高通量测序分析附子、红参不同比例配伍对大鼠肠道菌群的影响

目的 初步研究附子、红参不同比例配伍对大鼠肠道菌群的影响。方法 红参、附子分别采用8倍体积的70%乙醇加热回流提取2次,每次1 h,制备醇提物。将15只SD大鼠随机分成A、B、C 3组,每组5只,A组为附子醇提物单独给药组,给药量为0.415 g/kg,B、C组分别为附子、红参配伍比例1∶1（红参醇提物1.17 g/kg）和1∶2（红参醇提物2.34 g/kg）给药组,每天ig给药1次,连续给药7 d。给药结束后,于第8天收集大鼠粪便,提取粪便中细菌的DNA,对粪便菌群的16Sr-RNA的V4区进行扩增,利用Miseq高通量测序平台进行基因序列的测定,利用Uparse software对序列进行分析,将相似性在97%以上的序列进行归并,生成分类操作单元（OTU）;利用QⅡME软件计算样品的菌群丰度指数（Ace、Chao1）、菌群多样性指数（Simpson、Shannon）。结果 A组和B组的OTU数量较C组显著增多（P<0.05）;A组和B组Ace、Chao1指数为1 393、1 368和1 085、1 057,C组Ace和Chao1指数为889和884,A组和B组较C组显著增多（P<0.05、0.01）;厚壁菌门、拟杆菌们和变形菌门均为3组样品中的优势菌门;在属的水平上,C组中乳酸杆菌属和拟杆菌属含量较A组和B组增加。结论 红参与附子不同比例配伍可对大鼠肠道菌群产生显著的影响,随红参比例的增加,可能在一定程度上改善肠道的微生态环境。     

高通量测序和实时荧光定量PCR分析何首乌肝损伤与肠道微生物组的关系

目的采用Illumina高通量测序技术和实时荧光定量PCR（Real-Time PCR,RT-PCR）法研究何首乌（PM）致肝损伤与肠道微生物组间的关系,并验证两种定量方法的一致性。方法雄性SD大鼠随机分为5组：对照组、脂多糖（LPS）组、LPS+对乙酰氨基酚（APAP）组、PM组和LPS+PM组;大鼠尾iv给予4.0 mg/kg LPS建立肝损伤模型,各组相应每天1次ig给予0.625 g/kg APAP和12 g生药/kg PM,记录大鼠体质量;分别于造模后2、14 h、5和8 d,对大鼠粪便中细菌16SrRNA基因的V4高变区进行Illumina高通量测序,根据测序结果得出的差异物种,采用RT-PCR进行验证;取造模后8 d大鼠肝脏组织,HE染色,光学显微镜观察。结果大鼠肝脏病理学检查结果显示,与对照组比较,LPS组大鼠存在肉芽肿,PM组无异常病变;与LPS组比较,LPS+PM大鼠肝细胞出现轻度变性和微小肉芽肿增多,LPS+APAP组可见微小肉芽肿和淋巴细胞浸润。Illumina高通量测序结果提示,与对照组比较,随着PM给药次数增加,单独给予PM的大鼠肠道微生物无显著变化;LPS+PM组表现为肠球菌科和毛螺旋菌科细菌逐渐增加,乳杆菌属细菌减少,且与LPS组有差异;RT-PCR结果显示,与对照组比较,随着PM给药次数的增加,单独给予PM的大鼠肠道微生物无显著变化;LPS+PM组肠球菌科、毛螺旋菌科细菌数显著增加（P<0.05）,乳杆菌属细菌数显著减少（P<0.05）,且与LPS组比较有显著差异。结论 PM肝损伤大鼠存在不同程度的菌群失衡,且Illumina高通量测序和RT-PCR检测结果具有良好的一致性,但Illumina高通量测序技术可获得更多的微生物信息,更具优势。     

基于肠道微生态探讨理气化痰祛瘀方对高脂血症地鼠的调控作用

目的 观察理气化痰祛瘀方对高脂血症地鼠的干预作用及地鼠肠道菌群的变化。方法 采用高脂饲料喂养诱导高脂血症金黄地鼠模型。将成模地鼠随机分为理气化痰祛瘀方低、中、高剂量组和非诺贝特组,检测各组地鼠总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-c）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-c）含量;HE染色观察肝脏病理变化;提取肠道微生物总DNA,检测肠道微生物菌群变化。结果 理气化痰祛瘀方能显著降低TC、TG、LDL-c水平,改善肝脏病理变化程度。16S rDNA高通量测序技术结果显示,理气化痰祛瘀方干预后大鼠肠道菌群丰度及多样性均有一定程度改善,厚壁菌门和杆菌纲的相对丰度显著降低,而放线菌门、拟杆菌门显著升高。结论 理气化痰祛瘀方能有效改善高脂血症金黄地鼠的血脂水平和肝脏病理变化,并在一定程度上恢复高脂血症金黄地鼠肠道菌群紊乱,其可能通过肠道菌群这一途径调节脂质代谢从而起到治疗高脂血症作用。     

杠柳毒苷体外抑制肝癌细胞和乳腺癌细胞增殖的实验研究

目的 探讨杠柳毒苷在体外对人乳腺癌MDA-MB-468细胞和人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法 MTT法观察杠柳毒苷对人乳腺癌MDA-MB-468细胞和人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,流式细胞术观察杠柳毒苷对两种肿瘤细胞的细胞增殖周期作用。结果 与对照组比较,杠柳毒苷能明显抑制两种肿瘤细胞的增殖,其抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关。流式细胞仪检测发现,杠柳毒苷对乳腺癌MDA-MB-468细胞和肝癌HepG2细胞持续作用24 h后,可以使G₀/G₁期细胞增多,G₂/M期细胞减少。结论 杠柳毒苷具有抑制乳腺癌MDA-MB-468细胞和肝癌HepG2细胞增殖的作用,并可将乳腺癌MDA-MB-468细胞和肝癌HepG2细胞的细胞生长周期阻滞在G₀/G₁期。     

急进高原后肠道菌群介导的溴吡斯的明体内代谢研究

目的 探讨肠道菌群是否参与溴吡斯的明的代谢及急进高原后肠道菌群对其代谢产生的影响。方法 将大鼠随机分为平原给药组、平原空白组、高原给药组、高原空白组,共4组,每组6只大鼠。平原给药组大鼠禁食12 h后于上海（中国人民解放军海军军医大学）进行实验,分别将10.2 mg（约含溴吡斯的明2.3 mg）溴吡斯的明片剂粉末用水溶解后ig给药,于给药前（0 h）及给药后0.33、0.66、1.00、1.50、2.00、3.00、4.00、6.00、8.00、12.00、24.00 h由眼眶后静脉丛取血进行药动学分析。高原给药组大鼠于碌曲县海拔为4 300 m的高原地区,大鼠禁食12 h后开始药动学实验,过程同平原给药组。收集平原空白组和高原空白组大鼠的粪便,通过16S rRNA法分析急进高原后肠道菌群的变化情况;体外孵育实验结合LCMS/MS法分析肠道菌群与溴比斯的明的代谢关系。结果 急进高原后大鼠肠道菌群组成发生了变化,菌群种类和数量均减少;溴比斯的明与大鼠粪便体外孵育实验结果表明肠道微生物群参与溴吡斯的明吸收前的代谢,且在高原缺氧条件下,肠道微生物群对其代谢减慢;急进高原后溴吡斯的明药动学参数药时曲线下面积（AUC_0~t）增加了57.60%,清除率（CL）降低了35.94%。结论 肠道菌群参与溴吡斯的明吸收前代谢,可能与其生物利用度低有关;并且急进高原后肠道菌群介导的溴吡斯的明代谢减慢,从而增加其吸收。     

注射用益气复脉（冻干）对阿霉素所致心肌损伤大鼠药效及肠道菌群的影响

目的 探讨注射用益气复脉（冻干）（YQFM）对阿霉素导致的心肌损伤大鼠的药效作用及对肠道菌群的影响。方法 将24只阿霉素导致心肌损伤模型成功的SD大鼠随机分为3组：模型组和YQFM低、高剂量（464.3、928.6 mg·kg^-1）组,另取8只健康SD大鼠为对照组。每天尾iv给药1次,连续14 d,对照组和模型组尾iv 0.9%氯化钠注射液。给药过程中观察大鼠状态并称体质量。给药结束后,酶联免疫吸附（ELISA）法检测大鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）水平;取出心脏进行HE染色观察病理改变;取出盲肠位置粪便,进行高通量16S rRNA测序分析。结果 对照组大鼠一般状态正常,模型组出现毛色变差、厌食、腹胀、腹泻、口鼻出血、眼球出血的动物数明显多于给药组;与对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低（P<0.001）;与模型组比较,YQFM低、高剂量组的大鼠体质量显著上升（P<0.01、0.001）。与对照组相比,模型组MDA、LDH、CK水平均显著升高,SOD活性显著性下降（P<0.001） ;与模型组比较,YQFM低、高剂量组MDA、LDH、CK水平显著下降,SOD活性显著升高（P<0.001）。HE结果显示,对照组心肌细胞排列整齐,模型组有心肌细胞溶解和出血现象,给予YQFM后心肌细胞溶解和出血现象减轻。Alpha多样性分析结果显示,与对照组相比,模型组肠道菌群的多样性和丰度均显著下降（P<0.05、0.01） ;与模型组比较,YQFM组肠道菌群的多样性和丰度显著上升（P<0.05、0.01、0.001）。距离矩阵与PCoA分析结果显示,给药组和对照组之间的差异比模型组和对照组的差异小。肠道丰度的结果显示,与对照组相比,模型组在门和属的水平上的菌群数量均显著减少（P<0.01） ;与模型组比较,YQFM低剂量组在门的水平上和低、高剂量组在属的水平上菌群数量均显著增加（P<0.01、0.001）。在菌群物种的组成差异度分析中,与模型组比较,给予YQFM后有助于有益菌的生长和抑制致病菌生长（P<0.05、0.01、0.001） ;在肠道菌群均匀度的分析中,与对照组比,模型组的肠道菌群均匀度降低,给予YQFM后,肠道菌群的均匀度恢复。结论 YQFM对阿霉素导致的大鼠心肌损伤发挥改善作用,并且可改善心肌损伤造成的肠道菌群多样性及丰度下降,抑制致病菌的生长,促进有益菌的生长。     

注射用益气复脉（冻干）对慢性心力衰竭大鼠肠道菌群的影响

目的 探讨注射用益气复脉（冻干）（YQFM）对慢性心力衰竭（CHF）大鼠的肠道菌群的影响。方法 采用腹主动脉缩窄法制备CHF大鼠模型，选取造模成功的大鼠随机分为3组：模型组和YQFM低、高剂量（464.3、928.6 mg·kg^-1，464.3 mg·kg^-1为临床等效剂量）组；假手术组大鼠进行切口和缝合，但不进行结扎缩窄。每天尾iv给药1次，连续给药14 d，假手术组和模型组尾iv给予0.9%氯化钠注射液。给药前后采用超声诊断仪检测大鼠心功能；给药14 d后取血，ELISA法检测大鼠血清心钠肽（ANP）、脑钠肽（BNP）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、内皮素（ET）、丙二醛（MDA）水平；取出盲肠位置粪便，进行高通量16S rRNA测序分析。结果 与模型组比较，YQFM组大鼠的左室短轴缩短率（LVFS）和左室射血分数（LVEF）均显著升高（P＜0.01、0.001），ANP、BNP、CK-MB、ET、MDA水平均显著下降（P＜0.001）。Venn图结果显示，CHF模型可以使大鼠肠道菌群数量下降；α多样性分析结果显示，与模型组比较，YQFM组的Chao1、Shannon、Simpson指数均显著上升（P＜0.05、0.01）；在非度量多维尺度（NMDS）和主坐标分析（PCoA）中，YQFM组与假手术组的差异比模型组与假手术组的差异小；在门水平下，与模型组相比，YQFM组的厚壁菌门相对丰度升高，高剂量组差异显著（P＜0.01），YQFM组的拟杆菌门相对丰度有降低趋势，YQFM低、高剂量组的厚壁菌门/拟杆菌门（F/B）呈升高趋势。在丰度等级曲线中，模型组与假手术组的差距大，YQFM组更接近假手术组，肠道菌群的均匀度明显回升。结论 YQFM改善CHF大鼠的心功能，缓解炎症反应，改善肠道菌群紊乱。     

疾病以及配伍对人参皂苷在大鼠体内的药动学影响

目的 建立SD大鼠血浆中人参皂苷Rb1、Rb2和Rg1的HPLC分析方法,对比分析配伍白术挥发油前后,人参皂苷在慢性萎缩性胃炎模型大鼠体内药动学特征。方法 SD大鼠分为4组,其中单用正常组和单用模型组均给药人参总皂苷292 mg·kg^-1,配伍正常组和配伍模型组均给药人参总皂苷292 mg·kg^-1和白术挥发油0.1 mL·kg^-1。于给药前和给药后不同时间点进行眼眶取血,采用HPLC测定各成分的血药浓度,并采用Winnolin 6.3软件计算其药动学参数。结果 与单用正常大鼠比较,单用模型组大鼠体内人参皂苷Rb1的C_max和AUC值降低,T_max、T_1/2以及MRT增加,人参皂苷Rb2和Rg1则呈现出AUC增加的变化;而配伍正常组大鼠体内人参皂苷Rb1、Rb2和Rg1的C_max和AUC值均增加,T_max、T_1/2以及MRT值均缩短。与单用模型组大鼠比较,配伍模型组大鼠体内人参皂苷Rb1和Rg1的C_max和AUC值均增加,T_max、T_1/2以及MRT值均降低。结论 在相同给药剂量下,疾病状态机体对人参皂苷的吸收和代谢呈现缓慢趋势,而配伍后能促进皂苷成分在体内的吸收,同时加快代谢消除,为人参的临床用药提供参考依据。     

白头翁皂苷对大鼠肠道菌群组成及多样性的影响

目的 采用高通量测序研究白头翁皂苷对大鼠肠道菌群多样性及组成的影响.方法 将12只雄性大鼠随机分为两组各6只,给药组灌胃白头翁皂苷,对照组灌胃空白溶剂(羧甲基纤维素钠溶液),均给药7d.采集大鼠新鲜粪便样本,进行微生物群落多样性测序及交互式分析,生物信息分析软件分析测序结果,比较两组大鼠肠道菌群组成和结构.结果 两组大...     

郁金散对抗生素相关性大肠湿热证大鼠肠黏膜屏障损伤的修复作用

目的 探讨郁金散对抗生素相关性大肠湿热证大鼠肠黏膜屏障损伤的修复作用。方法 采用复合因素诱导建立抗生素相关性大肠湿热证大鼠模型,随机分为正常组、模型组、阳性组（柳氮磺吡啶）、郁金散高、中、低剂量组,每组10只,连续给药7 d,定期观测各组大鼠的一般状态、体质量、摄食量、肛温,对肠道敏感性和粪便性状进行评分,测定粪便含水量及血清TNF-α、IL-1β、二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸含量,检测肠黏膜SIgA及结肠组织髓过氧化物（MPO）含量,计数结肠内容物中乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌、大肠杆菌,分析结肠组织形态变化。结果 与模型组比较,给予郁金散治疗后,高、中剂量组大鼠体质量和摄食量明显增加,肛温降低,肠道敏感性减小,4 h内排便次数、粪便性状评分、粪便含水量均有所减少,血清TNF-α、IL-1β、DAO、D-乳酸及结肠组织MPO含量均减小,肠黏膜SIgA含量升高,肠内容物中乳酸杆菌、双歧杆菌显著增加,而肠球菌、大肠杆菌明显减少,HPS评分显著减小。结论 郁金散对抗生素相关性大肠湿热证大鼠肠黏膜屏障损伤具有一定的的修复作用,其作用机制与抑制血清TNF-α、IL-1β、DAO、D-乳酸和结肠组织MPO含量的增加以及肠黏膜SIgA含量的减少,调节肠道菌群向正常水平恢复有关。     

三七有效成分提取工艺的比较研究

目的：研究三七有效成分的最佳提取工艺。方法：采用水煎煮法、乙醇回流法、超声提取法提取,用超滤法和大孔吸附树脂进行分离,以不同提取方法得到提取物中三七总皂苷、人参皂苷Rb1、Rg1的含量为考察指标。结果：最佳提取工艺为：75％的乙醇超声提取3次,每次2h。结论：经优选得到最佳提取工艺,有效成分含量高,工艺简便。     

植物乳杆菌RG-034对大鼠腹泻型肠易激综合征的治疗作用

目的 研究植物乳杆菌RG-034的体外抑菌效果以及对大鼠腹泻型肠易激综合征的治疗作用。方法 采用活菌计数法测定RG-034菌粉活菌数,利用类“牛津杯法”确定植物乳杆菌RG-034对大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性。SD大鼠按体质量随机分为对照组、模型组、蒙脱石散组及植物乳杆菌RG-034胶囊组,每组6只。除对照组外,其余大鼠每日ig5g/kg番泻叶联合隔日禁食,持续5周,制备大鼠腹泻型肠易激综合征模型。自造模第3周开始给药,植物乳杆菌RG-034组大鼠igRG-034胶囊(1×10⁹CFU/粒,15mg),2粒/d;蒙脱石散组大鼠ig0.81g/kg蒙脱石散,1次/d;对照组和模型组大鼠ig等量生理盐水,给药3周。观察大鼠一般状态变化,测定稀便率、稀便级以及腹泻指数,采用16S核糖体RNA测序技术分析大鼠结肠中肠道菌群变化。结果 植物乳杆菌RG-034菌粉活菌数为2.5×10¹¹CFU/g,对不同浓度的大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用,抑菌圈直径为15.90～25.06mm。与模型组比较,植...     

基于16S rRNA技术分析金乌健骨胶囊对胶原诱导关节炎模型大鼠肠道菌群的影响

目的 基于16S rRNA技术研究金乌健骨胶囊对胶原诱导关节炎模型大鼠肠道菌群的影响，并探讨其作用机制。方法 将24只Wistar大鼠随机分为6组，分别为对照组，模型组，金乌健骨胶囊0.225、0.450、1.350g/kg组及甲氨蝶呤（0.001g/kg）组，每组4只。除对照组外，其余各组大鼠制备胶原诱导关节炎模型后ig相应药物，给药期间观察大鼠一般状态并收集大鼠粪便，连续ig 4周后处死大鼠。苏木精–伊红（HE）染色观察各组大鼠关节滑膜及结肠组织病理变化情况，提取粪便基因组DNA，利用Illumina Miseq测序平台对样本16S rRNA进行测序，对测序结果进行生物信息学分析。结果 与模型组大鼠相比，金乌健骨胶囊1.350g/kg组和甲氨蝶呤组关节炎指数评分显著降低（P<0.05、0.01）。6组样本间Chao、observed species、Shannon、Simpson指数没有统计学差异。肠道菌群组成及结构差异分析显示，与对照组相比，模型组普雷沃菌属Prevotella Shan and Collins和螺旋杆菌属Helicobacter Gest and Favinger的相对丰度均增高（P<0.05），毛螺菌属_NK4A136_group （Lachnospira Bryant and Small_NK4A136_group）的相对丰度降低（P<0.05）。与模型组相比，金乌健骨胶囊0.225g/kg组Lachnospira Bryant and Small_NK4A136_group的相对丰度显著增高（P<0.01）；金乌健骨胶囊0.450g/kg组Lachnospira Bryant and Small_NK4A136_group的相对丰度增高（P<0.05），Prevotella Shan and Collins和Helicobacter Gest and Favinger的相对丰度降低（P<0.05）。结论 金乌健骨胶囊可能是通过调节肠道菌群的结构组成而发挥治疗类风湿关节炎的作用。     

三七茎叶研究进展

三七茎叶是五加科人参属三七[Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen]的干燥茎叶,是三七的副产物.现代研究表明,三七茎叶中含有多种活性成分和营养物质,如:皂苷类、黄酮类、维生素、氨基酸等;药理作用多样,具有抗焦虑,抗抑郁,抗骨质疏松,抗糖尿病,抗癌,保肝,抗衰老、预防肥胖等.目前,对三七茎叶化学...     

桑叶多糖调节小鼠肠道菌群失调的研究

目的研究桑叶多糖对小鼠肠道菌群失调的调节作用。方法利用盐酸林可霉素诱导小鼠肠道菌群失调。将造模成功的小鼠随机分为桑叶多糖组、乳酶生组、模型组,另设置对照组。桑叶多糖组小鼠ig 6.0 mg/m L桑叶多糖溶液0.6 m L(剂量0.144 mg/g),乳酶生组小鼠ig 5.5 mg/m L乳酶生混悬液0.6 m L(剂量0.132 mg/g)。2次/d,连续给药7 d。模型组、对照组小鼠自行饮水。取小鼠的新鲜粪便,提取肠道菌DNA。16S段DNA序列扩增,变性梯度凝胶电泳(DGGE)法分析。比对各条带及样品,进行聚类分析,对各组小鼠肠道微生物群落结构进行主成分分析。结果 DGGE直观图分析,经过自然恢复、桑叶多糖和乳酶生的作用,小鼠肠道菌群种类有了明显的增加,但与对照组小鼠的肠道菌群比较仍然有差别,并不能完全恢复到原来的水平。聚类分析结果可以看出,与对照组最接近的是乳酶生组,其次是桑叶多糖组,最后是自然恢复组。菌群落结构的主成分分析可以直观地看出,桑叶多糖、乳酶生组小鼠肠道菌群与对照组关系最近,模型组与对照组肠道菌群及其他组肠道菌群的差异明显。结论桑叶多糖对小鼠肠道菌群失调有调节作用。     

Alleviation of ovariectomy-induced osteoporosis in rats by <Emphasis Type="Italic">Panax notoginseng</Emphasis> saponins

To examine the effects of Panax notoginseng saponins (PNS), the main active components of Panax notoginseng, on ovariectomy-induced osteoporosis in rats. A total of 72 six-month-old female rats were randomly assigned to sham-operated group and five ovariectomized (OVX) groups: OVX with distilled water (5 ml/kg/day, p.o.), OVX with graded doses of PNS (75, 150, 300 mg/kg/day, p.o.), and OVX with nilestriol (1 mg/kg/week, p.o.). Animals were sacrificed after a 13-week treatment course. Compared with the OVX group, PNS administration prevented OVX-induced decrease in bone mineral density (BMD) of lumbar vertebrae and total femur, and significantly increased bone structural biomechanical properties. Improvements of BMD and biomechanical properties were accompanied by the beneficial changes of PNS on trabecular microarchitecture in the tibial metaphysis. PNS at the highest dose significantly prevent decrease in trabecular bone volume over bone total volume, trabecular number, trabecular thickness, connectivity density, and increase in trabecular separation and structure model index in OVX rats. The bone-modulating effects of PNS may be due to the increased bone formation and decreased bone resorption, as was evidenced by the elevated level of serum alkaline phosphatase and decreased level of urinary deoxypyridinoline. PNS treatment is able to enhance BMD, bone strength, and prevent the deterioration of trabecular microarchitecture without hyperplastic effect on uterus. Therefore, PNS might be a potential alternative medicine for the prevention and treatment of postmenopausal osteoporosis.     

近红外光谱技术快速测定三七水分和醇溶性浸出物

目的 利用近红外光谱技术（near infrared spectroscopy,NIRS）建立三七药材水分和醇溶性浸出物定量分析的快速测定方法。方法 参照《中国药典》2015年版三七水分和醇溶性浸出物含量测定方法对53批药材分别测定水分和醇溶性浸出物含量,采用偏最小二乘法（PLS）分别建立水分和醇溶性浸出物的近红外定量分析模型,并利用内部交叉验证和外部验证的方法对模型进行优化。结果 药材样品中水分和醇溶性浸出物预测最佳波段分别为4 450.32～7 350.01 cm^-1和6 163.92～3 984.71 cm^-1。定量模型校正集相关系数分别为0.997 2和0.962 4,校正均方差分别为0.039 6和0.776 0;验证集的相关系数为0.962 4和0.988 4,验证均方差分别为0.173和0.595。结论 该方法准确、快速、无污染,可用于三七药材中水分和醇溶性浸出物含量的快速测定。     

Panax notoginseng saponins promote hair follicle growth in mice via Wnt/β-Catenin signaling pathway

Panax notoginseng saponins (PNS), the active ingredients of the traditional Chinese medicine Panax notoginseng, have strong neuroprotective and anti-platelet aggregation effects. To investigate whether PNS can promote hair follicle growth in C57BL/6J mice, the optimal concentration of PNS was initially determined, followed by clarification of the mechanism underlying their effects. Twenty-five male C57BL/6J mice had the hair on a 2 × 3 cm² area of the dorsal skin shaved and were equally divided into five groups: control group, 5% minoxidil (MXD) group, and three PNS treatment groups [2% (10 mg/kg), 4% (20 mg/kg), and 8% (40 mg/kg) PNS]. They were then intragastrically administered the corresponding drugs for 28 days. The effects of PNS on C57BL/6J mice were analyzed by subjecting their dorsal depilated skin samples to different assessments, including hematoxylin and eosin staining, immunohistochemistry, immunofluorescence, quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), and Western blotting (WB). The group with 8% PNS exhibited the largest number of hair follicles from 14 days onwards. Compared with the control group, the number of hair follicles increased significantly in the mice treated with 8% PNS and 5% MXD, which significantly increased in a PNS-dose-dependent manner. Immunohistochemistry and immunofluorescence results revealed that treatment with 8% PNS activated the metabolism of hair follicle cells, with them showing higher rates of proliferation and apoptosis than those in the normal group. In qRT-PCR and WB analysis, the expression of β-catenin, Wnt10b, and LEF1 was upregulated in the PNS and MDX groups compared with that in the control group. Examination of the WB bands revealed that the greatest inhibitory effect of Wnt5a occurred in mice in the 8% PNS group. PNS may promote the growth of hair follicles in mice, with 8% PNS demonstrating the strongest effect. The mechanism behind this may be related to the Wnt/β-catenin signaling pathway.