基于Wnt/β-catenin信号通路探讨太白楤木抗去卵巢大鼠骨质疏松症的作用和机制

目的 探索太白楤木对去卵巢大鼠骨质疏松症以及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 40 只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、仙灵骨葆胶囊组（0.3 g/kg）、太白楤木低剂量组（0.4 g/kg）和太白楤木高剂量组（0.8 g/kg）,每组8 只,除假手术组外其余组进行去卵巢手术。术后灌胃给药12周,三点弯曲试验测定骨生物力学性能,Micro-CT检测骨密度和微结构,ELISA法检测血清骨代谢指标,HE染色观察胫骨病理改变,Western blot法测定骨组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达情况。结果 经过12周治疗,与模型组相比,太白楤木高剂量组显著增大最大载荷、刚度和最大应力(P＜0.01),提高去卵巢大鼠骨密度(P＜0.01),保护骨小梁微结构不被破坏,骨吸收标志物NTX-Ⅰ和TRAP水平降低(P＜0.01),骨形成标志物BALP水平升高(P＜0.01),Wnt3a、β-catenin和RUNX2蛋白表达量升高(P＜0.01),p-β-catenin蛋白水平降低(P＜0.01)。结论 太白楤木对去卵巢大鼠生物力学性能、骨密度和骨微结构具有保护作用,太白楤木调节骨代谢可能和激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

Wnt/β-catenin信号通路探讨羌活鱼超微粉抗去卵巢大鼠骨质疏松的作用机制

目的 探讨羌活鱼超微粉对去卵巢大鼠骨代谢、骨微观结构及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 选取75只4月龄SPF级雌性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、羌活鱼超微粉组、羌活鱼普通粉组、仙灵骨葆组,除假手术组外均采用去势法建立骨质疏松症动物模型。药物干预12周后通过ELISA检测各组血清骨代谢指标、通过Micro-CT扫描测定各组大鼠的股骨骨微结构变化、运用Western Blot法测定骨组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果 药物干预12周后,与模型组相比,羌活鱼组、仙灵骨葆组的ALP、OPG、PINP及BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著升高,SMI、Tb.Sp、TRACP显著降低,Wnt2、β-catenin、Runx2的蛋白表达增加,但仍较假手术组低,差异有统计学意义（P<0.05）;羌活鱼超微粉组在改善大鼠骨代谢、骨微观结构及蛋白表达方面均优于羌活鱼普通粉组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 羌活鱼能够延缓去卵巢大鼠骨质疏松的发生、发展,且超微粉剂优于普通粉剂,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

microRNA-21调节Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症作为老年骨科中的一种代谢性及慢性疾病，主要表现为骨密度降低及骨骼脆性增加。microRNA-21作为最为密切的骨质疏松症相关微小因子，能够发挥调节作用进而抑制骨质疏松症的进展。Wnt/β-catenin信号通路作为与骨质疏松症相关的经典信号通路，对延缓骨质疏松症的进展具有重要的作用。microRNA-21通过调节该信号通路的表达，进而防治骨质疏松症的进展。该文就microRNA-21与该信号通路的相关性及在防治骨质疏松症方面的作用进行综述，以期从微小分子方面探讨新的防治骨质疏松症的途径，为骨质疏松症的研究提供更多的理论依据。     

中医药介导Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松的研究进展

骨质疏松症（osteoporosis,OP）的发生多由骨吸收大于骨形成导致骨稳态失衡所引起,随着人口老龄化的到来,已逐渐发展成为困扰50岁以上人群的常见慢性代谢性骨病。Wnt/β-catenin信号通路在骨骼相关细胞增殖、分化中发挥着重要作用,通过激活其核心蛋白β-catenin,上调骨形态发生蛋白-2、骨保护素及下调核因子κB受体活化因子配体的表达,进而促进间充质干细胞成骨分化和抑制破骨细胞活性,达到促进骨形成和抑制骨吸收的目的,在骨骼靶向重建及骨稳态中发挥着重要作用。中医药可通过激活Wnt/β-catenin通路影响相关因子表达防治OP,但其分子机制研究尚未完全阐明。笔者旨在探讨Wnt/β-catenin通路在OP发病中的分子机制及综述中医药介导Wnt/β-catenin信号通路防治OP的研究成果,为中医药防治OP提供依据和新思路。     

不同中药调控Wnt/GSK-3β/β-连环素蛋白通路治疗骨质疏松症的研究现状

Wnt/GSK-3β/β-连环素蛋白(β-catenin)通路是一种作用广泛的经典信号通路,在骨骼生长发育及骨髓干细胞转化等多种过程起重要作用。笔者就不同中药通过该通路对骨重建影响的文献研究,了解到苦味药独活、藜芦、姜黄、黄连、黄芩,补肾药龟板、淫羊藿、骨碎补,补气药黄芪等单味中药及左归丸、右归丸、金贵肾气丸等补肾中药复方通过调控Wnt/GSK-3β/β-catenin通路,抑制GSK-3β的表达,促使更多的β-catenin向核内转移,进而诱导骨髓干细胞向成骨细胞分化,抑制破骨,以达到增加骨密度、增强骨的机械应力、治疗骨质疏松的作用效果,通过观察中药对Wnt/GSK-3β/β-catenin通路各种蛋白表达的影响,阐明中药对骨代谢的调节作用,为开展中药复方治疗骨质疏松症的研究与开发提供思路。     

青娥丸调控Wnt1/β-catenin信号通路治疗糖尿病骨质疏松

目的 探究青娥丸对糖尿病骨质疏松（diabetic osteoporosis，DOP）小鼠模型Wnt/β-catenin通路的影响。方法 采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲菌素建立DOP小鼠模型，对小鼠进行药物干预，分为空白组、模型组、青娥丸低、中、高剂量组及阿仑膦酸钠组，进行一般状态观察，股骨组织进行HE染色，验证造模成功情况。生化检测各组小鼠碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、天冬氨酸转氨酶（AST）的水平，免疫组化检测股骨Wnt/β-catenin信号传导通路中相关蛋白Wnt1、β-catenin、Runx2表达水平，HE染色观察各组股骨组织细胞形态，qPCR检测股骨组织中GSK-3β、低密度脂蛋白受体相关基因5(LRP5)、COL1A1 mRNA水平。结果 与对照组相比，模型组小鼠骨小梁间隔增大，骨小梁之间连接减少，小鼠多饮多尿少动，尾静脉血糖值增加（P＜0.01），血清中ALP、BUN、AST含量和GSK-3β mRNA水平均增加（P＜0.01），体重和LRP5、COL1A1 mRNA水平下调（P＜0.01），Wnt1、β-catenin、Runx2蛋白呈少量阳性表达（P＜0.01）。与模型组相比，青娥丸组和阿仑膦酸钠组骨小梁间隔变小，骨小梁间的连接增多，尾静脉血糖值下降（P＜0.01），血清中ALP、BUN、AST含量和GSK-3β mRNA水平均减少（P＜0.01），体重和LRP5、COL1A1 mRNA水平上调（P＜0.01），Wnt1、β-catenin、Runx2蛋白阳性表达增多（P＜0.01）。结论 青娥丸可增强DOP小鼠骨组织的修复作用，其机制可能与Wnt1/β-catenin信号通路的激活有关。 关键词：中医中药；青娥丸；糖尿病性骨质疏松；骨组织；Wnt1/β-catenin信号通路     

蒙药那仁满都拉调控Wnt/β-catenin信号通路抗骨质疏松的作用及机制

目的 观察蒙药那仁满都拉对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨微结构与骨形成的影响,初步探讨其防治骨质疏松的作用及机制。方法 将30只雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙药那仁满都拉低、中、高剂量组,每组6只,利用去卵巢大鼠构建骨质疏松模型大鼠,模型制备成功后用蒙药灌胃,假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。连续12周后,通过对股骨组织进行Micro-CT、骨骼力学检测、HE染色,分别观察大鼠骨密度、骨骼力度、骨组织病理形态,检测Wnt、β-catenin蛋白表达情况;从1日龄大鼠颅骨中提取成骨细胞用低、中、高浓度的含药血清干预后检测ALP染色、矿化染色,观察其ALP分泌、矿化结节大小,检测Wnt、β-catenin蛋白表达情况。结果 在模型大鼠股骨组织中Micro-CT显示,蒙药组均能增加骨小梁密度;骨骼力学分析显示,蒙药组均能提高骨骼力学的载荷与刚度,其中中、高剂量组具有显著统计学意义(P<0.01,P<0.05)。HE染色结果显示蒙药组均可明显改善骨小梁病理变化;Western blot结果提示蒙药组中Wnt、β-catenin蛋白表达明显升高(P<0.000 1);蒙药含药血...     

Wnt/β-catenin信号通路及与之相关骨质疏松药物研究

目的 Wnt/β-catenin信号通路在维持骨组织平衡过程中发挥至关重要的作用,主要通过调节信号通路过程中的三类抑制物实现,分别为Sclerostin、Dickkopfs(DKKs)、Secreted frizzled-related proteins(SFRPs)。同时,与之相关的促进骨形成的新药,如Sclerostin单克隆抗体(AMG 785)和DKK1单克隆抗体(RH2-18),正在进行动物及III期临床试验。本文就Wnt/β-catenin信号通路的结构及分布,该通路及其调节机制对骨代谢的作用及与之相关的骨质疏松药物研究作一综述。     

Wnt/β-catenin信号通路重要分子及其靶基因在原发性肝癌中的作用机制

肝癌是我国及某些亚非地区常见的恶性肿瘤之一,死亡率较高.近年来我国肝癌的发生率有上升趋势,因此了解肝癌的发生发展机制及其治疗刻不容缓.但目前对其发生机制仍不清楚.其中细胞信号转导对其发生、发展、转移起着至关重要的作用.如Notch信号通路、Wnt信号通路、Ras、Jnk信号通路、mTOR通路等,目前倍受关注的是Wnt/β-catenin转导途径.经典Wnt信号通路研究最多且相关机制解释较为清楚,其激活的重要标志是β-catenin于胞质稳定表达及核内定位.研究表明,Wnt信号通路各蛋白表达水平改变及相关基因突变参与了原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生.     

基于Wnt／β-catenin信号通路的中医药干预骨关节炎的研究进展

骨关节炎是老年人最常见的骨病之一,该病的发病机制尚不明确,除手术外无有效治疗手段。目前Wnt/β-catenin信号通路与骨关节炎已成为研究热点,近年来中医药调控Wnt/β-catenin信号通路干预骨关节炎的研究取得较大进展。作者通过查阅CNKI、维普和PUBMED数据库近10年的国内外相关文献,总结了中医药调控Wnt/β-catenin信号通路干预骨关节炎的研究进展,分析这些研究中存在的问题,以期进一步阐明中医药如何通过调控Wnt/β-catenin信号通路干预骨关节炎的分子机制,发掘中医药防治骨关节炎的潜在价值。     

补肾健脾中药复方对去势大鼠骨骼肌线粒体通透转孔调控的研究

目的 探讨补肾健脾中药复方干预去势大鼠骨骼肌线粒体通透转孔的影响。方法 48只6 月龄的雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组。治疗12周后收集左侧股骨、股直肌分 别行骨矿含量、骨密度测量,同时进行骨骼肌线粒体通透转换孔的检测。结果 最后纳入研究的动物 40只。模型组的骨密度值和骨矿含量均低于空白组,其差异有统计学意义（P <0.05 );中药组和西药组的骨密度值均高于模型组,其差异有统计学意义（P <0.05 )。在骨骼肌线粒体通透转换孔方面,空白组的OD比值均相应高于模型组的OD比值,其差异有统计学意义（P <0.05 )。经过药物干预后, 观察组的OD比值与对照组的OD比值均相应低于同一时间点的模型组OD比值,其差异有统计学意 义（P <0.05 )。结论 补肾健脾中药复方对去势大鼠有明显的治疗作用,能明显提高骨密度;而且能在一定程度抑制骨骼肌细胞的凋亡。     

补肾益气活血法治疗绝经后骨质疏松症的实验研究

目的 探讨补肾益气活血法对大鼠去卵巢试验性骨质疏松模型的治疗作用和疗效作用机制。方法 40只12月龄SD雌性大白鼠随机等分为：正常组、造模组、中药组和西药组。正常组行假手术，其余三组行卵巢切除术。术后一周给药，满4个月后处死，取胫骨行组织形态学测量，并取血观测其碱性磷酸酶、雌二醇、骨钙素。结果 补肾益气活血中药可提高雌二醇水平，降低碱性磷酸酶和骨钙素活性，显著提高骨密度。结论 补肾益气活血中药通过其性激素样作用来抑制骨吸收和骨转化率，防治绝经后骨质疏松。     

补肾、健脾和活血化瘀方药对去卵巢大鼠骨质疏松的比较性研究

采用去卵巢大鼠模型，在确定单一因素的条件下比较性研究三种治则对骨代谢的影响。４０只４月龄ＳＤ♀大鼠，随机分为５组，每组８只。Ⅰ组：假手术组（ｓｈａｍ），Ⅱ组：切除卵巢组（ＯＶＸ），Ⅲ组：切除卵巢加补肾方剂组（ＯＶＸ＋ＴＫＲ），Ⅳ组：切除卵巢加健脾方剂组（ＯＶＸ＋ＩＳＲ），Ⅴ组：切除卵巢加活血化瘀中药组（ＯＶＸ＋ＰＢＣＲ）。术后第７天起，Ⅲ～Ⅴ组灌胃中药，Ⅰ～Ⅱ组灌胃蒸馏水。术后９７天处死动物。行血清、尿生化检测、胫骨骨组织形态计量学检测和股骨骨密度检测。结果：ＯＶＸ与ｓｈａｍ组相比，胫骨ＴＢＶ％明显下降（Ｐ＜０．０１），股骨的股骨头、粗隆间、踝间窝上骨密度明显下降（Ｐ＜０．０５～０．０１）。ＯＶＸ＋ＴＫＲ组与ＯＶＸ组相比，胫骨ＴＢＶ％明显上升（Ｐ＜０．０１），股骨各部位骨密度均明显升高（Ｐ＜０．０５～０．０１），健脾方剂组基本无延缓去势引起的骨量丢失作用。活血化瘀中药有延缓去势引起的大鼠骨量丢失作用。结果提示：三方相比，补肾方剂有显著性对抗去势引起的大鼠骨量丢失作用。     

补肾健脾中药方对去卵巢大鼠血清SOD和MDA的影响

目的探讨补肾健脾中药方对去卵巢大鼠血清SOD和MDA的影响。方法 48只6月龄的雌性SD大鼠随机分为正常空白组、模型组、中药组、西药组。治疗12周后,收集左侧股骨、血清分别行BMD测量和SOD、MDA检测。结果最后纳入研究动物40只。股骨BMD值:模型组低于正常空白组(P0.01);观察组、对照组分别与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。在SOD方面,观察组、对照组的SOD值均比模型组高,三者比较,有统计学意义(P0.05)。在MDA方面,观察组、对照组的MDA值均比模型组低,三者比较,有统计学意义(P0.05)。结论补肾健脾中药康方具有提高去卵巢大鼠BMD的作用;能够提高血清中SOD的含量,同时减低MDA含量,在一定的程度上清理自由基,达到防治骨质疏松症的目的。     

补肾健脾活血法治疗绝经后骨质疏松症疗效的Meta分析

目的 系统评价补肾健脾活血法治疗绝经后骨质疏松症的疗效。方法 利用计算机检索各大数据库,如Cochrane图书馆、知网(CNKI)、万方(Wanfang)、荷兰医学文献数据库、维普(VIP)、Web of Science、PubMed、Medline等数据库,检索各库建库时间至2021年2月补肾健脾活血法治疗绝经后骨质疏松症的随机对照试验(randomized controlled trial, RCT),并采用RevMan5.3软件对符合纳入条件的文献进行定量Meta分析。结果 共纳入14篇RCT文献进行定量分析,研究共涉及1 218名患者,分析结果显示,(1)补肾健脾活血法方药在提高绝经后骨质疏松患者临床有效率[OR=2.57, 95%CI(1.37～4.83),P=0.003]、血清E₂水平[MD=3.15,95%CI(0.28～6.02),P=0.03]以及降低患者B-ALP水平[MD=-17.63,95%CI(-26.01～-9.25),P<0.000 1]、尿Ca/Cr比值[MD=-0.14, 95%CI(-0.27～-0.01),P<0....     

补肾健骨中药复方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Leptin启动子甲基化的影响

目的观察去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Leptin启动子甲基化,探索补肾健骨中药复方防治绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的分子机制。方法切除雌性Wistar大鼠双侧卵巢建立PMOP模型,实验大鼠分为4组:正常组、模型组、补肾健骨中药复方组、仙灵骨葆阳性对照组。给药14周后,X射线骨密度测定仪检测骨密度、显微镜观察股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构、质谱法检测Leptin启动子甲基化。结果 (1)第1～6腰椎骨密度,模型组与正常组相比显著降低(P0.01);补肾健骨中药复方组、仙灵骨葆阳性对照组与模型组相比显著升高(P0.05)。(2)模型组与正常组相比,股骨头骨皮质骨板变薄,骨松质骨小梁明显变细,有些部位破坏、断裂,骨髓腔明显扩大;补肾健骨中药复方组、仙灵骨葆阳性对照组与模型组相比,股骨头显微形态结构病理改变明显改善。(3)骨组织Leptin启动子-493 bp～-19 bp甲基化水平,模型组与正常组相比Cp G19、Cp G22.23显著升高(P0.05);补肾健骨中药复方组(P0.01)、仙灵骨葆阳性对照组(P0.05)与模型组相比,Cp G19甲基化水平显著降低。结论补肾健骨中药复方通过降低骨组织Leptin启动子甲基化的分子机制,有效防治PMOP。     

补肾健脾中药复方干预成骨细胞内细胞凋亡蛋白的机制研究

目的分析补肾健脾中药复方对成骨细胞内Bcl-2、Bax和Bid的调控作用,探讨细胞凋亡信号途径和骨质疏松症的相关关系。方法选用1日龄SD大鼠获取原代的成骨细胞体外培养,细胞分成治疗组、对照组和正常组,治疗组给予补肾健脾中药复方含药血浆,对照组给予戊酸雌二醇含药血浆培养,正常组常规培养,采用MTT比色法记录各组细胞的OD值,荧光定量PCR法检测各组Bcl-2、Bax和Bid表达。结果在细胞增殖方面,治疗组的OD值在第8天时达最大值,明显高于对照组(P0.05),从而确定第8天为最佳实验时间;与对照组相比,治疗组中Bcl-2、Bax和Bid蛋白的表达量上升,其差异有统计学意义(P0.05);而且治疗组的Bcl-2/Bax比值明显高于对照组,其差异有统计学意义(P0.05)。结论补肾健脾中药复方能下调Bcl-2、Bax和Bid的表达,在一定程度上抑制成骨细胞的凋亡。     

补肾健脾活血法治疗中老年原发性骨质疏松症Meta分析

目的 系统评估补肾健脾活血法治疗中老年原发性骨质疏松症(primary osteoporosis,POP)的有效性,进一步为临床提供循证参考.方法 检索中国知网、万方数据库、维普中文科技期刊数据库、Medline、PubMed、Springer、PHMC、Cochrane Library,收集运用具有补肾健脾活血功效的...     

益肾活血法对精子DNA损伤及自然妊娠结局的影响

目的:探讨益肾活血法治疗男性不育症的疗效,观察其对精子DNA损伤、自然妊娠结局的影响。方法:伴有精子DNA碎片指数(DFI)异常的50例男性不育症患者为观察对象,随机分为2组,最后42例纳入统计分析,其中益肾活血法组(试验组)22例,对照组20例。试验组予口服中药治疗,对照组予口服他莫昔芬片和维生素E胶丸,3个月为1个疗程。治疗前后检测精液常规参数、精子形态、DFI变化情况,并对自然妊娠情况随访。结果:与治疗前比较,治疗后试验组精子浓度[(36.82±29.16)×10^6/ml vs(50.00±39.16)×10^6/ml,P<0.05]、前向运动精子百分率[(20.62±9.10)%vs(36.82±13.45)%,P<0.05]、正常形态精子百分率[(1.28±1.00)%vs(3.44±1.33)%,P<0.05]显著升高,精子DFI显著降低[(29.07±11.52)%vs(15.51±11.31)%,P<0.05];对照组精子浓度[(34.56±37.03)×10^6/ml vs(40.72±47.37)×10^6/ml,P<0.05]、前向运动精子百分率[(21.25±9.11)%vs(26.18±10.60)%,P<0.05]、正常形态精子百分率[(1.48±0.91)%vs(2.57±1.32)%,P<0.05]也显著升高,精子DFI也显著降低[(24.43±8.46)%vs(18.53±10.44)%,P<0.05];两组比较,试验组在提高精子总活力、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率方面显著优于对照组(P<0.05),而在增加精子浓度和降低DFI差异无统计学意义(P>0.05)。试验组妊娠率(18.2%vs 15.0%)和活产率(18.2%vs 10.0%)均高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾活血法类中药有助于降低精子DNA损伤,改善自然妊娠结局。     

Vaspin对去卵巢大鼠骨质疏松的保护作用及机制研究

目的 观察内脏脂肪组织特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂（visceral adipose tissue derived serine protease inhibitor，Vaspin）对去卵巢大鼠骨质疏松的保护作用，并探讨潜在的机制。方法 30只雌性SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、去卵巢组（OVX）以及OVX+Vaspin治疗组，每组10只，OVX组及OVX+Vaspin治疗组均给予去卵巢手术构建绝经后骨质疏松模型，OVX+Vaspin组大鼠每天给予Vaspin 1 μg/kg腹腔注射治疗，Sham及OVX组给予等量生理盐水腹腔注射，干预12周后，检测血清1型胶原前N末端前肽(P1NP)、骨钙素(OCN)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、1型胶原C末端肽(CTX)、白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的水平；再分别进行骨病理组织学检查、生物力学分析、microCT检查，评价骨微观结构和骨强度，并通过qRT-PCR和Western blot检测Vaspin对骨组织中OPG及RANKL的mRNA和蛋白表达的影响。结果 Vaspin干预治疗12周后，与OVX组相比，OVX+Vaspin组大鼠的血清P1NP和OCN明显升高，血清TRAP、CTX及IL-1β、TNF-α明显降低(P<0.05)，骨强度和显微结构特征改善, 大鼠骨组织中OPG的mRNA和蛋白表达水平均上调，RANKL的mRNA和蛋白表达水平均下调。结论 Vaspin可能通过上调OPG的表达、下调RANKL的表达介导对OVX大鼠骨代谢的调节作用，改善骨微观结构和提高骨强度，从而发挥抗骨质疏松的作用。