老年慢性心力衰竭患者外周血CD14~(dim)CD16~+单核细胞及白介素-13水平与心功能的关系

目的:研究老年慢性心力衰竭(CHF)患者外周血CD14~(dim)CD16~+单核细胞数和血清白介素-13(IL-13)的水平及其与心功能之间的关系。方法:选取42例老年CHF患者为观察组,另选25名健康老年人为对照组,采用流式细胞术检测外周血单核细胞CD14~(dim)CD16~+表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-13水平变化,同时采用超声心动图测定左心室射血分数(LVEF)和舒张末期内径(LVEDD)。结果:老年CHF组CD14~(dim)CD16~+单核细胞数高于健康对照组(P<0.05)。结论:老年CHF患者体内存在单核细胞功能异常,CD14~(dim)CD16~+水平和血清IL-13浓度有望成为反映心力衰竭严重程度再分层的一种新型生物标志物。     

急性胰腺炎患者外周血CD14^+CD16^+单核细胞表达B7-H2的临床意义

背景急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是常见的急腹症,不同类型预后不同.AP的免疫应答和失衡免疫与其严重程度有关,炎症因子和相关免疫细胞在AP发病机制中至关重要,因而寻找炎症细胞和新炎症免疫因子对精准治疗AP具有重要意义.目的探讨AP患者外周血CD14^+CD16^+单核细胞表达B7-H2的临床意义.方法A P患者63例[轻度A P(m i l dA P,M A P)25例、中度AP(moderately severe AP,MSAP)20例、重度AP(severe AP,SAP)18例],对照组为健康体检者20例,采用流式细胞仪检测CD14^+CD16^+细胞亚群上B7-H2表达情况,评价其与胰腺炎严重程度关联性及临床意义.结果AP患者发病24hCD14^+CD16^+细胞B7-H2出现异常高表达,显著高于健康对照组(t=11.10,P<0.001);A P各组B 7-H 2在C D 14^+C D 16^+细胞膜上表达明显高于CD14^+C D16^-细胞膜上表达(P<0.01);SAP组CD14^+C D 16^+和CD14^+C D 16^-细胞B7-H2表达(373.30±89.72和78.62±13.05)最高,M S A P组(279.55±76.95/44.92±12.44)其次,均高于M A P组(181.15±35.75/23.32±4.28),各组两两比较差异有显著性(P<0.01);MAP组、MSAP组发病24 h、48 h、72hCD14^+CD16^+和CD14^+CD16^-单核细胞膜B7-H2动态表达差异无显著性(P>0.05),然而,SAP组无论C D14^+C D16^+还是CD14^+C D16^-细胞膜B7-H2表达24h、48h、72h均呈明显上升趋势,差异有显著性(P<0.05).结论CD14^+CD16^+和CD14^+CD16^-单核细胞膜B7-H2在AP患者体内高表达,与AP严重程度密切相关,且SAP呈动态升高变化;同时B7-H2在AP患者CD14^+CD16^+单核细胞膜表达较CD14^+CD16^-单核细胞明显升高,为进一步认识AP免疫应答和失衡提供了新的线索,为AP精准靶向治疗提供参考.     

2型糖尿病患者外周血CD14+CD16+单核细胞水平及巨噬细胞STAT3蛋白表达的研究

目的 研究T2DM患者外周血CD14+ CD16+单核细胞数和血清IL-6、TGF-β的水平,及患者血清和IL-6孵育的THP-1单核细胞源性巨噬细胞STAT3、p-STAT3的蛋白表达,以了解炎症性免疫反应在T2DM大血管病变中的可能作用. 方法 对42例T2DM(T2DM组)患者和35名健康体检者(NC组)采用外周血流式细胞术检测外周血单核细胞CD14+ CD16+的表达,并分离其外周血血清.采用ELISA检测血清中细胞因子IL-6及TGF-β的浓度,免疫比浊法检测血清中高敏C反应蛋白(hsC-RP)水平,血清和IL-6孵育THP-1单核细胞源性巨噬细胞,采用Western blot检测其STAT3和p-STAT3的蛋白表达. 结果 T2DM组外周血CD14+ CD16+单核细胞数高于NC组(P＜0.01),且与血清hsC-RP和IL-6水平呈正相关(r=0.462、0.495,P＜0.01),与TGF-β水平无相关性(P＞0.05).T2DM组24 hUAlb水平、大血管病变发病率及THP-1单核细胞源性巨噬细胞p-STAT3的蛋白表达均高于NC组(P＜0.01). 结论 T2DM患者体内可能存在单核/巨噬细胞功能异常,其可能参与了T2DM患者体内免疫炎症反应,从而导致了T2DM及其血管病变的发生发展,作用机制可能与STAT3信号通路的激活有关.     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8~+T细胞CD95表达的研究

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T细胞CD95分子的表达水平,了解CD95分子表达与炎症进展的关系。方法采集37例慢性乙型肝炎患者及健康对照者外周血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),用流式细胞术检测外周血CD8+T细胞CD95分子的表达情况。结果高病毒载量组和低病毒载量组CD8+T细胞CD95的表达均显著高于健康对照组(P0.05);CD95的表达及CD8+T细胞频率之间存在负相关关系(r=-0.3486)。结论慢性乙型肝炎患者CD95的高表达可能促进了CD8+T细胞的凋亡,使CD8+T细胞的抗病毒作用减弱,可能与HBV持续感染、慢性乙型肝炎的形成机制有关。     

阿托伐他汀降低急性冠脉综合征患者外周血CD_(14)~+单核细胞表面TLR4的表达

目的 Toll 样受体4(TLR4)的激活与动脉粥样斑块的进展及斑块的不稳定导致临床并发症的发生有关。他汀类调脂药物临床获益可能与其调脂以外的作用尤其是抗炎作用有关,但抗炎作用的确切机制目前还不清楚。推测其抗炎作用可能是通过抑制 TLR4炎症信号通路起作用的。方法入选者为健康志愿者(n=22)及2006-07-2007-09在门诊和住院患者共121例[稳定性心绞痛(SAP)患者17例,急性冠脉综合征(ACS)患者82例],入院即刻抽取外周静脉血;将其中的41例 ACS 患者随机分为两组:在常规抗心绞痛治疗的基础上服用阿托伐他汀10 mg 组(20例)及阿托伐他汀40 mg 组(21例),治疗1月后抽取外周静脉血。观察指标为血脂、高敏 C 反应蛋白(hsCRP)、外周血 CD_(14)~+单核细胞表面 TLR4的表达,单核细胞表面 TLR4的表达采用流式细胞仪方法测定。结果 ACS 患者血 hsCRP 及外周血 CD_(14)~+单核细胞表面 TLR4的表达明显高于 SAP 患者(P<0.05)及正常对照组(P<0.05),hsCRP 与 TLR4的相关性分析结果是两者轻度相关(r=0.261,P=0.002)...     

单核细胞CD14＋ CD16＋与脑梗死关系的研究进展

脑梗死是指由于组织的血液供给障碍,造成局部缺血缺氧,导致组织死亡（坏死）的病变。好发于中老年人群,特别是50岁-60岁的人群发病率更高,脑梗死起病急,前期症状不明显,不易被察觉,发病后,疾病快速发作,迅速达到高峰[1]。单核细胞是由骨髓中的前体发育而来,前体又称单潜能或双潜能细胞,是从造血干细胞分化产生的。在组织中,单核细胞在不同的解剖位置发育成不同类型的巨噬细胞或树突状细胞[2]。巨噬细胞是负责保护组织免受外来物质损伤,但也被认为在大脑和心脏等重要器官的形成和发展过程中发挥重要的作用。单核细胞异常与多种疾病如慢性炎症、应激反应、库欣综合征（亢进）、免疫介导的疾病、坏疽、结节病等密切相关。血管壁病变、血液成分和血流动力学改变是引起脑梗死的主要原因,主要包括动脉粥样硬化性血栓性脑梗死、脑栓塞、腔隙性梗死、出血性梗死4种类型[3]。研究表明,动脉易损斑块的形成、破裂及随后的血栓形成是脑梗死发生的病理基础,斑块局部的炎症和免疫反应是易损斑块形成的关键因素[4]。血小板及单核细胞的异常活化、凝血因子活性增高所导致的高凝状态是脑梗死的重要发病机制之一,单核巨噬细胞在动脉粥样硬化的形成和发展过程中起到关键的作用[5]。     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体2和4的变化

目的探讨慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体2 （TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的变化情况及其意义。方法用流式细胞仪检测正常对照、慢性乙型肝炎患者和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞表面TLR2和TLR4的表达,ELISA法检测上述患者血清TNFα的水平。Student-t检验比较3组间TLR2、TLR4和TNFα表达的差异;3组病例TLR2、TLR4的表达水平间及它们与血清TNFα水平间的相关性分析采用线性相关分析。结果正常对照组（30例）、慢性乙型肝炎组（31例）和慢性重型乙型肝炎组（30例）外周血单核细胞TLR2和TLR4的平均免疫荧光强度（MFI）分别为21．5±2．7、39．0±4．1．47．7±21．4和2．3±1．1、3．7±2．3、6．9±4．1;外周血清TNFα（ng／L）水平分别为53．8±38．1、164．3±89．9、359．8±1 40．0,自正常对照组到慢性乙型肝炎组及慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2、TLR4表达强度和外周血清TNFα水平均依次显著升高;经线性相关分析研究发现,外周血单核细胞TLR2、TLR4表达水平和血清TNFα表达水平间均呈现显著的正相关性。结论TLR2和TLR4可能与慢性乙型肝炎及慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

丹参多酚酸盐对急性心肌梗死PCI术后CD14~+单核细胞活性氧和Toll样受体的影响

目的:观察丹参多酚酸盐对急性心肌梗死经皮冠状动脉介入术(PCI)术后,外周血单核细胞脂质过氧化损伤、单核细胞趋化因子-1及Toll样受体的影响,以进一步探讨丹参多酚在拮抗急性心肌梗死单核细胞氧化损伤中的作用。方法:选取我院2011年2月至2012年8月,因急性ST段抬高性心肌梗死入院患者320例,所有患者均行急诊PCI治疗。将320例患者随机分为常规治疗组(155例)和丹参多酚治疗组(165例)。常规治疗组予以阿司匹林、氯吡格雷及阿托伐他汀等药物口服。而丹参多酚治疗组除上述治疗外,予以丹参多酚注射液400mg静点,此后每日1次,持续7d。入院时及治疗7d末取静脉血6 mL分离单核细胞,通过流式细胞仪、ELISA等方法检测单核细胞活性氧ROS、血浆单核细胞趋化因子-1(MCP-1)以及单核细胞Toll受体4(TLR4)表达的变化。另取30例自愿者为对照组。结果:治疗7d末,两组患者单核细胞ROS、血浆MCP-1及TLR4水平均较入院前明显降低(P<0.01),而与常规治疗组比较,治疗7d末丹参多酚治疗组单核细胞ROS、血浆MCP-1及TLR4水平显著降低(P<0.05)。结论:注射用丹参多酚能通过抑制CD14+单核细胞TLR4信号转导途径,抑制单核细胞过氧化损伤,降低急性心肌梗死PCI术后患者单核细胞引起的炎性损伤。     

CD4~+CD25~+Treg细胞在慢性乙型肝炎发病机制中的作用研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,对维持机体免疫动态平衡具有重要作用。它不仅诱导产生自身免疫耐受,防止自身免疫性疾病的发生,而且能够限制免疫防御中T细胞和B细胞的过度活化,避免造成组织损伤。慢性乙型肝炎患者病毒感染的持续原因可能与体内CD4+CD25+Treg细胞数量或者功能异常,从而降低了机体对HBV发挥特异性效应的CD8+T细胞反应有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞亚群表面程序性死亡配体1表达

目的 探讨程序性死亡配体1(PD-L1)在慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞亚群表面的表达情况.方法 利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞各亚群表面PD-L1分子的表达.结果 慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞PD-L1的表达率与血清AST水平呈正相关(r=0.358,P=0.035),且免疫活...     

Parallel decline of CD8＋CD38＋ lymphocytes and viremia in treated hepatitis B patients

AIM:To assess the peripheral T lymphocyte subsets in chronic hepatitis B virus(HBV) infection,and their dynamics in response to adefovir dipivoxil monotherapy.METHODS:Proportions and absolute counts of peripheral natural killer cells,B cells,CD8+,CD4+,CD8+ CD38+,CD8+CD28+ and CD4+CD28+ T cells were determined using three-color flow cytometry in chronic hepatitis B patients(n = 35),HBV carriers(n = 25) and healthy controls(n = 35).Adefovir dipivoxil was initiated in 17 chronic hepatitis B patients who were r...     

NK-cell responses are biased towards CD16-mediated effector functions in chronic hepatitis B virus infection

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慢性乙型肝炎患者外周血 CD8＋T 淋巴细胞功能的变化

目的：探讨慢性乙型肝炎患者 CD8＋ T 淋巴细胞功能的变化。方法利用主要组织相容性复合物（MHC）-抗原肽四聚体标记技术检测 HBV 的特异性 CD8＋ T 淋巴细胞,并检测其细胞因子的分泌能力,分析其与病毒学指标及临床生化指标的关系。结果人类白细胞相关抗原（HLA）-A 基因型为 A02或 A24的42例患者中,有11例患者至少检出一种被四聚体识别的 HBV 特异性 CD8＋ T 淋巴细胞,白细胞介素2（IL-2）及γ（IFN-γ）干扰素的分泌能力相对于其自身的外周血总 CD8＋ T 淋巴细胞显著降低（t＝14．231、10．450,P ＜0．01）。检出抗原特异性 CD8＋ T 淋巴细胞的患者,其血清ALT 的水平较阴性患者高（t＝2．306,P ＜0．05）,而 HBV DNA 水平却相对低（t＝－4．447,P ＜0．001）。结论慢性乙型肝炎患者外周血的抗原特异性 CD8＋ T 淋巴细胞的功能存在明显的缺陷,可能与病毒抗原的持续刺激导致功能耗竭有关。     

促炎症CD16＋单核细胞增加与慢性乙型肝炎患者的肝损伤和纤维化程度关系

目的探讨慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者单核／巨噬细胞及其亚群的特点及其临床意义。方法分析110例CHB患者外周血内单核细胞亚群的频率和表型,包括32例免疫耐受期HBV携带者和78例免疫活化期患者。另选取20例免疫活化期患者肝组织标本用于免疫组化和肝内单核细胞亚群分析。结果免疫活化期患者外周血、肝内的单核细胞及其促炎症亚群CD16＋单核细胞显著增加,且与肝组织学活动指数和ALT水平密切相关。结论免疫活化期患者单核细胞及其促炎症亚群CD16＋单核细胞的增加可能参与形成肝脏炎症微环境和促进CHB患者的肝损伤。     

乙肝病毒感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达及临床意义

目的 探讨乙肝病毒感染者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 Tr)表达水平及其临床意义.方法 选择乙肝病毒携带者25例、急性乙肝患者26例、慢性乙肝患者38例,26例正常对照,用流式细胞仪检测外周血中CD4 CD25 Tr表达水平;用PCR法检测患者HBV DNA载量.结果 乙肝病毒携带者组与慢性乙肝患者组CD4 CD25 Tr水平(9.93±3.51,11.21±3.29)明显高于对照组(8.12±2.80)(P＜0.01或0.05),急性肝炎组与对照组相比,差异没有显著性.结论 持续性HBV感染者CD4 CD25 Tr表达增加,提示CD4 CD25 Tr在慢性乙型肝炎中担负着重要的免疫调节作用,可能抑制HBV感染者特异性细胞免疫反应,与乙肝病毒感染的慢性化及肝病的临床发生、发展有关.     

慢性乙型肝炎患者血清sCD14变化意义的初步探讨

目的阐明可溶性CD14(sCD14)在慢性乙型肝炎(慢乙肝)肠源性内毒素血症中的作用.方法ELISA双抗体夹心法测定了60例慢乙肝患者血清sCD14和TNF-α水平,应用基质显色法鲎试验定量检测血浆内毒素水平.结果慢乙肝(轻度)患者血清sCDl4水平与对照组无显著差异外,慢乙肝(中度和重度)sCD14水平均显著高于对照组;慢乙肝伴肠源性内毒素血症时sCD14s为(4.8±2.3)μg/ml,而不伴肠源性内毒素血症者的sCD14为(2.9±1.9)μg/ml,两者之间有显著差异(P＜0.01).慢乙肝(轻度)sCD14水平为(3.0±1.7)μg/ml,TNF-α为(4.69±2.75)ng/ml,两者之间无显著相关(r=0.26,P＞0.05),而慢乙肝(中度和重度)的sCD14水平分别为(5.2±2.1)μg/ml和(6.9±3.4)μg/ml,TNF-α分别为(9.48±6.15)ng/ml和(14.23±8.29)ng/ml,慢乙肝(中度和重度)的sCD14水平分别与其TNF-α有显著相关(r=0.87,P＜0.01;r=0.91,P＜0.01).结论血清中sCD14水平影响并调节内毒素对肝细胞的毒性,临床测定肝病患者sCD14水平,有助于阐明慢性肝病时肠源性内毒素血症在继发性肝损害中的作用.     

Distribution of hepatitis B virus genotypes in patients with chronic hepatitis B in Turkey

AIM: Hepatitis B virus (HBV) strains isolated worldwide has been classified into eight genomic groups deduced from genome comparisons and designated as genotypes A to H. We aimed to investigate prevalence of HBV genotypes and subtypes in Turkey. METHODS: A total of 88 chronic hepatitis B (CHB) patients from 15 hospitals throughout the country were included. Patients who were HBsAg positive in serum at least for 6 mo, who had HBV-DNA in serum and elevation of ALT levels more than two times upper limit of normal, and who had percutaneous liver biopsy within 6 mo were included. Genotyping of HBV was done by restriction fragment length polymorphism (RFLP). The patients received subcutaneous 9 MU interferon-α 2a thrice a week for a period of 6 mo. RESULTS: Genotype D was detected in 78 of 88 (88.7%) patients, however, genotyping failed in two patients (2.3%), while no product was obtained in eight (9.0%) patients. Regarding subtypes, D2 was more prevalent (67 patients between 78% and 85.9%) followed by subtype D2+deletion (seven patients of 78 or 8.9%), subtype D1(three patients of 78% or 3.9%) and subtype D3 (one patient of 78% or 1.3%). Thirty-three patients (37.5%) were HBeAg positive compared to 55 (62.5%) anti-HBe positive patients. The endpoint for the viral response of HBeAg positive patients was 27.2%, while it was found 52.7% in HBeAg negative patients (P<0.05). Long-term persistent viral response was 29.5% for all patients. CONCLUSION: This multi-center study indicates that the predominant genotype with CHB patients in Turkey like in other Mediterranean countries is genotype D.     

Increased circulating CD16+ CD14dim monocytes in a patient with pulmonary alveolar proteinosis

Pulmonary alveolar proteinosis (PAP) is characterized by filling of the alveoli with a periodic acid-Schiff-positive proteinaceous material. Although the pathogenesis of primary or idiopathic PAP remains unknown, it has been proposed that a deficiency or loss of responsiveness of the monocyte/macrophage lineage to granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) is involved in PAP. Secondary PAP is associated with haematological malignancies, especially in myeloid disorders. Herein, we report on an adult with PAP associated with myelodysplastic syndrome (MDS). The CD16+ CD14dim monocytes comprise 5-10% of circulating monocytes in healthy volunteers. Flow cytometric analysis of the patient in the present study revealed increased CD16+ CD14dim monocytes in the peripheral blood. It has been demonstrated that the expression of CD16 and CD14 is regulated by macrophage colony stimulating factor (M-CSF) and GM-CSF. Hence, serum cytokines were analysed in our patient and the concentration of serum GM-CSF was found to be less than the lower limit of the assay. In addition, serum M-CSF and granulocyte colony stimulating factor levels were only slightly increased above the normal range. These results suggest that the increase in the CD16+ CD14dim subpopulation in the circulation of our patient indicates another pathogenetic mechanism for secondary PAP, such as hyperresponsiveness of the monocyte/macrophage lineage to these cytokines.