碳青酶烯类抗生素耐药弗劳地枸橼酸杆菌KPC-2基因的检测

目的研究弗劳地枸橼酸杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。方法采用琼脂对倍稀释法检测弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南以及其他常见药物的最低抑菌浓度(MIC)。等电聚集电泳分析其β-内酰胺酶类型,聚合酶链反应(PCR)和DNA序列分析检测β-内酰胺酶基因型,接合试验分析其耐药质粒传递情况。结果弗劳地枸橼酸杆菌对亚胺培南和美罗培南的MIC均为64 mg·L-1,对青霉素类、头孢菌素类、头孢西丁、氨曲南和氨基糖苷类均耐药。转移接合结果显示对亚胺培南和美罗培南的耐药性可以通过质粒转移。等电聚焦电泳结果显示转移接合子具有等电点(PI)约为5.0、7.5的2种β-内酰胺酶。PCR检测及序列分析结果显示该菌产生KPC-2基因。结论 KPC-2型碳青酶烯酶的产生是引起弗劳地枸橼酸杆菌对碳青酶烯酶耐药的主要原因,并且该耐药性能通过质粒进行转移。     

弗劳地枸橼酸杆菌败血症10例报告

近年来枸橼酸杆菌败血症报告日渐增多,但对该菌的致病能力看法尚不尽统一,有人认为该菌属腐生菌不致病,然而,临床上发现由该菌引起的感染常常较为严重。现将本院1984年6月至1990年6月经血培养证实的10例结合文献加以分析报告。临床资料一、一般情况 10例中男7例,女3例,年龄17～66岁,40岁以上6例,院内感染2例。     

质粒介导的AmpC β-内酰胺酶的研究进展

近些年来研究表明，质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶主要由肠杆菌科细菌产生，具有比ESBLs酶更广的水解底物谱，能有效水解三代头孢菌素类、单环类及头霉素类抗生素，且不受酶抑制剂所抑制。携带编码ampC酶基因质粒快速复制和可转移性的特点，导致耐药性广泛传播，给临床治疗带来极大困难。本文就质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶的来源、流行病学特点、分类及基因表达调控等方面进行综述。     

大肠埃希菌质粒介导AmpC酶基因检测及耐药性分析

目的 了解深圳市人民医院质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的基因型特点和耐药特性,为临床抗菌药物的合理使用提供依据.方法 收集深圳市人民医院头孢西丁耐药的大肠埃希菌临床分离株110株.提取菌株的质粒DNA,采用多重PCR法检测AmpC酶基因,并应用DNA测序确定AmpC酶的基因型;用K-B法对其进行药物敏感试验.结果 110株对头孢西丁耐药的大肠埃希菌中,13株(11.8%)AmpC酶基因扩增阳性,测序结果显示12株为DHA-1,1株为CMY-2.AmpC酶基因阳性株对亚胺培南和美罗培南100%敏感,对其它大多数药物敏感性较低.结论 该院大肠埃希菌临床分离株中质粒介导AmpC酶基因型主要为DHA-1型,对多种抗生素的耐药性高.     

天津地区医院感染鲍曼不动杆菌产ESBLs和AmpC酶的检测及耐药性分析

目的 了解天津地区五所三甲医院鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBs)和AmpC酶的情况及耐药特点.方法 采用酶提取物三维试验方法分别检测鲍曼不动杆菌产ESBLs和AmpC酶的情况,并以PCR方法检测ESBLs基因.以KB法检测72株鲍曼不动杆菌对12种抗生素的耐药性.结果 72株鲍曼不动杆菌中,共检测到ESBLs阳性株16株.阳性率为22.2%(11/72);AmpC酶阳性株18株.阳性率为25.0%(18/72).11株产TEM型ESBLs,4株产PER型ESBLs,1株产VEB·l型ESBLs.ESBLs阳性株和AmpC酶阳性株均呈多重耐药,产酶株对抗生素的耐药率明显高于非产酶株.结论 产AmpC酶是鲍曼不动杆菌医院感染多重耐药主要原因,应加强对AmpC酶的检测及医院内感染的控制工作.     

质粒介导的AmpC β-内酰胺酶

质粒介导的AmpC β-内酰胺酶是近十余年来发现的一种新型C类β-内酰胺酶。根据与染色体C类酶氨基酸序列的同源性，将其分为6组。此类酶对第一、二、三代头孢菌素、头霉素、氨曲南耐药，外膜蛋白丢失的菌株甚至出现对碳青霉烯类的耐药。质粒介导的AmpC β-内酰胺酶耐药基因在质粒间及质粒与染色体间的转移主要是通过转座子或整合子为工具实现的。与染色体介导AmpC酶不同，除DHA型外，大多数质粒介导的AmpC酶的产生是不可诱导的。     

阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶基因检测及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶的产生情况，研究β-内酰胺酶的基因型别，并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法用酶提取三维试验检测ESBLs和AmpC酶，聚合酶链反应（PCR）扩增β-内酰胺酶的基因；VITEK全自动药敏分析系统和KB法检测细菌耐药性。结果101株阴沟肠杆菌中，检出ESBLs阳性株39株，高产AmpC酶阳性株53株，其中16株ESBLs和AmpC酶均阳性，非产酶菌25株；12株AmpC酶阳性菌中，7株扩增出blaDHA。基因，8株扩增出6laMIR基因，其中5株同时携带blaDBA．和blaMIR基因，1株同时携带blaMIR和blaFOX基因，4株三维试验阴性菌株blaMIR基因阳性；16株ESBLs阳性菌中，8株扩增出blaTEM基因，2株ESBLs三维试验阴性菌株blaTEM基因阳性，未检出blaSHV基因。阴沟肠杆菌对多种抗生素高度耐药，产酶菌株的耐药性明显高于非产酶株。结论阴沟肠杆菌中ESBLs和AmpC酶检出率均很高，AmpC酶以blaDHA、blaMIR基因型为主。产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要原因。     

儿童感染革兰阴性杆菌中产AmpC酶的基因型分析

目的:研究儿童常见革兰阴性杆菌ampC基因和AmpC酶发生率,分析其产酶与非产酶菌株对抗生素的耐药性。方法:对2002年~2004年我院临床分离的革兰阴性杆菌4 022株进行细菌鉴定,K-B法进行药敏试验;选择确认的产超广谱-β内酰胺酶(ESBLs)菌108株,用聚合酶链反应(PCR)扩增ampC基因;用酶粗提物头孢西丁三维试验检测AmpC酶菌,对产酶株与非产酶株的药敏进行对比分析。结果:108株ESBLs菌中检出70株ampC基因阳性株(占64.8%),7株细菌产AmpC酶(占6.5%)。产AmpC酶菌株对头孢他啶、头孢曲松钠、氧哌嗪青霉素、氨苄青霉素、氨曲南的耐药率分别为85.7%、85.7%、71.4%、79.4%、79.4%;非产AmpC酶菌株对头孢曲松钠、氧哌嗪青霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、氨曲南的耐药率分别为50.8%、55.6%、55.6%、70.3%、54.0%;2种菌株对亚胺培南的耐药率都最低,环丙沙星次之。结论:ampC基因检出率明显高于产AmpC酶,而产AmpC酶菌对常见抗生素的耐药性高于非产AmpC酶菌。     

安徽省产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的耐药性及基因型分析

目的 了解2007年安徽地区产质粒介导AmpC酶的大肠埃希菌枪出率及产酶株基因型.方法 三维实验进行AmpC酶筛选;并行转移接合实验,PCR检测AmpC酶基因,琼脂稀释法进行药物敏感试验.结果 21株大肠埃希菌三维实验阳性,占所有临床分离菌株的5.9%(21/355),19株经PCR检测携带ampC基因,16株转移接合成功,经序列分析表明,9株CIT阳性结果,6株DHA阳性结果,3株EBC阳性结果;1株同时携带EBC及DHA基因.其中有1株EBC型新基因被枪出(序列号为FJ237369);药敏结果显示临床分离菌株及接合子对多种抗菌药物耐药,对头孢吡肟,亚胺培南,美罗培南相对较敏感.结论 安徽地区大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶以CIT型和DHA型为主,同时存在变异型,临床可选用第四代头孢菌素类抗菌药物,碳青霉烯类抗菌药物抗感染治疗.     

儿科重症监护病房鲍曼不动杆菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解是医院儿科重症监护病房（PICU）鲍曼不动杆菌感染分布和产AmpC酶情况及耐药性。方法收集2011年1月至2012年9月医院儿科病房分离的饱曼不动杆菌．采用三维试验检测AmpC酶;用K-B纸片法进行药敏实验。结果儿科病房共检出226株鲍曼不动杆菌,产AmpC酶29株,AmpC酶阳性率为12.83％;其中PICU检出132株,25株产AmpC酶,AmpC酶阳性率18．94％;非PICU检出94株,产AmpC酶4株,AxnpC酶阳性率为4026％。并且PICU感染鲍曼不动杆菌的耐药性明显高于非PICU科室感染。结论P1CU感染鲍曼不动杆菌产AmpC酶的分离率及耐药率都较高,临床应加强耐药监测,根据药敏结果选川抗菌活性相当的㈣类抗生素中低耐药性药物,以减少耐药菌株的产生与蔓延。     

产AmpC酶与非产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性研究

目的:探讨我院产AmpC酶和非产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性。方法:将住院患者的痰液、尿液、创口分泌液和阴道分泌液标本中分离的131株革兰阴性杆菌对12种抗菌药进行药敏试验和耐药率分析,并通过三维试验检测AmpC酶。结果:131株革兰阴性杆菌中产AmpC酶菌为15株,占菌株数11.5%。产AmpC酶菌株对各种抗菌药的耐药率明显高于非产AmpC酶菌株。革兰阴性杆菌对阿莫西林/克拉维酸、头孢西丁、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率高于亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟。结论:革兰阴性杆菌的耐药性与AmpC酶有关。亚胺培南可考虑用作治疗产AmpC酶革兰阴性杆菌感染的首选药物。     

鲍曼不动杆菌产去阻遏持续高产AmpC酶检测及耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌产去阻遏持续高产AmpC酶情况及对21种抗菌药物的耐药性。方法对我院2004年~2005年从临床标本分离出的62株鲍曼不动杆菌进行产去阻遏持续高产AmpC酶检测及对21种抗菌药物耐药性进行统计分析。结果62株鲍曼不动杆菌中,产去阻遏持续高产AmpC酶菌株共19株,阳性率为30.65%;除加替沙星外,产去阻遏持续高产AmpC酶菌株对其余20种抗菌药物的耐药率明显高于不产去阻遏持续高产AmpC酶的菌株。结论产去阻遏持续高产AmpC酶的鲍曼不动杆菌日益增多,耐药率高,临床治疗应首选亚胺培南。     

下呼吸道感染革兰阴性杆菌AmpC酶的检测与耐药性分析

目的 分析我院患者下呼吸道产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性,为临床合理应用抗生素提供依据.方法 用头孢西丁纸片对产AmpC酶菌株进行初筛,用改良Hodge试验进行确证,用K-B法测定这些菌株对21种抗菌药物的耐药性.结果 978株革兰阴性杆菌共检出产AmpC酶菌263株,检出率26.89%.产AmpC酶菌株对青霉素、一、二、三代头孢菌素类药物的耐药率在66% 以上,对碳青霉烯类、四代头孢菌素、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率在25%以下.结论 AmpC酶是形成多重耐药菌的重要原因之一,常规检测AmpC酶对有效控制产 AmpC酶革兰阴性杆菌引发的医院感染是十分必要的.     

我院2012年10月-2013年3月革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)革兰阴性杆菌的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法:收集我院2012年10月-2013年3月临床分离出的革兰阴性杆菌。用头孢硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶情况,双纸片法检测产ESBLs情况,头孢西丁三维试验检测产AmpC酶情况,以确定产酶表型。用K-B法进行药敏检测。结果:103株革兰阴性杆菌中,单产AmpC酶菌42株(40.8%),单产ESBLs菌21株(20.4%),同时产ESBLs和AmpC酶菌12株(11.7%)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂复方制剂如哌拉西林/他唑巴坦,以及碳青霉烯类抗生素亚胺培南和氨基糖苷类抗生素阿米卡星的耐药率均较低。非发酵菌铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各抗生素耐药率均较高。结论:各革兰阴性杆菌产酶菌株对多种抗生素的耐药率较高,产ESBLs和AmpC酶可能是导致革兰阴性杆菌耐药的主要机制之一。     

阴沟肠杆菌质粒介导AmpC酶的基因检测

<正>为了解我院医院感染的阴沟肠杆菌产质粒介导AmpC酶的发生情况,我们对头孢西丁(FOX)三维试验阳性的菌株进行了质粒提取、基因的检测分型和质粒接合实验的研究,报告如下。     

下呼吸道标本肺炎克雷伯菌耐药性分析及其AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶检测

医院感染肺炎克雷伯菌是引起临床呼吸道感染常见的革兰阴性杆菌。因其具有容纳外源性遗传物质的特性，作为医院感染的重要致病菌，继超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）后，又出现质粒介导的AmpC酶，且质粒介导者因其具有较快的传播速度和较强的耐药性，日益受到人们的重视。近年来随着广谱抗生素的大量使用，肺炎克雷伯菌耐药性日趋严重，     

AmpCβ-内酰胺酶的产生机制及检测方法学进展

AmpCβ-内酰胺酶存在于许多革兰氏阴性菌中,最初由染色体介导,目前已转移到质粒上。它与超广谱p一内酰胺酶(EsBLs)的最主要表型区别是耐药谱的扩大且不能被克拉维酸抑制。诱导表达是染色体AmpC酶表达的典型模式,受染色体amp操纵子调控。基因突变造成的高产表达和新型质粒AmpC酶的不断出现威胁着感染性疾病的治疗。目前检测AmpC酶的方法有纸片诱导、抑制剂协同、三维试验、等电聚焦、基因检测等。需要发展简便、快速、准确的检测技术应用于临床实验室,指导合理正确使用抗生素,以控制AmpC酶所致耐药性的蔓延。     

医院内G-杆菌产酶检测及耐药性分析

目的了解医院常见G-杆菌的产酶及耐药情况为临床控制感染提供依据。方法收集2002-01～12住院病人分离的对三代头孢菌素至少有一种耐药的易产酶G-杆菌,采用传统K-B法进行药物监测,并使用改良的三维试验法检测细菌产酶情况。结果所监测大肠埃希菌与肺炎克雷伯杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率为94.0%、100%,大肠埃希菌AmpC的检出率为3.0%;易产诱导酶阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、粘质沙雷菌、奇异变形杆菌ESBLs检出率分别为47.0%、86.0%、80.0%、100%、40.0%。其中阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌AmpC酶的检出率为29.0%、14.0%、13.0%;鲍曼不动杆菌AmpC的检出率为33.0%;另外有7.0%的弗劳地枸橼酸杆菌、3.0%的大肠埃希菌产SSBL。亚胺培南是治疗严重易产酶细菌感染的首选药物。结论G-杆菌存在严重耐药,要正确区分细菌产酶机制,为临床控制感染提供正确的依据。