一氧化氮合酶抑制剂对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响

目的:观察一氧化氮(NO)和不同类型的一氧化氮合酶(NOS)抑制剂对大鼠局灶性脑缺血损伤后的影响。方法:用线栓法复制大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)模型后注射氨基胍(AG)和N^G－硝基－L-精氨酸(L-NA),观察大鼠脑缺血后脑梗死体积和脑组织中NO、MDA含量和NOS、SOD活性的变化。结果:AG有明显的减轻局灶性脑缺血损伤作用;L-NA在缺血后1 h、6 h时给药,有保护作用,但在3 h时给药,无显著改变。结论:AG对局灶性脑缺血损伤有治疗作用;L-NA在不同时间给药,对脑缺血损伤也有明显治疗作用。     

急性局灶性脑缺血后脑组织内皮素的变化及意义

在人体,内皮素(ET)有三种异构体,ET-~1、ET-~2、ET-~2,主要分布于血管内皮细胞和脑组织。 ET与多种人体疾病有关,如心肌梗死、心源性休克、高血压、动脉粥样硬化等。近来有文献报道,脑卒中病人血浆ET升高。本文试图通过对右大脑中动脉栓塞(R-MCAO),形成局灶性脑缺血的大鼠脑组织ET水平的观察,揭示内源性ET在脑缺血后的变化规律,以探讨脑缺血对内源性ET的影响以及ET在脑缺血过程中的病理作用。     

半暗带的损伤机制及脑电地形图表现

Astrup于1977年首先提出缺血半暗带(Ischemic Penumbra,IP)的概念。以后的研究提示,局灶性脑缺血损伤的结果不只取决于血流阈值。在半暗带内发生的一系列病理变化,局部脑血流量降低、电活动终止、代谢增加、基因选择性表达以及进行性发展的神经元凋亡,都影响了它的转化方向,即“损伤级联反应”。这促使不少     

L-精氨酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤研究

目的 探讨一氧化氮（NO）前体L-精氨酸（L-Arg）对大鼠局灶性脑缺血再灌注早期炎症损伤的影响.方法 建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,设立假手术组、缺血组（ischemia/reperfusion,IS组）,L-Arg治疗组（n=10）.L-Arg治疗组于缺血2h再灌注即刻给予L-Arg,缺血组给予生理盐水.将大鼠于缺血再灌注6h后断头取脑,检测脑组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素10（IL-10）的活性,测定脑组织含水量和脑梗死体积.结果 局灶性脑缺血再灌注大鼠给予L-Arg治疗组TNF-α和IL-6的表达下降,IL-10升高,脑组织含水量及脑梗死面积减少.结论 L-精氨酸可以通过抑制脑组织炎性因子TNF-α和IL-6的表达,上调IL-10的含量来发挥抗炎作用,从而对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤早期产生一定程度的保护作用.     

大鼠脑梗塞灶周围区GAP-43免疫组化反应的观察

目的 探查脑梗塞灶周围区GAP-43表达的结构和时间.方法 运用电凝阻断大脑中动脉脑局部缺血模型和免疫组化(ABC)染色方法,对38只SD大鼠进行了研究.结果 GAP-43阳性反应发生于脑梗塞灶周围区的神经元的胞体和突起.其表达高峰在脑梗塞3～7d,随后逐渐减弱.神经元突起的阳性反应显示不同的形式和时相,其反应部位邻近梗塞区,在脑缺血2～3w,其显示强反应,没有发现胶质细胞的阳性反应.结论 局灶性脑缺血诱导GA-43蛋白质在梗塞灶周围区神经元表达,提示缺血区周边皮质神经元有生长和修复反应倾向.     

电针对局灶性脑缺血模型大鼠自由基代谢的影响

目的：研究探讨电针对局灶性脑缺血模型大鼠自由基代谢的影响。方法：应用栓线法栓塞大鼠大脑中动脉（MCA0）造成局灶性脑缺血模型，分为三组：假手术对照组、模型组、电针组，观察电针对局灶性脑缺血大鼠神经体征的促恢复作用，采用放射免疫方法和荧光分光光度法分别检测血液中一氧化氮（NO）、内皮素（ET）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的变化。     

大鼠局灶性脑缺血MAP2表达及毛冬青黄酮的保护作用

目的：探讨大鼠局灶性脑缺血神经细胞MAP2表达，研究毛冬青黄酮对脑缺血的保护作用：方法：选用颈外动脉插入线栓法制备大鼠大脑中动脉梗塞模型，加只雄性Wistar大鼠，随机分成正常对照组、假手术组、盐水-缺血3h、6h、24h组，毛冬青黄酮-缺血3h、6h、24h组。本研究以MAP2染色为指标，评价大鼠局灶性脑缺血损伤情况以及毛冬青黄酮对大鼠局灶性脑缺血MAP2表达的影响。MAP2在大鼠神经元中表达丰富，对兴奋性氨基酸、生长因子等反应敏感，是细胞内信号传导的重要环节，参与经元的生长和损伤后修复过程。MAP2对缺血敏感，可显示缺血时神经元损伤情况。     

脂肪干细胞对脑缺血损伤大鼠氧化应激反应的抑制作用

目的探讨大鼠脂肪干细胞(ADSCs)对脑缺血损伤大鼠氧化应激反应的抑制作用。方法原代培养SD大鼠的ADSCs,检测增殖及抗原表达等特性。制备SD大鼠局灶性脑缺血模型,脑缺血后24h经立体定位仪局部移植Brd U标记的ADSCs。细胞移植14d检测各项指标:m NSS评分检测神经功能,TTC染色法观察脑梗死体积,免疫组化法观察Brd U阳性细胞的分布,HE染色观察脑组织病理改变,检测脑组织氧化应激产物MDA及蛋白羰基含量,Western Blotting检测Mn SOD和Cu Zn SOD的表达水平。结果 ADSCs增殖能力强并表达干细胞相关抗原。ADSCs移植后脑缺血模型大鼠的mN SS评分明显降低,脑梗死体积明显减小,脑组织内可见BrdU阳性细胞;病理形态明显改善,氧化应激产物MDA、蛋白羰基含量及MnS OD、CuZ nS OD表达量明显下调。结论 ADSCs可以通过抑制氧化应激反应修复脑缺血损伤大鼠脑组织的病理改变,改善神经系统功能。     

基因表达谱芯片筛选局灶性脑缺血大鼠脑相关基因的研究

目的:应用基因芯片技术研究局灶性脑缺血大鼠脑组织与假手术组大鼠脑组织基因表达谱的差异,探索局灶性脑缺血的发病机制。方法:将4096种大鼠基因PCR产物用CartesianPixsys7500点样仪按微矩阵排列制成基因芯片;按一步法抽提脑局灶性缺血大鼠脑组织与假手术组大鼠脑组织的总RNA;将等量的脑局灶性缺血大鼠脑组织与假手术组大鼠脑组织RNA分别逆转录合成以Cy5和Cy3标记的cDNA一链做探针,混合后与上述基因芯片杂交。用AxonGenepix4000B扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用GenepixPro4.0软件进行数字化处理和分析后比较两种组织基因表达谱的差异。结果:局灶性脑缺血大鼠与假手术组大鼠脑组织基因表达谱分析,发现211个差异表达基因,其中12个基因低表达,199个基因高表达。结论:本研究从脑局灶性缺血大鼠脑组织中筛选出大量的差异表达基因,说明这些基因可能参与局灶性脑缺血后脑损伤的发生及发展过程,从而为局灶性脑缺血的诊治提供新思路。     

丹参酮对大鼠实验性脑梗塞的防治作用

凝闭大鼠一侧大脑中动脉、造成局灶性脑梗塞后24小时,大鼠外周中性粒细胞活性增强;缺血区脑组织脂质过氧化损伤严重;TTC染色后可见边界明显的脑坏死区。丹参酮可抑制脑缺血所致的中性粒细胞吞噬化学发光增强,减少白细胞在缺血区内的浸润,减轻脑组织脂质过氧化损伤,保护SOD活性,缩小梗塞范围。其抑制粒细胞功能激活与减轻脑缺血性损伤之间有显著的正相关关系。这一作用与地塞米松相似。提示:丹参酮抑制白细胞功能的作用可能是其防治脑梗塞的机制之一。     

局灶性脑梗死后半暗带区皮层血流量与神经细胞凋亡的实验研究

目的：研究大鼠局灶性脑梗死后半暗带区皮层血流量及神经细胞凋亡。 方法： 光化学法诱导大鼠局灶性脑梗死模型，应用激光多普勒微循环测量仪检测局灶性脑梗死后各时间点坏死区和半暗带皮层血流量；TdT-介导dUTP-生物缺口末端标记（TUNEL）法检测凋亡细胞。 结果： 脑梗死后坏死区皮层血流量呈波浪样改变，3 h降至最低，为正常血流量的9.36%±1.72%，6h后回升，12 h达高峰，为正常31.18%±1.44%，24-48 h血流量再度下降，与3 h相比无显著差异（P＞0.05）。半暗带皮层血流量6 h降至最低，为正常皮层血流量的30.88%±7.11%，9-48 h上升，至48 h血流恢复至正常91.90%±4.56%，与其它组差异显著 (P<0.05)。TUNEL结果显示，局灶性脑梗死组 6 h 开始出现凋亡细胞，主要集中于半暗带区，呈半球状向四周放射样扩展，随梗死时间的延长凋亡细胞逐渐增多，梗死48 h后凋亡细胞达峰值。 结论： 局灶性脑梗死后半暗带区皮层血流量与神经细胞凋亡具有明显的关系，其血流量的恢复引起的再灌注损伤最终导致了迟发性神经细胞凋亡。     

脑梗死早期血流动力学模型的研究

脑梗死发病早期，血管闭塞直接造成了脑血流动力学的变化．为定量研究梗死发生后缺血脑组织残余血流变化和多种变量间的关系，本文使用血流动力学的相关原理，依据脑血流自动调节机制，在理论上建立影响残余血流的数学模型，并结合临床对该模型进行讨论和研究．     

Collateral blood flow in different cerebrovascular hierarchy provides endogenous protection in cerebral ischemia

Collateral blood flow as vascular adaptions to focal cerebral ischemia is well recognized. However, few studies directly investigate the dynamics of collateral vessel recruitment in vivo and little is known about the effect of collateral blood flow in different cerebrovascular hierarchy on the neuropathology after focal ischemic stroke. Here, we report that collateral blood flow is critically involved in blood vessel compensations following regional ischemia. We occluded a pial arteriole using femtosecond laser ablating under the intact thinned skull and documented the changes of collateral flow around the surface communication network and between the surface communication network and subsurface microcirculation network using in vivo two photon microscopy imaging. Occlusion of the pial arteriole apparently increased the diameter and collateral blood flow of its leptomeningeal anastomoses, which significantly reduced the cortical infarction size. This result suggests that the collateral flow via surface communicating network connected with leptomeningeal anastomoses could greatly impact on the extent of infarction. We then further occluded the target pial arteriole and all of its leptomeningeal anastomoses. Notably, this type of occlusion led to reversals of blood flow in the penetrating arterioles mainly proximal to the occluded pial arteriole in a direction from the subsurface microcirculation network to surface arterioles. Interesting, the cell death in the area of ischemic penumbra was accelerated when we performed occlusion to cease the reversed blood flow in those penetrating arterioles, suggesting that the collateral blood flow from subsurface microcirculation network exerts protective roles in delaying cell death in the ischemic penumbra. In conclusion, we provide the first experimental evidence that collateral blood vessels at different cerebrovascular hierarchy are endogenously compensatory mechanisms in brain ischemia.     

CT灌注成像在急性缺血性卒中患者诊断及预后评估中的应用

目的 探讨CT灌注成像在急性缺血性卒中（AIS）患者诊断及预后评估中的应用价值。方法 回顾性研究。纳入2020年2月—2021年7月河南省直第三人民医院收治的AIS患者104例,其中,男61例、女43例,年龄46~81（62.7±12.3）岁。患者均接受急诊脑CT灌注成像检查,获取核心梗死面积,以及脑血流量（CBF）、脑血容量（CBV）、对比剂平均通过时间（MTT）和峰值时间（TTP）等CT灌注成像血流动力学参数,对比分析患者脑梗死区和缺血半暗带脑组织间CBF、CBV、MTT、TTP值的差异。以《中国急性缺血性脑卒中诊疗指南2018》为金标准,分析CT灌注成像AIS患者的检出率。入院时进行美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分评估患者神经功能状态。治疗后3个月采用改良Rankin量表（mRS）评分评估患者预后,并按照预后评估结果进行分组观察。采用logistic回归分析AIS预后的预测因素。结果 本组104例AIS患者中,经CT灌注成像检查显示梗死区及半暗带血流异常者共96例（检出率为92.31%）。CT灌注成像检出的96例中,mRS评分评估预后良好者69例、预后不良者27例。脑梗死区和缺血半暗带分别与健侧对应部位的正常脑组织相比,CBF、CBV值降低,MTT、TTP延长,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。预后不良组核心梗死面积、发病至溶栓时间及高脂血症比例、NIHSS评分及缺血半暗带CT灌注参数MTT、TTP均高于预后良好组,CT灌注参数CBF、CBV均低于预后良好组,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。logistic回归分析结果显示,核心梗死面积、发病至溶栓时间、高脂血症,NIHSS评分,以及缺血半暗带CT灌注成像血流动力学参数CBF、CBV、MTT、TTP等均是AIS患者预后的预测因素（P值均<0.05）。结论 CT灌注成像检查可快速反映脑部组织灌注损伤情况,对AIS患者的及时诊断具有重要意义;且CT灌注成像血流动力学参数可有效反映AIS患者溶栓治疗后受累血管再通情况,为其预后评估提供一定依据。     

Lidocaine attenuates apoptosis in the ischemic penumbra and reduces infarct size after transient focal cerebral ischemia in rats

Lidocaine is a local anesthetic and antiarrhythmic agent. Although clinical and experimental studies have shown that an antiarrhythmic dose of lidocaine can protect the brain from ischemic damage, the underlying mechanisms are unknown. In the present study, we examined whether lidocaine inhibits neuronal apoptosis in the penumbra in a rat model of transient focal cerebral ischemia. Male Wistar rats underwent a 90-min temporary occlusion of middle cerebral artery. Lidocaine was given as an i.v. bolus (1.5 mg/kg) followed by an i.v. infusion (2 mg/kg/h) for 180 min, starting 30 min before ischemia. Rats were killed and brain samples were collected at 4 and 24 h after ischemia. Apoptotic changes were evaluated by immunohistochemistry for cytochrome c release and caspase-3 activation and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) for DNA fragmentation. Cytochrome c release and caspase-3 activation were detected at 4 and 24 h after ischemia and DNA fragmentation was detected at 24 h. Double-labeling with NeuN, a neuronal marker, demonstrated that cytochrome c, caspase-3, and TUNEL were confined to neurons. Lidocaine reduced cytochrome c release and caspase-3 activation in the penumbra at 4 h and diminished DNA fragmentation in the penumbra at 24 h. Lidocaine treatment improved early electrophysiological recovery and reduced the size of the cortical infarct at 24 h, but had no significant effect on cerebral blood flow in either the penumbra or core during ischemia. These findings suggest that lidocaine attenuates apoptosis in the penumbra after transient focal cerebral ischemia. The infarct-reducing effects of lidocaine may be due, in part, to the inhibition of apoptotic cell death in the penumbra.     

脑梗塞患者血小板形态学与微循环的研究

本文对血小板超微结构、球结膜微循环与脑梗塞之间的关系进行了观察,进一步探讨血小板在脑梗塞发病中的动态改变及球结膜微循环的变化。结果显示:正常血小板呈园盘形或椭园形,中间为密度很高约2-3个致密体,并有多个溶酶体颗粒,以及较小的密度很高的许多糖元颗粒等。而患者组血小板形态、线粒体、致密斑颗粒、糖元颗粒与对照组比较均有显著变化或减少(P<0.001)。球结膜微循环的改变亦更明显,微血管血流慢、血管迂曲、形态不规则、局部扩张、细胞聚集等(P<0.01)。脑梗塞患者组血小板超微结构及球结膜微循环的改变与疾病程度成同步变化倾向。故脑梗塞患者除治疗缺血外,还应解除微循环障碍。     

缺血后适应减轻树鼩缺血性脑水肿及脑梗死的机制

目的 观察缺血后适应对树鼩血栓性脑缺血时大脑皮层脑水含量、局部脑血流、梗塞面积及神经元超微结构的影响,探讨其对树鼩脑缺血时神经保护的可能机制。 方法 将88只健康成年树鼩随机分为对照组、脑缺血4 h组、脑缺血24 h组、后适应4 h组及后适应24 h组（每组n=8）,另取8只动物做HE染色（n=3）及电子显微镜观察（n=5）。本实验采用光化学反应诱导树鼩血栓性脑缺血而建立脑缺血动物模型,在脑缺血模型建成后4 h夹闭缺血侧颈总动脉5 min,再灌注5 min,如此交替进行3个循环以建立缺血后适应模型。测定大脑皮层局部脑血流,脑组织含水量,脑梗死范围,并观察皮层及海马CA1区神经元超微结构改变。 结果 脑缺血时神经元固缩,线粒体肿胀,嵴溶解或形成空泡,内质网肿胀,内质网池形成。缺血后适应能使海马CA1区神经元固缩减少,线粒体和内质网的病理改变减轻,细胞水肿改善。随着缺血时间的延长,缺血24h组脑水含量明显增加86.81%±1.08%,此时脑梗塞面积明显扩大33.00%±3.03%,局部脑血流明显降低（134.27±28.75）ml/min。缺血后适应24h组脑组织含水量明显减少（81.04%±1.04%,P＜0.01）;脑梗塞面积缩小（16.79%±1.29%,P＜0.01）;而局部脑血流明显增加［（195.25±21.18）ml/min,P＜0.01］。 结论 缺血后适应可缓解树鼩缺血性脑水肿并缩小梗死范围,其机制可能与改善局部脑血流有关。     

丰富环境对大鼠局灶性脑梗死后海马区微血管新生的影响

目的研究丰富环境对局灶性脑梗死后大鼠海马区微血管新生的影响。方法采用开颅电凝法制作SD大鼠右侧大脑中动脉缺血（MCAO）模型,术后24h随机分为丰富环境组（EE组）和标准环境组（SE组）。另设假手术组（Sham组）。免疫组织化学法检测大鼠缺血侧海马区血管内皮生长因子（VEGF）、Ⅷ因子表达,测定微血管密度。结果EE组和SE组大鼠缺血侧海马区术后1d VEGF开始表达,3d达高峰,EE组大鼠经干预后后期VEGF和微血管数目高于SE组大鼠。结论丰富环境可促进脑梗死大鼠海马区VEGF、Ⅵ因子表达,促进微血管新生,有利于脑损伤修复。     

电针对脑梗塞大鼠脑皮质线粒体通透性转换孔的影响

目的观察电针对脑梗塞大鼠脑组织线粒体通透性转换孔的影响,探讨针刺对缺血神经元保护的线粒体机制。方法将45只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、非电针组组(线栓法制造脑梗塞灶)和电针组(梗塞后立即给予电针刺激)。非电针组和电针组分别在梗塞后和针灸后1h、3h、6h取材,提取大脑皮质缺血半暗带线粒体,用流式细胞仪检测各组大鼠脑线粒体内Rhodamine123的荧光强度值(FL1)、线粒体前向角散射(FSC)、线粒体90°侧向角散射(SSC)。结果在1h、3h、6h时,非电针组和电针组与对照组相比FL1、SSC值显著低于对照组值(P<0.05),FSC值均显著高于对照组(P<0.05),具有统计学意义;电针组在上述3个时间点与非电针组相比FL1、SSC值高于非电针组值,但P>0.05,FSC值低于非电针组,但P>0.05,差异均无统计学意义;非电针组内、电针组内FL1、FSC、SSC值各自比较,P>0.05,差异均无统计学意义。结论缺血能显著促使缺血半暗带脑皮质线粒体通透性转换孔的开放,促使线粒体肿胀;未发现针刺在缺血后1h、3h、6h能抑制脑线粒体通透性转换孔的开放。     

小神经胶质细胞移植对脑梗死的治疗作用

目的： 探讨小神经胶质细胞(MG)移植对脑梗死的治疗作用及其机制。方法: 采用光化学局灶性脑梗死大鼠动物模型，运用组织化学、免疫组织化学方法研究经锁骨下动脉移植入MG对梗死周边区的影响。并通过免疫荧光双标和Western blotting检测MG中神经生长因子（NGF）和白细胞介素-10（IL-10）的表达。结果: 脑梗死灶的周围发现大量FITC绿色荧光标记的移植而来的MG；MG移植明显减小脑梗死灶体积、减少神经元凋亡；移植而来的MG中NGF和IL-10的表达显著增加。结论: MG能够通过血脑屏障（BBB）并游走至损伤部位，并通过分泌NGF和IL-10对脑血栓脑梗死灶的周围区产生保护作用，提示MG移植可能用于脑血栓的治疗。