苦参3种方法提取液HPLC指纹图谱比较

目的:比较苦参半仿生提取法(SBE法)、醇提法(AE法)、水提法(WE法)3种方法提取液的HPLC指纹图谱。方法:以≤1000Da提取物为最终产物,比较苦参3种方法提取液指纹图谱的共有峰、峰对应关系、共有峰重叠率、特征指纹峰总峰面积、相似度。结果:SBE法、AE法、WE法≤1000Da提取物特征峰数依次为17、14、14,总峰面积依次为7230.0、6733.4、2792.1。结论:3种提取方法制得的≤1000Da提取物的HPLC指纹图谱特征峰个数及总面积以SBE液为最大,进一步验证了苦参以SBE法提取为佳。     

黄连配方颗粒的HPLC指纹图谱研究

配方颗粒是我国1993年尝试中药改革而发展的新剂型。产品采用将中药饮片经浸提、浓缩、干燥等若干工艺精制而成，保持原中药饮片的性味与功能。2001年国家药品监督管理局发布的《中药配方颗粒管理暂行规定》已明确规定配方颗粒可以在全国范围试点临床医院进行使用，并对其质量标准的研究作了技术要求。     

HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中的生物 …

用ＨＰＬＣ法测定４种不同工艺制备的黄连解毒汤撮物粉末及２种日本汉方颗粒剂黄连解毒汤中的小檗碱和巴马汀含量。结果表明此方法简便、快速、必度高、回收率较地。采用此法比较了上述６种黄连解毒汤的生物碱含量。结果是新工艺制备的提取物中生物碱含量最高,其中小檗碱含量分别是东洋、津村黄连解毒汤的６倍和１３．８倍,是传统水煎提取物的３倍。     

HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中黄芩苷含量

用ＨＰＬＣ方法测定４种不同工艺制备的黄连银毒汤提了粉末及２种日本汉方制剂黄连解毒汤中的黄芩苷含量,结果表明方法简便,快速,精密度及回收率好,适合于制剂生产中多批量产品的质量控制,采用此法比较了不同工艺制备的贡连解毒汤及日本汉方制剂东洋黄连解毒汤,津村黄连解毒汤的黄芩苷的含量。     

黄连专属性对照物质及其指纹图谱的创建

目的建立黄连的专属性对照物质及其核磁共振氢谱(1H NMR)和高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,用于其基源鉴定.方法采用规范化的程序获取黄连专属性对照物质并测定其1H NMR和HPLC指纹图谱;通过硅胶柱色谱法分离其化学成分,鉴定各单体化合物的结构,实现指纹图谱的解析.结果不同来源的黄连样品,其1HNMR和HPLC指纹图谱都有很好的重现性和特征性;从其专属性对照物质中分得盐酸巴马亭、盐酸小檗碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱和盐酸药根碱5个主要成分,经光谱分析鉴定了结构.黄连专属性对照物质的1H NMR和HPLC指纹图谱主要显示所分得小檗碱型生物碱的特征信号.结论黄连专属性对照物质的1H NMR和HPLC指纹图谱反映了其主要活性成分的结构和整体组成,适用于其基源鉴定和质量评价.     

黄连饮片NACE-DAD指纹图谱的研究

目的 建立黄连饮片NACBDAD指纹图谱分析方法 ,并对黄连及其炮制品的指纹图谱进行比较.方法 选择非水毛细管电泳分离模式,以40 mmol/L乙酸钠-40mmol/L乙酸铵.无水甲醇缓冲液(pH5.8)为运行缓冲液,分离电压为25kV,以小檗碱为参照物(IS),测定其指纹图谱,并作模糊聚类法分析和相似度评价.结果 初步建立了以8个共有峰为特征指纹信息的NACE-DAD指纹图谱;发现少数产地黄连饮片的指纹图谱有一定差异,生品与其炮制品的指纹谱中共有峰相对峰面积差异显著.结论 方法 准确可靠,重现性好,可作为黄连饮片内在质量评价的依据.     

岩黄连注射液的HPLC指纹图谱研究

目的建立岩黄连注射液的HPLC指纹图谱,用于控制产品的质量。方法采用HPLC法。Shim-pack CLC-ODS色谱柱(150mm×6.0mm,5μm),乙腈-缓冲溶液(1∶1)梯度洗脱,体积流量为1mL/min,检测波长285nm。中药色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范(版本2004A)计算。结果13批岩黄连注射液的相似度均在0.95以上,确定了12个共有峰,建立了该注射液HPLC指纹图谱。结论本法可作为岩黄连注射液质量控制方法。     

黄连HPLC Maxplot指纹图谱的建立

[目的] 以高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-PDA）MaxPlot色谱图为基础,建立黄连指纹图谱分析方法。[方法] 采用高效液相色谱（HPLC）法,色谱柱为Agilent SB-C18（4.6 mm×150 mm,3.5 μm）;流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液,线性梯度洗脱;210~400 nm波长下提取Maxplot色谱图。以黄连对照药材随行测定所得MaxPlot色谱图作为黄连的标准对照指纹图谱,通过相似度评价黄连药材质量。[结果] 结果显示,PDA MaxPlot模式下黄连指纹图谱共获得11个共有峰,较单一波长345 nm下多1个微量成分峰。12批样品指纹图谱与对照药材随行对照标准指纹图谱相似度达0.994以上。[结论] MaxPlot指纹图谱显著提高了黄连中各类成分检测的灵敏度,有效增加了黄连药材共有峰数量,为该药材多成分的质量控制提供了借鉴。     

黄连的毛细管电泳特征指纹图谱研究

目的 建立黄连的高效毛细管电泳指纹图谱。方法 采用毛细管电泳考察了不同批药材季铵碱的保留时间和峰面积的相关性，并以小菜碱作为参照物计算了各色谱峰的相对保留时间和峰面积比值。结果 不同批号的黄连样品色谱组分的保留时间和峰面积的相关系数均大于0．9990。结论 建立的黄连高效毛细管电泳指纹图谱稳定、可靠，可作为黄连的特征指纹图谱。     

干燥方式对黄连浸膏粉物理指纹图谱和有效成分的影响

目的 考察不同干燥方式对黄连浸膏粉物理指纹图谱和有效成分的影响.方法 采用喷雾干燥法、冷冻干燥法、真空干燥法和鼓风干燥法制备黄连浸膏粉,以5个一级指标和9个二级指标构建4种干燥方式黄连浸膏的物理指纹图谱,并测定其HPLC指纹图谱.采用相似度评价、主成分分析法和聚类分析法分别对比4种浸膏粉的物理指纹图谱和HPLC指纹图谱...     

以血清药理学方法研究黄连解毒汤对小鼠的药效动力学

目的以含药血清对小鼠肝匀浆体外生成丙二醛(M DA)的抑制作用为指标,研究黄连解毒汤及单味药水煎剂的药效动力学。方法测定小鼠ig黄连解毒汤及单味药所得含药血清对M DA生成作用的经时过程,并考察黄连解毒汤含药血清、单味药煎剂及小檗碱、黄芩苷抑制M DA生成作用的剂量-效应关系。结果小鼠ig黄连解毒汤、黄连、黄芩、黄连 黄芩后,含药血清均可抑制体外肝匀浆M DA生成,且作用呈剂量依赖性。各药的Em ax分别为86%、76%、79%及81%;tm ax分别为180、120、5及15 m in;其煎剂对M DA生成抑制作用呈剂量依赖性;小檗碱在0.12~10 ng/mL无明显的抑制作用;黄芩苷在1.11~10μg/mL有抑制作用,且作用亦呈剂量依赖性。结论黄连解毒汤体内抗氧化作用强于各单方。黄芩苷可能是黄芩药液和含药血清中的抗氧化成分之一,而小檗碱可能与含药血清抗氧化作用无关;小鼠ig黄连解毒汤及其单味药所得含药血清对M DA生成呈时间和剂量依赖性。     

黄连解毒汤对糖尿病大鼠肠道二糖酶活性的影响

目的 研究黄连解毒汤对糖尿病大鼠的降血糖作用及对糖尿病大鼠肠道二糖酶活性的影响。方法 链脲佐菌素 (ip) 建立糖尿病大鼠模型;糖尿病大鼠 ig 给予黄连解毒汤提取物治疗1个月,观察治疗后血糖变化,测定各肠段肠内容物中的二糖酶 (蔗糖酶、麦芽糖酶、乳糖酶) 活性。正常大鼠小肠注入麦芽糖,30、60、120 min 后取门静脉、外周静脉血,测定门静脉与外周静脉血中葡萄糖浓度差值。结果 高、低剂量黄连解毒汤治疗后糖尿病大鼠的血糖分别降低 (42.2±4.9)%、(23.1±3.8)%;黄连解毒汤治疗后糖尿病大鼠十二指肠、空肠和回肠的麦芽糖酶活性分别降低 (32.2±4.3)%、(26.5±2.9)%、(36.5±5.2)%;蔗糖酶活性分别降低 (33.3±3.7)%、(32.8±4.6)%、(27.4±3.3)%,乳糖酶活性分别降低 (35.4±4.2)%、(17.9±2.3)%、(6.3±1.8)%。黄连解毒汤能减小大鼠小肠注入麦芽糖后门静脉与外周静脉血中葡萄糖浓度差值。结论 黄连解毒汤能显著降低糖尿病大鼠血糖,其降糖机制可能与抑制糖尿病大鼠肠道二糖酶活性有关。     

黄连解毒汤中小檗碱在脑缺血模型大鼠体内药动学与药效学相关性研究

目的 研究黄连解毒汤中小檗碱在脑缺血损伤模型大鼠体内的药动学过程及其与黄连解毒汤抗脑缺血作用的相关性。方法 实验分为假手术组和模型组,模型组以电凝法制备局灶性脑缺血模型。两组大鼠均ig给予黄连解毒汤（10.0 g/kg）,分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24 h眼眶取血,HPLC法测定小檗碱在大鼠血浆中的变化,绘制药-时曲线;测定模型组和假手术组大鼠给药后不同时间点血浆中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,结合小檗碱的药-时曲线和时-效曲线,比较相同剂量的黄连解毒汤给药后小檗碱在假手术组及模型组大鼠体内的药动学参数的差异以及模型组给药后的药效学指标变化,评价小檗碱在黄连解毒汤治疗脑缺血疾病中的作用。结果 小檗碱在模型组大鼠体内吸收迅速、代谢快、维持时间长,表现出其体内较强的循环性特点。与假手术组相比,局灶性脑缺血大鼠给予黄连解毒汤后,对小檗碱吸收充分,血中MDA水平显著降低,时-效曲线呈现双峰现象。造模后大鼠血清SOD活性降低,黄连解毒汤能提高SOD至正常水平,模型组大鼠的时-效曲线也出现双峰现象。结论 黄连解毒汤抗缺血性脑损伤作用可能与小檗碱在体内的水平有关,黄连解毒汤抗缺血性脑损伤作用与其升高SOD水平、降低MDA水平有关。     

黄连解毒汤的药动学-药效学相关性研究

目的 研究大鼠给予黄连解毒汤（HJD）、黄芩提取物及黄芩苷后,血清中黄芩苷和汉黄芩苷的经时变化及抗氧化作用的药动学-药效学（PK-PD）相关性。方法 以HPLC法同步监测血清黄芩苷、汉黄芩苷的水平,求算其血药浓度-时间曲线下面积（AUC）,并将含药血清抗氧化作用的效应-时间曲线下面积（AUE）与对应的AUC进行相关性分析。结果 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的lgAUC-AUE均呈近似“S”形曲线。结论 HJD、黄芩提取物及黄芩苷的抗氧化作用与血清黄芩苷、汉黄芩苷水平呈正相关,黄芩苷可能是HJD及黄芩抗氧化作用的活性成分,汉黄芩苷也有一定的抗氧化作用。     

黄连解毒汤体外抗菌活性研究

目的探讨黄连解毒汤体外抗菌活性。方法采用连续倍比试管稀释法和琼脂扩散法测定黄连解毒汤的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果黄连解毒汤对副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为62．5mg/mL、125．0m咖L,MBC分别为125．0mg/mL、125．0mg／mL;黄连解毒汤对福氏志贺菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌、伤寒沙门菌MIC均〉1000mg／mL。结论黄连解毒汤在体外对副溶血弧菌及金黄色葡萄球菌有显著的抗菌活性。     

黄连解毒汤在不同煎煮条件下的有效成分研究

目的：探讨黄连解毒汤在不同煎煮条件下有效成分的变化规律,以为其煎煮的条件选取提供依据。方法：选取黄连解毒汤的药材进行煎煮,然后将煎煮20、30、60min时黄苓苷、栀子苷、生物碱、汉黄芩素等成分的溶出率进行检测及比较。结果：经研究比较发现,栀子苷和黄苓苷煎煮20min时与30、60min时均为80%和60%以上,不同时间比较（均P〉0.05）,而生物碱煎煮30min及60min均高于20min（均P〉0.05）,汉黄芩素煎煮60min时溶出率明显高于煎煮20min及30min时（P〈0.05或P〈0.01）,有显著性差异或非常显著性差异,但第2次煎煮较第1次煎煮溶出率提高（均P〉0.05）,均有显著性差异。结论：黄连解毒汤在不同煎煮条件下的有效成分溶出率变化有一定的规律,为确保药物达到最佳药效,值得进一步研究及探讨。     

黄连解毒汤对非酒精性脂肪性肝病患者的治疗作用

目的：探讨黄连解毒汤（Huanglianjiedu decoction,HJD）对非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）的治疗效果。方法：134例NAFLD患者随机分为3组：治疗组（HJD干预）45例,对照组（易善复干预）45例,空白对照组44例。3组患者均常规＂运动饮食＂治疗,均给予阿托莫兰1.8g每日1次静脉滴注护肝治疗;针对血脂异常给予相关处理。30d为1疗程,治疗3疗程。治疗结束分析各组治疗前后各组临床症状、肝脏CT值、甘油三酯（triglyceride,TG）、胆固醇（total cholesterol,TC）及丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）等指标变化。结果：①治愈好转率：治疗组患者临床综合疗效为95.56%稍高于对照组93.33%,但无统计学差异;治疗组和对照组与空白对照组59.09%比较,有非常显著差异,P〈0.01。②肝脏CT值：治疗后治疗组、对照组上升,与空白对照组比较有显著差异,P〈0.05。③TG、TC：治疗后治疗组、对照组TG、TC下降,与空白对照组比较有非常显著差异,P〈0.01。④ALT、AST：治疗后治疗组、对照组ALT、AST显著下降,与空白对照组比较有非常显著差异,P〈0.01。结论：HJD治疗NAFLD疗效与易善复相似,具有广泛应用前景。     

黄连解毒汤有效部位对一氧化氮诱导大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的 :观察黄连解毒汤有效部位 (HJDAF)对培养皮层神经细胞一氧化氮损伤的保护作用。方法 :体外培养新生大鼠皮层神经细胞 ,加入硝普钠观察其对神经细胞的损伤及HJDAF的保护作用。结果 :HJDAF(15 3mg/kg)可减少受损细胞的乳酸脱氢酶 (LDH)漏出率 ;6 10 ,30 5 ,15 3mg/kg可提高受损细胞的活性 ,减少丙二醛 (MDA)生成 (P     

黄连解毒汤对体内外晚期糖基化终产物形成的影响

目的 探讨黄连解毒汤对体内外晚期糖基化终产物（AGEs）形成的影响。方法 链脲佐菌素（ip给药）建立糖尿病大鼠模型,以不同剂量（0.5、1.0 g/kg）黄连解毒汤ig给药90 d后,检测血糖、糖化血红蛋白,血浆和肾组织中的果糖胺和AGEs水平。将不同浓度的黄连解毒汤与葡萄糖和牛血清白蛋白孵育21 d,用荧光光度法测定AGEs的荧光值。结果 黄连解毒汤能明显降低糖尿病大鼠的血糖和糖化血红蛋白水平（P＜0.01）,抑制血浆和肾组织的果糖胺和AGEs的生成（P＜0.01）,并呈明显的剂量依赖性。黄连解毒汤对体外AGEs的生成也有明显的抑制作用,并有一定的剂量依赖性。结论 黄连解毒汤对体内外AGEs的生成均有明显的抑制作用,这可能是黄连解毒汤治疗糖尿病并发症的机制之一。     

黄连解毒汤对血热型银屑病动物模型免疫细胞及炎性因子表达的影响*

目的研究黄连解毒汤对血热型银屑病小鼠模型免疫细胞及炎性因子表达的影响。方法 选取40只SKH-1雌性小鼠,随机分为正常组、模型组、消银颗粒组、黄连解毒汤组,各10只。除正常组外,其余各组均建立血热型银屑病模型,并于建模成功后分别给予生理盐水、消银颗粒、黄连解毒汤处理。于建模后1 d、给药前1 d、给药后1周评价各组小鼠银屑病面积和严重程度指数（psoriasis area and severity index,PASI）差异,并分别于给药前1 d、给药后1周检测各组小鼠血清粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）、IL-17水平变化,比较其血清CD4、CD8、CD11c表达变化。结果 模型组、黄连解毒汤组均建模成功,消银颗粒组建模成功9只。模型组、消银颗粒组、黄连解毒汤组给药前1 d、给药后1周PASI均较建模后1 d升高,且均高于正常组,消银颗粒组、黄连解毒汤组给药后1周PASI较给药前1 d下降。模型组、消银颗粒组、黄连解毒汤组给药前1 d、给药后1周IL-17均低于正常组,其G-CSF、IL-10均高于正常组;消银颗粒组、黄连解毒汤组给药后1周IL-17较给药前1 d升高,G-CSF、IL-10较给药前1 d下降。模型组、消银颗粒组、黄连解毒汤组给药前1 d、给药后1周CD4均低于正常组,其CD8、CD11c均高于正常组;消银颗粒组、黄连解毒汤组给药后1周CD4较给药前1 d升高,CD8、CD11c较给药前1 d下降。各组小鼠观察期间均未见毒副反应发生。结论 黄连解毒汤能够有效调节血热型银屑病小鼠免疫细胞及炎性因子表达,促进小鼠皮损的消退。