青海高原地区胎儿生长受限患者胎盘组织人类白细胞相关抗原G表达的研究

目的:探讨青海高原地区胎儿生长受限(FGR)患者人类白细胞相关抗原G(HLA-G)mRNA及蛋白的表达及临床意义。方法:收集2015年1~12月在青海大学附属医院产科分娩的20例FGR患者(FGR组)和20例正常妊娠妇女(正常妊娠组)的胎盘组织,采用实时荧光定量PCR及Western blot分析检测HLA-G mRNA及蛋白在两组胎盘组织中的表达差异。结果:FGR组胎盘组织中HLA-G mRNA表达水平(0.449±0.116),明显低于正常妊娠组(0.963±0.226),差异有统计学意义(P=0.000)。FGR组胎盘组织HLA-G蛋白表达灰度值(0.375±0.101),亦明显低于正常妊娠组(0.797±0.177),差异有统计学意义(P=0.002)。结论:青海高原地区FGR患者胎盘组织HLA-G mRNA及蛋白表达水平均明显降低,HLA-G的表达量降低在FGR的发生发展过程中可能起着重要的作用。     

子痫前期患者血清及胎盘组织中人类白细胞抗原G的表达研究

目的:检测正常晚期妊娠妇女及子痫前期患者胎盘组织HLA-G的表达及血清中sHLA-G的浓度,探讨HLA-G在子痫前期发病中的临床意义。方法:用半定量逆转录-聚合酶链技术(RT-PCR)检测37例正常晚期妊娠妇女(正常妊娠组)及41例子痫前期患者(轻度20例,重度21例)胎盘组织中HLA-G mRNA的表达;并用ELISA检测血清sHLA-G浓度。结果:(1)子痫前期胎盘组织中HLA-G mRNA表达水平分别为:轻度0.402±0.104、重度0.329±0.09,明显低于正常妊娠组的0.628±0.117(P<0.01),轻、重度差异亦有统计学意义(P<0.05)。(2)子痫前期血清sHLA-G浓度:轻度45.5±11.9u/ml,重度31.2±10.3u/ml,均明显低于正常妊娠组的105.7±12.5u/ml(P<0.01),轻重度差异亦有统计学意义(P<0.01)。(3)子痫前期患者血清sHLA-G浓度与胎盘组织HLA-G mRNA表达水平呈正相关(r=0.702,P<0.01)。结论:子痫前期血清sHLA-G浓度及胎盘组织中HLA-G表达水平均明显降低,可能与子痫前期发病及病情轻重程度相关。     

HLA-G在子痫前期患者血清及胎盘中的表达及意义

目的:探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)在子痫前期患者血清及胎盘组织中的表达及意义。方法:收集子痫前期患者20例(观察组)和正常妊娠者20例(对照组)的血清及胎盘组织,采用酶联免疫吸附法(ELSIA)、实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)以及免疫蛋白印迹(Westen Blot)检测两组血清可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)及胎盘组织中HLA-G的表达差异,并通过HE染色观察两组胎盘的病理变化。结果:①观察组血清及胎盘组织中HLA-G表达水平均低于对照组,两组差异均有统计学意义(P0.05)。②观察组与对照组比较,胎盘绒毛间质血管数及绒毛数平均值减少(P0.01,P0.05),合体滋养细胞结节增多(P0.05),绒毛间质纤维化及纤维素样坏死显著增多(P0.01),细胞滋养细胞明显增生(P0.01),干绒毛小动脉管腔直径明显变小(P0.01)。③相关分析显示,血清中sHLA-G表达水平与胎盘中HLA-G蛋白表达水平呈正相关(r=0.909,P0.05)。HLA-G mRNA及HLA-G蛋白表达强度与胎盘绒毛血管密度呈正相关(r=0.907,P0.05;r=0.904,P0.05)。结论:HLA-G可能与子痫前期的发生、病理生理过程密切相关。     

重度子痫前期患者可溶性人类白细胞抗原G在血浆和胎盘组织中的表达

目的:研究可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)在孕晚期重度子痫前期患者血浆的含量水平及其亚型mRNA在胎盘组织中的表达,探讨sHLA-G的来源及其在子痫前期发病中的意义.方法:选择2008年10月至2009年4月第四军医大学唐都医院重度子痫前期患者20例(重度子痫前期组),20例正常足月妊娠者(正常足月妊娠组)及20例正常未妊娠者(正常未妊娠组).采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆sHLA-G的含量;采用实时荧光定量PCR法比较sHLA-G亚型(HLA-G5、G6)mRNA在重度子痫前期组和正常足月妊娠组胎盘组织表达的差异.结果:①重度子痫前期组血浆sHLA-G含量水平明显低于正常足月妊娠组(P<0.05),正常未妊娠组与重度子痫前期组和正常足月妊娠组比较,差异有统计学意义(P<0.05).②重度子痫前期组胎盘HLA-G5、G6 mRNA相对表达量(0.32)明显低于正常足月妊娠组相对表达量(1.0).结论:重度子痫前期患者血浆sHLA-G及其胎盘组织中亚型mRNA含量水平均降低,可能与子痫前期发病有关,胎盘可能是sHLA-G的来源之一.     

人白细胞抗原-G mRNA各亚型在重度子(癎)前期胎盘组织中的表达

目的　探讨人白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)各亚型在早发型、晚发型重度子(癎)前期患者以及正常妊娠产妇胎盘组织中表达的差异. 方法　使用巢式RT-PCR方法检测11例早发型重度子(癎)前期患者、14例晚发型重度子(癎)前期患者以及8例正常分娩产妇胎盘组织中HLA-G各亚型mRNA表达的差异情况. 结果 与正常对照组相比,HLA-G1亚型在早发型和晚发型重度子(癎)前期患者的胎盘组织中表达明显减少(中位数:早发型组1.37,P<0.05;晚发型组24.90,P<0.05;正常对照组46.67,P<0.05).HLA-G2亚型在晚发型重度子(癎)前期患者的胎盘组织中表达水平较高(中位数:早发型组0;晚发型组21.59,P<0.05;正常对照组5.39).HLA-G5亚型在早发型以及晚发型重度子(癎)前期患者的胎盘组织中表达水平增高(中位数:早发型组19.23;晚发型组3.65;正常对照组1.33). 结论 HLA-G膜结合型亚型mRNA在胎盘组织中表达减少以及HLA-G可溶性亚型mRNA在胎盘组织中表达的增高,可能在子(癎)前期的发病机制中起到一定的作用.     

HLA-G 14bp基因多态性及HLA-G mRNA表达水平与原因不明复发性流产的关系

目的:探讨人类白细胞抗原G 14bp(HLA-G 14bp)基因缺失或插入多态性与原因不明复发性流产(URSA)的相关性,了解HLA-G mRNA在URSA患者中的表达水平和意义。方法:选择URSA患者39例(URSA组)和有1次以上正常分娩史并行人工流产的妇女52例(正常对照组)为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)检测14bp基因多态性和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组人群绒毛组织中HLA-G mRNA的相对表达量,并进行分析。结果:URSA组14bp基因杂合子(-14bp/+14bp)的基因频率(64.1%)明显高于正常对照组(42.3%)(χ2=6.511,P=0.039);而插入纯合子(+14bp/+14bp)的基因频率(7.7%)低于正常对照组(26.9%)(χ2=5.425,P=0.020);缺失纯合子(-14bp/-14bp)的基因频率(28.2%)与正常对照组(30.8%)比较,差异无统计学意义(χ2=0.070,P=0.791)。URSA组HLA-G mRNA表达水平(-3.018±1.005)明显低于正常对照组(-1.072±0.436)(t=9.681,P=0.000)。结...     

人类白细胞相关抗原-G及其各亚型mRNA在正常妊娠及重度子(癎)前期患者胎盘组织中的表达

目的 研究人类白细胞相关抗原-G(HLA-G)及其各个亚型mRNA在正常妊娠及重度子(癎)前期患者胎盘组织中的表达.方法 选取2005-01-2005-06第四军医大学唐都医院10例重度子(癎)前期患者(研究组)及10例正常妊娠胎盘组织(对照组),应用荧光定量RT-PCR比较两组间HLA-G及其各个亚型mRNA(HLA-G1、G2、G3、G4、G5、G6)的表达.结果 与对照组相比,重度子(癎)前期患者胎盘组织中总HLA-G mRNA显著降低,以HLA-G1、HLA-G3降低为主,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HLA-G1与HLA-G3 在胎盘组织中的低表达可能与妊娠期高血压疾病的发病和病理生理过程有关.     

人类白细胞抗原G、E在人胎盘组织中的表达及其意义

目的:探讨人类白细胞抗原G、E(HLA-G、E)在人胎盘组织中的表达及意义。方法:用原位杂交及免疫组化法分别检测HLA-G、E mRNA及蛋白质在人正常早孕绒毛组织、晚孕胎盘组织中的表达。结果:在人正常早孕绒毛组织中的绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞及绒毛外滋养细胞(EVCT)内均有HLA-G、E mRNA及HLA-E蛋白质表达,而HLA-G蛋白质仅在EVCT内表达;晚孕胎盘组织中HLA-G、E mRNA及蛋白质表达于蜕膜板内的EVCT及羊膜上皮细胞。结论:HLA-E表达于人正常早孕绒毛组织中所有类型的滋养细胞及晚孕胎盘组织中的EVCT和羊膜上皮细胞。抗人HLA-G单克隆抗体4H84仅能检测出人胎盘组织中EVCT及羊膜上皮细胞内的HLA-G蛋白。     

人类白细胞相关抗原-G及其各亚型mRNA在正常妊娠及重度子前期患者胎盘组织中的表达

目的研究人类白细胞相关抗原-G(HLA-G)及其各个亚型mRNA在正常妊娠及重度子前期患者胎盘组织中的表达。方法选取2005-01-2005-06第四军医大学唐都医院10例重度子前期患者(研究组)及10例正常妊娠胎盘组织(对照组),应用荧光定量RT-PCR比较两组间HLA-G及其各个亚型mRNA(HLA-G1、G2、G3、G4、G5、G6)的表达。结果与对照组相比,重度子前期患者胎盘组织中总HLA-GmRNA显著降低,以HLA-G1、HLA-G3降低为主,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HLA-G1与HLA-G3在胎盘组织中的低表达可能与妊娠期高血压疾病的发病和病理生理过程有关。     

分娩发动前后胎盘中白细胞抗原G1 mRNA和NK细胞的变化

目的:检测胎盘及蜕膜组织中白细胞抗原G1(HLA-G1)mRNA和NK细胞在足月妊娠分娩发动前后的变化,探讨其在分娩发动中的作用。方法:通过RT-PCR法检测足月妊娠晚期未临产组(剖宫产组)和临产组胎盘组织中HLA-G1 mRNA的表达,并用免疫组织化学方法测定蜕膜中NK细胞的数量。结果:与未临产组相比临产组胎盘组织中HLA-G1 mRNA表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);临产组蜕膜中NK细胞数量明显多于未临产组(P<0.05)。结论:分娩发动时胎盘组织表达HLA-G1mRNA下降,蜕膜组织中NK细胞数量明显增多,推测HLA-G1表达下降激活NK细胞可能参与了分娩发动。     

胎盘组织中人类主要组织相容性抗原G mRNA的表达变化与特发性胎儿生长受限发病的关系

目的探讨人类主要组织相容性抗原G(HLA G) mRNA在特发性胎儿生长受限(IFGR)产妇胎盘组织中的表达及其与IFGR发病的关系。方法采用原位杂交法,检测20例IFGR产妇(IFGR组)及28例正常产妇(对照组)胎盘组织中HLA GmRNA的表达水平和表达部位,并对两组产妇的胎盘组织进行病理学观察。结果( 1 )IFGR组产妇胎盘出现病理改变的发生率为75%(15 /20), 主要为慢性绒毛膜炎、胎盘梗死及绒毛发育迟缓;明显高于对照组的18% (5 /28),两组比较,差异有统计学意义(P=0 001)。(2)IFGR组产妇胎盘HLA GmRNA的阳性表达率为45% ( 9 /20),明显低于对照组的79% ( 22 /28 )。两组比较,差异有统计学意义(P= 0 017 )。( 3 )HLA GmRNA的阳性表达部位主要位于胎盘绒毛外细胞滋养细胞及合体滋养细胞的细胞质内,呈紫蓝色的颗粒状沉淀,轮廓清晰。(4)HLA GmRNA表达阴性者,出现胎盘病理改变的例数较HLA GmRNA表达阳性者明显增多(r=-0 638,P=0 008 )。结论IFGR产妇胎盘组织中HLA GmRNA表达水平明显下降,HLA GmRNA的异常表达可能参与了IFGR的发病过程。     

妊娠高血压综合征合并胎儿生长受限胎盘组织血管细胞粘附分子1的表达

目的：探讨血管细胞粘附分子1（vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)在妊娠高血压综合征（简称妊高征）合并胎儿生长受限（fetal growth restriction,FGR)发病过程中的作用。方法：采用免疫组化法测定30例妊高征合并FGR患者、28例非妊高征合并FGR及30例正常妊娠者胎盘组织中血管内皮及滋养细胞的VCAM－1表达。结果：妊高征合并FGR组胎盘底蜕膜内血管内皮VCAM－1的表达阳性率（80％）及表达强度（＋＋＋）14例，与正常妊娠组25％（＋＋＋）0例及非妊高征合并FGR组155％（＋＋＋）0例相比明显增高（P＜0．005），而前两者间无显著差异，随妊高征病情加重，其表达强度逐渐增强；胎盘绒毛毛细血管VCAM－1阳性表达强度妊高征合并FGR组（73．3％）和非妊高征FGR组（67．8％）明显增强，与正常组（10％）相比差异有显性（P＜0．005）；所有GFR患者胎盘滋养细胞VCAM－1表达强度明显降低（妊高征FGR为0％，非妊高征FGR组3．6％，正常组40％），并且在妊高征组随妊高征病情加重其表达强度急剧减低。结论：胎盘血管内皮及绒毛滋养细胞异常表达的VCAM－1参与了妊高征引起FGR的病理生理过程，可以作为判定妊高征对胎盘损伤程度的一个指标。     

人类白细胞抗原G蛋白在胎盘组织中的表达及其基因多态性与妊娠肝内胆汁淤积症发病的关系

目的探讨人类白细胞抗原G（HLA-G）蛋白在胎盘组织中的表达及其基因多态性与妊娠肝内胆汁淤积症（ICP）发病的关系。方法选取2004年4月至10月间,在四川大学华西第二医院产科及四川省妇幼保健院产科行剖宫产分娩的晚孕妇女60例,其中ICP孕妇30例（ICP组）,根据妊娠期是否接受过地塞米松治疗又将ICP组分为治疗组（15例）和非治疗组（10例,因未治病例少）;正常晚孕妇女30例为对照（根据检测指标不同分为对照1组,15例;对照2组,30例）。采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法,检测HLA-G蛋白在对照1组、治疗组及非治疗组孕妇胎盘组织中的表达情况（以平均吸光度值表示）;同时采用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）法,检测HLA-G基因外显子8上14bp缺失多态性在ICP组及对照2组孕妇外周血及新生儿脐血中的分布。结果（1）非治疗组胎盘组织中,HLA-G蛋白的平均吸光度值为56±8,明显低于对照1组的70±10及治疗组的66±9,分别比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）;治疗组与对照1组胎盘组织中HLA-G蛋白的平均吸光度值比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）HLA-G基因外显子8上14bp缺失多态性检测结果显示,对照2组及ICP组母儿的等位基因频率及基因型频率比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论ICP患者胎盘组织中HLA-G蛋白表达下调可能是ICP发病机制之一;地塞米松对胎盘组织中HLA-G蛋白的表达具有上调作用;HLA-G基因外显子8上14bp缺失多态性可能与ICP的发病无关。     

胎儿生长受限对其肾脏发育的影响

目的：探究胎儿生长受限（fetal growth restriction,FGR）的宫内环境对胎儿肾脏发育的影响。方法：收集2009年11月—2011年12月于天津市中心妇产科医院产科因胎儿原因要求引产的11例FGR和同期12例非FGR死胎或死产胎儿的肾脏组织标本（所有标本的采集均征得患方的知情同意和院伦理委员会的认可）,测量其质量和体积,应用TUNEL法分析肾脏组织细胞凋亡率,并对Bax和Bcl-2蛋白在凋亡细胞中的阳性表达率进行检测。结果：与非FGR组相比,FGR组胎儿的平均肾脏体积、质量和肾单位数目均明显下降（P＜0.01）,而其细胞凋亡率明显增加（P＜0.01）。进一步检测发现,FGR组细胞内促凋亡蛋白Bax的阳性表达率明显增加（P＜0.01）,伴随有凋亡抑制基因Bcl-2的阳性表达率显著降低（P＜0.01）。结论：生长受限的宫内环境可能通过促进细胞凋亡而影响胎儿肾脏发育,为将来进一步探讨FGR的分子机制和成人期疾病的发病机制提供了新的线索。