B淋巴细胞刺激因子及其受体介导的免疫细胞信号转导

肿瘤坏死因子家族成员B淋巴细胞刺激因子(BLyS)与其受体BAFF-R、BCMA和TACI特异性结合后,启动下游MAPK和NF-κB等抗凋亡信号通路,是维持免疫细胞生存、分化以及成熟的重要因素。该文就BLyS/BLyS-受体介导信号转导通路调节免疫细胞功能,参与免疫性疾病的发生以及各信号通路间的相互调控予以综述。     

以IAPs为靶点的抗肿瘤研究进展

凋亡抑制因子(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)是一类高度保守的内源性抗细胞凋亡因子家族,主要通过抑制caspase活性和参与调节核因子NF-κB的作用抑制细胞凋亡。caspases蛋白酶的级联激活是凋亡过程的中心环节,Bcl-2家族蛋白和IAPs家族蛋白是主要控制因素。近年来发现,某些IAPs成员异常表达与肿瘤密切相关,成为肿瘤治疗的潜在靶点。因此,该文主要综述了与IAPs家族相关的蛋白以及以IAPs为靶点的抗肿瘤研究。     

Dvl交叉调控Wnt及NF-κB信号通路在类风湿性关节炎骨侵蚀中的作用研究进展

Wnt信号通路在骨细胞的成熟、分化和凋亡过程中具有重要的调控作用,通过调控成骨细胞和破骨细胞从而达到骨代谢的动态平衡。Wnt通路激活不足或过度激活均参与了类风湿性关节炎的发生和发展。核因子κB(NF-κB)是一种具有多向性调节作用的转录因子,参与细胞的生长、发育、凋亡等多种生理功能。如果NF-κB通路被不适当的活化,则可导致多种自身免疫和炎症性疾病,这其中就包括类风湿性关节炎。Dvl蛋白是Wnt信号通路中关键蛋白,有研究发现其也参与NF-κB通路的调控。因此,通过对Dvl蛋白交叉调控Wnt和NF-κB通路的研究,有可能为我们提供治疗类风湿关节炎新的药物靶点。     

与A20结合的核因子-κB抑制蛋白1的研究进展

与A20结合的核因子κB抑制蛋白1（A20 binding inhibitor of NF-κB activation,ABIN1）是近年来研究发现的一个新泛素结合蛋白。最初的研究表明,ABIN1通过结合锌指结构蛋白A20在NF-κB信号通路中发挥重要的调节作用。目前发现,ABIN1在过表达的条件下能抑制肿瘤坏死因子、白细胞介素1、脂多糖、表皮生长因子等诱导的NF-κB的活性,从而发挥抗炎和免疫调节作用。因此,以ABIN1为新靶点调节NF-κB活性的研究日益受到关注。本文就ABIN1蛋白结构、功能及其研究进展做一综述。     

Matrilin-2对TNF-α诱导大鼠卵圆细胞凋亡的影响

目的探讨matrilin-2对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导大鼠卵圆细胞凋亡的影响。方法体外培养大鼠卵圆细胞WB-F344,过表达matrilin-2或慢病毒敲降后,用10 ng·mL~(-1)肿瘤坏死因子α处理24 h,应用噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Hoechst/PI染色及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞凋亡通路、JAK-STAT通路、核因子κB(NF-κB)通路和JNK通路相关蛋白的变化,应用免疫沉淀检测ASK1和Trx的相互作用。结果肿瘤坏死因子α-matrilin-2敲降组细胞增殖率明显低于空白敲降组和肿瘤坏死因子α空白敲降组(P<0.5),matrilin-2敲降组细胞凋亡率明显高于空白敲降组和肿瘤坏死因子α空白敲降组(P<0.5);肿瘤坏死因子α-matrilin-2敲降组促进磷酸化JNK表达水平升高,然而磷酸化STAT3和IKKβ的表达水平没有明显变化;JNK抑制剂SP600125逆转了matrilin-2敲降组对肿瘤坏死因子α诱导细胞凋亡的作用;matrilin-2过表达及肿瘤坏死因子α处理后,磷酸化p-JNK、p-MKK7表达下调;共表达ASK1和Trx,matrilin-2促进ASK1和Trx的结合。结论 Matrilin-2通过抑制ASK1/MKK7/JNK通路阻止了肿瘤坏死因子α诱导WB-F344细胞凋亡的作用。Matrilin-2在各种损伤因素下确保卵圆细胞的增殖,对维持卵圆细胞的存活起着至关重要的作用。     

柚皮素对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡及MAPK/NF-κB信号通路的影响

本研究探究柚皮素对肺炎链球菌(SP)诱导的肺泡上皮细胞凋亡及MAPK/NF-κB信号通路的影响。培养肺泡上皮细胞HPAEpiC,使用CCK-8检测柚皮素对HPAEpiC细胞的毒性。再次培养HPAEpiC细胞,分为对照组、模型组、阳性对照组、柚皮素组和抑制剂组,ELISA法检测炎症因子的表达水平;TUNEL检测细胞凋亡水平;Western blot检测凋亡及MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果显示,柚皮素浓度≤60μmol/L时,对HPAEpiC细胞无毒性(P>0.05)。SP诱导可上调细胞上清液中炎症因子(TNF-α和IL-1β)的释放量、细胞凋亡率和细胞中凋亡相关蛋白(Cleaved caspase-8、Cleaved caspase-9和Cleaved caspase-3)与MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白(p-JNK、p-p38、p-ERK、p-p65和p-IκBα)的表达水平。柚皮素干预后可改善SP对肺泡上皮细胞的影响,且添加MAPK/NF-κB信号通路抑制剂干预与柚皮素干预对SP诱导的肺泡上皮细胞的作用效果具有相似性。以上结果提示柚皮素可能通过抑制MA...     

原白头翁素衍生物诱导人乳腺癌细胞的凋亡机制

目的:探讨原白头翁素衍生物诱导MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡的作用机制。方法:采用体外培养方法培养MCF-7人乳腺癌细胞;应用免疫组织化学技术检测实验组和对照组中死亡受体蛋白(Fas),天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、Caspase-8,细胞核转录因子(NF)-κB的表达。结果:对照组中Fas、Caspase-3和Caspase-8蛋白低表达于细胞质或细胞核,呈弱阳性;实验组细胞这些蛋白表达增高,呈强阳性;2组3种蛋白阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。对照组细胞中NF-κB高表达于细胞浆和细胞核,而实验组NF-κB表达较对照组下降,呈弱表达于细胞质。结论:原白头翁素衍生物通过外源性途径即死亡受体通路完成凋亡的启动和执行,抑制NF-κB信号转导途径可能是促进MCF-7细胞凋亡的原因。     

绿原酸抑制NF-κB/NLRP3炎性体通路减轻LPS诱导小胶质细胞神经炎症损伤研究

摘要：目的:探究绿原酸（CGA）对脂多糖（LPS）诱导的小胶质细胞神经炎症损伤及核因子κB（NF-κB）/Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3（NLRP3）炎性体通路的影响。方法:培养小胶质细胞BV2,3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测不同浓度(0,1,2,4,8 mmol·L-1)CGA对BV2细胞活力的影响;再次培养BV2细胞,依次分为对照（Control）组、LPS组、脂多糖和药物溶剂对照[LPS+二甲亚砜（DMSO）]、脂多糖和阳性药物对照（LPS+Positive）组以及脂多糖和绿原酸处理（LPS+CGA）组。免疫荧光法检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-1β表达情况;ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12和诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）含量;免疫印迹分析NF-κB/NLRP3炎性体通路和凋亡相关蛋白水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:与CGA 0 mmol·L-1比较,CGA 1,2,4 mmol·L-1对BV2细胞增殖活力的影响无统计学意义（P>0.05）,CGA 8 mmol·L-1显著降低BV2细胞增殖活力（P<0.05）。LPS诱导后细胞凋亡率升高,细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和iNOS分泌量增多,IL-10分泌量减少,细胞中NF-κB p65、磷酸化NF-κB抑制蛋白（p-IκBα）、NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（Caspase-1）和B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）蛋白水平上调,细胞中Bcl-2蛋白水平下调（P<0.05）。添加CGA可明显改善LPS对BV2细胞的影响（P<0.05）。结论:CGA通过抑制NF-κB/NLRP3炎性体通路减轻LPS诱导的BV2细胞神经炎症损伤。     

丹皮酚通过抑制NF-κB信号通路诱导Tca8113细胞凋亡

目的 研究丹皮酚对核因子κB（NF-κB）信号通路的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法 将丹皮酚以不同浓度及不同时间作用于人舌鳞癌Tca8113细胞,应用MTT法观察不同浓度丹皮酚在不同作用时间下对Tca8113细胞增殖的抑制作用,Hoechst 33342荧光染色及流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2,以及NF-κB信号通路组分中IκBα和p-IκBα的表达情况,并采用凝胶电泳迁移率检测（EMSA）对NF-κB活性进行测定。结果 经丹皮酚作用后,Tca8113细胞生长受到明显抑制,并呈明显的时间、剂量依赖效应关系。丹皮酚有明显诱导Tca8113细胞凋亡的作用,Western Blot 以及EMSA检测结果显示,丹皮酚上调Tca8113细胞中Bax与IκBα的表达,下调Bcl-2的表达,并能下调IκBα磷酸化及NF κB活性。结论 丹皮酚能够抑制NF-κB信号转导通路,进而抑制Tca8113细胞的增殖并诱导其凋亡。     

马鞭草苷对口腔扁平苔藓免疫反应的抑制作用及机制

目的 探讨马鞭草苷对口腔扁平苔藓（OLP）免疫反应的抑制作用及机制。方法 用脂多糖（LPS）体外刺激角质形成细胞系HaCaT细胞构建OLP炎症模型,CCK-8法检测细胞活力;实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）法检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的基因表达变化;蛋白质印迹法检测细胞中核因子-κB p65(NF-κB p65)和p-NF-κB p65蛋白的表达变化。结果 在HaCaT细胞中,LPS刺激抑制细胞活力,并诱导TNF-α、IL-1β和IL-6基因的表达上调,以及NF-κB p65和p-NF-κB p65蛋白的表达上调;20 mg/L马鞭草苷作用24 h可减轻LPS诱导的HaCaT细胞损伤、抑制炎症因子的表达和NF-κB p65信号通路的活化;同时,经G蛋白偶联受体18(GRP18)抑制剂O1918预处理后,马鞭草苷的保护作用显著减弱。结论 马鞭草苷可以通过激活GPR18受体抑制NF-κB信号通路的活化,进而降低炎症因子的表达和减轻OLP口腔黏膜炎症反应。     

NF-κB——治疗糖尿病微血管并发症的潜在靶点

糖尿病是一种代谢紊乱性疾病,影响着全球大部分人口。核因子-κB(NF-κB)在糖尿病微血管并发症的发病机制中起着关键作用。持续的高血糖可激活NF-κB,从而触发各种细胞因子、趋化因子和细胞黏附分子的表达。NF-κB促使肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素、转化生长因子-β(TGF-β)、Bcl2及其他促炎蛋白和促凋亡基因过度表达,是血管功能障碍的主要危险因素。NF-κB过表达也会使内皮细胞钙化,从而导致内皮功能障碍和微血管并发症的发生。抑制NF-κB炎症通路是未来治疗糖尿病微血管并发症的新靶点。在治疗糖尿病并发症方面已经研究了各种天然和合成的NF-κB抑制剂。最近的临床前和临床试验研究证实NF-κB是治疗糖尿病微血管并发症的潜在靶点。     

肿瘤坏死因子受体相关因子参与炎症免疫调节的研究进展

肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor-associated factors,TRAF)是一类重要的具有多功能的细胞内信号转导因子。TRAF参与多种受体家族的信号转导,包括肿瘤坏死因子受体家族(tumor necrosis factor receptor,TNFR)和Toll样-IL-1受体(Toll-like receptors-interleukin-1 receptors,TLR-IL-1R)家族等,在固有免疫和获得性免疫中发挥重要作用。受体活化时,TRAF直接或间接募集下游受体的胞内结构域,参与信号转导,最终激活NF-κB和干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)等活化转录因子信号通路,从而诱导免疫和炎症反应,参与炎症免疫性疾病的发生发展。     

NF-κB/IκB在二苯乙烯苷抑制过氧化氢诱导内皮细胞凋亡中的表达变化

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及对核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制因子(IκB)基因表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,实验分为对照组、H2O2组、TSG组,采用Ho-echst 33258染色观察细胞凋亡形态,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测NF-κB与IκB mR-NA表达,Western blot检测NF-κB p65、IκB蛋白表达。结果与对照组比较,H2O2组凋亡细胞数增多,细胞凋亡率增加,细胞增殖降低;NF-κB mRNA和蛋白表达增加,IκB mRNA和蛋白表达降低,差异均有显著性(P<0.01)。经TSG预处理后,细胞的增殖率较H2O2组增加,细胞凋亡率减少;NF-κBmRNA和蛋白表达减少,IκB mRNA和蛋白表达增加(P<0.01)。结论二苯乙烯苷能抑制H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,其作用机制可能与调节NF-κB/IκB表达有关。     

穿心莲内酯对人肺腺癌A549细胞NF-κB通路的调控作用

目的探讨穿心莲内酯对肿瘤细胞生长的作用及机制。方法人肺腺癌A549细胞分别与穿心莲内酯1.5～30μmol·L-1作用24h,以及穿心莲内酯30μmol·L-1作用4～24h。用MTT法检测A549细胞存活率;Western印迹法检测在肿瘤坏死因子α(TNF-α)10μg·L-1刺激下,穿心莲内酯30μmol·L-1对NF-κB信号通路中的相关蛋白NF-κB抑制因子α(IκBα)、磷酸化IκBα、IκB激酶β(IKKβ)和磷酸化IKKβ表达的影响;ELISA法检测穿心莲内酯对A549细胞核内NF-κBDNA结合活性的影响。结果穿心莲内酯的浓度和作用时间与A549细胞的存活率密切相关,穿心莲内酯30μmo·lL-1作用24h,A549细胞的存活率下降到(22.0±1.2)%,而穿心莲内酯1.5μmol·L-1作用24h或者穿心莲内酯30μmol·L-1作用4h对A549细胞的存活率几乎无影响。Western印迹法显示,穿心莲内酯能够抑制TNF-α诱导的NF-κB信号通路中IKKβ的磷酸化,抑制IκBα的磷酸化,推迟IκBα的降解,对IKKβ的表达无影响。穿心莲内酯还能够抑制TNF-α诱导的A549细胞核内NF-κBp65蛋白的DNA结合活性,抑制率达32%。结论穿心莲内酯通过影响NF-κB信号通路抑制A549细胞的生长。     

蓝萼乙素通过NF-κB信号通路调控舌鳞状细胞癌细胞的增殖与凋亡

摘要：目的:探讨蓝萼乙素调控舌鳞状细胞癌（TSCC）细胞增殖、凋亡的分子机制。方法:体外培养人TSCC细胞SCC15,使用不同浓度的(3,6,12μmol·L-1)蓝萼乙素处理24 h。甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测蓝萼乙素对核因子-κB（NF-κB）信号通路相关蛋白[磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）、磷酸化p65（p-p65）、p65、核因子κB抑制蛋白α（IκBα）]表达的影响; NF-κB信号通路的激活剂脂多糖（LPS）预处理SCC15细胞后,MTT法与流式细胞术分别检测细胞增殖能力及细胞凋亡率; Western blot法检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、增殖细胞核抗原（PCNA）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3总蛋白（T-caspase-3）的蛋白水平。结果:与空白组相比,蓝萼乙素不同浓度组细胞增殖率显著降低,CyclinD1、PCNA、Bcl-2、p-IκBα、p-p65蛋白水平显著降低,细胞凋亡率显著升高,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高（P<0.05）;与蓝萼乙素高浓度+PBS组相比,蓝萼乙素高浓度+LPS组细胞增殖率显著升高,CyclinD1、PCNA、Bcl-2蛋白水平显著升高,细胞凋亡率显著降低,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:蓝萼乙素能够抑制TSCC细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路的活化而发挥作用。     

中药调控核因子-κB（NF-κB）信号通路治疗银屑病的研究进展

银屑病是一种慢性自身免疫性皮肤病,其核心是免疫反应失调和角质形成细胞增殖异常。核因子-κB（NF-κB）在银屑病中是一种关键的调节信号通路,通过抑制NF-κB信号途径或下游转录因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）或白细胞介素-17（IL-17）/白细胞介素-23（IL-23）成为未来银屑病治疗的一个新方向。中药针对NF-κB信号通路在银屑病治疗中具有疗效确切、手段多样、不良反应小等优势。总结了中药调控丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/NF-κB、NF-κB/信号传导和转录激活因子3（STAT3）、Toll样受体4（TLR4）/NF-κB信号通路治疗银屑病的研究进展,以期为中药治疗银屑病提供更新策略。     

基于NF-κB信号通路的咖啡酸苯乙酯抗炎和抗肿瘤作用研究进展

咖啡酸苯乙酯(CAPE)是源于蜂胶的小分子化合物,具有抗炎、免疫调节、抗肿瘤和抗氧化等作用,是NF-κB信号通路的特异性抑制剂,具有良好的临床应用前景。CAPE抑制多种介质诱导的NF-κB通路活化,降低肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β等促炎因子的浓度,其机制涉及阻滞p65核转录、抑制NF-κB与DNA结合等。本综述主要介绍近年来国内外关于CAPE基于NF-κB通路的抗炎免疫和抗肿瘤药理活性研究进展,以期对该化合物的进一步研究和应用提供参考。     

核因子κB在糖尿病肾病中作用的研究进展

核因子 (NF) κB是一个具有广泛生物学活性的核转录因子 ,调控多种疾病中炎症介质的产生 ,本文概述了 NF-κB在肾脏疾病尤其是糖尿病肾病 (DN )中的作用。1　 NF-κB概述NF- κB是细胞中一个具有多向性调节作用的核转录因子 ,在细胞的信号传递和基因的诱导表达过程中起重要作用 ,可参于多种炎症性细胞因子、趋化因子的产生、成纤维细胞的增生分化、细胞外基质交联及细胞凋亡等过程 ,在炎症损伤、肿瘤、凋亡、细胞再生等方面均有重要作用。近年来研究发现 NF-κB在肾脏疾病尤其是糖尿病肾病发生发展中的作用不容忽视 ,特别是致炎作用…     

左卡尼汀抑制NF-κB敏化TRAIL诱导神经胶质瘤细胞凋亡

目的探讨左卡尼汀作为TRAIL(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand)敏化剂,增强TRAIL对神经胶质瘤细胞诱导凋亡的效果,并对其敏化作用的机制进行研究。方法以U87为神经胶质瘤细胞模型,通过CCK-8检测细胞活性,Annexin V-FITC/PI染色、caspase-3表达及活性等指标检测细胞凋亡,通过RT-PCR、Western blot对NF-κB(nuclear factor kappa B)和c-FLIP(FLICE抑制蛋白)的转录与表达进行分析,沉默NF-κB,分析其与c-FLIP的关系。结果 TRAIL与左卡尼汀联用,癌细胞存活率明显下降,凋亡明显上升;联用组与对照组相比,c-FLIP的转录和蛋白表达以及NF-κB的转录均有明显降低;沉默NF-κB证明其为c-FLIP上游因子。结论左卡尼汀与TRAIL可以产生协同作用,诱导U87细胞凋亡,其敏化机制与抑制NF-κB信号通路以及其下游c-FLIP表达有关。     

片仔癀调控膜联蛋白A1/VEGF通路对人肝癌细胞系HepG2作用的影响

目的研究片仔癀对人肝癌细胞系HepG2作用的影响,并探讨其作用机制。方法培养人肝癌细胞HepG2,将细胞分为空白对照组(Normal)、片仔癀不同浓度剂量组(浓度分别为1、10、100 mg·L~(-1)),药物作用24 h后,收集细胞进行以下相关检测:MTT比色法检测不同浓度片仔癀对HepG2细胞活性的影响;集落形成实验观察细胞存活能力;Western blot法检测凋亡相关指标Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的表达,膜联蛋白A1/VEGF通路相关指标(ANXA1、VEGF、VEGFR、NF-κB p50);结果与空白对照组比较,不同浓度片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株HepG2细胞活性,抑制细胞集落形成,促进HepG2细胞凋亡蛋白表达,促进细胞ANXA1蛋白表达,抑制VEGF、VEGFR表达,及抑制核蛋白NF-κBp50表达;结论片仔癀能够抑制体外人肝癌细胞株Hep G2活性,其主要作用机制与促进Hep G2细胞凋亡蛋白,促进细胞ANXA1蛋白,抑制VEGF/VEGF受体,及NF-κB信号通路相关。