人参15个组织器官中皂苷量与6种人参皂苷生物合成基因表达的相关性研究

以四年生红果期吉林人参的15个组织器官为材料,利用HPLC和香草醛-硫酸比色法分别测定15个组织器官中6种单体皂苷(人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁,Rc,Rb₂,Rd)和总皂苷含量;同时,利用实时荧光定量PCR测定15个组织器官中法尼基焦磷酸合成酶(farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)、鲨烯合成酶(squalene synthase,SQS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SQE)、氧化鲨烯环化酶(oxidized squalene cyclase,OSC)、β-香树脂合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)和细胞色素P450超家族(cytochrome P450 family,P450)基因的相对表达量。研究试图通过相关性分析,获得吉林人参15个组织器官中人参皂苷含量与生物合成途径相关酶基因表达量之间相关关系。结果表明,6种单体皂苷含量之间具有线性正相关的协同增减趋势,而单体皂苷含量与总皂苷含量之间具有相关性极显著(P<0.01)的正相关关系;总皂苷含量与人参中SQS,OSC,β-AS,SQE,P450,FPS基因之间的相关性极显著(P<0.01),单体皂苷含量与6种酶基因之间相关性各不相同。说明这6种参与人参皂苷生物合成酶基因调控人参总皂苷与单体皂苷的生物合成,它们在人参不同组织器官中的表达呈现协同增减趋势,并以集群协调表达的方式来调控人参皂苷生物合成。     

人参属植物高温蒸制前后人参皂苷含量的变化和细胞毒活性研究

目的 研究人参属植物人参Panax ginseng、三七P.notoginseng和西洋参P.quinquefolium高温蒸制前后主要人参皂苷的含量变化,并测定高温蒸制前后样品对4株肿瘤癌细胞的细胞毒活性.方法 采用HPLC建立了测定22种皂苷含量的分析方法,测定这些皂苷在人参属植物及其高温蒸制品中的含量.用MTT法...     

手性人参皂苷Rg_3的抗凝血和抗血小板聚集活性差异研究

目的:观察人参皂苷20(S)-Rg3和20(R)-Rg3的的大鼠体内抗凝血活性和体外ADP诱导的血小板聚集活性的差异,初步探究其抗凝作用机制。方法:将大鼠随机分为5组[对照组、20(S)-Rg3和20(R)-Rg3低、高剂量组],每组3只。给药组分别以5 mg·kg-1和20 mg·kg-1剂量尾静脉给药,眼眶取血后,测定血浆的APTT、PT和TT值;取大鼠全血,以ADP为诱导剂,体外测定Rg3对血小板聚集的抑制率。结果:在20 mg·kg-1的剂量下,20(R)-Rg3对APTT有显著的延长作用(P0.05),对PT有显著的缩短作用(P0.05),而S构型则对上述指标无显著的影响。1 mg·m L-1的20(R)-Rg3显著抑制ADP诱导的血小板聚集(P0.05),而20(S)-Rg3则显著促进ADP诱导的血小板聚集(P0.01)。结论:人参皂苷Rg3的两个手性异构体在抗凝血和抗血小板聚集作用上有差异。20(R)-Rg3构型相对于S构型更具有抗凝作用,通过延长APTT和抗血小板聚集两种机制体现出来。     

中药中皂苷类化合物的抗氧化活性评价研究

目的 以人参、西洋参、三七中的皂苷类化合物为研究对象研究其抗氧化性能.方法 采用Photochemi-luminescence (PCL)抗氧化活性体外评价体系为分析平台系统考察皂苷类化合物的抗氧化活性,并利用DPPH法进行对照评价.结果 人参、西洋参和三七95%乙醇提取的皂苷类化合物均具有一定的清除自由基活性,并且随着皂苷含量的增加,其清除自由基能力增强.结论 PCL法成功应用于皂苷类化合物的清除自由基能力研究.     

西洋参冠瘿组织与西洋参药材人参皂苷含量比较研究

目的:比较西洋参冠瘿组织与西洋参药材人参总皂苷含量及各人参皂苷含量的差异,为采用生物技术方法生产人参皂苷提供理论依据.方法:采用香草醛-冰醋酸-高氯酸紫外显色法测定西洋参冠瘿组织与西洋参药材中总皂苷含量;用HPLC法测定西洋参冠瘿组织与西洋参药材中人参皂苷Rb1、Rb3、Rc、Re的含量.结果:(1)培养27 d西洋参冠瘿组织总皂苷积累量达到最高,与西洋参药材总皂苷含量相当;(2)西洋参冠瘿组织中人参皂苷Rb1、Re的含量约为西洋参药材的50%,人参皂苷Rc的含量约为西洋参药材的80%,人参皂苷Rb3的含量远远高于西洋参药材,约为西洋参药材的16倍.结论:西洋参冠瘿组织可作为大规模生产人参皂苷的新途径.     

西洋参微粉加工与人参皂苷Rb1含量的相关性研究

目的:比较不同粒度西洋参超微粉粉体中人参皂苷Rb1含量来确定粉碎工艺.方法:用HPLC法测定西洋参微粉中人参皂苷Rb1含量.结果:常温、低温粉碎的西洋参微粉中人参皂苷Rb1含量均随粉碎粒度变细而增高,低温粉碎的西洋参微粉中人参皂苷Rb1含量明显高于常温粉碎的西洋参微粉.结论:低温粉碎西洋参优于常温粉碎.     

基于人参皂苷含量的西洋参等级规格标准研究

目的：分析不同产地、不同等级规格西洋参中人参皂苷的含量,评价西洋参的化学信息,为其行业标准的制定提供实验依据。方法：采用UPLC测定主要活性成分人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg2含量,用SPSS16.0软件进行统计分析。结果：建立了不同产地西洋参样品人参皂苷分布特征图谱;西洋参中Rg1、Re、Rb1的含量之和符合《中国药典》标准;方差分析表明产地、长度对同一个规格的西洋参中人参皂苷的含量影响具有统计学意义（P〈0.01）。结论：由于西洋参中人参皂苷含量受产地、长度、重量等多因素影响,在等级规格评价中,符合《中国药典》标准基础上不宜采用人参皂苷含量为指标进行等级规格划分。     

HPLC法测定人参、三七颗粒中四种皂苷类成分的含量

目的：建立测定人参、三七颗粒中四种皂苷类成分含量的高效液相色谱方法。方法：WatersNova—Pakc18（150×3．9mm 4μm）色谱柱,流动相为乙腈-水溶液梯度洗脱,流速为1．0mL／min,检测波长为203nm。结果：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rbl分别在0．210～1．890μg,0．822—7．398μg,0．203～1．827μg及11．22—10．98μg范围内线性关系良好,相关系数r均大于0．9995。三七皂苷R1的回收率为101．7,RSD=2．3％（n=5）;人参皂苷Rg1的回收率为97．4,RSD=1．3％（n=5）;人参皂苷Re的回收率为98．9,RSD=1．6％（n=5）;人参皂苷Rb1的回收率为100．4RSD=0．9％（n=5）。结论：本方法操作简便,分离效果好,灵敏度高,重复性好,可用于控制人参、三七颗粒的质量。     

HPLC同时测定人参药材中12种人参皂苷的含量

目的:建立HPLC测定人参药材中12种人参皂苷含量的方法.方法:采用lunna NH2色谱柱(4.6 mm×150mm,5 μm);流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长203 nm,柱温为室温.结果:12种人参皂苷Rh2,Rh1,Rg2,Rg3,Rg1,Rf,Re,Rd,Rc,Rb2,Rb3,Rb1在60min内达基线分离,线性关系良好(Γ≥0.999 5).加样回收率分别为98.1%,95.3%,96.1%,95.6%,97.3%,98.6%,98.0%,96.4%,96.1%,97.6%,96.8%,96.9%(RSD≤3%).结论:该方法简便,快速,可作为人参药材质量控制指标.     

西洋参茎叶总皂苷制取人参皂苷Rh2的应用研究

西洋参原产于北美加拿大和美国东部，现国产西洋参已种植成功。卫生部已认定国产西洋参与西洋参通用。西洋参的药理作用与人参相似，但比人参作用缓和。人参皂苷-Rh2，具有诱导癌细胞分化逆转作用，对多种癌细胞的增殖具有直接抑制作用。但人参和西洋参中抗癌活性较强的单体皂苷含量甚少，1983年，日本学者     

三七叶的化学成分及其抗氧化活性研究

目的研究三七Panax notoginseng叶乙醇提取物的化学成分及抗氧化活性(ABTS和DPPH)。方法利用硅藻土、硅胶、MCI柱色谱、凝胶柱色谱、中压制备液相色谱和制备液相等色谱技术进行分离纯化,并应用质谱、核磁共振等波谱技术鉴定化合物结构。初步考察了这些化合物的抗氧化能力。结果从三七叶95%乙醇提取物的氯仿、丙酮-乙醇(4∶1)和丙酮-乙醇(1∶1)3个洗脱部位中分离鉴定了15个化合物,分别为falcarinol(1)、γ-tocopherol(2)、(5S)-3α-acetyl-2,3,5-trimethyl-7α-hydroxy-5-(4,8,12-trimethyltridecanyl)-1,3α,5,6,7,7α-hexahydro-4-oxainden-1-one(3)、picrionoside B(4)、linarionoside A(5)、viburnolide A(6)、槲皮素(7)、lilyn(8)、茵芋苷(9)、阿彼斯基姆素(10)、daphnin methylether(11)、20(S)-人参皂苷Rh2(12)、人参皂苷F2(13)、20(R)-人参皂苷Rh2(14)、异人参皂苷Rh3(15)。结论化合物3、6、9~11为首次从人参属植物中分离得到,化合物2、4为首次从该植物中分离得到。化合物2、4、7、8具有较强的抗氧化活性。     

林下参皂苷含量与生态因子的相关性研究

目的 研究林下参Panax ginseng皂苷含量与生态因子的关系,明确影响林下参皂苷积累的主导生态因子,为林下参的生态种植提供理论依据。方法 以吉林省和龙市12个样地林下参为研究对象,采用HPLC法测定林下参7种单体皂苷含量,并测定土壤含水量、有机质、空气温湿度、透光率等14个生态因子,运用相关性分析、灰色关联度分析、逐步回归分析等统计方法,探讨人参皂苷含量与生态因子的关系。结果 不同样地林下参皂苷含量存在显著差异,其中各样地含人参皂苷Rb1为2.93～6.13mg/g,均超出《中国药典》2020年版标准(人参皂苷Rb₁不少于0.20%),而人参皂苷Rg₁与人参皂苷Re之和为1.23～5.61 mg/g,有5个样地未达到药典标准(人参皂苷Rg₁与人参皂苷Re之和不少于0.30%),可见不同生境条件对林下参皂苷含量积累具有较大影响;综合多项数学统计结果,土壤含水量、有机质含量、碱解氮含量、空气温度和适中的透光率等5个生态因子对林下参皂苷含量存在明显的正向影响,土壤容重存在明显的负面影响,而其他8个生态因子的影响未得到一致...     

QuECHERS-液相色谱-串联质谱法测定不同产地人参中147种农药残留

目的 建立QuEChERs结合液相色谱-串联质谱同时测定不同产地人参Panax ginseng中147种农药残留的分析方法。方法 人参样品经0.1%冰醋酸乙腈提取,QuEChERs法净化,采用F5色谱柱（50 mm×30 mm,2.6 μm）,流动相为0.5%氨水-0.1%甲酸水溶液（A）-甲醇（B）;进样口温度为250 ℃,进样量为10 µL,体积流量0.5 mL/min,电离方式ESI⁺;毛细管电压5.5 kV;源温度500 ℃;气帘气压力207 kPa：雾化器压力414 kPa;碰撞气62 kPa,多反应监测模式。结果 147种农药的线性关系良好,相关系数均不低于0.995,3个添加水平（1.0、5.0、20.0 ng/kg）下,81.2%的农药残留的回收率范围在60%～140%,相对标准偏差均小于14.02%。结论 该方法净化方式简单、提取充分、回收率较高,适用于人参中农药残留的筛查测定,为人参中农药残留量的快速筛查和质量控制提供技术支撑。     

基于ITS2的竹节参及其近缘物种和混伪品鉴定评估

目的对竹节参及其近缘物种和混伪品进行分子鉴定,为竹节参现代化鉴定提供科学依据和保证临床疗效与用药准确性。方法对竹节参样品进行ITS2基因片段扩增和正向测序,并从Gen Bank数据库下载竹节参、近缘物种和混伪品的ITS2序列,通过ITS2 database剪切最终共获得24个物种102条序列,使用DAMBE软件进行序列替代饱和度检测,利用MEGA 6.06软件进行比对、分析变异位点、计算GC含量、种内和种间遗传距离、构建NJ系统发育树,并预测ITS2二级结构。结果竹节参ITS2序列长度均为230 bp,平均GC含量63.7%,ITS2序列平均遗传距离分析、NJ树、二级结构特征均显示竹节参与非同属混伪品和部分近缘物种(屏边三七、假人参、三叶参、野三七和越南人参)存在极大差异,能有效区分,而鉴定近缘物种西洋参、人参、三七、珠子参、羽叶三七、Panax assamicus、Panax variabilis和狭叶竹节参序列分辨率较低,具有一定局限性。结论 ITS2序列可作为鉴定竹节参与其非同属混伪品DNA条形码之一,对非同属混伪品鉴定分辨率极高,而对于鉴定其近缘物种的通用性仍有待考证,这为后续竹节参及其近缘物种种间遗传关系和亲缘关系鉴定、非同属混伪品鉴别区分和临床安全用药提供重要参考。     

三七片DNA条形码分子鉴定及方法学考察

目的为研究DNA条形码技术在中成药鉴定中的应用,以三七片为研究对象,对方法的适用性、专属性与精密度进行考察。方法收集15批次市售三七片样品,考察三七片DNA提取条件,并对"中药材DNA条形码分子鉴定法指导原则"中PCR扩增、序列获得、结果判定等方法适用性进行确认;收集三七、人参、西洋参,制作三七片及其掺伪品,考察方法的专属性和重现性。结果三七片取样量100 mg,56℃水浴8 h所获得DNA的质量浓度平均值为60.7 ng/μL,PCR扩增、序列获得和结果判定均可获成功;三七、人参和西洋参的ITS2序列长度均为230bp,三七与人参、三七与西洋参的序列间均存在7个稳定的SNP位点,自制三七片和掺伪三七片均可成功获得ITS2序列,不同比例三七与人参、三七与西洋参的测序峰图在SNP位点处呈现相应峰高比的SNP套峰具备专属性;重复性、中间精密度和重现性考察符合《中国药典》2015年版(通则9101)相关要求。结论 ITS2序列作为DNA条形码能够稳定、准确鉴定三七片的原料药材,具备良好的专属性和精密度,三七片DNA条形码分子鉴定法将为保障三七片临床用药安全提供新的技术手段,并对《中国药典》其他收载单方制剂的鉴定提供参考。     

珠子参种质资源遗传多样性的ISSR分析

目的研究珠子参Panax japonicus种质资源的遗传多样性。方法采用ISSR分子标记技术,通过聚类分析和主坐标分析,研究3个主要产地珠子参的19个样本的遗传多样性和亲缘关系。结果 13条ISSR引物扩增出181条带,其中有166条呈现多态性,占91.71%,遗传相似系数变化范围0.60~0.83。聚类分析和主坐标分析结果一致,将源于同一地区的珠子参样本聚在一起,呈现出一定的地域性分布规律。结论珠子参样本之间的遗传多样性水平较高,种质间的亲缘关系和地理位置有一定关系。     

人参bZIP基因家族生物信息学分析

目的 通过人参bZIP基因家族生物信息学分析,为人参功能基因开发利用提供理论依据。方法 运用PlantTFDB数据库预测人参基因组中b ZIP基因;通过ExPASy网站得到人参bZIP基因家族信息和特征;使用MEME网站对PgbZIP基因家族保守基因序列进行分析;运用MEGA软件建立PgbZIP基因家族系统进化关系;利用TBtools软件进行PgbZIP表达分析。结果 人参基因组中含有157个bZIP基因家族成员,其中152个定位在细胞核,其余5个分别定位在叶绿体和内质网,相对分子质量在14 009.93～83 440.38,等电点在4.53～10.05,氨基酸数目在120～760 aa,除PgbZIP157以外,均为亲水蛋白。PgbZIP131在干旱胁迫下的表达量为83.47;PgbZIP99在根和盐胁迫条件下表达量均最高,分别为119.82和117.86;PgbZIP117在叶中表达量为48.54;花中PgbZIP106表达量最高为79.55;成熟果实中表达量最高是PgbZIP118,为119.32;PgbZIP101在未成熟果实中的表达量最高,且为65.32。结论 推测PgbZI...     

基于ITS2序列的人参及同属易混品西洋参种子的分子鉴定

目的基于DNA条形码技术建立人参与西洋参种子的分子鉴别方法。方法采用生药鉴定方法研究其性状、显微特征,并结合DNA条形码技术,基于中药材DNA条形码数据库,通过ITS2序列比对、遗传距离比较和构建临接(NJ)系统发育树,对人参与西洋参的种子进行鉴别研究。结果人参与西洋参种子的种内遗传距离分别小于种间遗传距离,系统发育树图中各物种均聚为一支,来自9个产地的42份人参及西洋参的种子均为正品,且容易区分。结论基于ITS2序列DNA条形码技术可以快速、准确、有效地鉴别人参与西洋参种质资源。     

基于权重基因共表达网络分析挖掘人参皂苷Rh1生物合成相关基因

目的 通过权重基因共表达网络分析（weighted gene co-expression network analysis,WGCNA）挖掘人参皂苷Rh1生物合成相关基因。方法 以种植于吉林省人参主产区304个农家品种的转录组测序数据为基础,以人参皂苷Rh1含量为表型进行差异表达基因的挖掘。结果 通过WGCNA获得6个与人参皂苷Rh1含量密切相关的基因共表达模块,根据关联分析结果确定Green模块为与人参皂苷Rh1含量显著相关的关键模块。功能注释结果显示Green模块内的基因富集到m RNA结合、蛋白修饰等多个相关途径。通过构建基因互作网络筛选获得7个核心基因,功能预测表明这些基因可能在人参皂苷Rh1的生物合成途径中起着重要作用。对7个候选基因进行茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,Me JA）体外调控分析。对人参不定根进行MeJA诱导处理,随Me JA的诱导,comp9517＿c0＿seq1、comp10896＿c0＿seq1、comp43180＿c0＿seq2、comp64014＿c0＿seq8的表达量与人参皂苷Rh1的含量同时呈现显著变化,但只有comp64014＿c0...     

人参皂苷量变异的研究进展

人参Panax ginseng为五加科植物,是传统的名贵中药材.人参皂苷是人参的主要药效成分之一,人参所表现出的大部分药理活性与人参皂苷密切相关,因此,人参皂苷量被认为是衡量人参内在质量的重要指标之一.归纳总结了导致人参皂苷量变异的多种因素,对最新的相关实验结果及文献资料进行了整理,同时从人参不同部位、栽培条件、采收期、生长年限、产地、提取条件、加工条件、类型等方面阐述了多种因素与人参皂苷量变异的关系.