糖基化终末产物对人外周血单核细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的 研究糖基化终末产物(AGE)修饰蛋白对人外周血单核细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法 将培养的人外周血单核细胞与不同浓度AGE修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)共同培养,收集细胞培养液,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测MCP-1的分泌。结果 AGE-HSA以时间和剂量依赖的方式促进单核细胞分泌MCP-1。结论 AGE-HSA促进单核细胞分泌MCP-1,可能参与了糖尿病患者动脉粥样硬化(AS)的形成和发展     

重组人单核细胞趋化蛋白-1在骨肉瘤化疗过程中的作用

目的 观察重组人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在骨肉瘤化疗过程中的作用。方法 建立裸鼠荷人骨肉瘤动物模型。分别及联合应用重组人MCP-1和高剂量氨甲喋呤(HD-MTX)对其进行治疗，并设立空白对照。观察瘤体的生长及病理指标。结果 MCP-1可抑制骨肉瘤体的生长。但效果不理想；HD-MTX可明显抑制骨肉瘤体的生长，效果显著，但可出现肿瘤再生长；MCP-1可增强HD—MTX对瘤体的抑制作用，且能明显延迟肿瘤再生长的时间。结论 重组人MCP-1在骨肉瘤进行HD—MTX化疗过程中具有显著的增强治疗作用。     

突变型单核细胞趋化蛋白-1构建及其对单核细胞趋化蛋白-1的干预作用

目的:构建表达N端2-8位氨基酸缺失的突变型单核细胞趋化蛋白-1(mMCP-1),并观察其对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的干预作用.方法:Megaprimer-PCR构建mMCP-1-pVAX1(pVMm).以脂质体将pVMm转染真核细胞系C2C12,ELISA分析mMCP-1的表达情况.采用趋化实验分析mMCP-1对病毒性心肌炎小鼠外周血单个核细胞(PMNCs)的趋化活性及其对MCP-1的干预作用.结果:①酶切和测序显示野生型MCP-1真核表达载体(pVM)和pVMm构建成功.pVMm在真核细胞C2C12中有效表达.②mMCP-1不具有趋化病毒性心肌炎小鼠PMNCs的活性.与单纯使用MCP-1相比,以不同浓度的mMCP-1和MCP-1同时行趋化实验,被趋化的细胞明显减少(P＜0.01),25 μg/L mMCP-1可阻断10 μg/L MCP-1对病毒性心肌炎小鼠PMNC的趋化活性.结论:小鼠MCP-1 N端2-8位氨基酸决定其趋化活性.mMCP-1可用于干预MCP-1的作用.     

在大肠杆菌中融合高效表达人MCP-1

目的：利用含强启动子的融合表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ对编码人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的基因进行高效表达。方法：基因重组技术及蛋白纯化技术。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示表达产物占菌体蛋白的５０％ 。Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测表明,表达产物可与抗ＭＣＰ－１ 抗体特异反应。生物学活性测定结果表明,表达产物具有明显的单核细胞趋化活性。结论：融合蛋白对ＭＣＰ－１ 趋化活性无影响     

单核细胞趋化蛋白-1对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的 研究单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1, MCP-1)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, hUVEC)凋亡的影响.方法 培养并鉴定人脐静脉内皮细胞;用不同浓度MCP-1(0.1、1.0、10、100 μg/L)对其作用24、48 h;先用MTT比色法观察细胞存活率、流式细胞技术检测细胞DNA含量及细胞周期观察其对hUVEC凋亡的影响.结果 单核细胞趋化蛋白-1能诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡(P＜0.05),其效应随浓度和时间的增加而增强:MTT明显减低;细胞DNA含量减少,出现明显亚G0/G1峰(凋亡细胞峰).结论 单核细胞趋化蛋白-1能诱导人脐静脉内皮细胞凋亡.     

利用PCR技术优化人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因

本研究利用ＰＣＲ技术将人单核细胞趋化蛋白－１基因（ＭＣＰ－１）５′端翻译起始区进行优化改构。结果表明，改构后的ＭＣＰ－１基因克隆入大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中，ＤＮＡ测序证实正确。上述结果为进一步研究ＭＣＰ－１的高效表达奠定了基础。     

单核细胞趋化蛋白1与妇科肿瘤

单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)作为单核细胞的特异性趋化和激活信号分子,多项研究表明,其为肿瘤内巨噬细胞浸润量的决定因素。MCP-1诱导巨噬细胞瘤内浸润,有抑瘤和促瘤的双向作用。MCP-1在妇科肿瘤中也有相似的作用。本文就MCP-1在妇科肿瘤中的作用予以综述。     

凝血酶诱导人肺成纤维细胞释放单核细胞趋化蛋白-1

目的：研究凝血酶对人肺成纤维细胞（HFL-1）释放单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的调节作用。方法：HFL-1分别培养于96孔培养板各孔内,不同浓度（0．001-300nmol／L）凝血酶诱导2、6、9、12、24h后,收集上清液并用ELISA法检测其MCP-1浓度。结果：凝血酶可诱导HFL-1释放MCP-1,其最高释放量是基础分泌量的近17倍。凝血酶诱导的HFL-1释放MCP-1呈浓度和时间相关性。结论：凝血酶可诱导HFL-1表达MCP-1。     

单核细胞趋化蛋白1与细胞凋亡

单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)是一种分泌型单链蛋白质,为趋化因子家族成员之一,可通过G蛋白耦联受体途径诱导趋化性的产生,是调节单核巨噬细胞迁移及浸润的主要趋化因子之一。MCP-1参与多种疾病的细胞凋亡过程,并在凋亡机制中发挥重大作用。现就其特点、功能及与细胞凋亡性疾病的关系予以综述。     

肺结核患者单核细胞趋化蛋白-1的表达及其意义

目的 :研究单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP - 1)在肺结核患者血清及体外培养中的表达 ,初步探讨其在结核发病中的作用。方法 :收集 32例肺结核患者血清标本 ,ELISA方法测定不同类型病例MCP - 1的表达水平 ;分离培养结核患者及正常个体外周血单个核细胞 ,LPS刺激 ,ELISA方法测定上清中MCP - 1的含量。结果 :与健康对照组相比 ,初治型与难治型肺结核患者血清中MCP - 1的浓度显著升高 (P <0 .0 5 ) ,两组间MCP - 1的浓度差异也具有显著性 (P <0 .0 5 ) ;细胞培养上清中患者与对照组的MCP - 1的浓度有明显差异(P <0 .0 5 )。结论 :PBMCs是血清中MCP - 1的来源之一 ,增高的MCP - 1水平可能涉及结核的发病机制以及常规化疗对结核的疗效。     

同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞MCPIP表达

目的 探讨同型半胱氨酸是否可以诱导人脐静脉内皮细胞中MCPIP的表达.方法 体外培养并鉴定人脐静脉内皮细胞;分别用10、50、100、200、500 μmol/L Hcy与HUVECs孵育24 h;用100 μmol/L Hcy与HUVECs分别孵育1、2、4、8、12、24 h;Real-time PCR检测MCPIP mRNA的表达,Western blot检测MCPIP蛋白质的表达.结果 Real-time PCR和Western blot分析结果表明,在所设置浓度下,Hcy均可诱导HUVECs中MCPIP的表达（P＜0.05）,其中以100 μmol/L Hcy作用24 h时MCPIP表达量最多;100 μmol/l Hcy与细胞作用2h时后MCPIP表达与对照组相比即有明显增高（P＜0.05）,并存在时间依赖效应.结论 Hcy可诱导HUVECs中MCPIP的表达,这可能与它致As的机理有关.     

新疆地区狼疮肾炎患者尿液单核细胞趋化因子1水平及临床意义

目的探讨狼疮肾炎（lupus nephritis,LN）患者尿液中单核细胞趋化因子1（monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1）的水平及其临床意义。方法采用横断面调查研究分析方法,ELISA法检测33例活动期狼疮肾炎患者和35例缓解期狼疮肾炎患者尿液中 MCP-1水平。结果活动期狼疮肾炎患者 MCP-1水平[468．0（205～1990）pg/mg Cr]明显高于缓解期狼疮肾炎患者[131．5（69～734）pg/mg Cr],差异有统计学意义（P ＝0．000）。活动期狼疮肾炎组患者年龄（25．9±3．7）岁,缓解期狼疮肾炎组患者年龄（29．7±3．5）岁,两组年龄有统计学差异（P ＜0．05）,活动期狼疮肾炎组患者抗 ds-DNA抗体阳性率高于缓解期狼疮肾炎组患者（P ＜0．05）。两组在性别和族别上无统计学差异（P ＞0．05）。活动期狼疮肾炎组患者尿液中MCP-1水平与24 h尿蛋白定量及24 h尿白蛋白/肌酐（Urinary albumin-to-creatinine,UACR）呈正相关（r＝0．916,P＝0．000;r＝0．936,P＝0．000）。结论活动期狼疮肾炎患者尿液中 MCP-1水平升高,对狼疮肾炎的活动性及复发具有可靠稳定的临床诊断意义。需进行前瞻性研究进一步明确其临床意义。     

系膜增生性肾炎中单核细胞趋化蛋白-1的表达和单核巨噬细胞的浸润

目的观察在系膜增生性肾炎(MsPGN)中,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达和单核/巨噬细胞(MФ)的浸润情况.方法采用免疫组织化学和原位杂交技术观察17例MsPGN患者肾活检组织.结果①轻度MsPGN中,肾小球和肾小管间质中有少量Mφ浸润、MCP-1无明显表达(P＞0.05);②中度MsPGN中,肾小球、肾小管-间质中的Mφ浸润数、MCP-1表达量显著增高(P＜0.01).肾小球MCP-1+细胞数与肾小球内MФ数呈正相关(r=0.90,P＜0.01);MCP-1+小管数与小管间质内MФ数亦呈正相关(r=0.86,P＜0.01).结论①MФ参与中度MsPGN中肾小球和肾间质小管的炎症病变;②肾小球和肾小管间质中浸润的MФ可能受MCP-1趋化作用的影响.     

单核细胞趋化蛋白1 在前列腺癌 进展中的调节作用

目的 探讨单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）在前列腺癌进展中的作用。方法 采用免疫组织化学 （简称免疫组化）检测MCP-1 和血管紧张素Ⅱ 1 型受体（AT1R）在前列腺癌细胞系LNCaP,C4-2 和C4- 2AT6 中的表达。ELISA 检测Ang Ⅱ和CV11974（AT1R 阻断剂）对前列腺癌细胞系中MCP-1 生成的影响。 在C4-2AT6 细胞中,ELISA 检测Ang Ⅱ和LY294002（PI3K 抑制剂）对MCP-1 生成的影响,Western blot 检 测Ang Ⅱ和CV11974 对Akt 蛋白磷酸化水平（p-Akt）的影响,免疫组化检测TCV116（AT1R 阻断剂）对 C4-2AT6 细胞中MCP-1 和F4/80+ 表达的影响。免疫组化检测前列腺癌患者组织中MCP-1 和CD68 的表 达。结果 MCP-1 和AT1R 在前列腺癌细胞系LNCaP,C4-2 和C4-2AT6 中均表达,且在C4-2AT6 中表达 最高。在C4-2 和C4-2AT6 细胞中,Ang Ⅱ能够增加MCP-1 生成（P <0.05）,而CV11974 则能够逆转Ang Ⅱ介导的MCP-1 生成增加（P <0.05）。在C4-2AT6 细胞中,LY294002 逆转了Ang Ⅱ介导的MCP-1 生成 增加（P <0.05）,CV11974 能够逆转Ang Ⅱ介导的p-Akt 增加。TCV116 可降低C4-2AT6 细胞中MCP-1 和 F4/80+ 的表达（P <0.05）。前列腺癌患者组织中MCP-1 和CD68 的表达与前列腺癌的恶性程度有关,格里森 分数越高,MCP-1 和CD68 的表达越高。结论 MCP-1 可通过AT1R-PI3K/Akt 信号通路在前列腺癌恶性进 展中发挥重要作用。     

缬沙坦对肾小球硬化大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的观察缬沙坦对肾小球硬化大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨血管紧张素转化酶Ⅱl-型受体拮抗剂(AT1RA)对肾脏的保护作用。方法雄性SD大鼠36只随机分为对照组、肾小球硬化组和缬沙坦治疗组,每组12只。切除肾小球硬化组和缬沙坦治疗组大鼠左肾,1周后按5 mg.kg-1的剂量于尾静脉注射阿霉素,对照组行假手术及尾静脉注射等量生理盐水,注射阿霉素后次日始缬沙坦治疗组予缬沙坦20 mg.kg-1的剂量每日晨灌胃1次,对照组和肾小球硬化组仅灌以2 mL自来水。灌胃12周后处死大鼠,切取右肾用于肾脏病理分析,免疫组织化学法测定肾组织MCP-1。结果(1)形态学改变:对照组大鼠肾小管结构正常;肾小球硬化组多数肾小球呈节段性硬化,许多肾小球及肾小管受累;缬沙坦治疗组肾脏病变轻于肾小球硬化组,且肾小球硬化指数明显低于肾小球硬化组(P<0.01);(2)MCP-1的表达:对照组肾小管中有少量MCP-1的表达,在肾小球内几乎不表达,在肾小球硬化组和缬沙坦治疗组肾小球及肾小管内表达皆强于正常对照组(P<0.01)。缬沙坦治疗组MCP-1表达较肾小球硬化组弱(P<0.01)。结论缬沙坦可能通过阻断肾小球硬化大鼠肾素-血管紧张素系统,降低MCP-1在肾脏中的表达,抑制或减轻了巨噬细胞浸润,进而延缓肾小球硬化的进展。     

贝尼地平对原发性高血压患者血清hs-CRP和MCP-1的影响

目的 观察贝尼地平对原发性高血压患者血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响.方法 选择60例轻、中度原发性高血压患者,随机分为两组各30例,分别用贝尼地平和双氢克尿噻治疗3个月,每组治疗前后均检测血清hs-CRP和MCP-1水平;比较两组降压程度和对血清hs-CRP和MCP-1水平有无影响.结果 治疗后两组血压水平下降明显,有统计学意义,贝尼地平组血清MCP-1和hs-CRP水平降低(P<0.01),双氢克尿噻组MCP-1和hs-CRP水平无明显改变.结论 贝尼地平能减轻轻、中度高血压患者机体的炎症反应且这种作用不依赖于其降压效果.     

人单核细胞趋化蛋白1基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的：克隆表达具有重要生物功能的人单核细胞核细胞趋化蛋白１（ｈｕＭＣＰ－１）。方法：从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中提取ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增出ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ。将ｈｕＭＣＰ－１ｃＤＮＡ插入融合表达载体ｐＧＥＸＩＮ,１ｍｍｏｌ／Ｌ异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导后获得高效表达。结果：Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ证明与ｈｕＭＣＰ－１单克隆抗体有明显交叉反应。结论     

冠心病患者外周血树突状细胞亚型分布与血浆单核细胞趋化蛋白1的关系

目的探讨冠心病患者外周血树突状细胞(DCs)亚型分布与血浆单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)浓度变化的关系。方法连续入选2010年11月～2011年12月在我院心内科住院经冠状动脉造影术检查及治疗的患者(稳定型心绞痛10例、不稳定型心绞痛25例以及急性心肌梗死25例)60例,正常对照组28例。采用流式细胞仪四色荧光标记技术对外周血髓样树突状细胞(mDCs)和浆细胞样树突状细胞(pDCs)占外周血单核细胞比例进行检测,酶联免疫吸附测定法检测外周血浆单核细胞趋化蛋白1的表达,评价各组间差异,并对外周血髓样树突状细胞与外周血浆MCP-1进行相关性分析。结果急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组组mDCs占外周血单核细胞比例及mDCs实际数量明显低于对照组和稳定型心绞痛组(P<0.001);冠心病患者外周血浆MCP-1浓度明显高于正常人(P<0.001),并且与外周血mDCs比例呈负相关(r=-0.707,P<0.001)。结论 MCP-1可能促进了冠心病患者外周血mDCs向AS斑块病变部位迁徙并介导了斑块局部免疫炎症反应,加剧了AS斑块的不稳定。     

同型半胱氨酸对内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的　探讨同型半胱氨酸 (HCY)对内皮细胞中单核细胞趋化蛋白 1 (MCP 1 )表达的影响。方法　使人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)暴露于不同浓度的HCY ,孵育 8h后 ,用免疫细胞化学和细胞ELISA方法检测其单核细胞MCP 1的表达。结果　培养的HUVECs能表达单核细胞MCP 1。免疫细胞化学显示 ,0 .1mmol·L- 1 、0 .5mmol·L- 1 和 1mmol·L- 1 HCY组单核细胞MCP 1表达的平均吸光度值分别为 0 .0 789± 0 .0 0 81、0 .0 948± 0 .0 383和 0 .1 1 0 7±0 .0 1 71 ,均显著高于对照组 (0 .0 4 1 1± 0 .0 0 4 6 ,P <0 .0 1 )。细胞ELISA显示 ,上述各实验组单核细胞MCP 1表达的吸光度值分别为 0 .0 4 4 2± 0 .0 0 31、0 .0 4 94± 0 .0 0 39和 0 .0 51 8± 0 .0 0 2 8,对照组为 0 .0 396± 0 .0 0 53 ,方差分析表明 ,各组间均存在显著性差异 (F =58.38,P <0 .0 1 )。结论　培养的HUVECs能低水平表达单核细胞MCP 1 ,HCY能诱导其表达较高水平的单核细胞MCP 1。