右美托咪定预先给药对脂多糖诱导乳鼠原代小胶质细胞炎性介质释放的影响

目的 评价右美托咪定预先给药对脂多糖诱导乳鼠原代小胶质细胞炎性介质释放的影响.方法 培养乳鼠原代小胶质细胞,采用随机数字表法,将其分为3组:对照组(C组)、脂多糖组(L组)和右美托咪定预先给药组(D组),每组10孔.C组去血清细胞培养液培养,L组加入脂多糖(终浓度1 μg/ml),D组加入右美托咪定(终浓度1 ng/ml),1h后加入脂多糖(终浓度1μg/ml).作用24h后采用Griess法测定培养上清液一氧化氮(N0)浓度,采用酶联免疫吸附法测定培养上清液前列腺素E2(PGE2)、IL-1β和TNF-α浓度,采用RT-PCR法测定细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA的表达.结果 与C组比较,L组和D组细胞iNOS mRNA表达上调,上清液NO、PGE2、IL-1β和TNF-α浓度升高(P＜0.01);与L组比较,D组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 右美托咪定预先给药对脂多糖诱导乳鼠原代小胶质细胞炎性介质释放无明显影响.     

右美托咪定激活Akt通路对缺氧复氧肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 观察右美托咪定对缺氧复氧诱导肾小管上皮细胞凋亡的作用,并探讨其作用机制。方法 将人肾小管上皮细胞分五组干预：对照组(C组),常氧环境中培养28 h;缺氧复氧组(HR组),低氧环境中培养24 h后常氧环境中培养4 h;右美托咪定处理组(D组),复制缺氧复氧模型前以右美托咪定处理2 h;Akt阻断剂Uprosertib处理组(U组),复制缺氧复氧模型前以Akt阻断剂Uprosertib处理1 h;右美托咪定复合Akt阻断剂Uprosertib处理组(DU组),复制缺氧复氧模型前先以Akt阻断剂Uprosertib处理1 h,再以右美托咪定处理2 h。采用Ellsa法检测细胞上清中TNF-ɑ、IL-6、IL-1β浓度,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9、p-Akt蛋白含量。结果 与C组比较,HR组、D组、U组和DU组TNF-ɑ、IL-6、IL-1β浓度、细胞凋亡率、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白含量明显升高(P<0.05),细胞存活率、Bcl-2、p-Akt蛋白含量明显降低(P<0.05)。与HR组比较,D组和DU组TNF-ɑ、IL-6、IL-1β浓度、细胞凋亡率、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白含量明显降低(P<0.05),细胞存活率、Bcl-2、p-Akt蛋白含量明显升高(P<0.05);U组TNF-ɑ、IL-6、IL-1β浓度、细胞凋亡率、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白含量明显升高(P<0.05),细胞存活率、Bcl-2、p-Akt蛋白含量明显降低(P<0.05)。与D组比较,U组和DU组TNF-ɑ、IL-6、IL-1β浓度、细胞凋亡率、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白含量明显升高(P<0.05),细胞存活率、Bcl-2、p-Akt蛋白含量明显降低(P<0.05)。与U组比较,DU组TNF-ɑ、IL-6、IL-1β浓度、细胞凋亡率、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白含量明显降低(P<0.05),细胞存活率、Bcl-2、p-Akt蛋白含量明显升高(P<0.05)。结论 右美托咪定可通过激活Akt信号通路,抑制缺氧复氧造成的肾小管上皮细胞凋亡,发挥保护作用。     

右美托咪定通过抑制JAK2/STAT3通路改善脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的研究右美托咪定对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠JAK2/STAT3通路的作用。方法雄性昆明小鼠36只,随机均分为三组:正常组(C组)、模型组(L组)和右美托咪定预处理组(D组)。取小鼠右肺下叶,称量并计算湿/干比重(W/D),对右肺上叶进行苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理学改变,BCA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量,用ELISA试剂盒检测BALF上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及髓过氧化物酶(MPO)水平;qRT-PCR定量分析肺组织中TNF-α、IL-6mRNA水平;Western blot方法检测肺组织中p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白的含量。结果与L组比较,C组、D组肺损伤评分明显降低、小鼠肺W/D、BALF中蛋白含量明显减少,BALF中TNF-α、IL-6及MPO浓度明显降低,肺组织TNF-α和IL-6mRNA表达明显减少,p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3相对量明显减少(P0.05)。结论右美托咪定可能通过抑制JAK2/STAT3通路减轻LPS诱导的小鼠ALI。     

右美托咪定对脓毒症大鼠脑组织炎性反应的影响

目的 评价右美托咪定对脓毒症大鼠脑组织炎性反应的影响.方法 健康雄性SD大鼠72只,10周龄,体重250 ～ 280 g,采用随机数字表法,将其分为4组(n=18):对照组(C组)、脓毒症组(LPS组)、注射用水组(DW组)和右美托咪定组(DEX组).LPS组、DW组和DEX组腹腔注射LPS5mg/kg(溶于1 ml生理盐水中)制备大鼠脓毒症模型;C组腹腔注射生理盐水1ml.DW组侧脑室注射注射用水20μl,DEX组侧脑室注射右美托咪定3μg/kg(溶于20μl注射用水中).分别于开始给药后1、2和6h时处死6只大鼠,取海马组织,采用ELISA法测定TNF-α和IL-6的含量,采用RT-PCR法测定TLR4 mRNA的表达.结果 与C组比较,LPS组开始给药后各时点海马组织IL-6和TNF-α的含量升高(P＜0.05);与LPS组比较,DW组开始给药后各时点海马组织IL-6和TNF-α的含量差异无统计学意义(P＞0.05),TLR4mRNA表达上调(P＜0.05);与DW组比较,DEX组开始给药后各时点海马组织IL-6和TNF-α的含量降低,开始给药后2和6h时海马组织TLR4 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 右美托咪定可减轻脓毒症大鼠脑组织炎性反应,可能与下调TLR4 mRNA的表达有关.     

右美托咪定预处理减轻脑缺血-再灌注后的脑局部炎症反应

目的利用大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型观察右美托咪定预处理减轻脑炎症反应的机制。方法雄性SD大鼠42只,体重220~250g,随机分为七组,每组6只:假手术组(S组):大鼠不做任何干预,只分离一侧颈动脉;MCAO组(M组):阻断一侧颈内动脉血流,缺血90min;D10组:MCAO前30min腹腔注射右美托咪定10μg/kg;D50组:MCAO前30min腹腔注射右美托咪定50μg/kg;D100组:MCAO前30 min腹腔注射右美托咪定100μg/kg;DY组:腹腔注射右美托咪定50μg/kg前10min给予育亨宾5mg/kg;Y组:MCAO前40min腹腔注射育亨宾5mg/kg。MCAO后24h采用TTC染色法测定脑梗死面积,神经功能评分法评定脑损伤程度。采用TUNEL染色法评估大脑皮层细胞凋亡情况,采用Western blot法检测AMPK和磷酸化AMPK(pAMPK)蛋白含量,并计算pAMPK/AMPK值;采用ELISA法检测脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)含量。缺血-再灌注后第1、2、5天评估运动功能。结果与S组比较,M组神经功能评分、脑组织中TNF-α和IL-1β含量明显升高,梗死面积、凋亡细胞数明显增加,运动功能评分明显降低(P0.01)。与M组比较,D10、D50和D100组神经功能评分、脑组织中TNF-α和IL-1β含量明显降低,梗死面积、凋亡细胞数明显减少,pAMPK/AMPK值、运动功能评分明显升高(P0.05);D50和D100组上述指标改变较D10组更为明显(P0.05)。与D50组比较,DY和Y组和YpAMPK/AMPK值明显降低(P0.01)。结论 MCAO后右美托咪定预处理可以通过激活AMPK减轻脑缺血后炎症反应,保护脑组织,改善脑功能,并且高剂量右美托咪定较低剂量的效应更为明显。采用α2肾上腺素能受体拮抗药育亨宾可阻断右美托咪定的这些效应。     

右美托咪定对小鼠内毒素性急性肾损伤时细胞焦亡的影响及其与miRNA-223-3p的关系

目的评价右美托咪定对小鼠内毒素性急性肾损伤时细胞焦亡的影响及其与miRNA-223-3p的关系。方法清洁级健康雄性ICR小鼠32只, 8～12周龄, 体重20～25 g, 采用随机数字表法分为4组(n=8):对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+右美托咪定组(LD组)和LPS+右美托咪定+阿替美唑组(LDT组)。腹腔注射LPS 400 μg/kg, 8 h后腹腔注射LPS 10 mg/kg制备小鼠内毒素性急性肾损伤模型。LD组造模后30 min时腹腔注射右美托咪定40 μg/kg, 每2 h 1次, 共3次;LDT组于造模结束即刻腹腔注射阿替美唑750 μg/kg, 30 min后腹腔注射右美托咪定40 μg/kg, 每2 h 1次, 共3次;C组腹腔注射等容量生理盐水。造模后24 h时经心脏取血, 检测血清Cr和BUN浓度。处死小鼠取左侧肾脏组织, HE染色后光镜下观察病理学结果, 采用Western blot法及qRT-PCR法检测caspase-1 p20、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、ASC及其mRNA表达水平, 采用ELISA法测定IL-1β和IL-1...     

右美托咪定对脂多糖诱导的脓毒症大鼠全身炎症反应和肺损伤的影响

目的观察脂多糖(LPS)对大鼠血浆和肺组织中的炎性因子和Toll样受体4(TLR4)表达的影响及右美托咪定的干预作用。方法雄性SD大鼠40只,250~300g,随机分为四组。Control组(n=10)生理盐水1ml·kg~(-1)·h~(-1)大鼠尾静脉泵注6h;DEX组(n=10)右美托咪定(负荷量6.5μg·kg~(-1)·h~(-1),10min;5μg·kg~(-1)·h~(-1)维持)大鼠尾静脉泵注6h;LPS组(n=10)经大鼠尾静脉注射7.5mg/kg的LPS后继续生理盐水泵注6h;LPS+DEX组(n=10)经大鼠尾静脉注射7.5mg/kg的LPS后泵注右美托咪定6h。以6h为实验终结点,并于此时行右心室取血和肺组织标本的制备。采用ELISA法检测血浆IL-1、IL-6、TNF-α浓度,Western blot法检测肺组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB蛋白含量;检测大鼠肺组织湿/干比(W/D);并用Murakami法评测肺损伤程度。结果与Control组比较,LPS组大鼠血浆IL-1、IL-6和TNF-α浓度明显升高,肺组织中的TLR4、MyD88、NF-κB蛋白含量明显升高(P0.01),肺W/D明显升高;LPS+DEX组上述指标差异均无统计学意义。Control组和DEX组未见明显肺损伤,LPS组肺间质水肿、炎性细胞浸润明显,LPS+DEX组肺损伤程度明显减轻(P0.01)。结论 LPS的刺激可以明显升高大鼠血浆中炎性因子以及肺组织中TLR4的表达水平,右美托咪定的干预可以减轻这一趋势,缓解大鼠的全身炎症和肺水肿的程度。     

右美托咪啶对脂多糖诱导大鼠外周血单核细胞Toll样受体4mRNA表达的影响

目的 探讨右美托咪啶对脂多糖(LPS)诱导大鼠外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠40只,取外周血分离培养单核细胞,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=8),A组:阴性对照;B组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml);C组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml)+右美托咪啶(终浓度为0.5 ng/ml);D组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml)+右美托咪啶(终浓度为5.0 ng/ml);E组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml)+右美托咪啶(终浓度为50.0 ng/ml).孵育24 h后,收集上清液,采用ELISA法测定TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度,采用RT-PCR法测定TLR4 mRNA的表达.结果 与A组比较,B组TNF-α、IL-1p、IL-6的浓度升高,TLR4 mRNA表达上调(P＜0.01);与B组比较,C组、D组和E组TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度降低,TLR4 mRNA表达下调(P＜0.05或0.01);与C组比较,D组和E组TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度降低(P＜0.01),TLR4 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);D组和E组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 右美托咪啶可通过下调TLR4 mRNA表达,抑制TLR4的合成,从而抑制LPS诱导大鼠外周血单核细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的生成与释放.

Abstract：

Objective To investigate the effects of different concentrations of dexmedetomidine on the expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) mRNA in rat peripheral blood monocytes exposed to lipopolysaccharide ( LPS ). Methods Peripheral blood monocytes isolated from male Wistar rats were seeded in 24-well plate in RPMI 1640 liquid culture medium in CO2 incubator at 37 ℃ and 5% CO2 for 2 h, and were randomly divided into 5 groups ( n = 8 each): group A negative control; group B was exposed to LPS 1 μg/ml and C, D and E groups were exposed to LPS 1 μg/ml + dexmetomidine 0.5, 5.0 and 50.0 ng/ml respectively. The monocytes were then incubated for 24 h. The concentrations of TNF-α, IL-1β and IL-6 in the supernatant of the cultured monocytes were detected by ELISA. The expression of TLR4 mRNA in the monocytes was detected by RT-PCR.Results Exposure to LPS significantly increased the expression of TLR4 mRNA and the concentrations of TNF-α, IL-1β and IL -6 in group B as compared with group A ( P ＜ 0.01 ). Dexmedetomidine attenuated the LPS-induced increase in the expression of TLR 4 mRNA and the concentrations of TNF-α, IL-1β and IL-6 in a dose-dependent manner ( P ＜0.05or 0.01 ). Conclusion Dexmedetomidine can inhibit the synthesis of TLR4 and inhibit the secretion and dilivery of TNF-α, IL-1β and IL-6 by down-regulating the gene expression of TLR4 in rat peripheral blood monocytes exposed to LPS.     

右美托咪定对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响

目的 探讨右美托咪定对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响及与肾脏细胞焦亡的关系。
方法 健康清洁级ICR小鼠32只,雌雄各半,8~12周龄,体重20~25 g。采用随机数字表法将小鼠分为四组：对照组（C组）、脂多糖（LPS）组（L组）、LPS+右美托咪定组（LD组）和LPS+右美托咪定+阿替美唑组（LT组）,每组8只。L组、LD组和LT组腹腔注射LPS 400 μg/kg,8 h后腹腔注射LPS 10 mg/kg建立脓毒症急性肾损伤模型。L组于建模即刻、建模后0.5、2、2.5、4、4.5 h腹腔注射生理盐水0.5 ml;LD组于建模即刻、建模后2、4 h腹腔注射生理盐水0.5 ml,于建模后0.5、2.5、4.5 h分别腹腔注射右美托咪定40 μg/kg;LT组于建模即刻、建模后2、4 h腹腔注射阿替美唑750 μg/kg,于建模后0.5、2.5、4.5 h分别腹腔注射右美托咪定40 μg/kg;C组在各时点腹腔注射等量生理盐水。所有小鼠于建模后24 h麻醉处死。采用全自动生化分析仪检测血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）浓度,化学发光法测量肾皮质细胞三磷酸腺苷(ATP)和血清ATP浓度,ELISA法检测肾组织IL-1β和IL-18浓度,qRT-PCR法检测肾组织caspase-11、泛连接蛋白1（pannexin-1）、P2X7 mRNA表达量,Western blot法检测肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7蛋白含量,HE染色法观察肾组织病理结构,TUNEL染色记录肾小管上皮细胞凋亡细胞数并计算细胞凋亡率。
结果 与C组比较,L组、LD组和LT组血清BUN、Scr、ATP浓度均明显升高（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显降低（P<0.05）,肾组织IL-1β和IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显升高（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。与L组比较,LD组血清Scr、BUN、ATP浓度均明显降低（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显升高（P<0.05）,肾组织IL-1β浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1 mRNA表达量均明显降低（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显降低（P<0.05）;LD组和LT组肾组织IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1蛋白含量、肾组织P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显降低（P<0.05）。与LD组比较,LT组血清BUN、Scr、ATP浓度均明显升高（P<0.05）,肾皮质细胞ATP浓度明显降低（P<0.05）,肾组织IL-1β和IL-18浓度、肾组织caspase-11、pannexin-1、P2X7 mRNA表达量及蛋白含量均明显升高（P<0.05）,肾小管上皮细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。
结论 右美托咪定减轻了LPS导致的脓毒症小鼠肾脏病理学损伤,降低肾组织IL-1β和IL-18浓度,降低肾小管上皮细胞凋亡率,可能通过非经典途径减轻了肾脏细胞焦亡。     

不同剂量右美托咪定对妇科腹腔镜手术围术期炎症因子的影响

目的探讨不同剂量右美托咪定对妇科腹腔镜手术围术期炎症因子的影响。方法选择2012年1月至2013年12月择期妇科腹腔镜手术患者90例,按照随机数字表法将其分为高剂量右美托咪定组(D1组)、低剂量右美托咪定组(D2组)和对照组(C组),每组30例。D1组和D2组分别于麻醉诱导后持续静脉输注右美托咪定0.5和0.2μg·kg-1·h-1,C组则以等容量生理盐水代替。记录麻醉诱导前10 min(T1)、气管插管后1 min(T2)、气腹后1 min(T3)、术毕(T4)的MAP和HR,并检测血清TNF-α、IL-6、IL-10水平。结果与T1时比较,T2~T4时D2组和C组MAP明显升高,D1组HR明显减慢,T2、T3时C组HR明显增快(P0.05)。与C组比较,T2~T4时D1组和D2组MAP明显降低,HR明显减慢(P0.05)。与T1时比较,T2~T4时三组TNF-α、IL-6和IL-10水平明显升高(P0.05)。与C组比较,T2~T4时D1组和D2组TNF-α和IL-6水平明显降低,但D1组IL-10水平明显升高,T2、T3时D2组IL-10水平明显降低(P0.05)。结论持续输注右美托咪定可减轻妇科腹腔镜手术围术期炎症反应,且0.5μg·kg-1·h-1较0.2μg·kg-1·h-1更为明显。     

The TEG® vs the ROTEM® thromboelastography/thromboelastometry systems

We have evaluated the TEG^® thromboelastograph and the ROTEM^® thromboelastometer, two point-of-care devices that measure blood coagulation. During a one-week period, seven consultant anaesthetists, one consultant haematologist, one associate specialist anaesthetist and two senior trainee anaesthetists were trained by the manufacturers and set up, calibrated and used both systems, after which their views were obtained and specific technical/support information was sought from the manufacturers using a questionnaire. Although the devices shared common features, they differed in complexity and aspects of ease of use, and in their purchase and running costs.