过夜,再离心10000转/分钟,共1小时,然后用PBS透析,即得到SEA和AWA。DDY小鼠感染30或50条曼氏血吸虫尾蚴后,每两     

血吸虫病间接免疫荧光试验的改良抗原

作者等用成虫和尾蚴的冰冻切片作抗原进行间接免疫荧光试验。从感染尾蚴后7周的小鼠和感染后12周的金色田鼠肝脏分别收集曼氏血吸虫成虫和埃及血吸虫成虫。尾蚴取自感染后6周的螺蛳。将成虫放在滤纸上吸去水份,不予固定,尾蚴则以10%福尔     

肝片吸虫脂肪酸结合蛋白异构体的分离及免疫学特性

自肝片吸虫成虫分离、纯化所得的天然Fh12(nFh12)是一种脂肪酸结合蛋白,感染了该吸虫的不同动物在2wk内就会产生针对nFh12的抗体。rFh15是一种重组蛋白,通过抗Fh12多克隆抗体从肝片吸虫cDNA文库中筛选出来。已有研究表明,nFh12对肝片吸虫的免疫预防作用效果比rFh15强,提示这两种蛋白可能有所不同。     

曼氏血吸虫成虫萃取物不同成份中Sm14的初步分析

以往的研究发现,重组分子r-Sm14在体外感染动物模型中,可诱导高水平的抗曼氏血吸虫的保护性免疫作用。同时也可在瑞士小鼠感染肝片吸虫的模型中诱导交叉免疫保护作用。r-Sm14是活成虫的萃取物,也称为SE。SE是开发上述两种寄生虫的抗蠕虫二     

基于重组酶聚合酶扩增的曼氏血吸虫核酸可视化检测技术的建立及初步评价

目的 结合重组酶聚合酶扩增技术(RPA)和侧流层析试纸条(LFD)，建立一种快速、便捷的曼氏血吸虫核酸可视化检测方法，并初步评价其检测效能。方法 以曼氏血吸虫细胞色素c氧化酶亚基1(SmCOX1)基因为靶序列，利用Primer Primer 5软件结合手工辅助，设计特异性引物和探针并进行筛选，建立曼氏血吸虫核酸LFD-RPA检测方法。制备不同浓度(1 ng/μl、100 pg/μl、10 pg/μl、1 pg/μl、100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl、0.1 fg/μl)的曼氏血吸虫成虫基因组DNA和含有不同拷贝数浓度(10~5、10~4、10~3、10~2、10~1、10~0、10^-1拷贝/μl)的SmCox1重组质粒DNA，评价所建立方法的敏感度。以曼氏血吸虫成虫、日本血吸虫成虫、埃及血吸虫虫卵、感染曼氏血吸虫双脐螺(阳性双脐螺)和阴性双脐螺、感染日本血吸虫钉螺(阳性钉螺)和阴性钉螺、华支睾吸虫成虫、大片形吸虫成虫、卫氏并殖吸虫成虫基因组DNA为模板，评价所建立方法的特异性。将30只雌性BALB/c小鼠随机分为40尾感染组、80尾感染组和健康...     

用放射变应原吸附试验研究曼氏血吸虫、日本血吸虫和肝片吸虫特异的血红蛋白酶的抗原性

许多学者已证实多种寄生蠕虫存在着特异的血红蛋白酶(HSP)。本文研究了曼氏血吸虫、日本血吸虫及肝片吸虫的特异的HSP抗原的性质。抗原三种成虫均用0.85%NaCl溶液洗3次后,在-20℃中保存待用。以Sauer和Senft(1972)的方法,分别提取3种虫体中     

两种片形吸虫成虫抗原组分分析及其免疫学鉴定

目的应用SDS-PAGE对肝片形吸虫和巨片形吸虫成虫蛋白组分进行比较分析,并Western blot检测其特异性蛋白分子。方法分别收集肝片形吸虫和巨片形吸虫成虫,冰上研磨匀浆,提取上清蛋白,采用SDS-PAGE分析肝片形吸虫和巨片形吸虫差异蛋白组分;应用Western blot检测特异蛋白组分。结果虫体蛋白经SDS-PAGE后采用Gel Doc XR+凝胶成像系统对电泳图像进行高灵敏度分析,巨片形吸虫和肝片形吸虫成虫均有37条带,低灵敏分析显示肝片形吸虫成虫蛋白主要7条带,巨片形吸虫成虫蛋白主要有6条带,相对分子质量集中在10×103~70×103。Western blot检测巨片形吸虫有6条反应带,分别在150×103、100×103、75×103、50×103、34×103、23×103等位置;肝片形吸虫5条反应带,分别在55×103、37×103、34×103、23×103、15×103等位置。与血吸虫、囊虫、广州管圆线虫、旋毛虫的交叉反应蛋白为75×103、100×103、75×103组分(巨片形吸虫)和60.34×103组分(肝片形吸虫)。结论肝片形吸虫成虫与巨片形吸虫成蛋白组成有差异不明显,抗原特异的蛋白在23×103、15×103等位置,且22×103~24×103组分占比较大(在在肝片形吸虫占48.4%,巨片形吸虫占77.3%)。其特异的蛋白酶类有待经质谱分析后用于诊断抗原及疫苗研究,而15×103组分可能是肝片形吸虫特有的可区别于巨片形吸虫的蛋白。     

实验性肝睥型血吸虫病循环免疫复合物对肾小球损伤的作用

肝脾型曼氏血吸虫病病人的肾小球存在免疫球蛋白和补体,实验感染曼氏血吸虫的动物也可以看到类似的变化,同时在病人和感染动物的血清和尿中发现了曼氏血吸虫循环抗体、抗原和循环免疫复合物。这提示肝脾型血吸虫病免疫复合物对肾小球的损伤作用。本文作者对115只小鼠感染曼氏血吸虫,     

129/Ola小鼠血管异常与对曼氏血吸虫“非适宜”的关系

通常认为小鼠是血.吸虫的适宜宿主,但部分129小鼠对初次感染即有抗性,约50％129/J小鼠对日本血吸虫有先天抵抗力,约70％129/Ola小鼠对曼氏血吸虫有先天抵抗力。所谓非适宜指在门脉系统未找到成虫和虫卵,但在肺部血管可出现成虫。将5日