水通道蛋白4的研究进展

AQP家族是近几年来逐渐被发现并认识的一类水特异性膜内在蛋白,已有200多种水通道广泛分布于动物植物微生物中,在哺乳动物组织中已发现13种水通道蛋白（AQP0-AQP12）。迄今已在脑内已发现7种AQP,别是AQP1,3,4,5,8,9,11,其中水通道蛋白-4（AQP4）为主要在脑组织中表达的水通道蛋白。它参与了脑缺血、脑水肿等病理生理过程,调节水通道蛋白表达水平可能为脑缺血、脑水肿等的治疗提供新的途径。     

肺水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白(aquaporin,AQPS)是新近发现的一组与水通透性有关的细胞膜转运蛋白,是一种可调节进出细胞膜的水通道同源蛋白质家族的总称,它的发现在分子水平上揭示了水跨膜转运的调节机制。AQPS在维持肺脏的液体平衡中起着重要的作用。本文就肺AQPS的研究进展做一综述。1AQPS的结构1988年Agre发现了整合膜蛋白28(CH 1P28)后命名为水     

水通道蛋白9的研究进展

水通道蛋白作为水分子通过磷质双分子层的一种膜蛋白,已经在动植物尤其在哺乳动物被发现并得到鉴定。AQP9（aquaporin9）是水通道蛋白家族中特殊的一员,对水和多种中性溶质均具有转运活性。现已发现,AQP9分布在多种器官组织中。其在机体中组织器官的特异性分布情况及在蛋白分子生物学遗传、结构方面的研究也日渐深入。研究AQP9的分子结构,生化特性,病理生理变化对于了解水代谢疾病的发生机制以及指导临床水代谢疾病的治疗具有十分重要的意义。本文就近年来国内外AQP9分子生物学研究进展作一综述。     

丙泊酚对水通道蛋白家族影响的相关研究

颅内占位性病变、颅脑损伤、脑血管疾病和脑代谢功能障碍等均可引起脑水肿,而水通道蛋白(AQP)是控制脑水肿的重要蛋白。丙泊酚能够通过多种途径影响水通道蛋白,从而控制脑水肿,本文对丙泊酚对AQP的影响进行综述。     

水通道蛋白1与羊水量的关系

目的 研究水通道蛋白1(AQP1)与羊水量关系.方法 运用免疫组织化学法分别检测20例羊水过少(A组)、17例羊水过多(B组)、22例羊水正常(C组)的胎盘、胎膜组织中AQP1的表达;同时每组随机抽取10例用免疫印迹法分别检测胎盘、胎膜组织中AQP1的蛋白表达量.结果 AQP1主要在羊膜上皮细胞、平滑绒毛膜细胞滋养细胞、胎盘合体滋养细胞和血管内皮细胞的胞浆中表达.免疫组织化学法结果显示,AQP1在A、B和C组胎膜的表达强度分别为(5.82±1.33)、(7.94±1.85)和(6.75±1.25)(P<0.01);免疫印迹法结果显示,AQP1在胎膜的表达强度分别为(13.35±3.33)、(19.51±2.84)和(16.21±2.45)(P<0.01).胎膜AQP1蛋白表达最随着羊水量的增加相应上调.结论 胎膜中AQP1的表达随着羊水量的增多而增加.AQ21在胎膜的上调节可能促进了羊水的跨膜转运.     

水通道蛋白在肝硬化肾脏中的研究进展

水对生物是必需的 ,细胞内外水平衡的稳定是维持生命的关键因素之一 ,但水通过生物膜的分子基础并不完全清楚。近年来研究发现水通道蛋白 (ａｑｕａｐｏｒｉｎ ,ＡＱＰ)在介导自由水被动跨生物膜转运 ,维持细胞内外环境的稳定平衡中具有特殊作用 ,ＡＱＰ广泛存在于动物、植物及微生物中 ,每种水通道蛋白有其特异性的组织分布 ,尤其是肾脏ＡＱＰ对肾水的调控起着极为重要的作用。本文就水通道蛋白在肝硬化肾脏中的表达、分布综述如下。1　水通道蛋白的生理、生化特性水通道蛋白是一族广泛存在于人类各种组织细胞中 ,可使水通过浆膜的膜蛋白。…     

大鼠颅脑损伤急性期水通道蛋白4表达变化的研究

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在大鼠重型颅脑损伤时的表达变化及其与脑水肿间的关系。方法98只成年雄性Wistar大鼠,随机分为对照组及实验组(伤后0.5、2、6、12、24、48、72 h共7组,对照组不打击)。制作大鼠液压冲击颅脑损伤模型,分别于伤后0.5、2、6、12、24、48、72 h采用干湿比重法测脑组织含水量,半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑组织AQP4 mRNA表达及其变化。结果脑组织AQP4 mRNA在伤后0.5 h开始表达上调,2、6、12 h依次增高,24 h达到峰值(P<0.05),72 h时仍维持较高水平。脑组织含水量与AQP4 mRNA表达变化一致。经相关性分析,AQP4 mRNA的表达与脑组织含水量呈正相关(r=0.095,P<0.05)。结论重型脑损伤急性期,AQP4 mRNA表达变化与颅脑损伤后脑水肿的形成和发展密切相关。AQP4可能参与重型脑损伤后脑水肿的形成并起重要作用。     

水通道蛋白-4研究进展

1988年，Agre等分离红细胞Rh蛋白时偶然发现一种分子量为28KD的水通道结合膜蛋白(CHIP 28)，于1991年完成其cDNA克隆，并将其成功转染非州爪蟾卵母细胞，结果显示其具有选择性水通透的功能。至此．很多学者都将目光投向这一类只允许水通过的选择性通道蛋白即水通道蛋白(aquaporin，AQP)。到目前为止．已发现的水通道蛋白共有10种，即AQPO至AQP9。     

HPLC-ELSD同时测定知母药材中4种主要皂苷的含量

目的建立同时测定知母药材中4种主要皂苷成分的HPLC-ELSD方法。方法采用Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以水(冰醋酸调节pH 3.3)(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,0～8 min,12%～23%B;8～25 min,23%B;25～35 min,23%～45%B;35～40 min,45%～95%B。蒸发光散射检测器漂移管温度55℃,以氮气为雾化气,压力为4.0 Bar。结果知母皂苷B、知母皂苷E1、知母皂苷BII、知母皂苷A III浓度分别在42.10～252.6μg/ml(r=0.9993)、48.80～292.8μg/ml(r=0.999 1)、192.2～1 153μg/ml(r=0.999 7)、8.512～85.12μg/ml(r=0.998 5)的范围内呈良好的线性关系。4种成分精密度试验RSD<1%,48 h内稳定性RSD<1%,加样回收率为96.04%～102.8%。结论该含量测定方法简便,分离效果好,能同时测定知母皂苷B、知母皂苷E1、知母皂苷BII和知母皂苷AIII 4种有效成分的含量,结果准确可靠。     

知母总多糖的含量测定

目的 :测定知母根茎、根、叶中的总多糖含量。方法 :苯酚—硫酸比色法。结论 :知母根茎中总多糖含量较高 ,同一生长期、不同产地知母根茎中含量存在较大差异。     

知母中的两种新呋甾皂苷

目的研究知母根茎的化学成分。方法采用水煎提取、大孔吸附树脂SP825柱色谱、反相C₁₈柱色谱等进行分离，并通过化学手段和光谱分析(FAB-MS，¹H NMR，13C NMR，¹H-¹H COSY)鉴定其化学结构。结果从知母根茎中分离得到6种甾体皂苷，分别鉴定为：(25S)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-22-羟基-5β-呋甾-2β，3β，26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(知母皂苷N，1)，知母皂苷E_l(2)，(25S)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-22-甲氧基-5β-呋甾-2β，3β，26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(知母皂苷O，3)，知母皂苷E₂(4)，(25R)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-22-羟基-5α-呋甾-2α，3β，26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡糖基-(1→2)-［β-D-吡喃木糖基-(1→3)］-β-D-吡喃葡糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷(purpureagitosid，5)，marcogenin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-galactopyranoside (6)。结论化合物1和3为新化合物，命名为知母皂苷N和知母皂苷O，化合物5为首次从知母中分离得到。     

知母盐炙前后体外降血糖作用的研究

目的利用Caco-2细胞模型比较知母盐炙前后的降血糖作用,并考察其作用机制,为盐知母炮制原理的阐明提供依据。方法建立Caco-2单层细胞模型,采用CCK-8细胞活力试剂盒检测5 000、2 500、500、250、50、25、5、2.5、0.5、0.25μg/m L生、盐知母水煎液细胞毒性,来确定药物最大毒性剂量。以蔗糖酶和麦芽糖酶底物,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖质量浓度,计算抑制率,比较其对Caco-2单层细胞上蔗糖酶和麦芽糖酶活力的影响。葡萄糖吸收实验测定剩余葡萄糖的质量浓度,比较生、盐知母对Caco-2细胞吸收和转运葡萄糖的影响。结果当生、盐知母质量浓度≤250μg/m L时,Caco-2细胞可进行细胞实验。实验选取了50、250μg/m L两个质量浓度。生、盐知母水煎液50、250μg/m L对蔗糖酶、麦芽糖酶活性均有抑制作用,且盐知母水煎液对蔗糖酶、麦芽糖酶的抑制作用均优于生知母。生、盐知母水煎液均有降低细胞对葡萄糖吸收的趋势,且呈现剂量相关性,但效果不显著。盐知母水煎液对葡萄糖吸收的抑制作用略好于生知母(P0.05)。结论盐知母对Caco-2细胞的降糖作用优于生知母,其降糖机制可能主要体现在α-葡萄糖苷酶上,而对葡萄糖吸收作用影响较小。     

The effect of Nepeta cataria extract on adherence and enzyme production of Staphylococcus aureus

Nepeta cataria L., commonly known as catnip, is a perennial herb with a considerable folkloric reputation. A diethyl ether extract of this plant has been shown to have antimicrobial activity against fungi and Gram-positive bacteria. The aim of this work was to study the activity of N. cataria extract on 44 Staphylococcus aureus strains, some resistant to methicillin, and S. aureus 6538P (American Type Culture Collection) by evaluating the effect of subminimum inhibitory concentrations on coagulase, DNAse, thermonuclease and lipase production, and on in-vitro adherence. DNAse, thermonuclease and lipase were inhibited by concentrations equal to 1/2 and 1/4 MIC. A reduction of adherence was also observed.     

啤酒花HPLC指纹图谱研究

目的 建立啤酒花HPLC指纹图谱。方法 色谱柱：Diamonsil C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱,检测波长358 nm,柱压10.2 MPa,柱温30℃,进样量10 μl,流速1.0 ml/min。结果 首次建立啤酒花HPLC指纹图谱共有模式,对其19个共有峰进行标定,并对其中的黄腐酚、类葎草酮、葎草酮、加葎草酮、类蛇麻酮、蛇麻酮、加蛇麻酮进行指认。26批药材中有5批药材相似度低于或等于0.9,而该5批均为野生品种。结论 该方法高速有效,可准确地对啤酒花栽培种、野生种进行区分,为啤酒花的品质评价研究奠定基础。     

补骨脂水提药渣大鼠三个月长期毒性试验研究

目的 研究补骨脂水提药渣大鼠ig给药的长期毒性。方法 SD大鼠70只,按体质量、性别随机分为5组：对照组、补骨脂生药粉高、低剂量组,补骨脂水提药渣高、低剂量组（各组高、低剂量均相当于生药6、3 g/kg,分别为临床等效剂量的11.11、5.56倍）,每组14只,雌雄各半,每日ig给药1次,连续给药12周。每周称大鼠体质量,药结束后,取心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺,称质量并计算脏器系数;血细胞分析仪检测血液学指标;全自动生化仪血清生化学指标;试剂盒法检测大鼠肝脏中氧化应激指标;做肝脏和肾脏组织病理学检查。结果 与对照组比较,生药粉和药渣高剂量组雄性大鼠体质量均显著下降（P<0.05）,而药渣组雌性大鼠体质量随给药时间延长无显著性变化;补骨脂生药粉和水提药渣雌性、雄性大鼠的肝系数均显著升高（P<0.01）;雄性大鼠生药粉和药渣高剂量组、雌性大鼠生药粉组和药渣高剂量组肾系数显著升高（P<0.05、0.01、0.001）;雄性大鼠生药粉高剂量组血小板（PLT）水平,药渣低剂量组红细胞（RBC）水平显著升高,生药粉低剂量组和药渣低剂量组白细胞（WBC）水平,药渣高剂量组PLT水平显著下降,雌性大鼠各给药组PLT均显著下降（P<0.05）;雄性大鼠生药粉组碱性磷酸酶（ALP）和三酰甘油（TG）水平均显著下降,总蛋白（TP）水平显著升高,生药粉低剂量组尿素氨（BUN）水平显著下降（P<0.05、0.01、0.001）;药渣高剂量组TP和白蛋白（ALB）、药渣低剂量组天冬氨酸转氨酶（AST）显著升高,丙氨酸转氨酶（ALT）和ALP显著下降（P<0.05、0.01、0.001）;雄性大鼠生药粉高剂量组和药渣组丙二醛（MDA）显著升高（P<0.05）,雌性大鼠生药粉组MDA和总抗氧化能力（T-AOC）、药渣组MDA均显著下降（P<0.05、0.01）。结论 长时间给予大剂量补骨脂水提药渣,对大鼠肝脏和肾脏功能均造成一定损害。     

去甲泽拉木醛的体外抗真菌作用研究

目的 研究去甲泽拉木醛的体外抗真菌作用。方法 采用微量液基稀释法测定去甲泽拉木醛与氟康唑单独应用于23株真菌的最低抑菌浓度（MIC）,以棋盘式微量液基稀释法测定两药联合抗耐药白念珠菌的协同指数（FICI）,判断两药联合抗菌效果;并通过纸片扩散实验直观验证两药联合的协同作用。最后通过CCK-8法测定去甲泽拉木醛的细胞毒性。结果 去甲泽拉木醛单用时呈现广谱的抗真菌作用,MIC范围为4~32 g/L。两药联用时,可将氟康唑的有效浓度从大于64 g/L降至0.25 g/L,FICI值介于0.129~0.254之间,两药表现出协同抗耐药白念珠菌作用。CCK-8结果显示,去甲泽拉木醛在高于MIC值4倍浓度下才展示出细胞毒性。结论 去甲泽拉木醛表现出较好的抗真菌作用,与氟康唑联合时有很好的协同效果,且毒性较低。     

大黄、枳实、厚朴不同炮制品对小承气汤中药效组分的影响

目的研究大黄、枳实、厚朴饮片变化对小承气汤药效组分的影响,以期为临床的合理应用和饮片的质量标准提供参考。方法采用HPLC法分别测定各类成分。大黄游离蒽醌类(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–0.1%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长254 nm。大黄结合蒽醌类(番泻苷B、番泻苷A):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;柱温30℃;进样量10μL;检测波长340 nm。枳实黄酮苷类(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–水;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温40℃;进样量10μL;检测波长283 nm。厚朴木脂素类成分(和厚朴酚、厚朴酚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长294 nm。结果小承气汤配伍剂量(大黄12 g–炒枳实9 g–姜厚朴6 g)不变,大黄、枳实、厚朴饮片改变时,小承气汤药效组分总量变化规律为:大黄–枳实–姜厚朴酒大黄–炒枳实–姜厚朴熟大黄–炒枳实–姜厚朴大黄炭–炒枳实–姜厚朴≈小承气汤大黄–炒枳实–厚朴,变化率分别为酒大黄组(6.561%)、熟大黄组(4.222%)、大黄炭组(0.118%)、枳实组(30.186%)、厚朴组(-11.218%)。除大黄炭组外,其余组的药效组分总量皆明显变化,其中枳实组变化最明显。结论同一味药材的不同炮制品在小承气汤处方中药效组分不同,对其他药味的影响亦不同,在小承气汤处方配伍中不可随意替代。     

鱼腥草不同溶剂提取物的抗病毒活性研究

目的 研究鱼腥草不同溶剂提取物体外抗手足口病毒（enterovirus type 71,EV71）、单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type 1,HSV-1）、呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）、柯萨奇病毒B3型（coxsackie virus type B3,CV-B3）、柯萨奇病毒B5型（coxsackie virus type B5,CV-B5）的活性。方法 采用细胞体外培养技术,建立不同病毒感染模型,用鱼腥草不同溶剂提取物进行治疗,通过细胞融合病变观察法以及MTT比色法检测得到治疗指数（therapeutic index,TI）,以此判定其体外抗病毒活性。结果 体外抗病毒试验结果证明,鱼腥草不同溶剂提取物对HSV-1、EV71抗病毒作用较强,对RSV、CV-B3、CV-B5的效果甚微或无明显作用。鱼腥草醇提物中黄酮类成分含量较高,抗病毒活性相对较高;30%,50%,75%乙醇提取物以及水提醇沉处理沉淀物对HSV-1的TI值分别是81.68,67.23,41.91,32.61,均高于阳性对照阿昔洛韦TI值23.43,显示鱼腥草水醇提取物抗HSV-1的活性较强;75%,50%,30%乙醇提取物对EV71的TI值分别是19.58,20.13,18.84,效果较为显著。结论 研究证实鱼腥草提取物对HSV-1、EV71的抗病毒活性较高,可一定程度为临床应用鱼腥草治疗这2种病毒感染引发的疾病提供参考依据。