p16基因在喉癌中的表达

目的 探讨p16基因的表达与喉癌的关系。方法 采用RT—PCR方法检测喉癌中p16mRNA表达情况。结果 不同病理级别喉癌组织中p16mRNA表达均有不同程度下降，Ⅱ-Ⅲ级患者下降比较明显。结论 p16基因在喉癌中的表达明显低于正常喉粘膜组织。可能与喉癌的发生发展密切相关。     

成人骨髓源性神经干细胞中nestin表达的实时定量RT—PCR检测

目的建立快速获取成人骨髓源性神经干细胞（Human adult bone marrow—derived neural stem cells,Md—NSCs）的方法,并对Md—NSCs中神经巢蛋白nestin的表达进行定量比较分析。方法抽取成人志愿者全骨髓,梯度离心分离成人骨髓基质细胞（human adult bone marrow stromal cells,hMSCs）,贴壁培养法纯化及扩增hMSCs;以神经干细胞培养基体外诱导培养hMSCs成为成人骨髓源性神经干细胞（Human adult bone marrow—derived neural stem cells,Md—NSCs）;以实时定量RT—PCR检测Md—NSCs中nestin基因的表达,以hMSCs作为对照组。结果hMSCs呈长梭形,贴壁生长,于体外诱导培养可快速有效地获取Md—NSCs,Md—NSCs不贴壁生长,由神经干细胞克隆组成神经球样结构;Md—NSCs中nestin基因的表达比hMSCs增高2．04×10^2倍。结论hMSCs经诱导分化成为Md—NSCs后细胞的生物特征发生显著改变,Md—NSCs高度表达神经巢蛋白nestin具有神经干细胞的特征,并非hMSCs的简单聚集成球。     

NMDA受体亚单位NR1在离体人神经干细胞中的表达

目的研究离体培养的人海马神经干细胞（NSCs）中NMDA受体亚单位NR1的表达。方法分离培养胎龄8-12周人胚脑海马神经干细胞,对NSCs进行Nestin和分化鉴定。用免疫细胞化学、Western blot免疫印迹和RT—PCR等方法检测原代、传代1次、传代2次的人胚胎海马NSCs中NR1蛋白和mRNA的表达。结果在孕8～12周人胚脑海马分离培养的NSCs中,NMDA受体亚单位NRI免疫细胞化学反应呈阳性,该受体亚单位的蛋白和mRNA均被检测钊。结论体外培养的早期人胚胎海马NSCs能稳定表达NMDA受体亚单位NR1。     

脑肿瘤干细胞研究进展

自2003年Singh等[1]首次从恶性脑肿瘤中分离得到CD133+肿瘤干细胞以来,脑肿瘤干细胞的研究便逐渐成为神经科学及其相关领域的热点话题.通过初步研究发现脑肿瘤干细胞有可能是决定恶性脑肿瘤发生、发展、转移、复发以及对治疗敏感与否的关键细胞[2,3].因此进一步深入研究脑肿瘤干细胞的生物学特性,探索脑肿瘤干细胞在恶性脑肿瘤发生及复发中的具体作用及机制,将为今后寻找靶向肿瘤干细胞的恶性脑肿瘤的根治治疗产生十分重要的作用.     

脑肿瘤干细胞相关研究进展

颅内恶性肿瘤浸润生长、复发快,是当前神经外科治疗的难点。近年来研究表明,肿瘤组织中存在少数"种子细胞"——脑肿瘤干细胞,其不仅可增殖、分化为肿瘤细胞,同时也主导肿瘤的血管生成、侵袭与转移。脑肿瘤干细胞的研究对于阐释脑部肿瘤的发病和发展机制有重要作用。该文就脑肿瘤干细胞的起源、分化、标志物以及治疗等问题予以综述。     

多药耐药基因mdr1在食管癌组织中的表达及其意义

目的：检测食管癌基因mdr1 mRNA表达，探讨其与食管癌临床病理间的关系。方法：应用逆转录多聚酶链反应(RT—PCR)对51例术前未作治疗的食管癌，20例正常食管组织的mdr1 mRNA进行检测并于食管癌患者的病理类型、部位、浸润转移作对比研究。结果：51例食管癌癌组织中mdr1 mRNA阳性表达率为62．7％(32／51)，正常食管组织表达率为10．0％(2／20)，二者差异有显著性(P<0．01)。mdr1 mRNA食管癌的分化程度、发生部位、病理类型、浸润转移无关(P>0．05)。结论：食管癌组织中mdr1 mRNA的存在着高表达，可作为食管癌化疗耐药的指标。     

凋亡抑制基因Survivin在上皮性卵巢癌中的表达及其意义

目的：探讨凋亡抑制基因Survivin在上皮性卵巢癌组织中的表达，及其与卵巢癌的临床病理特征的关系。方法；应用RT—PCR的方法，检测Survivin在46例上皮性卵巢癌和20例正常卵巢组织中的表达。结果；46例上皮性卵巢癌组织中，Survivin阳性表达40例，表达率87％；20例正常卵巢组织中，survivin阳性表达4例，表达率20％，两者比较有极显著性差异(P＜0．001)。46例上皮性卵巢癌中，浆液性囊腺癌30例，Survivin阳性表达率90％(27／30)；粘液性囊腺癌16例,Survivin阳性表达率81．3％(13／16)；两者比较，差异无显著性意义(P＞0．05)。临床分期I—Ⅱ期Survivin阳性表达率71．4％(10／14)；Ⅲ—Ⅳ期Survivin性表达率93．8％(30／32)，两者比较，有显著性差异(P＜0．05)。病理分级I—Ⅱ级Survivin性表达率70．6％(12／17)，Ⅲ级Survivin性表达率96．6％(28／29)，二者比较，有显著性差异(P＜0．05)。结论:Survivin基因在卵巢癌中的异常表达而引起的细胞凋亡抑制，在卵巢癌的发生发展中起一定作用。     

脑肿瘤干细胞的最新研究进展

原发恶性脑肿瘤发病率呈逐年递增趋势,其预后极差.寻找脑肿瘤复发的根源、延长患者的生存时间,已成为国内外学者急需解决的难题.尽管为了了解恶性脑肿瘤的发病机制做了大量的研究工作,其预后仍不乐观,患者生存期延长极为缓慢,这可能与对肿瘤细胞来源的肤浅认识有关.而脑肿瘤干细胞(BTSCs)的提出,为神经科学研究领域开创了新局面.本综述对神经干细胞(NSCs)、BTSCs的发现、BTSCs与NSCs的关系、BTSCs的标记物作了阐述,为脑肿瘤研究提供了新方向,为临床用药及新药研发提供了新的靶标.     

MDR基因在食管癌中的表达及其临床意义

临床上对肿瘤患者进行化疗失败的重要原因是瘤细胞对化疗药物产生耐受性,多药耐药（MDR）就是耐药的一个主要类型,其实质是MDR基因mdr-1表达升高,导致细胞内药物积聚减少。我们选择食管癌患者手术切除的标本组织,采用RT－PCR方法检测其表达水平,探讨MDR与食管癌组织学分级之间的关系,及其在临床上的应用价值,为临床化疗和克服MDR提供理论依据。     

P16基因在喉癌中的表达

目的探讨P16基因的表达与喉癌的关系。方法采用RT—PCR方法检测喉癌中P16 mRNA表达情况。结果不同病理级别喉癌组织中P16 mRNA表达均有不同程度下降，Ⅱ～Ⅲ级患者下降比较明显。结论P16基因在喉癌中的表达明显低于正常喉黏膜组织，可能与喉癌的发生发展密切相关。     

SDF-1/CXCR4生物学轴在乳腺癌中的表达及其临床意义

 目的 检测SDF-1及其配体CXCR4在乳腺浸润癌、导管原位癌及癌旁组织中的表达,分析两者与乳腺浸润癌临床病理特征的关系,探讨SDF-1/CXCR4生物学轴在乳腺癌发生发展过程中的相关性。 方法 免疫组化检测80例乳腺浸润癌、15例导管原位癌和15例癌旁组织中SDF-1及CXCR4蛋白的表达。RT-PCR检测40例乳腺浸润癌、5例导管原位癌和5例癌旁组织中SDF-1及CXCR4mRNA的表达。结果 免疫组化检测SDF-1、CXCR4在乳腺浸润癌与导管原位癌,导管原位癌与癌旁组织中的表达均有差异（P＜0.05）,其中CXCR4表达与乳腺癌的淋巴结转移和分期有关（P＜0.05）。RT-PCR检测 SDF-1与CXCR4mRNA在乳腺浸润癌与导管原位癌,导管原位癌与癌旁组织中的表达均有差异（P＜0.05）。两者蛋白及mRNA在乳腺浸润癌中的表达均呈正相关（P＜0.05）。结论 SDF-1/CXCR4生物学轴在促进乳腺癌的发生发展以及侵袭转移过程中起到重要促进作用。     

PTEN基因mRNA在膀胱癌中的表达

目的 探讨PTEN基因在膀胱癌组织中转录水平的表达及临床意义。方法 采用RT-PCR方法检测27例膀胱癌及癌周组织PTENmRNA的表达。结果 27例膀胱癌组织中,PTENmRNA无表达10例,阳性表达17例;癌旁组织全部为阳性表达。癌组织表达率明显低于癌周组织(P<0.05)。27例膀胱癌标本中18例表浅性癌,PTENmRNA阳性表达14例(78%);9例浸润性癌,阳性表达3例(33%)。浸润性膀胱癌PTENmRNA表达率明显低于表浅性癌(P<0.05)。结论 PTEN基因转录水平的低表达与膀胱癌细胞的浸润有关。     

CAGE基因在颅脑肿瘤中的表达研究

目的探讨肿瘤相关基因(CAGE)在颅脑肿瘤发生发展中的意义及其应用价值。方法采用半定量RT-PCR方法,检测8种共17例正常组织,35例脑膜瘤和63例胶质瘤组织CAGE基因的表达。结果CAGE基因在除睾丸以外的正常组织中不表达;4例脑膜瘤(11.3%)和57例胶质瘤(90.5%)中CAGE基因表达阳性,该基因在两类肿瘤中表达差异有统计学意义(P<0.001)。胶质瘤级CAGE基因表达量为内对照的0.5±0.11倍,级为0.86±0.23倍,级为1.85±0.37倍,级为2.7±0.46倍,基因表达量与病理组织学分级呈正相关(r=0.82)。结论CAGE在脑胶质瘤细胞转化和癌变过程中起着重要作用,它可能成为胶质瘤的肿瘤特异性抗原。     

胃溃疡活动期患者胃泌素mRNA的表达及意义

目的 检测胃溃疡患者胃泌素（gastrin,GAs）mRNA的表达,探讨胃泌素在胃溃疡发病中的作用。方法 取手术切除的胃溃疡新鲜标本15例,分别在胃溃疡边缘及切端（相对正常胃组织）取材。胃镜胃溃疡标本15例。运用逆转录PCR（RT- PCR）的方法检测2个不同部位中GAS mRNA的表达,其光密度值（OD）与内参照β-actin的光密度值比较,分析2个部位的OD比值的不同。结果 胃溃疡标本的2个不同部位均有GAS mRNA的表达,在胃溃疡边缘GAS mRNA的OD比值明显高于胃溃疡切端相对正常胃组织的OD值,差异有显著性（P〈0.05）。结论 在基因水平证实了GAS在胃溃疡中的表达,而且表明GAS等胃肠激素在胃溃疡的发病过程中起着非常重要的作用。     

水通道蛋白4在大鼠外伤性脑损伤的表达及意义

通过建立大鼠外伤性脑损伤动物模型,采用IgG免疫组化染色法、干湿比重法测定脑组织含水量,Evans Blue（EB）测定法观察大鼠血-脑屏障（BBB）通透性变化,半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测脑组织AQP4 mRNA表达及其变化,研究急性实验性大鼠外伤性颅脑损伤水通道蛋白4（AQP4）的表达规律、急性脑水肿产生的关系,探讨大鼠外伤性脑损伤导致急性脑水肿中AQP4的表达变化及其与血、脑脊液屏障（blood-brainbarrier,BBB）通透性的关系,分析AQP4在外伤性脑水肿的分子生物学机制。     

骨形态发生蛋白2和4在SD大鼠肠管中的表达

目的观察骨形态发生蛋白(BMP)-2、BMP-4在SD大鼠胚胎肠管中的定位及表达规律,探讨其在肠神经系统发育过程中可能的作用。方法应用免疫组化方法观察BMP-2、BMP-4在不同年龄的SD大鼠结肠肠管内的表达情况。结果BMP-2、BMP-4在胎肠发育早期即有表达,在出生前后达到峰值,此后略下降,胎龄16d、20d、生后7d组间表达差异无显著性(P>0.05),但与生后4个月组差异有显著性(P<0.05)。结论BMP-2、BMP-4在大鼠结肠上表达与肠神经系统发生发育的时间相一致,提示其可能参与了SD大鼠肠神经系统生长发育的调节。     

肝癌中PTEN基因及蛋白表达的意义

目的:研究肝癌中PTEN基因mRNA和蛋白的表达与肝癌病理之间的关系。方法:应用RT-PCR法检测28例肝癌组织和对应的癌旁组织中PTEN基因mRNA表达,并通过电泳凝胶图像系统分析其相对表达量。同时采用免疫组化方法检验51例肝癌石蜡切片中PTEN蛋白表达(其中包括与28例新鲜组织相对应的标本)。结果:RT-PCR检测PTENmRNA表达率肝癌中为35.71%,癌旁组织中为71.43%,PTEN基因在肝癌细胞中表达显著低于癌旁肝组织。免疫组化检测肝癌中PTEN蛋白的检出率为66.7%,PTEN蛋白表达与肝癌的病理分级和癌栓形成呈负相关。结论:PTEN基因缺失和肝癌的分化程度以及癌栓形成、转移密切相关。     

乙酰肝素酶mRNA在直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究乙酰肝素酶(Hpa)mRNA在直肠癌组织中的表达,探讨其与直肠癌分化、转移及预后的关系.方法 采用RT-PCR方法检测40例直肠癌组织、癌旁正常组织、转移淋巴结、正常肠黏膜组织及6例直肠绒毛状腺瘤组织中Hpa mRNA表达情况,并分析其与直肠癌临床各病理参数的关系.结果 40例正常肠黏膜组织及6例直肠绒毛状腺瘤组织中Hpa mRNA的表达均阴性.40例直肠癌标本中27例Hpa mRNA表达阳性阳性表达率67.5%明显高于正常肠黏膜组织、癌旁正常组织及直肠绒毛状腺瘤组织(均P＜0.01);直肠癌直径≥5 cm者Hpa mRNA阳性表达明显高于直径＜5 cm者(P＜0.05);有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P＜0.05);远处转移者高于无远处转移者(P＜0.05);Ⅲ/Ⅳ期者表达明显高于Ⅰ/Ⅱ期者(P＜0.05).Hpa mRNA与患者的性别、年龄、肿瘤细胞分化无明显关系(均P＞0.05).结论 Hpa mRNA参与了直肠癌的生长、进展,并可能对直肠癌的浸润、转移有促进作用,可以作为反映直肠癌生物学行为的有效指标之一.     

卵泡抑素、激活素A与BMP-4在缺血缺氧性脑损伤大鼠脑组织中的表达

目的 探讨卵泡抑素、激活素A与骨形成蛋白-4(BMP-4)在正常大鼠和缺血缺氧性脑损伤大鼠脑组织中的表达规律及意义。方法 将同期受孕60只SD大鼠分为正常组和模型组各30只,每组按照胎鼠发育时间分为胚胎期8.5 d、13 d、18 d,出生后3 d、7 d、30 d 6个亚组,每个亚组取5只胎鼠或幼鼠。模型组建立脑缺血缺氧模型,应用 SABC免疫组化及 RT-PCR方法,检测不同生长时期大鼠脑缺血缺氧后卵泡抑素、激活素A与BMP-4的表达。结果 正常组卵泡抑素和激活素A的表达水平很低,免疫组化和RT-PCR法显示随着胎鼠发育的时期表达量逐渐减少,BMP-4在胚胎期几乎不表达,出生后30 d略有表达。缺血缺氧后模型组各发育时期卵泡抑素、 激活素A与BMP-4的表达量均高于同期正常组（P<0.01）,尤其以卵泡抑素和激活素A表达增高明显。结论 卵泡抑素、激活素A、BMP-4的表达与发育时间相关,脑缺血缺氧损伤可诱导卵泡抑素、激活素A高表达,但是BMP-4的表达增高不明显,推测在胚胎发育早期卵泡抑素的主要功能是作为激活素A的抑制剂而不是BMP-4的配体来调控神经发育。     

Survivin基因在脑星形细胞肿瘤中的表达及其病理意义

目的：研究脑星形细胞肿瘤中Survivin基因mRNA表达的临床、病理和预后的关系。方法：应用RT-PCR方法检测26例脑星形细胞肿瘤组织中Survivin基因mRNA的表达,并通过电泳凝胶图像系统检测Survivin的相对表达量。结果：Survivin只表达于脑星形细胞肿瘤中的肿瘤细胞,对正常脑组织中胶质细胞无表达。在脑星形细胞肿瘤中RT-PCR的检出率为65%（17/26）。Survivin基因mRNA的相对表达量与脑星形细胞肿瘤的病理分级密切相关,在高级别肿瘤中Survivin基因mRNA相对表达量和表达强度均高于低级别肿瘤（P〈0.05）。结论：随着星形细胞肿瘤分化程度的降低,Survivin相对表达量显著增强;其高表达预示着预后不良,可成为有价值的评估该肿瘤预后指标。