重型肝炎患者肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1 mRNA的表达

目的：观察重型肝炎患者基质金属蛋白酶－1（MMP－1）和金属蛋白酶组织抑制因子－1（TIMP－1）mRNA的表达以及胶原蛋白的沉积情况，从胶原降解的角度探讨重型肝炎致肝纤维化的机制。方法：重型肝炎肝组织标本20例，非肝病患者肝组织6例，用原位杂交法检测肝组织MMP－1和TIMP－1 mRNA-1 的表达，并作I、Ⅳ型胶原的免疫组化以及天狼红胶原染色。结果：与对照组比较，重型肝炎组的MMP－1 mRNA和TIMP－1 mRNA表达显著增加，肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量亦显著增加。肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量与MMP－1 mRNA表达无明显相关性，与TIMP－1 mRNA表达呈正相关。结论：重型肝炎患者肝纤维化的发生与金属蛋白酶抑制因子增加、抑制金属蛋白酶的活性、降低间质胶原蛋白的分解有关。     

脑梗死病人梗死面积与MMP1、MMP9、TIMP1的关系探讨

目的探讨脑梗死病人基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)及其组织抑制因子1(TIMP1)与脑梗死面积的关系。方法选择20名正常人作对照组,分别于第1天、第3天、第7天采集肘静脉血;脑梗死组40例,分别于发病后第1天、第3天、第7天采集肘静脉血。两组均应用酶联免疫吸附法检测血清MMP1、MMP9及TIMP1的浓度变化,通过头颅CT评估脑梗死的面积。结果脑梗死组第1天、第3天、第7天血清MMP1、MMP9及TIMP1水平均高于正常对照组(P<0.01);随着脑梗死面积的不同变化,则MMP1、MMP9、TIMP1数值存在相应变化。结论脑梗死病人MMP-1、MMP-9、TIMP1在不同的时间窗存在一定规律的改变。     

心肌组织基质金属蛋白酶-3及其抑制物-1的表达与心功能损害

目的 探讨心肌组织基质金属蛋白酶－3（MMP－3）及其抑制物－1（TIMP－1）相对含量与心力衰竭（心衰）的关系。方法 采用RT－PCR方法对31例风湿性心脏病（RHD）心衰患者及8例健康人心室肌组织中MMP－3及TIMP－1含量进行半定量分析;RHD患者术前心功能指标采用超声心动图检查。结果 瓣膜病所致心力衰竭（心衰）病人心肌组织呈心肌重型的病理改变;心衰病人心肌组织MMP－3 mRNA表达较正常人增高,且心功能越差,MMP－3相对含量越高;TIMP－1则相反。结论 MMP－3表达含量的增加及TIMP－1表达含量的降低参与心肌重构,是影响心衰患者心功能恢复的重要因素之一。     

胃癌组织中MMP-9mRNA、TIMP-1mRNA的表达变化及意义

目的观察基质金属蛋白酶（MMP）-9及其抑制剂（TIMP一1）在胃癌组织中的表达变化,并探讨两者在胃癌发生、发展中的作用。方法采用逆liT—PCR法检测43份胃癌组织、35份癌旁组织和8份胃溃疡组织中MMP-9和TIMP-1的mRNA表达,分析两指标表达的相关性及与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织中MMP一9mRNA、TIMP一1mRNA表达均显著高于癌旁组织和胃溃疡组织,尤以T。级、有淋巴结转移、Ⅲ期者为著（P均〈0．05）;MMP-9mRNA、TIMP一1mRNA表达均与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关,与浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关（P均〈0．05）。结论胃癌组织中MMP-9mRNA、TIMP一1mRNA的表达升高,且与肿瘤浸润、侵袭有关。     

MMP/TIMP、VEGF与肺癌的浸润和转移

肺癌的浸润和转移与基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinase，MMP）及其抑制剂基质金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP）、血管内皮生长因子 （vascular endothelial growth factor, VEGF）等多因素密切相关，深入研究肺癌中MMP／TIMP及VEGF的表达与功能，揭示肺癌的浸润与转移的机制，可为评估肺癌的浸润、转移及预后提供重要的参考指标。     

脑梗死患者外周血血清和血浆中白细胞基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1水平差异分析

目的采用酶联免疫吸附法测定脑梗死患者外周血血清和血浆中白细胞基质金属蛋白酶9（MMP9）和基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）水平的差异。方法采用无促凝剂和含抗凝剂的采血管抽取脑梗死患者和健康体检者血液,检测血清、血浆MMP9和TIMP-1水平,并进行统计分析。结果外周血MMP9及TIMP1血清与血浆水平存在差异,血清MMP9和TIMP1的水平高于血浆（P〈0.01）。同时,与对照组比较,脑梗死患者MMP9血浆水平显著增加,而TIMP-1血浆水平明显减低,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论血浆水平MMP9和TIMP-1更适合作为脑组织损伤的潜在生物学标志,采血方法的选择对实验结果的影响不容忽视。     

胃癌组织中基质金属蛋白酶及其组织抑制物的基因表达意义

目的观察胃癌组织及其癌变标本中基质金属蛋白酶（MMPs）及其金属蛋白酶组织抑制物（TIMPs）基因表达的变化。方法采用Northern—blot、原位分子杂交ISH的方法，对15例胃癌组织中MMP2、MMP9和TIMP1基因的mRNA表达水平进行了检测。结果胃癌癌组织MMP2、MMP9和TIMP1的基因表达水平明显高于正常组织。它们在胃癌癌组织和间质细胞中均有分布。结论组织中MMPs和TIMPs的异常表达有助于胃癌的早期诊断。     

复元胶囊对实验性骨关节炎软骨中MMP13、TIMP1及TIMP2的影响

目的观察复元胶囊对实验性骨关节炎软骨中基质金属蛋白酶13、组织型金属蛋白酶抑制剂1,2及病理形态方面的影响。方法选用新西兰兔66只,随机分为:正常对照组6只,不给予任何处理;模型对照组12只,造模后生理盐水灌胃;四环素组、复元胶囊低、中、高剂量组各12只,造模后分别用四环素、复元胶囊灌胃。连续灌胃4~12w后,比较各组关节软骨病理变化;免疫组化法检测兔膝关节软骨中MMP13、TIMP2蛋白质水平的变化;RT-PCR法检测关节软骨中MMP13、TIMP1及TIMP2mRNA表达。结果实验组软骨Mankin′s评分都显著低于模型对照组,实验组MMP13的mRNA表达水平明显低于模型对照组,而其TIMP1、TIMP2的mRNA的水平较模型对照组有所增加。MMP13主要表达于软骨表层及中上层,实验组MMP13表达量低于模型对照组(P<0.05)。结论复元胶囊能明显抑制骨关节炎软骨中MMP13的蛋白和mRNA的水平,能提高OA软骨中TIMP1,2的蛋白和mRNA的水平,稳定二者水平,对软骨退变有一定的防治作用。     

Ad-hTIMP1感染对Hcy刺激人脐静脉内皮细胞MMP1、MMP9、TIMP1 mRNA表达的影响

目的构建携带人金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的重组腺病毒Ad-人TIMP1(hTIMP1),将其感染用同型半胱氨酸(Hcy)刺激的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,观察该细胞基质金属蛋白酶(MMP)1、MMP9、TIMP1mRNA的表达变化。方法在大肠杆菌BJ5183中通过同源重组构建重组腺病毒Ad-hTIMP1和对照重组腺病毒Ad-Track。将CRL-1730细胞分为空白对照组、Track对照组和基因治疗组,并根据加入Hcy浓度的不同各分为三个亚组,即空白对照组、生理浓度组和病理浓度组。病毒感染48 h后加入Hcy刺激,6 h后收集各组CRL-1730细胞,RT-PCR法检测CRL-1730细胞中的MMP1、MMP9、TIMP1 mRNA。结果 Ad-hTIMP1和Ad-Track的滴度分别为1.9×1012VP/mL和0.6×1012VP/mL。基因治疗组Ad-hTIMP1感染CRL-1730细胞后,该细胞的TIMP1mRNA表达明显高于空白对照组(P<0.05),即使加入病理浓度的Hcy,CRL-1730细胞中TIMP1mRNA的表达仍处于高水平,而MMP1、MMP9 mRNA的表达明显降低(P均<0.05)。结论成功构建了Ad-hTIMP1和Ad-Track。重组腺病毒Ad-hTIMP1感染CRL-1730细胞后,该细胞中TIMP1 mRNA过表达,可抑制高浓度Hcy刺激造成的MMP1、MMP9mRNA的表达升高,提示其可对抗Hcy对内皮细胞的损伤。     

基质金属蛋白酶在类似人类2型糖尿病大鼠肾病中的研究

目的 动态研究基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和其体内特异的抑制物－金属蛋白酶组织抑制剂－2（TIMP－2）在类似人类2型糖尿病大鼠肾组织的改变。方法 利用免疫组织化学观察Ⅳ型胶原在肾小球的表达,酶谱法测定肾皮质MMP－2的活性,蛋白印迹法检测肾皮质TIMP－2的含量,Northern Blot观察肾皮质MMP－2和TIMP－2的基因表达。结果 类似人类2型糖尿病大鼠肾小球Ⅳ型胶原成分表达增强,肾皮质MMP－2基因表达减弱（P＜0．01）;其活性进行性减少（P＜0．0001）,而TIMP－2基因表达（P＜0．01）及其含量逐渐增加（P＜0．01）。结论 类似人类2型糖尿病大鼠肾组织MMP－2活性进行性降低、TIMP－2含量增加,两者比例失衡为肾小球ECM成份沉积的重要原因之一,基质降解减弱也参与了2型糖尿病大鼠肾脏病变的发生和发展。     

慢性肝病患者外周血细胞间质胶原酶(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)基因表达的研究

采用RT-PCR法及Northem杂交，检测38例慢性肝炎患者及20例正常成人外周血单个核细胞中MMP-1及TIMP-1mRNA的表达。结果发现正常成人外周血单个核细胞中存在MMP-1及TIMP-1的表达，慢肝患者外周血单个核细胞中MMP-1及TIMP-1的表达升高，MMP-1/TIMP-1比值显著升高，并且与肝纤维化严重程度呈正相关。与肝纤维化血清学指标HA、LN-C-Ⅳ、PCⅢ变化一致，提示外周血单个核细胞中MMP-1及TIMP-1mRNA的表达水平与肝纤维化严重程度关系密切。MMP-1/TIMP-1比值可为临床诊断提供一个新的血清学指标。     

基质金属蛋白酶及组织抑制剂在肝癌中的表达及与预后的关系

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制剂（TIMPs）在肝癌中的表达及其意义。方法：应用免疫组化、Northern印迹杂交及图像分析技术对人肝细胞癌（HCC）、肝癌细胞株7721、全反式维甲酸处理的7721细胞（RA－7721）和正常人肝细胞株L－02作MMP－1、2、9和TIMP－2的表达分析。结果;肝癌细胞浆内可表达MMP－1、2和9,但癌内阴性组5年生存率明显高于相应的阳性组（P＜0．05）。体外MMP－9mRNA在7721细胞表达明显高于RA－7721以及L－02细胞,而TIMP－2mRNA的表达与MMP－9相反,MMP－2mRNA在7721细胞中的表达仅略高于L－02细胞。结论：HCC组织内MMP－1和9的表达与患者的预后密切相关;癌细胞高表达MMP－9、低表达TIMP－2,可能是肝癌细胞浸润、转移的主要基础,而MMP-2并无重要作用。     

Serum matrix metalloproteinase-1 in patients with chronic viral hepatitis

BACKGROUND AND AIMS: Previously we found that serum matrix metalloproteinase (MMP)-1 activity decreased with progression of chronic liver disease. Our objectives in the present study were to observe the change in the serum MMP-1 protein concentration using recently developed specific enzyme immunoassays for MMP-1 and MMP-1 complexed with tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMP)-1 and to elucidate the clinical usefulness of the serum MMP-1 test in chronic viral hepatitis. We measured the serum concentrations of MMP-1 and MMP-1/TIMP-1 complex using these immunoassays in 64 patients with histologically characterized chronic viral hepatitis. RESULTS: Serum MMP-1 concentration was inversely related to the histological severity of chronic hepatitis (P< 0.0001). It was closely associated with the histological degree of periportal necrosis (P< 0.0001), intralobular necrosis (P< 0.005), portal inflammation (P<0.0001) and liver fibrosis (P< 0.05). The serum concentration of MMP-1/TIMP-1 complex was also related to the histological severity of chronic hepatitis (P< 0.0001). It was associated with the degree of portal inflammation (P< 0.05), but not with the degree of periportal necrosis, intralobular necrosis or liver fibrosis. As serum MMP-1 level was closely associated with the histological degree of necroinflammation, we examined the ability of the serum MMP-1 test to differentiate active and inactive forms of hepatitis with a receiver operating curve. The results were compared with those of serum procollagen type III N-peptide (PIIINP) test. We found that the serum MMP-1 test was superior to the serum PIIINP test in assessing liver necroinflammation. CONCLUSIONS: In addition to the previously reported changes in enzyme activity, MMP-1 proteins in serum decreased during histological progression of chronic hepatitis. The serum MMP-1 test may be useful clinically to differentiate active and inactive types of hepatitis in patients with chronic viral hepatitis.     

血清组织金属蛋白酶抑制因子-1在慢性病毒性肝炎肝纤维化非创伤性诊断中的应用

目的评价血清组织金属蛋白酶抑制因子诊断肝纤维化的应用价值.方法本研究测定了142例慢性病毒性肝炎病人的血清TIMP-1,并与血清生化指标、免疫学指标、影像学指标及肝活检组织学检查进行比较,以决定TIMP-1是否可作为慢性肝病肝纤维化诊断的一项有用的指标.结果TIMP-1与ALT、AST、GGT、ALT、SB、HA、APOAI呈正相关,与白蛋白呈负相关,与PGA、PGAA积分无相关.与肝炎病毒标志(HBsAg、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe、HBVDNA、抗-HCV)无相关,与血脂(TG、TC、高密度脂蛋白,低密度脂蛋白)无相关,血清TIMP-1浓度与CD3、CD8、NK、IgG相关(P＜0.05).将TIMP-1与B超指标作相关性分析,发现与胆囊壁厚度,脾脏厚度和胆囊形态相关(P＜0.05);将TIMP-1与CT和MRI作相关性分析,发现与脾脏厚度相关(P＜0.01);TIMP-1与肝组织学指标之间的相关分析可以看出TIMP-1与肝内炎症和纤维化均显著相关.利用判别分析法计算,以血清TIMP-1判别肝内炎症程度、纤维化的有无和肝硬化有无的准确性分别为72.54%、40.85%和81.25%.结论血清TIMP-1水平反映了慢性肝病肝内炎症和纤维化的一些重要特征,在目前情况下是一种较好的肝纤维化无创伤性诊断和随访指标.     

血清基质金属蛋白酶9和组织基质金属蛋白酶抑制剂1与急性脑梗死的临床关系

目的探讨脑梗死患者血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的动态变化及对临床预后的影响。方法选择急性脑梗死患者60例,按照TOAST分型方法将脑梗死患者分为3组,心源性脑栓塞(CE)组,大动脉粥样硬化性卒中(LAA)组,腔隙性脑梗死(SA)组,每组20例;另选健康体检者20例作为对照组,分别测定急性脑梗死患者发病24 h内,第5、10天的血清MMP-9、TIMP-1含量,记录患者入院时的美国国立卫生研究所脑卒中量表(NIHSS)评分;记录发病1、6个月时的Barthal指数(BI)来评价顸后。结果发病后24 h内,脑梗死各组患者血清MMP-9、TIMP-1含量较对照组均明显升高(P<0.05),其中,CE组和LAA组MMP-9、TIMP-1含量持续至第5天仍未下降.而SA组已逐渐降至正常水平。发病后24 h内血清MMP-9含量与相应时间段NIHSS评分呈正相关。近期预后较好患者发病24 h内血清MMP-9含量明显低于预后较差患者(P<0.05)。结论MMP-9与病情的严重程度有关。脑梗死后24 h内的血清MMIP-9含量是预后的独立预测因素。     

溃疡性结肠炎患者基质金属蛋白酶-2,9和抑制因子-1,2的表达及其意义

目的　在转录和蛋白水平检测基质金属蛋白酶 (MMP) 2 ,9和特异性组织抑制因子(TIMP) 1,2在溃疡性结肠炎 (UC)患者和正常志愿者肠粘膜中的表达情况及活性变化。方法　对病理证实的 2 2例UC和 2 0名健康志愿者在内窥镜下取活检 ,采用NorthernBlot和WesternBlot法分别对MMP 2 ,9及TIMP 1,2进行检测 ,并采用明胶酶谱法测定MMP 2 ,9活性。结果　MMP 2 ,9和TIMP 1在正常肠粘膜中均呈现低表达 ,在患者肠粘膜中表达显著升高 (P <0 .0 1) ,而TIMP 2在两种粘膜中的表达量无明显差别。明胶酶谱结果显示MMP 2 ,9在后者中的活性较前者中显著升高 (P <0 .0 5 ) ,且与炎症程度相关。结论　MMP 2 ,9在UC肠炎肠粘膜上皮重塑过程中具有重要作用 ,在疾病的发生和发展中可能起到促进作用     

TIMP-1和TIMP-2在原发性肝癌生长、浸润及转移中的作用

目的：了解基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitou of metalloproteinase-1，TIMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)mRNA及相关抗原在肝癌组织中的定位和表达状态，探讨TIMP-1和TIMP-2在肝癌组织生长、浸润及转移中所起的作用。方法：以TIMP-1和TIMP-2探针及单克隆抗体（McAb）为试剂，采用原位杂交技术及免疫组织化学法检测原发性肝癌、肝高分化腺癌的肝组织中TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原的表达，并与10例正常肝组织做对照。结果：20例原发性肝癌患者的肝组织中TIMP-1和TIMP-1mRNA及相关抗原表达的阳性率为90%;9例肝高分化腺癌的腺癌组织中无TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原的表达；10例正常肝组织中TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原表达均为阴性；TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原阳性信号呈现为棕黄色颗粒状，分布在肝细胞浆内，未见细胞核着色；无论是原发性肝癌癌组织还是癌周组织中,TIMP-1的表达强于TIMP-2的表达，癌周组织中TIMP-1和TIMP-2mRNA和相关抗原的表达与肝组织病理改变相关，即肝硬化者表达强，慢性肝炎者表达弱，正常肝组织无表达。结论：原发性肝癌的癌组织中存在TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原的表达，其表达强度可能与原发性肝癌的分型有关，它可能通过抑制MMP的活性使ECM降解减少从而阻止癌细胞通过基底膜移出而抑制肝癌细胞向周围浸润及转移。     

干扰素治疗前后慢性乙型肝炎患者的血清学和组织学观察

目的　探讨干扰素治疗前后 ,慢性乙型肝炎患者的血清学和肝组织学变化。方法　于干扰素治疗前 1周内和治疗后 1周内 ,取 2 4例慢性乙型肝炎患者的血清和肝脏活检组织 ,检测其血清ALT、HBsAg、HBcAg、HBeAg、HBVDNA和金属蛋白酶组织抑制剂 1(TIMP 1) ,评价肝组织学活动指数 ,检测肝脏中的HBsAg、HBcAg、HBeAg、活化的肝脏星状细胞 (HSC)和TIMP 1。 结果　治疗后 ,9/ 2 4 (37.5 % )的患者发生了应答反应。与治疗前相比 ,干扰素治疗后慢性乙型肝炎患者血清中的HBVDNA明显下降 (P <0 .0 5 ) ,血清中的TIMP 1、肝脏的组织学活动指数 (HAI)、HBcAg、HBeAg、活化的HSC和TIMP 1均有明显下降 (P <0 .0 5 )。结论　干扰素治疗慢性乙型肝炎患者 ,可以抑制病毒复制 ,减少肝组织中病毒抗原表达 ,减少血清和肝组织中的TIMP 1,减少肝脏中活化的HSC数量。