肠润方对功能性便秘大鼠结肠Cajal间质细胞及c-kit/SCF信号通路的影响※

目的:研究肠润方对功能性便秘大鼠结肠Cajal间质细胞及c-kit/SCF信号传导通路的影响,揭示滋阴行气法治疗功能性便秘的可能作用机制。方法:选取SD大鼠72只,随机分为空白组、模型组、麻仁丸组以及肠润方高、中、低剂量组。利用复方地芬诺脂制备功能性便秘大鼠模型,造模成功后,分别使用肠润方低、中、高剂量水煎剂(5.5、11、22g/kg/d)及麻仁丸-生理盐水混悬液(0.3g/kg/d)灌胃进行干预。通过免疫组化法、Western-Blot及RT-PCR法检测大鼠结肠组织中c-kit、SCF的分布及蛋白与基因表达水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠结肠组织c-kit、SCF蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P0.01);同模型组相比,肠润方高、中剂量组结肠组织c-kit、SCF蛋白及mRNA表达水平显著升高(P0.01),免疫组化结果显示c-kit、SCF的表达与肠润方剂量呈正相关。结论:功能性便秘与结肠ICC表达减少,功能异常相关,肠润方通过调控c-kit、SCF表达,恢复c-kit/SCF信号转导通路,恢复ICC对胃肠道节律的正常调控来治疗功能性便秘。     

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal间质细胞超微结构及干细胞因子-kit信号途径的影响

目的:观察电针对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃肠运动及其胃窦起搏细胞Cajal间质细胞(ICC)超微结构、c-kit受体蛋白表达及干细胞因子(SCF)基因表达的影响,探讨电针治疗DGP的机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针穴位组、电针非穴组、胃复安对照组,每组10只。腹腔注射2%链脲佐菌素结合高糖高脂饲料不规则喂养制备DGP模型。电针穴位组电针"足三里""梁门""三阴交",电针非穴组电针"足三里""梁门""三阴交"穴位对照点,胃复安对照组予1.7%胃复安药液(1mL/100g)灌胃,均每日1次,连续15d。监测血糖,酚红灌胃法测量大鼠胃排空率及小肠推进率,透射电镜法检测胃窦ICC超微结构,Western blot法、RT-PCR法分别检测大鼠胃窦c-kit蛋白及SCF mRNA表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血糖显著升高(P0.01),胃排空率和小肠推进率显著降低(P0.01),ICC呈细胞凋亡样改变,SCF mRNA表达量显著下降(P0.01);与模型组比较,电针穴位组大鼠血糖明显降低(P0.05),胃排空率及小肠推进率显著升高(P0.05,P0.01),ICC数目增加,受损超微结构得到修复,SCF mRNA表达量显著升高(P0.01);与电针非穴组比较,电针穴位组ICC受损超微结构有所恢复,SCF mRNA表达量明显升高(P0.05)。各造模组间比较,c-kit蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针"足三里"等穴可调控DGP大鼠血糖,促进胃肠排空,其作用机制可能与上调SCF mRNA,修复受损ICC超微结构,恢复其起搏功能,进而改善胃肠运动障碍有关。     

益气健脾通便方对慢传型便秘大鼠结肠组织ICC及SCF/c-kit信号通路的影响

目的:通过观察益气健脾通便方对慢传输型便秘模型大鼠结肠组织ICC表达的影响及对SCF/c-kit信号通路的修复作用,从理论上揭示益气健脾通便方治疗慢传输型便秘的可能作用机制。方法:采用"复方地芬诺酯灌胃法"复制慢传输型便秘大鼠动物模型,分别运用益气健脾通便方低、中、高剂量干预,并与西药聚乙二醇4000散对比。观察造模及治疗过程中各组大鼠粪便粒数的变化;采用免疫组化法检测大鼠结肠组织ICC的表达量及Western-Blot、RT-PCR法检测大鼠结肠组织c-kit、SCF蛋白的表达及c-kit、SCF mRNA的表达水平。结果:与模型组比较,聚乙二醇组、益气健脾通便方低、中、高剂量组均能明显提高慢传输型便秘大鼠24 h粪便粒数(P0.05);与模型组比较,聚乙二醇组、益气健脾通便方低、中、高剂量组大鼠结肠组织ICC、c-kit、SCF蛋白及c-kit、SCF mRNA表达水平均显著升高(P0.05);与聚乙二醇组比较,益气健脾通便方中剂量组大鼠结肠组织ICC及c-kit、SCF蛋白表达均有所升高,但差异无统计学意义(P0.05);益气健脾通便方中剂量组大鼠结肠组织c-kit、SCF mRNA表达水平较聚乙二醇组明显升高(P0.05);益气健脾通便方高剂量组大鼠结肠组织c-kit、SCF mRNA表达水平较聚乙二醇组有所升高,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:益气健脾通便方治疗慢传输型便秘疗效显著,其作用机制可能与其提高结肠组织ICC的表达量及修复SCF/c-kit信号通路有关,从而改善便秘症状,以中、高剂量组疗效最为显著。     

养阴和胃方对糖尿病胃轻瘫大鼠SCF/c-kit系统的影响

目的:观察养阴和胃方对糖尿病胃轻瘫大鼠的疗效及其对SCF/c-kit系统的影响。方法:将40只SD大鼠随机均分为正常对照组,模型对照组,养阴和胃方低、高剂量组,西药组,每组8只。采用腹腔注射注射用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病胃轻瘫大鼠模型,养阴和胃方低、高剂量组和西药组分别用低、高剂量养阴和胃方和吗丁啉混悬液灌胃。酚红灌胃实验测定胃排空率,Western Blot检测胃窦c-kit蛋白和清干细胞因子(stem cell factor,SCF)蛋白的表达,ELISA测定血清SCF含量。结果:与模型对照组相比,各给药组大鼠的胃排空率、c-kit蛋白、SCF蛋白和血清SCF含量均明显增高,差异有统计学意义(P0.05),且随着中药浓度的增高,胃排空率、c-kit蛋白、SCF蛋白和血清SCF含量增高更加明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论:中药养阴和胃方可上调SCF/c-kit系统的表达,从而逆转DGP胃排空障碍。     

消痞方对化疗后痞满证大鼠胃肌层c-kit蛋白及血清SCF表达水平的影响

目的探讨酪氨酸激酶c-kit蛋白的表达及血清干细胞因子(stem cell factor,SCF)水平在大鼠化疗后痞满证发病机制中的作用及消痞方干预对其的影响。方法将60只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、西沙必利组、消痞方高剂量组、消痞方中剂量组、消痞方低剂量组,每组10只。除空白组外,其余5组采用尾静脉注射化疗药物建立大鼠脾虚证模型。空白组和模型组给予0.9%Na Cl溶液灌胃,消痞方低剂量组、中剂量组与高剂量组分别给予浓度100%、150%、200%的煎剂灌胃,西沙必利组给予西沙必利灌胃,共给药7天。观察各组大鼠的一般情况,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠血清SCF水平,采用免疫组化方法检测大鼠胃肌层c-kit蛋白表达水平。结果模型组大鼠胃肌层c-kit蛋白表达及血清SCF水平明显低于空白组(P0.05)。消痞方高剂量组与模型组比较,胃肌层c-kit蛋白表达及血清SCF水平显著升高(P0.05),且明显优于西药组。消痞方低剂量及中剂量组较模型组各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论消痞方能够提高大鼠胃肌层c-kit蛋白的表达及血清SCF水平,维持c-kit/SCF信号通路的稳定,恢复胃肠道运动功能,从而起到对化疗所致痞满的治疗作用。     

从慢传输型便秘大鼠结肠c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路探讨四磨汤的调节机制

目的:研究四磨汤对慢传输结肠的c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路影响,探索理气中药改善结肠动力的作用机制。方法:选取120只SD大鼠,随机分为正常组30只,造模组90只,造模组饲喂含复方苯乙哌啶的饲料,造模成功后,将90只大鼠再随机分为3组,一组为空白对照组,一组为盐水对照组(安慰剂组),一组为四磨汤治疗组,每组30只。停药7 d后,分别从四组中各抽取10只大鼠,测首例黑便排出时间。结肠肌电检测,验证"四磨汤"对STC大鼠结肠肌电的影响效应。通过Realtime-PCR检测,分别检测c-kit和SCF的mRNA在STC结肠组织中的表达情况。计算机辅助图像分析表达情况。结果:四磨汤组大鼠首粒黑便排出时间较对照组和安慰剂组明显缩短(P0.05);较正常组有所延长(P0.05)。四磨汤组大鼠肌电频率、振幅、频率变异系数、振幅变异系数与正常组相比无统计学意义(P0.05),模型组大鼠肌电频率低于正常组(P0.05),振幅、频率变异系数、振幅变异系数高于正常组,有统计学意义(P0.05)。c-kit mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。SCF mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。结论:STC模型大鼠的结肠c-kit和SCF基因表达下调,c-kit/SCF系统受损。四磨汤能够显著提高c-kit mRNA、SCF mRNA相对含量,显著抑制造模药物对大鼠结肠慢波的影响,是通过调节c-kit,SCF基因表达及相应的信号通路来治疗慢传输型便秘的。     

麻枳降浊方对便秘型肠易激综合征大鼠肠道间质细胞的影响

目的 探讨麻枳降浊方治疗便秘型肠易激综合征(IBS-C)的可能作用机制. 方法 将60只Wistar大鼠随机分为正常组10只和造模组50只,造模组采用冰水灌胃法建立IBS-C模型,将造模成功的48只大鼠随机分为模型组9只、阳性药组10只、高剂量组10只、中剂量组10只、低剂量组9只,阳性药组给予西沙必利片3.6mg/ (kg·d)灌胃,高、中、低剂量组分别给予麻枳降浊方颗粒剂25.2、12.6、6.3g/(kg·d)灌胃,模型组给予等量蒸馏水灌胃,正常组正常饲养.14天后,HE染色观察肠组织病理变化,免疫组织化学法检测肠组织Cajal间质细胞(ICC)数量和形态的变化,并采用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统分析c-kit基因阳性表达面积和积分光密度(IOD). 结果 模型组大鼠肠道ICC细胞突起变短,带状、网状结构不明显,各给药组大鼠肠组织ICC数量、形态、分布及网状连接与正常组相似.模型组大鼠c-kit的阳性表达面积及IOD较正常组显著减少(P＜0.05).高、中剂量组和阳性药组c-kit阳性表达面积及IOD较模型组增多(P＜0.05),并且高、中剂量组显著高于阳性药组(P＜0.05).结论 麻枳降浊方可能通过增加肠组织ICC细胞数量,改善ICC形态结构,增加肠道传导功能,从而改善IBS-C.     

半夏泻心汤对糖尿病大鼠胃窦Cajal间质细胞及干细胞因子的影响

目的 观察半夏泻心汤对糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠胃窦Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal,ICCs）及干细胞因子（stem cell factor,SCF）表达的影响。方法 将60只健康雄性DM大鼠随机分成对照组、模型组、半夏泻心汤组（中药组）和多潘立酮组（西药组）。一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ,55 mg/kg）制作糖尿病大鼠模型。中药组给予半夏泻心汤［5.4 g/（kg？d）］灌胃,西药组给予多潘立酮［5 mg/（kg？d）］灌胃,模型组及对照组每天给予等体积蒸馏水,持续灌胃8周后,检测各组大鼠体重及血糖,给予半固体营养糊灌胃测定胃残留率,利用免疫组化和图像分析观察胃窦c-kit阳性ICCs及SCF表达。结果 与对照组比较,模型组体重减轻,血糖及胃残留率升高,c-kit阳性ICCs及SCF平均光密度值显著降低（P〈0.05）。与模型组比较,两个用药组多饮、多食及多尿症状减轻,精神状态好转,体重、c-kit阳性ICCs及SCF平均光密度值明显增加（P〈0.05）,胃残留率降低（P〈0.05）;中药组血糖降低（P〈0.05）,且中药组c-kit阳性ICCs平均光密度高于西药组（P〈0.05）。结论 半夏泻心汤可以促进糖尿病大鼠胃窦肌间神经丛c-kit ICCs及SCF的表达,对受损的DM大鼠胃窦ICCs、SCF有部分恢复作用,可改善糖尿病大鼠的胃动力障碍。     

基于调控大鼠胃肠c-kit和SCF mRNA表达的枳壳燥性及炮制减燥机制分析

目的:明确枳壳燥性的产生机制,并比较不同炮制品对正常大鼠胃窦、结肠c-kit和干细胞因子(SCF)mRNA表达的影响。方法:将SD大鼠分为空白组,生品枳壳高(10 g·kg~(-1),下同)和低(1 g·kg~(-1),下同)剂量组,麸炒枳壳高、低剂量组,蜜麸枳壳高、低剂量组及慢传输型便秘(STC)模型组,各给药组大鼠灌服相应药液1次/d,模型组大鼠灌服复方地芬诺酯片溶液,空白组大鼠灌服同等体积生理盐水,所有实验动物均连续给药30 d。在第30 d处死大鼠并迅速剖取胃窦与结肠组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应扩增仪检测组织中c-kit和SCF mRNA的表达水平。结果:与空白组比较,生品枳壳组胃窦与结肠的c-kit和SCF mRNA表达均显著降低(P0.01)。与模型组比较,生品枳壳高剂量组所有检测指标均无显著性差异;麸炒枳壳组、蜜麸枳壳组胃窦与结肠的c-kit和SCF mRNA表达有显著增加(P0.05,P0.01)。结论:长期高剂量服用枳壳生品能显著抑制正常大鼠胃肠道c-kit和SCF mRNA的表达,进而影响胃肠道Cajal间质细胞的数量和功能,从而造成肠燥便秘;麸炒枳壳与蜜麸枳壳均能有效缓和生品所产生的肠道燥性效应,且蜜麸炒品炮制减燥作用优于麸炒品。     

旋覆代赭汤对胃动力低下大鼠血液及组织中GAS、SP及SS含量的影响

目的：观察旋覆代赭汤对胃动力低下大鼠血液及胃窦组织中胃泌素（GAS）、P物质（SP）及生长抑素（SS）含量的影响。方法：将70只大鼠随机分为正常组和模型组,正常组10只,模型组60只。模型组每只大鼠按10g/kg体重的甘草煎剂灌胃后,随机分为模型3天组、模型7天组、旋覆代赭汤低、中、高剂量组及吗丁啉组。吗丁啉组予0.27mg/mL的吗丁啉混悬液灌胃,中药低、中、高各剂量组分别予浓度为0.369g/mL、0.738g/mL、1.476g/mL的旋覆代赭汤灌胃,共给药5天。用放免法观测各组大鼠血液及组织中GAS、SP及SS的含量。结果：一定剂量甘草煎剂可复制大鼠胃动力低下模型,旋覆代赭汤可使胃动力低下大鼠兴奋性脑肠肽GAS、SP在血液及组织中含量升高,使抑制性脑肠肽SS在血液及组织中含量降低,与模型组比较均有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论：旋覆代赭汤可通过调节脑肠肽在血液及组织中的含量达到促胃动力的作用。     

胃肠舒泰颗粒通过SCF/c-kit信号通路对功能性消化不良模型大鼠Cajal间质细胞的影响

目的 观察胃肠舒泰颗粒通过SCF/c-kit信号通路对功能性消化不良(functional dyspepsia, FD)模型大鼠Cajal间质细胞的影响。方法 50只SPF级雄性SD大鼠，随机分为空白组、模型组、胃肠舒泰颗粒中剂量组、胃肠舒泰颗粒高剂量组、莫沙必利组，每组10只。除空白组外，其余4组均采用复合法制备肝郁脾虚气滞型FD大鼠模型，连续刺激21 d,造模成功后，除空白组、模型组外，余各组分别按0.9 g/kg、1.8 g/kg、0.297 mg/mL的药物剂量给予灌胃，上下午各1次，间隔4 h,连续给药28 d。实验期间，观察大鼠造模、给药前后体质量及一般状态的变化，给药结束后进行胃窦组织取材，Western blot法测定大鼠胃窦组织中SCF、c-kit蛋白表达水平。结果 与空白组相比，模型组大鼠胃中SCF、c-kit蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组相比，胃肠舒泰颗粒高剂量组大鼠胃中SCF蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组相比，胃肠舒泰颗粒高剂量组大鼠胃中c-kit蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组相比，胃肠舒泰颗粒中剂量组、莫沙...     

六君子汤合旋覆代赭汤含药血清对大鼠胃Cajal间质细胞活性及钙离子浓度的影响

目的探讨六君子汤合旋覆代赭汤治疗胃食管反流病的可能作用机制。方法将2月龄Wistar大鼠分为中药低、中、高剂量组和莫沙必利组、空白组,每组10只。中药低、中、高剂量组分别予以浓度为0. 846、1. 728、3. 456 g/ml六君子汤合旋覆代赭汤溶液灌胃,莫沙必利组予以浓度0. 5 mg/ml莫沙必利溶液灌胃,每次均1. 5 ml/100g,每日2次,空白组予等量生理盐水灌胃,共5天。第5天灌胃后1h腹主动脉取血制备含药血清。出生10～15天的Wistar大鼠3只,禁食18 h后取2 cm左右胃窦组织培养大鼠胃Cajal间质细胞(ICC),并采用免疫荧光法鉴定。ICC细胞稳定培养7天后,分为中药低、中、高剂量组和莫沙必利组、空白组,每组12个样本。调整浓度为5×10~4/ml接种于96孔板,12 h后加入相应含药血清,200μl/孔,分别培养24、48、72 h,采用MTT法检测ICC细胞活性;激光共聚焦显微镜下进行Fluo-3-AM荧光检测细胞内Ca~(2+)浓度变化。结果稳定培养7天后倒置显微镜下可见ICC呈三角形、梭形或多边形,核大,周围充满胞浆,胞体发出多条大小不等的树枝状突起,突起与周围细胞的胞体和突起相互连接。免疫荧光染色后,在显微镜下观察ICC表面c-kit呈阳性,胞体和突起均明显着色,呈绿色阳性显性。与空白组和中药低剂量组同时间相比,中药中、高剂量组和莫沙必利组在24、48、72 h时ICC活性均显著增强,Ca~(2+)荧光强度升高(P 0. 05);在48 h、72 h时莫沙必利组ICC活性显著高于中药中、高剂量组,Ca~(2+)荧光强度亦高于中药中、高剂量组(P 0. 05)。结论六君子汤合旋覆代赭汤可增强ICC内Ca~(2+)浓度,从而提高ICC活性,这可能是其治疗胃食管反流病机制之一。     

运脾柔肝方对便秘型肠易激综合征大鼠Cajal间质细胞的影响

目的探讨运脾柔肝方对便秘型肠易激综合征(IBS-C)大鼠肠道推进率及Cajal间质细胞(ICC)的影响。方法Wistar大鼠被随机均分为正常对照组,IBS-C模型组,低、中、高剂量运脾柔肝方组和莫沙必利组。通过冰水灌胃建立大鼠IBS-C模型,运脾柔肝方组和莫沙必利组分别给予低、中、高浓度的运脾柔肝方(12.2g·kg-1,24.4g·kg-1,48.8g·kg-1)灌胃,正常对照组和IBS-C模型组给予等容积的蒸馏水灌胃,用墨水推进实验测定肠道推进率,用免疫组化法测定结肠组织c-kit蛋白含量和ICC的形态。结果与正常对照组比较,IBS-C模型组大鼠的大鼠粪便粒数和含水量明显减少,肠道推进率明显降低,c-kit表达含量降低(P0.05),ICC形态结构发生改变。而运脾柔肝方组和莫沙必利组大鼠粪便粒数和含水量、肠道推进率、c-kit表达含量均高于IBS-C模型组((P0.05),ICC形态结构也趋于正常。结论运脾柔肝方通过改善IBS-C大鼠ICC形态和数量来改善其排便和肠道推进率。     

红芪多糖对糖尿病胃轻瘫大鼠小肠组织c-kit、Cx43基因和蛋白表达的影响

目的观察红芪多糖(HPS)对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠小肠组织酪氨酸激酶受体c-kit、缝隙连接蛋白Cx43基因和蛋白表达的影响,探讨其对DGP大鼠肠动力障碍的作用机制。方法采用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素联合高糖高脂饲料不规则喂养方式复制DGP模型,将72只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组和HPS高、中、低剂量组,每组12只。阳性对照组予莫沙必利药液0.7 g/(kg·d)灌胃,HPS高、中、低剂量组分别予HPS药液0.2、0.1、0.05 g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组分别予等体积纯净水灌胃,每日1次,连续8周。HE染色观察小肠病理学结构改变;RT-PCR和Western blot分别检测小肠组织c-kit、Cx43mRNA和蛋白的表达。结果 HE染色结果显示,模型组大鼠小肠正常结构被破坏,大量炎性细胞浸润;各给药组大鼠情况改善,可见正常肠绒毛、中央乳糜管等结构,炎性细胞浸润减少,其中以HPS高剂量组改善明显。与空白组比较,模型组大鼠小肠组织c-kit、Cx43 mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组比较,各给药组大鼠小肠组织c-kit、Cx43mRNA和蛋白表达显著升高(P0.05,P0.01),HPS高剂量组作用最显著。结论 HPS通过上调c-kit、Cx43mRNA和蛋白的表达提高小肠动力,改善DGP模型大鼠肠动力障碍。     

半夏泻心汤及不同配伍组对慢性胃炎大鼠ICC细胞相关受体表达和钙内流的影响

目的研究半夏泻心汤及各配伍组对胃肠道运动相关受体及Cajal间质细胞(ICC)内Ca~(2+)浓度的影响,探究半夏泻心汤调节慢性胃炎胃肠道功能的作用机制。方法建立寒热错杂型慢性胃炎大鼠模型。大鼠随机分为正常组、模型组、全方组、苦降组、辛开组、甘补组以及阳性药组,灌胃给药7 d。对胃组织进行HE染色观察病理变化,RT-qPCR技术和Western blot法分别测定5-HT4、AchE、DA2、c-kit的mRNA和蛋白表达,免疫荧光法检测蛋白共表达位置及表达量,荧光探针Fluo-4-AM标记Ca~(2+),检测各组Cajal间质细胞中Ca~(2+)浓度变化情况。结果各药物组能不同程度改善大鼠慢性胃炎症状,提高5-HT4、AchE和c-kit的mRNA和蛋白的表达,降低DA2的mRNA和蛋白的表达。全方组调节5-HT4、AchE和c-kit的mRNA以及5-HT4和DA2蛋白表达的效果更显著。5-HT4、DA2、AchE和c-kit出现共表达,共表达部位在细胞膜。各药物组能不同程度降低Cajal间质细胞内Ca~(2+)的荧光强度,以全方组效果更为显著。结论半夏泻心汤及各个配伍组可通过调节5-HT4、DA2、AchE和c-kit的表达,降低Cajal间质细胞内的Ca~(2+)浓度,抑制Cajal间质细胞钙超载,防止Cajal间质细胞兴奋节律失常,从而调节胃肠道运动,改善大鼠慢性胃炎的症状。     

基于干细胞因子（SCF）/c-kit信号通路探讨和胃理气方治疗功能性消化不良胃肠运动功能障碍的作用机制

【目的】 观察和胃理气方对功能性消化不良肝郁模型大鼠胃肠动力及干细胞因子（SCF）/c-kit信号通路的影响,从分子水平探讨其作用机制。【方法】 选取敞箱实验和糖水偏好实验评分相似的40只SPF级健康Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、中药组和西药组,每组10只。除正常组外,其他组别采用夹尾刺激+不规则喂养复合因素法建立功能性消化不良肝郁动物模型。成功造模后,中药组和西药组分别用和胃理气方和吗丁啉进行干预治疗。通过敞箱、糖水偏好实验评价大鼠抑郁状态;采用胃排空、小肠推进实验评价胃肠运动情况;分别用免疫组织化学、蛋白免疫印迹法检测大鼠胃窦、小肠组织中 c-kit、SCF 的蛋白表达水平;采用实时定量聚合酶联反应（RT-PCR）法检测大鼠胃窦、小肠黏膜组织中 c-kit、SCF 的mRNA表达水平。【结果】 与正常组比较,模型组大鼠糖水消耗率下降,敞箱实验水平及垂直运动得分下降,胃排空及小肠推进减慢,胃窦、小肠组织中 c-kit、SCF 阳性表达细胞光密度值降低,c-kit、SCF 的蛋白、mRNA 表达水平均下降（均 P <0.05）。与模型组比较,中药组和西药组糖水消耗率提高,敞箱实验水平及垂直运动得分增加,胃排空及小肠推进加快,胃窦、小肠组织中c-kit、SCF阳性细胞光密度值升高,c-kit、SCF的蛋白、mRNA表达水平均升高（均P < 0.05）,且中药组和西药组比较,上述指标均无统计学差异（P > 0.05）。【结论】 肝郁可致胃肠动力障碍,和胃理气方可以改善功能性消化不良肝郁大鼠抑郁状态,促进胃肠动力,其分子作用机制与上调SCF/c-kit信号通路相关蛋白表达有关。     

藤莓汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜PPARγ/NF-κB信号途径的影响

目的观察藤莓汤对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠滑膜过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPARγ)、核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、IL-17表达的影响,探讨该方抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜免疫炎性病理损伤的分子机制。方法建立SD大鼠CIA模型,将成模大鼠随机分为模型组、西药组、中药高剂量组、中药低剂量组,并设正常组,每组6只。正常组与模型组予去离子水10 m L/(kg·d)灌胃,西药组予来氟米特1.87mg/(kg·d)灌胃,中药高、低剂量组分别以藤莓汤生药量31.8、15.9 g/(kg·d)灌胃,连续干预12周。干预结束后检测PPARγ、P65、IL-17蛋白及mRNA表达。结果与正常组比较,模型组PPARγ、P65、IL-17 mRNA及蛋白表达上调(P0.01)。与模型组比较,中药高剂量组PPARγ蛋白表达上调,P65、IL-17 mRNA及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P0.01);西药组及中药低剂量组PPARγmRNA及蛋白表达上调,P65、IL-17 mRNA及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P0.01)。结论藤莓汤可改善CIA大鼠关节滑膜病理损伤,抑制免疫炎性因子表达。     

电针足三里调控SCF/c-Kit信号通路对功能性消化不良大鼠胃窦组织肌内Cajal间质细胞的作用

目的观察电针足三里介导SCF/c-Kit信号通路对功能性消化不良大鼠胃窦组织肌内Cajal间质细胞的影响,探讨电针足三里治疗功能性消化不良的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分别为空白组、模型组、电针组、假电针组和电针加阻断剂组。除空白组外,其余各组均采用郭氏夹尾+不规则喂养+冰生理盐水灌胃法的多因素干预造模。在造模第5天,给予电针加阻断剂组腹腔注射Kit单克隆抗体(ACK2)。造模14d后,电针组取双侧足三里治疗,假电针组只针刺不接通电流进行治疗。10d治疗结束后,用免疫印迹法检测胃窦组织的c-Kit与SCF蛋白的表达量;用RT-qPCR测量各组大鼠胃窦组织的c-Kit的m RNA表达水平;在透射电子显微镜下观察各组大鼠胃窦组织中的肌内Cajal间质细胞的超微结构变化。结果与空白组对比,模型组c-Kit、SCF蛋白的表达量和c-Kit m RNA表达水平显著下降(0.01);与模型组对比,电针组胃窦组织中c-Kit、SCF蛋白的表达量和c-Kit m RNA表达水平增加(0.05),电针加阻断剂组c-Kit蛋白含量与c-Kit m RNA表达降低,SCF蛋白含量出现增高趋势,差异均无统计学意义(均0.05);与电针组对比,假电针组SCF、c-Kit蛋白含量与c-Kit m RNA表达水平降低(0.05)。在透射电镜下,电针组肌内Cajal间质细胞较模型组、假电针组、电针加阻断剂组数量增多,与平滑肌和神经末梢的连接更密切。结论电针足三里可以增加Cajal间质细胞的数量和修复受损的网状结构,从而改善Cajal间质细胞网状结构功能。这种作用机制可能是通过调节SCF、c-Kit蛋白含量与c-Kit m RNA表达,从而调控SCF/c-Kit信号通路实现的。     

基于慢传输型便秘大鼠结肠ICC及AQP3变化的温阳益气方改善便秘的作用机制探讨

目的探讨温阳益气方改善便秘的作用机制及其对模型大鼠结肠ICC及AQP3的影响。方法采用洛哌丁胺灌胃制备便秘大鼠模型,造模组大鼠50只,随机分为:模型组,温阳益气方低、中、高剂量组和莫沙必利组(每组各10只)。另有10只作为正常对照组。记录大鼠一般情况、粪便含水量,肠道传输功能,同时测定结肠肌电,ELISA法测定各组大鼠血清SP、VIP的变化,免疫组化检测结肠AQP3、c-kit蛋白的变化,Real-time PCR检测结肠PKA mRNA、AQP3 mRNA、NK-1mRNA,c-kit mRNA的表达情况。结果与模型组相比,温阳益气方高剂量组可显著增加粪便含水量(P0.05)。温阳益气方低、中、高剂量组大鼠肠道活性炭推进率随着剂量变化而不同程度增加,以中、高剂量组明显增高(P0.05)。结肠肌电检测结果提示温阳益气汤中、高剂量组在振幅、频率变异系数、振幅变异系数水平明显降低(P0.05)。免疫组化结果显示温阳益气方中、高剂量组能抑制AQP3表达,提升c-kit蛋白表达(P0.05),同时与莫沙必利组比较,温阳益气方高剂量组c-kit蛋白表达有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,温阳益气方中、高剂量组血清SP、VIP表达量均明显增高(P0.05)。RT-PCR结果提示治疗组(中药中、高剂量组及莫沙必利组)大鼠结肠AQP3、PKA mRNA表达量明显降低(P0.05),治疗组(中药中、高剂量组及莫沙必利组)大鼠结肠c-kit、NK-1 mRNA表达量明显升高(P0.05)。结论温阳益气方治疗便秘的机制可能是通过增加血清中SP和VIP的含量,调节PKA mRNA和NK-l mRNA的表达,从而调节肠道AQP3及c-kit的表达,通过增加肠道粪便含水量,同时加快肠道蠕动,达到缓解和治疗便秘的作用。     

桃红四物汤对溃疡性结肠炎大鼠SCF/c-kit通路及Cajal间质细胞的影响

目的 探讨桃红四物汤(THSWT)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠干细胞因子(SCF)/酪氨酸蛋白激酶受体(c-kit)通路及Cajal间质细胞(ICC)的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、THSWT低剂量组(50 mg/kg)、THSWT中剂量组(100 mg/kg)、THSWT高剂量组(200 mg/kg)...