外周血淋巴细胞培养及改良同步化无水乙醇乙酸染色体制备技术

目的建立一种改良同步化无水乙醇乙酸染色体制备技术。方法将20份外周血标本同时使用两种方法制备染色体,对照组采用常规法;实验组采用无水乙醇替代甲醇配制固定液,同时使用胸苷、脱氧胞苷、高浓度秋水仙素同步化制备染色体,整个培养过程于试管中完成。结果两组相比,实验组获得的早期染色体分裂相数量较多,差异具有统计学意义(P0.01);细胞分裂指数差异无统计学意义(P0.05);染色体交叉重叠不多,分散良好,G显带清晰。结论实验组的改良技术步骤简单、操作简便,能获得较多带纹清晰的早期染色体,适合于临床常规应用。     

杂交瘤研究中染色体分析的方法及其意义

目的探讨细胞同步化染色体高分辨技术检测杂交瘤细胞染色体的可行性。方法选择小鼠骨髓瘤SP-2/O细胞株、人淋巴母细胞CKM-8细胞株、人骨髓瘤KM细胞株、抗小鼠胰腺癌鼠-鼠杂交瘤细胞株,体外培养24～48h。对4种细胞株分别进行同步化处理,加入5-氟脱氧尿嘧啶核苷和尿嘧啶培养16～18h后,加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷,并在收集细胞前加入秋水酰胺;收集细胞进行离心、低渗处理、固定、再固定,制备染色体滴片,应用胰蛋白酶-Giemsa染液对染色体进行G显带处理。每例标本以30个以上分裂象做众数分析,按照《人类细胞遗传学国际命名体制》(ISCN 1978)对细胞株染色体进行G显带分析。结果 4种细胞株的染色体均较长、分散良好、形态较好。SP-2/O细胞株、CKM-8细胞株、KM细胞株、抗小鼠胰腺癌鼠-鼠杂交瘤细胞株的染色体数目分别为63、46、42、105,其中抗小鼠胰腺癌鼠-鼠杂交瘤细胞染色体数目接近小鼠淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞染色体数的总和,且多数为端着丝点染色体。结论细胞同步化染色体高分辨技术检测杂交瘤细胞染色体具有良好的效果。     

改进同步化法制备外周血染色体500条G显带技术的临床应用研究

目的 研究改进同步化法制备外周血染色体500条G显带技术用于染色体核型分析的意义.方法 对100份在本院细胞遗传室行外周血染色体检查样本,用常规制备法和改进同步化制备法同时进行外周染色体制备,观察两种方法制备玻片中的500条带分裂相数量和比例,并分别进行400条G显带和500条G显带核型分析.结果 两种方法的制备成功率均为100％.同步化法制备500条带核型分析结果为87份正常,9例Y染色体多态性,4例异常.常规法制备400条带核型分析漏诊1例染色体异常.同步化法获得的大于500条带分裂相显著多于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01),而且500条带核型分析准确率高于400条带.结论 改进同步化制备法可以显著增加500条带分裂相,应用于染色体核型分析,有利于发现染色体异常,且操作简单,可以在临床推广应用.     

在同一标本上的高分辨R带和G带

从1975年以来,提出了用胸苷或氨甲喋呤来得到R带或G带的前期和早中期染色体的细胞同步化技术。作者报导了用5-溴脱氧尿苷(BrdU)来同步分裂细胞,并在同一标本的不同细胞中获得优良的R带、G带和H带以及不同阶段的染色体凝聚。同以前发表的方法比较,用胸苷和BrdU更易获得每套单倍染色体组大约具有1千个带的较高比例的前期有丝分裂相。方法是外周血淋巴细胞生长72小时之后加入最终浓度200μg/ml     

鼻咽癌患者染色体畸变的非随机性研究

鼻咽癌患者染色体畸变的非随机性研究周宏远，曾设民，李世绩，高秀坤，刘永惠恶性肿瘤患者的染色体组成大多数有数目和结构异常，且某些畸变非随机地累及某些特定的染色体。这种结构异常的染色体在其形成过程中都经历了一次或多次的染色体断裂［１］。我们采用双同步化制...     

一小时孵育法制备骨髓染色体

目的:对近期一小时孵育法制备骨故染色体50例的结果进行总结,并比较该方法与其它方法之间的优劣。结果:染色体制备成功率为100％,分裂指数为2.92‰,异常核型检出率为78％,染色体质量良好率为 85.6％。与直接法、24小时培养法、同步化法进行了比较,显示在分裂指数、异常核型捡出率二项指标较直接法、24小时培养法为优,而在染色体制备成功率及染色体质量良好率方面差异不显著。而与同步化法相比,四项指标均无显著性差异。结论:一小时孵育法制备骨髓染色体,方法简单、快捷,成功率高,核型质量好,是一种较好的骨髓染色体制备方法。     

吖啶橙(AO)丙酮法直接制备绒毛高分辨染色体的研究

1983年Simoni等直接制备绒毛染色体的方法的成功将产前诊断染色体病的时间提早到早孕时期,为患者减轻了极大的痛苦,成为产前诊断的一突破性进展,不过这种方法制备的染色体多为中期分裂相,一般只有320条左右的带纹,对染色体的细微结构异常难以发现,绒毛高分辨染色体能使染色体呈现更多的带纹,从而进一步扩大了染色体疾病的诊断范围和提高其诊断率。 获得绒毛高分辨染色体有两种途径。一、同步化培养:将绒毛细胞进行体外培     

一种简单、快速、制备淋巴细胞高分辨染色体的技术

常用的高分辨率染色体技术是按Yunis介绍的方法进行的,主要是用氨甲喋呤和胸腺嘧啶脱氧核苷进行细胞同步化以获得前期染色体。但是,这个方法的缺点是要延长培养时间22.5小时。同样,Shafer提供的显带技术是在细胞培养中加入放线菌素D,可以得到较长的染色体,虽然这个方法比较简单,但在作者们的实验中主要得到的是中期     

临床细胞遗传的一种新的R-显带技术

近来,应用标准的染色体显带方法,在认为是细胞遗传研究适应症的全部病人中,约10～15％具有染色体异常。用较长的染色体(用或不用细胞同步化)高分辨研究,将获得较高的异常频率。但用较复杂方法来研究时,既费时又花钱。用5-溴脱氧尿嘧啶予     

即刻低渗法在恶性血液病骨髓染色体制备中的应用

目前国内外恶性血液病骨髓染色体的制备方法主要有３种：直接法、短期培养法和同步化法［１］。３种方法各有优缺点，直接法简便省时，不需无菌操作，但染色体短小、发毛分叉，成功率低。短期培养法虽可提高异常核型检出，但染色体质量低，需严格无菌操作，成功率亦不高［...     

放线菌素D诱导人类成纤维细胞染色体高分辨显带

近代染色体显带技术的进展,为增加显带的分辨力和显带分析的精确性提供了有效的工具。人类外周血淋巴细胞同步化,应用氨甲喋呤(methotrexate)阻滞DNA合成,然后以胸腺嘧啶消除,能获得足量伸长     

外周血淋巴细胞染色体G显带制备方法综述

在研究人类染色体的结构异常时,染色体标本制备的质量会直接影响着对染色体的分析。规范与量化操作步骤能保证染色体制备的重复性和一致性,确保得到数量较多、又易于分析的染色体。外周血染色体培养操作过程中影响因素多,如细胞培养基、秋水仙素、胰酶浓度、制片过程等。因此,本文对国内报道的染色体标本制备改良技术作一综述,以便得到高质量的中期染色体。     

人体肝癌细胞株(7402)的细胞同步化和中期染色体分离方法

用人体肝癌细胞株(7402)和中国地鼠肺细胞系(CH-CL)的细胞建立了同步化方法:7402细胞在指数生长时,加入秋水仙胺处理后,用机械摇晃法收集中期细胞。或者在传代培养的7402细胞中加入TdR的DNA合成抑制剂,培养24小时后更换新的培养液解除细胞的抑制。同上加入秋水仙胺使细胞停止在分裂中期。这两种方法均可获得85～96％的中期细胞。此外,按上述方法加入秋水仙胺处理细胞并结合机械摇晃法,同样可收获70～90％的同步的中期细胞。染色体分离方法:按上述同步化收集的中期细胞,用Hanks液洗涤,TM低渗液处理,离心;去上清液,加入TMS缓冲液与细胞沉淀混匀,转入注射器或研磨器内,吸打或研磨细胞,使细胞膜破裂释放出染色体,再离心,收集上清液,在沉淀中再加入TMS缓冲液,低速离心,再收集上清液。这样反复离心,收集的上清液汇集于大离心管内,再离心,去上清液,加入TMS液混匀,低速离心,收集上清液。如此反复,就可获得纯度高的中期染色体。最后比较了两种同步化方法的优劣,并讨论了分离中期染色体的各种因素。     

PDCA循环在羊水染色体标本分析前质量改进中的应用

目的应用PDCA循环法来提高羊水染色体分析前标本质量,将羊水染色体标本质量不合格率降到5%以下。方法采用不同病例前-后对照研究,将2018年1月～12月实施PDCA循环前送检的羊水染色体标本251例设为对照组,2019年3月～12月实施PDCA循环后送检的羊水染色体标本368例设为观察组。比较实施PDCA循环前后羊水染色体标本采集不合格率情况。结果实施PDCA循环前,送检的251份羊水标本共有28例不合格,不合格率为11.1%(28/251),而实施PDCA循环后送检的368例羊水标本共有6例不合格,不合格率为1.6%(6/368)。观察组不合格率显著低于对照组,且差异具有统计学意义(χ~2=26.080,P=0.000)。结论 PDCA循环持续改进显著提高送检羊水染色体标本质量,有效降低了羊水染色体标本的不合格率,为获得准确结果提供了分析前质量保证。     

高分辨细胞遗传学

1970年将显带技术用于研究人类中期染色体(320条带的时期),使得在许多先天性畸形和新生物病人中描述以往未查出的染色体异常。把显带技术和体细胞杂交相配合有助于发展人类基因绘图,对于染色体结构和演化的研究也是一种强有力的激励。 1976年,我们实验室以氨甲喋呤使细胞同步化,再使细胞短时间暴露于秋水酰胺中,从而提出了对400、550、850和1,200条带时期的染色体进行常规研究的技术,高分辨染色体(HRC)一词也就应运而生。这一技术,及其改良方法为更深入地研究染色体的结构和功能提供了手段。以往漏查的染色     

急性白血病染色体核型与临床关系

近年来大量研究表明染色体核型分析对急性白血病（ＡＬ）的分型、预后判断及指导治疗有重要意义，为此我们对１９９０年１月－１９９６年８月１２０例小儿急性白血病患儿应用高分辩同步化染色体制备法和骨髓短期培养法进行了细胞遗传学研究，现分析如下。资料与方法１２０...     

固定前用吖啶橙处理细胞的高分辨显带法

高分辨显带的简易技术,对于染色体结构的深入研究和检测染色体微小的改变极为重要。日前,由于受近代显带技术分辨力所限,以致许多微小的染色体结构重排仍不能察觉。Yunis(1976,1981)和Yunis 等(1978)采用氨甲喋呤使细胞同步化,以增加有丝分裂早期细胞的技术。虽然该法是有效的,但操作较为烦琐。本文报导一种用吖啶橙(acridine ora-nge AO)处理的高分辨显带染色体的简易方法。方法:人体血液的淋巴细胞按常规法培养,在含有15%的小牛血清RPMI“1640”     

一种利用细胞清质剂制备外周血染色体的新方法

制备出高质量的外周血染色体标本对染色体病的诊断和细胞遗传学研究起着至关重要的作用。长期以来，人们一直在期盼着有一种十分稳定的染色体制片方法出现。造成染色体标本不理想的最关键原因是细胞质对染色体的包裹，一旦染色体周围的细胞质十分明显，染色体分散不佳，G显带就会出现带纹不清或根本无带纹。     

人类染色体图像分析系统在核型分析中的应用

目的　探讨该系统在核型分析中的价值。方法　比较使用该系统前后因染色体标本质量欠佳导致复查例数及发现染色体异常的例数。结果　使用前因染色体标本质量欠佳导致复查的例数 6 0例 ,占 16 % ,使用后因染色体标本质量欠佳导致复查的例数为 2 2例 ,占 5 0 5 % (P <0 0 1) ;使用前发现染色体异常例数 6例 ,占 1 6 0 % ;使用后发现染色体异常例数为 2 2例 ,占 5 0 5 % (P <0 0 1)。结论　利用染色体图像分析与识别系统可降低因染色体标本质量欠佳复查率 ,同时帮助检查者发现更多染色体异常病例。本系统省时省力 ,在图像保存 ,模式图建立 ,图像传输等方面有着突出优点     

原发性卵巢癌的细胞遗传学研究

为了探讨染色体异常与卵巢癌的关系,应用改良的实体瘤染色体标本直接制备法对１３例原发性卵巢癌术后新鲜标本进行细胞遗传学分析［１］。结果显示卵巢癌、尤其是晚期病例染色体改变复杂,涉及多个染色体数目和结构异常。１材料与方法１．１材料３８例原发性卵巢癌手术新...