右美托咪定对大鼠离体肺缺血-再灌注损伤时ERK 1/2和Akt激活的影响

目的评价右美托咪定对大鼠离体肺缺血-再灌注损伤(lung ischemia-reperfusion injury,LIRI)时胞外信号调节激酶(ERK 1/2)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)激活的影响。方法成年雄性SD大鼠45只,随机分为三组:对照组(C组)、缺血-再灌注组(IR组)和右美托咪定组(DEX组),每组15只。C组大鼠离体肺在IL-2离体肺灌流系统内维持正常的生理活动,只通气和灌流150 min;IR组和DEX组大鼠离体肺在IL-2离体肺灌流系统中维持15 min后,停止通气和灌流60min后再通气和复灌75 min;DEX组复灌开始时于离体灌流液中加入右美托咪定10 nmol/L。C组和IR组分别于灌流75 min和复灌开始时在离体灌流液中加入等体积生理盐水。检测肺泡损伤率(IAR)。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肺组织ERK 1/2、Akt m RNA表达量,Western blot法测定磷酸化-ERK(p-ERK 1/2)、磷酸化-Akt(p-Akt)蛋白含量。结果与C组比较,IR组和DEX组IAR、肺组织ERK 1/2、Akt m RNA表达量和p-ERK 1/2及p-Akt蛋白含量均明显升高(P0.05);与IR组比较,DEX组IAR、肺组织ERK 1/2、Akt m RNA表达量和p-ERK1/2及p-Akt蛋白含量均明显降低(P0.05)。结论右美托咪定可减轻大鼠离体LIRI,其机制可能与其抑制ERK 1/2和Akt的激活有关。     

缝隙连接Cx43在右美托咪定预防缺血-再灌注离体兔心复灌性心律失常中的作用

目的观察右美托咪定对离体家兔心缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤后心肌复极不均一性及Cx43表达的影响,探讨Cx43在右美托咪定抑制IR损伤心肌复极不均一性中的作用。方法健康成年家兔18只,体重(2.0±0.5)kg,成功制备Langendorff离体心脏灌注模型,KH液平衡灌流15min后随机均分为三组,每组6只。空白对照组(C组):持续平衡灌注37℃K-H液150min;IR组:K-H液继续灌流15 min后停灌,注射4℃Thomas液10 ml/kg使心脏停搏60min,心脏周围用4℃Thomas液保护,30min半量复灌4℃Thomas液5ml/kg,60min时复灌K-H液;右美托咪定组(DEX组):于K-H液及Thomas液中加入右美托咪定25ng/ml,余同IR组。记录平衡灌流15min(T_0)、继续灌流15min(平衡30min,T_1)、复灌30min(平衡120min,T_2)、复灌60min(平衡150min,T_3)的HR及三层心肌(内膜、中膜、外膜)90%单相动作电位时程(MAPD90)并以此计算跨室壁复极离散度(transmural dispersion of repolarization,TDR),观察心脏复灌时心律失常发生情况、复跳时间,T_3时取左心室组织采用Western blot法、免疫组化法检测左室心肌组织Cx43的表达及分布。结果 DEX组复跳时间明显短于IR组(P0.05);与T_0时比较,T_2、T_3时IR组、DEX组HR明显减慢,TDR明显增大(P0.05);与IR组比较,T_1~T_3时DEX组HR明显减慢,T_2、T_3时DEX组TDR明显减小(P0.05)。与C组比较,IR组、DEX组Cx43表达明显减少(P0.05)且分布不均,且DEX组明显多于IR组(P0.05)。结论右美托咪定抑制IR损伤后心肌复极不均一性,从而起到稳定IR损伤心肌心电传导,降低复灌性心律失常发生率的作用,其机制可能与右美托咪定抑制缝隙连接失偶联、抑制Cx43表达减少及分布紊乱有关。     

盐酸右美托咪定对缺血-再灌注损伤大鼠心肌Toll样受体4/核因子-κB信号通路的作用

目的研究盐酸右美托咪定对心肌缺血-再灌注损伤大鼠心肌组织中Toll样受体(toll-like receptor,TLR)-4mRNA、核因子(nuclear factor,NF)-κB mRNA的表达,探讨盐酸右美托咪定对心肌缺血-再灌注损伤大鼠心肌TLR-4/NF-κB信号通路的影响。方法健康3个月龄SD雄性大鼠21只,体重250~300g,随机均分为三组:假手术组(sham组)、缺血-再灌注组(IR组)、缺血-再灌注+盐酸右美托咪定组(DEX组)。采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,sham组左冠状动脉穿线不结扎。Sham组和IR组在结扎前30min经腹腔注射生理盐水100μg/kg,DEX组在结扎前30min经腹腔注射盐酸右美托咪定注射液100μg/kg(4μg/ml)。实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测TLR-4mRNA和NF-κB mRNA的表达。结果sham、IR和DEX组的TRL-4mRNA分别为(2.21±0.11)、(7.83±0.35)和(3.91±0.21),sham、IR和DEX组的NF-κB mRNA分别为(0.013±0.166)、(0.051±0.016)和(0.015±0.004),IR、DEX组的TRL-4mRNA和NF-κB mRNA的表达明显高于sham组,且DEX组TRL-4mRNA和NF-κB mRNA的表达明显低于IR组(P0.05)。结论盐酸右美托咪定可降低缺血-再灌注损伤大鼠心肌组织TLR-4mRNA和NF-κBmRNA的表达,盐酸右美托咪定可以调控TLR/NF-κB信号通路的转导,抑制炎症反应,减轻心肌缺血-再灌注损伤,保护心肌。     

右美托咪定对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后抗氧化能力的影响

目的观察右美托咪定预先处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后抗氧化能力的影响。方法健康雄性SD大鼠42只,体重250~280g,随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(IR组)和右美托咪定组(DEX组),每组14只。采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,具体方法为线栓法栓塞大脑中动脉2h后恢复再灌注。Sham组仅分离血管,不留置线栓;于大脑中动脉栓塞前30 min DEX组给予腹腔注射盐酸右美托咪定注射液100μg/kg(4μg/ml),IR组腹腔注射等量的生理盐水。三组均于再灌注24h后取8只大鼠进行神经功能评分,测定脑梗死体积;剩余6只大鼠取脑组织检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果 IR组和DEX组神经功能评分明显高于Sham组,脑梗死体积明显大于Sham组,SOD、GSH-PX、GR、CAT活性明显低于Sham组(P0.05);DEX组大鼠神经功能评分明显低于IR组,脑梗死体积明显小于IR组,SOD、GSH-PX、GR、CAT活性明显高于IR组(P0.05)。结论右美托咪定有保护内源性抗氧化酶活性作用,可能有助于减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤。     

右美托咪定对脂多糖诱导的脓毒症大鼠全身炎症反应和肺损伤的影响

目的观察脂多糖(LPS)对大鼠血浆和肺组织中的炎性因子和Toll样受体4(TLR4)表达的影响及右美托咪定的干预作用。方法雄性SD大鼠40只,250~300g,随机分为四组。Control组(n=10)生理盐水1ml·kg~(-1)·h~(-1)大鼠尾静脉泵注6h;DEX组(n=10)右美托咪定(负荷量6.5μg·kg~(-1)·h~(-1),10min;5μg·kg~(-1)·h~(-1)维持)大鼠尾静脉泵注6h;LPS组(n=10)经大鼠尾静脉注射7.5mg/kg的LPS后继续生理盐水泵注6h;LPS+DEX组(n=10)经大鼠尾静脉注射7.5mg/kg的LPS后泵注右美托咪定6h。以6h为实验终结点,并于此时行右心室取血和肺组织标本的制备。采用ELISA法检测血浆IL-1、IL-6、TNF-α浓度,Western blot法检测肺组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB蛋白含量;检测大鼠肺组织湿/干比(W/D);并用Murakami法评测肺损伤程度。结果与Control组比较,LPS组大鼠血浆IL-1、IL-6和TNF-α浓度明显升高,肺组织中的TLR4、MyD88、NF-κB蛋白含量明显升高(P0.01),肺W/D明显升高;LPS+DEX组上述指标差异均无统计学意义。Control组和DEX组未见明显肺损伤,LPS组肺间质水肿、炎性细胞浸润明显,LPS+DEX组肺损伤程度明显减轻(P0.01)。结论 LPS的刺激可以明显升高大鼠血浆中炎性因子以及肺组织中TLR4的表达水平,右美托咪定的干预可以减轻这一趋势,缓解大鼠的全身炎症和肺水肿的程度。     

右美托咪定对家兔离体心脏缺血-再灌注时心肌单相动作电位及跨室壁复极离散度的影响

目的观察右美托咪定对家兔离体心脏缺血-再灌注心肌动作电位及跨室壁复极离散度的影响,探讨其对缺血-再灌注心肌电生理特性的作用。方法健康成年家兔18只,体重(2.0±0.5)kg,成功制备Langendorff离体心脏灌注模型,K-H液平衡灌注15min后,随机分为三组,每组6只:空白对照组(C组):持续平衡灌注37℃K-H液150min;缺血-再灌注组(IR组):K-H液继续灌注15min后停止,注射Thomas液(4℃,10 ml/kg)使心脏停搏60 min,心脏周围用低温(4℃)Thomas液保护,30min半量复灌Thomas液(4℃,5ml/kg),60min时复灌K-H液;右美托咪定组(DEX组):于K-H液及Thomas液中加入右美托咪定(25ng/ml),余同IR组。记录平衡灌注15min(T0)、继续灌注15min/平衡30min(T1)、复灌30min/平衡120min(T2)、复灌60min/平衡150min(T3)的HR及三层心肌[内膜(Endo)、中膜(Mid)、外膜(Epi)]单相动作电位振幅(monophonic action potential amplitude,MAPA),0相最大上升速率(Vmax),90%单相动作电位时程(monophonic action potential duration,MAPD90)并计算跨室壁复极离散度(transmural dispersion of repolarization,TDR),观察心脏复灌时心律失常、复跳时间,均不使用药物恢复心律。结果 DEX组心脏复跳时间(16.67±3.78)s明显短于IR组(46.33±7.29)s(P0.05);心脏复跳时IR组有6例发生心律失常,2min内有2例恢复正常节律;DEX组有2例发生心律失常,2min内有1例恢复正常节律。与T0时比较,T2、T3时IR组,T1~T3时DEX组HR明显减慢(P0.05);与T1时比较,T2、T3时DEX组HR明显减慢(P0.05);与T2时和C组比较,T3时DEX组HR明显减慢(P0.05);T1~T3时DEX组HR明显慢于IR组(P0.05)。与T0时比较,T1时DEX组Mid部位,T2、T3时DEX组Epi、Mid、Endo部位的MAPD90明显延长(P0.05)。与T1时比较,T3时DEX组Epi、Mid、Endo部位的MAPD90明显延长(P0.05);T3时DEX组Mid部位的MAPD90明显长于C组(P0.05);T2、T3时DEX组Epi、Mid、Endo部位的MAPD90明显长于IR组(P0.05)。与T0时和C组比较,T2、T3时IR组,T1~T3时DEX组TDR明显增大(P0.05);T2、T3时DEX组TDR明显小于IR组(P0.05)。结论右美托咪定能够延长MAPD、抑制缺血-再灌注损伤后心肌复极不均一性,具有稳定缺血-再灌注心肌电生理特性的作用。     

右美托咪定对脓毒症大鼠脑组织炎性反应的影响

目的 评价右美托咪定对脓毒症大鼠脑组织炎性反应的影响.方法 健康雄性SD大鼠72只,10周龄,体重250 ～ 280 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=18):对照组(C组)、脓毒症组(LPS组)、注射用水组(DW组)和右美托咪定组(DEX组).LPS组、DW组和DEX组腹腔注射LPS5mg/kg(溶于1 ml生理盐水中)制备大鼠脓毒症模型;C组腹腔注射生理盐水1ml.DW组侧脑室注射注射用水20μl,DEX组侧脑室注射右美托咪定3μg/kg(溶于20μl注射用水中).分别于开始给药后1、2和6h时处死6只大鼠,取海马组织,采用ELISA法测定TNF-α和IL-6的含量,采用RT-PCR法测定TLR4 mRNA的表达.结果 与C组比较,LPS组开始给药后各时点海马组织IL-6和TNF-α的含量升高(P＜0.05);与LPS组比较,DW组开始给药后各时点海马组织IL-6和TNF-α的含量差异无统计学意义(P＞0.05),TLR4mRNA表达上调(P＜0.05);与DW组比较,DEX组开始给药后各时点海马组织IL-6和TNF-α的含量降低,开始给药后2和6h时海马组织TLR4 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 右美托咪定可减轻脓毒症大鼠脑组织炎性反应,可能与下调TLR4 mRNA的表达有关.     

右美托咪定预先给药对大鼠肢体缺血-再灌注诱发心肌损伤的影响

目的探讨右美托咪定预先给药对肢体缺血-再灌注大鼠诱发心肌损伤的影响。方法健康清洁级SD大鼠30只,6周龄,体重200~250g,采用随机数字表法,将大鼠分为三组,每组10只:假手术组(S组),仅分离股动脉和股静脉;缺血-再灌注组(IR组);右美托咪定预先给药组(D组)。采用无创微动脉夹夹闭股动脉4h后恢复双后肢血流灌注4h的方法制备动物模型。D组肢体缺血前30min腹腔注射右美托咪定50μg/kg,S组和IR组腹腔注射等容量生理盐水。再灌注结束前15min经颈动脉行左心室插管,测量再灌注4h时各组动物左心室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左室内压最大下降速(-dp/dtmax)。实验结束时自腹主动脉取血,测定血浆SOD活性和MDA含量。开胸取心肌组织,测定心肌组织SOD活性和MDA含量,光镜下观察心肌病理学改变。结果与S组比较,IR组、D组血浆和心肌组织SOD活性明显降低,MDA含量明显升高(P0.05);与IR组比较,D组血浆和心肌组织SOD活性明显升高,MDA含量明显降低(P0.05)。与S组比较,IR组、D组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明显降低,LVEDP明显升高(P0.05);与IR组比较,D组LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明显升高,LVEDP明显降低(P0.05)。与IR组比较,D组心肌病理学结果显示损伤减轻。结论右美托咪定预先给药可减轻大鼠肢体缺血-再灌注诱发的心肌损伤,其机制可能与减轻心肌脂质过氧化反应和改善心肌血流灌注有关。     

右美托咪定对家兔窦房结细胞动作电位的影响

目的 评价右美托咪定对家兔窦房结细胞动作电位的影响.方法 健康新西兰家兔,雌雄不拘,体重1.5～2.5 kg,开胸取心脏,分离窦房结,60个离体窦房结,采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=l0):正常对照组(C组)、0.5 ng/ml右美托咪定组(D1组)、5.0 ng/ml右美托咪定组(D2组)、5.0 ng/ml右美托咪定+α2肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾组(D2+Y组)、5.0 ng/ml右美托咪定+非选择性超极化激活环核苷酸门控阳离子电流阻断剂氯化铯组(D2+C组)和50.0 ng/ml右美托咪定组(D3组).6组先用台氏液灌流60 min,C组继续用台氏液灌流40 min,D1组、D2组和D3组分别用含0.5、5.0、50.0 ng/ml右美托咪定灌流40 min,D2+Y组和D2+C组分别用含1 μmol/L育亨宾和2mmol/L氯化铯的台氏液灌流20 min,随后再加入5.0 ng/ml右美托咪定继续灌流20 min.分别于台氏液灌流60 min、育亨宾或氯化铯灌流20 min时和右美托咪定停止灌流时记录最大去极速率(Vmax)、动作电位幅度(APA)、复极化50％的动作电位时程(APD50)、复极化90％的动作电位时程(APD90)、4期自动去极速率(VDD)和起搏放电频率(RPF).结果 与C组比较,D1组、D2组和D3组T2,3时APA、VDD和RPF降低,Dt组、D2组和D3组上述指标依次降低(P＜0.05),4组间Vmax、APD5和APD90差异无统计学意义(P＞0.05).与T1时比较,T2时D2+C组VDD和RPF降低,T3时D2+Y组和D2+C组APA、VDD和RPF降低(P＜0.05),余参数差异无统计学意义(P＞0.05)；与T2时比较,T3时D2+Y组APA、VDD和RPF降低,D2+C组APA降低(P＜0.05),余参数差异无统计学意义(P＞0.05).结论 右美托咪定可呈浓度依赖性地降低家兔窦房结细胞自律性,其机制与抑制超极化激活的环核苷酸门控阳离子电流有关,而与α2肾上腺素能受体无关.     

右美托咪定及其联合舒芬太尼预先给药对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨右美托咪定及其联合舒芬太尼预先给药对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 健康清洁级雄性SD大鼠50只,体重250～300 g,采用阻断左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注模型.采用随机数字表法,将大鼠分为5组(n=10):假手术组(S组)只穿线,不结扎左冠状动脉前降支；缺血再灌注损伤组(IR组)；右美托咪定预先给药组(DP组)腹腔注射右美托咪定5 μg/kg,30 min后制备模型；舒芬太尼预先给药组(SP组)腹腔注射舒芬太尼10μg/kg,30 min后制备模型；右美托咪定+舒芬太尼预先给药组(DS组)腹腔注射右美托咪定5 μg/kg和舒芬太尼10 tμg/kg,30 min后制备模型.再灌注120 min时,取血样,测定血清CK、LDH浓度；处死大鼠,观察心肌组织病理学结果,计算心肌梗死体积,测定心肌组织MDA含量及SOD活性.结果 与S组相比,其余各组血清CK、LDH浓度升高,心肌梗死体积增加,心肌SOD活性降低,IR组、DP组和SP组心肌MDA含量升高(P＜0.05或0.01),DS组心肌MDA含量差异无统计学意义(P＞0.05)；与IR组相比,DP组、SP组和DS组血清CK和LDH浓度、心肌MDA含量降低,心肌梗死体积减少,心肌SOD活性升高(P＜0.05)；与DS组相比,DP组和SP组血清CK浓度升高,心肌梗死体积增加,心肌MDA含量升高(P＜0.05),DP组血清LDH浓度升高和心肌SOD活性降低(P＜0.05).DS组心肌病理学损伤较DP组和SP组减轻.结论 右美托咪定预先给药可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其联合舒芬太尼预先给药时该效应强于两者单独应用,机制与增强抗氧化能力、抑制脂质过氧化反应有关.     

七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤

目的分析七氟醚后处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响并探讨其机制。方法清洁级成年雄性SD大鼠72只,3月龄,体重180～230 g。采用随机数字表法分为四组:假手术组(S组)、单纯七氟醚组(Sev组)、缺血-再灌注组(IR组)和七氟醚后处理组(SP组),每组18只。S组:穿线不阻断左冠状动脉前降支(LAD);Sev组:穿线不阻断LAD,穿线稳定后60 min吸入2.4%七氟醚15 min; IR组:穿线稳定后30 min阻断LAD,缺血30 min,再灌注2 h; SP组:穿线稳定后30 min阻断LAD,缺血30 min,再灌注2 h,同时在穿线稳定后60 min吸入2.4%七氟醚15 min。于再灌注后2 h,采用ELISA法检测血清LDH浓度,Western Blot法检测心肌受体相互作用蛋白1(RIPK1)、p-RIPK1、受体相互作用蛋白3(RIPK3)、p-RIPK3、混合系激酶结构域样蛋白(MLKL)、p-MLKL含量,荧光显微镜观察程序性坏死心肌细胞的荧光强度,1%氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积百分比,HE染色后光镜下观察心肌病理学形态。结果与S组比较,IR组和SP组血清LDH浓度明显升高(P0.05),心肌RIPK1、p-RIPK1、RIPK3、p-RIPK3、MLKL、p-MLKL含量明显增加(P0.05),程序性坏死心肌细胞荧光强度明显增强(P0.05),心肌梗死面积百分比明显升高(P0.05),心肌细胞排列更为紊乱。与IR组比较,SP组血清LDH浓度明显降低(P0.05),心肌RIPK3、p-RIPK3、MLKL和p-MLKL含量明显减少(P0.05),程序性坏死心肌细胞荧光强度明显减弱(P0.05),心肌梗死面积百分比明显降低(P0.05),心肌细胞排列更为整齐。S组和Sev组间各指标差异无统计学意义。结论七氟醚后处理可通过升高血清LDH浓度、降低心肌梗死面积百分比、改善心肌病理学改变减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与抑制缺血-再灌注损伤后心肌细胞程序性坏死相关。     

丹酚酸A复合右美托咪定对脑缺血-再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨丹酚酸A复合右美托咪定对脑缺血-再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡及Sirt1-p53通路的影响。方法选择SD大鼠90只,体重160~230 g,随机分为五组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)、丹酚酸A干预组(A组)、右美托咪定干预组(D组)、丹酚酸A复合右美托咪定干预组(AD组),每组18只。采用线栓法建立大脑中动脉缺血-再灌注损伤模型。脑缺血-再灌注24 h后,检测大鼠血流动力学情况,Morris水迷宫实验观察第1、2、3、4、5天逃避潜伏期、穿越平台次数,评估神经功能缺损评分。采用TUNEL法检测海马神经细胞凋亡,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫化巴比妥酸法测定MDA含量,免疫组织化学法检测海马组织Bcl-2和Bax蛋白含量,Western blot法检测海马组织Sirt1和乙酰化p53蛋白含量。结果与S组比较,IR组、A组、D组和AD组第1、2、3、4、5天逃避潜伏期明显延长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05),HR明显减慢(P<0.05),MAP、CO明显降低(P<0.05),神经功能缺损评分明显升高(P<0.05),海马组织凋亡细胞百分比、MDA含量、Bax和乙酰化p53蛋白含量明显升高(P<0.05),海马组织SOD活力、Bcl-2和Sirt1蛋白含量明显降低(P<0.05)。与IR组比较,A组、D组和AD组第1、2、3、4、5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),穿越平台次数明显增多(P<0.05),HR明显增快(P<0.05),MAP、CO明显升高(P<0.05),神经功能缺损评分明显降低(P<0.05),海马组织凋亡细胞百分比、MDA含量、Bax和乙酰化p53蛋白含量明显降低(P<0.05),海马组织SOD活力、Bcl-2和Sirt1蛋白含量明显升高(P<0.05)。与A组、D组比较,AD组第1、2、3、4、5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),穿越平台次数明显增多(P<0.05),HR明显增快(P<0.05),MAP、CO明显升高(P<0.05),神经功能缺损评分明显降低(P<0.05),海马组织细胞凋亡百分比、MDA含量、Bax和乙酰化p53蛋白含量明显降低(P<0.05),海马组织SOD活力、Bcl-2和Sirt1蛋白含量明显升高(P<0.05)。结论丹酚酸A复合右美托咪定可显著降低脑缺血-再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡,其作用可能与Sirt1-p53通路有关。     

磷酸肌酸预处理对大鼠肾缺血-再灌注所致肺损伤的影响

目的探讨磷酸肌酸预处理对大鼠肾缺血-再灌注所致肺损伤的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠45只,8～10周龄,体重180～220g,采用随机数字表法,将其分为三组:假手术组(S组)、肾脏缺血-再灌注组(IR组)和磷酸肌酸预处理组(PCr组),每组15只。S组仅游离肾蒂并行右肾切除术。IR组和PCr组在S组基础上制备肾缺血-再灌注模型。PCr组于缺血前30min尾静脉注射磷酸肌酸钠150mg/kg,IR组于同时点注射等容量生理盐水。再灌注6h后于同时段经左心室采集动脉血样,血气分析记录PaO_2,检测血清丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性。Fluo-3AM染色经流式细胞仪检测肺泡巨噬细胞内Ca~(2+)浓度。取肺组织,HE染色,光学显微镜下观察肺组织病理结果,测定肺组织湿重/干重(W/D)比值。膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双染经流式细胞仪检测肺组织细胞凋亡比例。结果与S组比较,IR组和PCr组PaO2明显降低,MDA浓度明显升高,SOD活性明显减弱,肺泡巨噬细胞Ca~(2+)浓度明显升高,肺W/D比明显增大,肺组织病理学损伤程度明显加重,肺组织细胞凋亡率明显升高(P0.05)。与IR组比较,PCr组PaO_2明显升高,MDA浓度明显降低,SOD活性明显增强,肺泡巨噬细胞Ca~(2+)浓度明显降低,肺W/D比明显减小,肺组织病理学损伤程度明显减轻,肺组织细胞凋亡率明显降低(P0.05)。结论磷酸肌酸预处理可有效减轻大鼠肾缺血-再灌注诱发的肺损伤,其机制可能与抑制氧化应激,降低细胞凋亡及钙离子超载有关。     

熵指数指导下右美托咪定、丙泊酚及依托咪酯对脑功能区手术术中唤醒的影响

目的研究在熵指数指导下右美托咪定、丙泊酚及依托咪酯用于脑功能区手术术中唤醒的有效性及安全性。方法选择择期行脑功能区手术且需术中唤醒患者60例,随机分为右美托咪定组(D组)、丙泊酚组(P组)和依托咪酯组(E组),每组20例。手术过程中调整右美托咪定、丙泊酚或依托咪酯的泵注剂量使反应熵(RE)维持在40～60。记录唤醒时间、唤醒质量、唤醒期间不良反应的发生情况。结果 D组唤醒时间明显短于P、E两组(P0.05);D组唤醒质量明显优于P、E两组(P0.05),P组唤醒质量明显优于E组(P0.05)。D组不良反应总发生率明显低于P、E两组(P0.05)。结论在熵指数指导下,右美托咪定、丙泊酚和依托咪酯联合瑞芬太尼麻醉用于脑功能区手术术中唤醒均是安全且有效的,但右美托咪定的唤醒质量最高,唤醒期间不良反应发生率最低。     

氢气对内毒素小鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨氢气对内毒素(LPS)诱导的急性肺损伤的影响及机制。方法 选择SPF级雄性ICR小鼠12只,6～8周龄,体质量25～35 g。采用随机数字表法将小鼠分为四组：对照组(C组)、吸入氢气组(H组)、肺损伤模型组(L组)和肺损伤模型+吸入氢气组(LH组),每组3只。C组不做处理;H组仅吸入4%氢气,持续12 h; L组和LH组采用腹腔注射LPS 10 mg/kg建立肺损伤模型,LH组在建立肺损伤模型后即刻吸入4%氢气。于建模后12 h行肺超声检测肺水肿,超声检测完成后迅速处死小鼠,开胸取双肺组织,左肺组织采用Western blot法检测p-AMPK、p-ERK和p-p38蛋白含量,右肺组织采用HE染色行肺损伤评分并观察肺组织病理学改变。结果 与C组比较,L组和LH组B线面积明显增大,p-AMPK、p-ERK和p-p38蛋白含量明显升高(P<0.05);H组p-AMPK蛋白含量明显升高(P<0.05);L组肺损伤评分明显升高(P<0.05)。与L组比较,LH组B线的面积明显减小,p-ERK、p-ERK和p-p38蛋白含量、肺损伤评分明显降低(P<0.05)。...     

右美托咪定联合局麻药腹腔滴注缓解腹腔镜手术术后疼痛的Meta分析

目的采用Meta分析的方法评价右美托咪定联合局麻药腹腔滴注用于腹腔镜手术术后镇痛的有效性和安全性。方法检索Cochrane、Embase、Web of Science、Pubmed、CBM、知网、万方和维普等数据库,纳入比较右美托咪定联合局麻药(研究组)与单独局麻药(对照组)腹腔滴注的随机对照试验(RCT)。两名研究者独立进行文献筛选、质量评价、数据提取后,分别用RevMan 5.3和TSAv0.9Beta进行Meta分析和试验序贯分析(TSA)。结果共纳入5项RCT研究,共320例患者。与对照组比较,研究组术后24 h内各时点VAS疼痛评分明显降低(P<0.05),术后镇痛时间明显延长(P=0.002),镇痛药使用量明显减少(P<0.001),术后肩痛发生率明显降低(P<0.001),术后呕吐的发生率明显降低(P<0.05)。两组术后恶心、低血压和心动过缓的发生率差异无统计学意义。结论在腹腔镜手术中右美托咪定作为局麻药的佐剂腹腔滴注增强局麻药的作用效果,但鉴于该给药途径超说明书使用,腹腔内使用时应谨慎。     

铁死亡在肝缺血—再灌注损伤大鼠肠损伤中的作用

目的 探究铁死亡在肝缺血-再灌注损伤(HIR)大鼠肠损伤中的作用。方法 选择健康清洁级雄性SD大鼠40只,周龄8～10周,体重220～260 g。采用随机数字表法将大鼠分成四组：假手术组(S组)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1+假手术组(SF组)、HIR模型组(IR组)和铁死亡抑制剂Ferrostatin-1+HIR模型组(IF组),每组10只。S组腹腔注射等容量0.02%DMSO,30 min后行假手术,仅进行开腹、分离第一肝门和关腹处理。SF组腹腔注射Ferrostatin-1(溶于0.02%DMSO)5 mg/kg, 30 min后行假手术。IR组腹腔注射等容量0.02%DMSO,30 min后制备HIR模型。IF组腹腔注射Ferrostatin-1(溶于0.02%DMSO)5 mg/kg, 30 min后制备HIR模型。于再灌注后8 h处死大鼠,取小肠组织,采用ELISA法检测肠组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和铁(Fe²⁺)浓度;采用速率法检测血清中ALT和AST活性;采用Western blot法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁...     

盐酸戊乙奎醚预处理对小鼠反复缺血?再灌注脑损伤时细胞外信号调节激酶1/2的影响

目的探讨盐酸戊乙奎醚预处理对小鼠反复缺血-再灌注(ischemia reperfusion, IR)脑损伤时细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的影响。方法 SPF级成年C57BL/6J小鼠96只,6～8周龄,体重16～25 g,按照随机数字表法分为三组:盐酸戊乙奎醚组(PHC组)、IR组和假手术组(Sham组),每组32只。Sham组腹腔注射等容量生理盐水,30 min后分离双侧颈总动脉但不夹闭;IR组腹腔注射等容量生理盐水,30 min后分离并夹闭双侧颈总动脉,建立反复IR脑损伤模型;PHC组腹腔注射盐酸戊乙奎醚1.0 mg/kg,30 min后采用双侧颈总动脉夹闭术建立反复IR脑损伤模型。采用Morris水迷宫实验评估术前及术后学习记忆能力,随后处死小鼠,留取海马组织并测定其湿/干重比(W/D)。采用伊文斯蓝(EB)法检测血脑屏障的通透性。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定海马组织ERK1/2 mRNA表达量,Western blot法测定海马组织磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白含量。结果与Sham组比较,术后3、7 d IR组逃避潜伏期和游泳距离明显延长(P0.05)。与IR组比较,术后3、7 d PHC组逃避潜伏期和游泳距离明显缩短(P0.05)。与Sham组比较,IR组海马组织W/D和脑组织EB含量明显升高P0.05)。与IR组比较,PHC组海马组织W/D和脑组织EB含量明显降低(P0.05)。与Sham组比较,IR组海马组织ERK1/2 mRNA表达量和p-ERK1/2蛋白含量明显升高(P0.05)。与IR组比较,PHC组海马组织ERK1/2 mRNA表达量和p-ERK1/2蛋白含量明显降低(P0.05)。结论盐酸戊乙奎醚预处理可通过抑制海马组织ERK 1/2激活而减轻小鼠反复缺血-再灌注脑损伤并改善其学习记忆能力。     

盐酸戊乙奎醚后处理对心肌缺血-再灌注大鼠心功能的影响

目的探讨盐酸戊乙奎醚后处理对心肌缺血-再灌注(IR)大鼠心功能的影响。方法选择SPF级健康雄性Wistar大鼠32只,8周龄,体重220~250 g。将大鼠随机分为四组:假手术组(S组)、假手术+盐酸戊乙奎醚组(SP组)、IR组和IR+盐酸戊乙奎醚后处理组(IP组),每组8只。S组冠状动脉左前降支仅穿线不结扎,30 min后经尾静脉注射生理盐水1 mg/kg。SP组冠状动脉左前降支仅穿线不结扎,30 min后经尾静脉注射盐酸戊乙奎醚1 mg/kg。IR组冠状动脉左前降支穿线结扎30 min后,松开结扎线,再灌注3 h。于再灌注(松开结扎线)前即刻经尾静脉注射生理盐水1 mg/kg。IP组于再灌注前即刻经尾静脉注射盐酸戊乙奎醚1 mg/kg。于开胸前5 min、再灌注后3、6 h,采用经胸超声心动图监测大鼠左心室舒张末压(LVEDP)、左心室收缩末压(LVESP)、左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS),采用智能血压计监测大鼠尾动脉MAP,采用ELISA法检测血清肌钙蛋白T(cTnT)浓度。结果与开胸前5 min比较,再灌注后3、6 h IR组和IP组LVEDP明显升高,LVESP、LVEF、LVFS、MAP明显降低(P<0.05);再灌注后3、6 h S组、IR组和IP组血清cTnT浓度明显升高(P<0.05)。与再灌注后3 h比较,再灌注后6 h IR组LVEDP、血清cTnT浓度明显升高,LVESP、LVEF、LVFS、MAP明显降低(P<0.05)。与S组比较,再灌注后3、6 h IR组和IP组LVEDP、血清cTnT浓度明显升高,LVESP、LVEF、LVFS、MAP明显降低(P<0.05)。与IR组比较,再灌注后3、6 h IP组LVEDP、血清cTnT浓度明显降低,LVESP、LVEF、LVFS、MAP明显升高(P<0.05)。S组和SP组上述指标差异均无统计学意义。结论盐酸戊乙奎醚后处理能够维持血流动力学稳定,降低cTnT浓度,改善心肌缺血-再灌注大鼠的心功能。