氟西汀对抑郁模型大鼠海马CA1区少突胶质细胞作用的研究

目的：探讨抗抑郁药物氟西汀对抑郁症慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）模型大鼠海马CA1区内CNPase+少突胶质细胞的作用。方法：选用青年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠（4~6周龄）,随机分为对照组（12只）和模型组（38只）,给予模型组大鼠连续4周的CUS干预。随后依据大鼠的糖水偏好百分比筛选出模大鼠,随机分为CUS组（12只）和CUS+fluoxetine组（FLX组）（12只）,第5~7周CUS组和FLX组继续给予慢性应激,同时FLX组大鼠给予5 mg/（kg·d）氟西汀腹腔注射,对照组和CUS组给予等量生理盐水腹腔注射。干预结束后利用免疫组织化学方法结合现代体视学对大鼠海马CA1区CNPase+少突胶质细胞的数量进行精确的三维定量研究。结果：实验发现,CUS模型组大鼠的体质量（251.4±15.9） g较对照组（323.3±25.9） g明显下降（P=0.00）,但与FLX组大鼠的体质量（257.9±22.7） g相比无差异（P=0.473）。CUS组大鼠的糖水偏好百分比（62.0±14.2）%明显低于对照组（89.2±4.8）%（P=0.000）及FLX组（78.2±12.8）%（P=0.020）。CUS组大鼠海马CA1区CNPase+细胞数量（18 650.7±1 812.0）明显低于对照组（33 606.9±4 471.4）（P=0.007）及FLX组（29 080.7±2 877.5）（P=0.042）。结论：大鼠海马CA1区内少突胶质细胞在抑郁症发病过程中可能起着重要作用,氟西汀治疗可防止抑郁症模型大鼠海马CA1区的CNPase+少突胶质细胞的丢失。本研究结果为探索新的抗抑郁策略提供了形态学基础。     

抑郁症模型大鼠海马内小胶质细胞数量和炎症因子表达增加

目的 探讨慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)抑郁症模型大鼠海马小胶质细胞总数量、活化小胶质细胞和炎症因子的变化情况.方法 选取6～8周龄的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,在适应性饲养、糖水偏好基线调整及筛选后采用分层随机法分为空白对照组(n=19)和CUS干预组(n=48),给予CUS干预组大鼠5周的CUS干预,运用糖水偏好实验来评估两组大鼠的抑郁样行为,筛选出成模大鼠16只,即CUS模型组.采用免疫组织化学与体视学相结合的方法对两组大鼠海马各亚区小胶质细胞的总数量进行精确定量研究,运用免疫荧光方法评估大鼠海马各亚区活化小胶质细胞的密度,并采用实时定量PCR技术检测海马炎症因子的水平.结果 与空白对照组相比,CUS模型组大鼠的体质量明显下降(P＜0.01)、糖水偏好百分比显著降低(P＜0.01);CUS模型组大鼠海马CA1、CA2/3和DG区小胶质细胞的总数量较空白对照组均显著增加(P＜0.001,P=0.002,P=0.002);CUS模型组大鼠海马CA1、CA2/3和DG区活化小胶质细胞的密度和比例较空白对照组均显著增加(P=0.011,P=0.015,P＜0.001;P=0.018,P=0.019,P＜0.001);相对于空白对照组,CUS模型组大鼠海马炎症因子IL-1β和iNOS的mRNA表达量显著升高(P=0.012,P=0.020).结论 抑郁症模型大鼠海马各亚区内小胶质细胞总数量、活化小胶质细胞的密度和比例增加,炎症因子表达升高,表明海马小胶质细胞的改变可能参与抑郁症的病理过程.     

慢性应激对老龄雌性大鼠学习记忆和海马齿状回甘氨酸水平的影响

[目的]探讨慢性不可预见性应激(CUS)对老龄雌性大鼠学习记忆和海马齿状回(DG)甘氨酸水平的影响.[方法]取20月龄SD雌性大鼠随机分为对照组和CUS组,利用多种刺激随机应用法制作CUS大鼠模型(每天1种刺激,连续30d).通过Morris水迷宫实验观察大鼠空间学习和记忆能力,应用脑部微量透析法和高效液相色谱法测定海马DG甘氨酸水平,采用ELISA法测定大鼠血清中皮质酮水平.[结果]CUS组血清中皮质酮水平显著高于对照组(P<0.05).Morris水迷宫实验结果显示,与对照组比较,CUS组定位航行实验中第1,4d的逃避潜伏期明显延长(P<0.05),空间探索实验中第5d的目标象限游泳时间明显减少(P<0.05).与实验前比较,对照组Morris水迷宫实验第2,5d海马DG甘氨酸水平明显升高(P<0.05),而CUS组海马DG甘氨酸水平未见发生变化(P>0.05).[结论]CUS降低老龄雌性大鼠空间学习和记忆能力,可能机制认为与大鼠海马DG甘氨酸水平降低有关系.     

抑郁症大鼠海马CA1区及齿状回毛细血管的体视学研究

目的：研究慢性不可预见性刺激（chronically unpredicted stress,CUS）所致抑郁症模型大鼠海马CA1区和齿状回（den－tate gyrus,DG）体积及毛细血管的改变。方法：选取Sprague Dawley（SD）大鼠,经筛选后随机分为对照组10只和模型组10只。模型组采取慢性不可预见刺激建立抑郁症模型,共给予应激35 d,对照组不给予应激。利用糖水偏好实验和开场实验检测模型是否建立成功。建模成功后,分别从模型组和对照组中各随机选取5只SD大鼠,运用体视学和免疫组化染色相结合的方法对大鼠海马CA1区和DG毛细血管进行定量研究,剩余5只进行相关分子生物学研究。结果：模型组大鼠和对照组大鼠在体质量[（314.81±31.52） g,（349.18±28.23） g,t=2.569,P=0.019]、糖水偏好实验[（82.37±8.44）%,（89.33±3.97）%,t=2.359,P=0.03]、开场实验结果[（48.30±39.49）分,（87.70±38.32）分,u=-1.988,P=0.047]具有统计学差异,模型组较对照组大鼠海马总体积[（88.84±7.51） mm3,（99.89±12.55） mm3,t=2.388,P=0.028]、海马CA1区[（27.78±1.84） mm3,（32.38±3.69） mm3,t=3.522,P=0.004]和DG[（21.02±2.61） mm3,（24.20±3.33） mm3,t=2.377,P=0.029]体积明显减少,模型组较对照组大鼠海马CA1区毛细血管总长度[（8.454±1.010） m,（11.012±1.642） m,t=2.967,P=0.018]、总体积[（0.104±0.019） mm3,（0.151±0.021） mm3,t=3.720,P=0.006]、总表面积[（1.025±0.113） cm2,（1.589±0.313） cm2,t=3.794,P=0.013]、平均直径[（3.884±0.458） μm,（4.580±0.419） μm,t=2.509,P=0.036]下降以及DG毛细血管的总体积[（0.078±0.021） mm3,（0.117±0.024） mm3,t=2.716,P=0.026]、总表面积[（0.838±0.184） cm2,（1.133±0.074） cm2,t=3.32,P=0.011]、平均直径[（3.611±0.493） μm,（4.630±0.635） μm,t=2.834,P=0.022]下降,结果具有统计学意义。结论：抑郁症模型大鼠大脑海马萎缩,CA1区、DG毛细血管改变,海马结构与毛细血管的改变可能参与了抑郁症的发病机制。     

对CUS抑郁症大鼠模型海马齿状回突触改变的体视学研究

目的 运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress, CUS)模型大鼠海马DG体积、DG突触密度、突触总数的改变情况.方法 筛选4～5周龄雄性SD大鼠分为对照组(n=15)和CUS组(n=23).CUS组大鼠通过孤养并结合慢性不可预知应激方式建立模型,对照组每5只为1笼,正常喂养.建模期间,每周进行糖水偏好试验.建模4周后,结合糖水偏好试验、旷场实验、高架十字迷宫实验对两组大鼠行为学表现进行评估.随后运用现代体视学与免疫组织化学相结合的方法测量两组大鼠海马DG体积、DG突触密度和突触总数.结果 经过4周CUS干预后,CUS组大鼠与对照组相比,体质量显著降低(P＜0.05),糖水偏好显著下降(P＜0.05);旷场实验中央区域路程、中央路程比和中央时间比显著降低(P＜0.05).CUS组大鼠海马DG突触密度[(0.48±0.13) /μm3]和突触总数(6.713 5×1o8)较对照组大鼠[突触密度(0.15 ±0.03)/μm3,突触总数(2.103 3×109)]显著下降(P＜0.05).结论 抑郁症模型大鼠海马DG的突触总数减少、突触密度减小,表明海马齿状回突触改变可能是抑郁症发病的重要神经结构基础之一.     

抑郁症易感性差异与海马CA3区及DG内树突棘数量变化的相关性研究

目的：探讨在慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）模型中压力耐受大鼠海马结构CA3及海马齿状回（dentate gyrus,DG）内树突棘数量的改变情况,以期深入了解抑郁症发病的结构基础。方法：选用4~5周龄雄性sprague-dawley（SD）大鼠,将糖水偏好稳定的大鼠随机分为空白对照组和CUS造模组,造模组采取孤养并给予4周的CUS干预。根据糖水偏好结果筛选出CUS敏感组和CUS耐受组。利用免疫组织化学结合体视学方法对每组抽选出的5只大鼠海马结构CA3和DG内的树突棘数量进行精确的三维定量研究。结果：与空白对照组、CUS耐受组相比,CUS敏感组的糖水偏好百分比均明显下降（P=0.000,P=0.000）,而空白对照组与CUS耐受组的糖水偏好百分比无明显差异（P=0.262）;与空白对照组和CUS耐受组相比较,CUS敏感组大鼠海马结构CA3区内的树突棘数量明显下降（P=0.008,P=0.004）,CUS敏感组大鼠海马结构DG区内的树突棘数量也明显下降（P=0.001,P=0.001）;而在大鼠海马结构CA3及DG内,CUS耐受组与空白对照组的树突棘总数目无明显差异（P=0.656,P=0.950）。结论：CUS耐受组大鼠海马结构CA3及DG内树突棘的数量不受CUS干预的影响,提示海马结构内树突棘数量可能是抑郁症易感性差异的关键因素之一,为抑郁症的治疗提供了新的方向。     

脑室内注射BDNF抗体对大鼠海马NOS表达的影响

目的：探讨脑室内注射脑源性神经营养因子（BDNF）抗体阻断内源性BDNF对大鼠海马-氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的影响。方法：脑室内注射BDNF抗体一周后,采用Morris水迷宫进行行为检测;并用NADPH-黄递酶组化染色方法观察海马NOS阳性神经元数目的变化。结果：与对照组相比,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显下降（P〈0．01）;实验组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目（38．37±5．23）明显少于对照组（49．53±5．74）（P〈 0．01）;实验组DG区NOS阳性神经元数目（48．77±5．51）明显少于对照组（60．40±7．39）（P〈0．01）。结论：脑室内注射BDNF抗体可导致大鼠空间学习记忆能力下降,海马NOS阳性神经元数目减少,提示BDNF对学习和记忆的影响可能与海马NOS阳性神经元数目的变化有关。     

链脲佐菌素致阿尔茨海默病模型大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的变化

目的：观察侧脑室（intracerebroventricular,ICV）注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）对大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的影响。方法：将30只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,每组各15只,对照组于第1天和第3天ＩＣＶ注射生理盐水,模型组于第 1天和第3天侧脑室注射STZ（ICV-STZ,3 mg/kg） 建立AD模型。第 1 次注射后 36 d 采用 Morris 水迷宫检测2组大鼠空间学习和记忆能力的变化;Western blot检测2组大鼠大脑皮质和海马组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTORSer2448）、核糖体40S小亚基S6蛋白激酶（P70 ribosomal S6 protein kinase,P70S6K）、磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶（phosphorylated P70 ribosomal S6 protein kinase,p-P70S6KThr389）、胰岛素受体底物-1（insulin receptor substract-1,IRS-1）和磷酸化胰岛素受体底物-1（phosphorylated insulin receptor substract-1,p-IRS-1Ser636）蛋白的表达;HE染色观察2组大鼠大脑皮质和海马组织形态学的改变;甲硫素S染色观察2组大鼠脑内Aβ的沉积。结果：Morris 水迷宫结果显示 ICV-STZ 能明显降低大鼠目标象限停留时间[对照组：（55.945±9.447） s,模型组：（31.961±5.346） s,t=8.558,P=0.000]和穿越平台次数[对照组：（7.533±2.560）次,模型组：（2.867±1.506）次,t=6.086,P=0.000];HE染色可见：ICV-STZ大鼠大脑皮质和海马的部分细胞出现了明显的固缩和肿胀;甲硫素S染色发现：在ICV-STZ 处理后,大鼠脑内出现Aβ的大量沉积。Western blot结果表明：ICV-STZ能同时增加大鼠大脑皮质p-P70S6KThr389[对照组：（0.268±0.066）,模型组：（0.654±0.079）,t=-8.409,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组：（0.710±0.092）,模型组：（1.033±0.135）,t=-4.417,P=0.002]和海马p-P70S6KThr389[对照组：（0.405±0.064）,模型组：（0.732±0.077）,t=-7.339,P=0.000]、p-IRS-1Ser636[对照组：（0.498±0.093）,模型组：（0.836±0.102）,t=-5.496,P=0.001]蛋白的表达,但不影响大鼠大脑皮质和海马P70S6K、mTOR、p-mTORSer2448、IRS-1蛋白的表达。结论：ICV-STZ 能增加大鼠脑内mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路的激活,提示异常活化的mTOR/P70S6K/IRS-1信号通路可能参与了 AD 的发生发展。     

EGCG对APP/PS1双转基因小鼠神经突触损伤的保护作用

目的：研究表没食子儿茶素没食子酸酯（epi-gallocatechin-3-gallate,EGCG）对APP/PS1 双转基因小鼠中神经突触损伤的保护作用及其可能机制。方法：实验采用APP/PS1 双转基因小鼠,随机分为模型组（0.1 mL/10 g,生理盐水灌胃）、EGCG组[20 mg/（kg?d）,EGCG灌胃],每组 10 只,另以同窝同性别阴性小鼠10只设立正常组（0.1 mL/10 g,生理盐水灌胃）,共 3组。Morris 水迷宫实验测试各组小鼠逃避潜伏期和跨越平台变化,电镜观察各组小鼠海马神经元损伤情况,免疫组化法检测小鼠海马PSD95、GAP43 表达,RT-PCR检测小鼠海马PSD95 mRNA、GAP43 mRNA含量。结果：模型组逃避潜伏期明显延长,海马神经元损伤严重,PSD95表达下降、GAP43表达增高。免疫组化结果表示,EGCG组PSD95平均光密度高于模型组[（0.11±0.03） vs. （0.05±0.02）,P=0.001],EGCG组GAP43平均光密度低于模型组[（0.10±0.03） vs. （0.16±0.04）,P=0.002]。RT-PCR检测结果再次验证,EGCG组PSD95 mRNA表达高于模型组[（0.82±0.11） vs. （0.50±0.06） ,P=0.000],EGCG组GAP43 mRNA表达低于模型组[（1.12±0.11） vs. （1.56±0.16）,P=0.000]。结论：EGCG对 APP/PS1 转基因小鼠的空间学习记忆和突触损伤具有明显的改善作用,其机制可能与影响小鼠海马突触结构,提高PSD95表达、下调GAP43 表达有关。     

噻奈普汀对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马胆碱能纤维的作用

目的观察噻奈普汀(TIA)对抑郁模型大鼠学习记忆能力以及海马胆碱能纤维的作用。方法采用慢性轻度不可预见性的应激和孤养建立大鼠抑郁模型,对模型大鼠行噻奈普汀灌胃4周,Y迷宫测试大鼠的学习记忆能力,用乙酰胆碱脂酶(AChE)的组织化学方法染色,显微镜方格目测计数对大鼠海马AchE阳性纤维的密度行定量分析。结果抑郁模型大鼠经噻奈普汀4周治疗后,学习记忆能力:应激+TIA组[(43.0±4.1)分、(7.9±0.8)分]与应激组[(69.3±8.4)分、(4.6±0.7)分]、应激+生理盐水组[(58.0±9.3)分、(5.3±1.1)分]比较学习记忆能力均有极显著差异(P<0.01);AchE阳性纤维密度为应激+TIA组[CA1:(54.65±14.29);CA3:(51.00±10.77);DG:(57.63±14.59)],应激组[CA1:(40.68±10.17);CA3:(41.27±9.33);DG:(43.90±11.37)],应激+生理盐水组[CA1:(42.47±11.83);CA3:(48.53±10.75);DG:(50.69±14.59)],应激+TIA组各区AchE阳性纤维密度极显著高于应激组(P<0.01),应激+TIA组CA1区、DG区AchE阳性纤维密度显著高于应激+生理盐水组(P<0.05)。结论噻奈普汀能有效促进抑郁模型大鼠学习记忆能力的恢复以及海马胆碱能纤维的再生。     

慢性应激抑郁模型大鼠海马组织SIOOB表达及氟西汀的干预作用

目的探讨慢性应激抑郁模型大鼠脑内S100B表达与抑郁样行为之间的关联及氟西汀的干预作用。方法40只成年雄性SD大鼠随机数字表法分为对照组、氟西汀组、应激组和应激加氟西汀组。依组名接受相应应激和（或）氟西汀干预。应激于实验第1～42天进行,为慢性不可预见性应激;氟西汀干预[5mg／（kg·d）,灌胃]于实验22～42d进行。行为学评定采用旷场试验,蔗糖水消耗试验及体质量测定,分别于实验前、实验21d及42d进行。用免疫组化法观察比较干预结束后各组大鼠CA1、CA2、CA3、DG区及前额皮质S100B表达水平。结果应激42d使大鼠行为学评分明显下降（应激单独效应,均P〈0．05）,21d氟西汀干预逆转上述过程（交互作用,均P〈0．05）。应激使大鼠脑内CA1、CA3、DG区SIOOB表达升高（平均光密度,应激组分别为0．331±0．01,0．353±0．01,0．381±0．007;对照组分别为0．238±0．007,O．237±0．010,0．228±0．006。应激单独效应,P=0．000;P=0．000;P=0．000）。氟西汀逆转应激对CA1、CA3、DG区S100B表达的影响（平均光密度,应激＋氟西汀组为O．233±0．015,0．240±0．005,0．254±0．015;氟西汀组分别为0．241±0．007,0．233±0．013,0．227±0．017。氟西汀与应激交互作用,P=0．000;P=0．000;P=0．000）。结论慢性不可预见性应激所致大鼠抑郁样表现与海马内CA1,CA3,DG区S100B过度表达有关;逆转海马内S100B过度表达是氟西汀抗抑郁有效的标志而非作用机制。     

重复经颅磁刺激对慢性不可预见性应激大鼠抑郁样行为及海马脂质的影响

目的:探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)对慢性不可预见应激(chronic unpredictable stress,CUS)大鼠抑郁样行为及海马脂质的影响。方法:将24只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组(sham组)、模型组(CU...     

慢性不可预见性应激模型大鼠海马MAPKs信号蛋白的差异表达

目的 研究慢性不可预见性应激大鼠的认知功能,以及不同的促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号蛋白在慢性不可预见性应激大鼠海马的差异表达.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组和慢性不可预见性应激组(CUS),CUS组大鼠每天接受一种应激,共21d,正常对照组不接受任何应激.应激结束后, Morris水迷宫检测空间忆功功能,免疫组织化学和western blot检测MAPKs通路信号蛋白在海马的表达.结果 前5次的定位航行试验,CUS组大鼠找到站台所用的时间显著多于对照组大鼠(F=5.258～10.225,P<0.05),后3次2组大鼠间差异无显著性(F=4.458～4.590,P>0.05);CUS组大鼠在空间探索试中,穿越站台的次数显著少于对照组大鼠[(1.8±0.5)次,(7.0±3.9)次,t=3.741,P<0.05].免疫组织化学法示CUS组大鼠齿状回pCREB标记指数显著低于对照组.Western blot示CREB、ERK1、P-ERK1、ERK2、P-ERK2、P38、P-P38和 JNK信号蛋白水平在2组大鼠海马的表达差异无显著性.但CUS组大鼠的P-CREB水平[(13.6±8.3)%,(36.0±14.5)%,t=3.792,P<0.05]和P-JNK水平[(30.8±7.8)%,(113.8±55.3),t=4.204,P<0.05]显著低于正常对照组.结论 JNK-CREB信号通路异常在21 d 慢性不可预见性应激中起着重要作用.CUS大鼠空间记忆功能是降低的,但通过锻炼,空间忆功功能可以恢复到正常水平.     

Traumatic brain injury impairs synaptic plasticity in hippocampus in rats

Background  Traumatic brain injury (TBI) often causes cognitive deficits and remote symptomatic epilepsy. Hippocampal regional excitability is associated with the cognitive function. However, little is known about injury-induced neuronal loss and subsequent alterations of hippocampal regional excitability. The present study was designed to determine whether TBI may impair the cellular circuit in the hippocampus.

Methods  Forty male Wistar rats were randomized into control (n=20) and TBI groups (n=20). Long-term potentiation, extracellular input/output curves, and hippocampal parvalbumin-immunoreactive and cholecystokinin-immunoreactive interneurons were compared between the two groups.

Results  TBI resulted in a significantly increased excitability in the dentate gyrus (DG), but a significantly decreased excitability in the cornu ammonis 1 (CA1) area. Using design-based stereological injury procedures, we induced interneuronal loss in the DG and CA3 subregions in the hippocampus, but not in the CA1 area.

Conclusions  TBI leads to the impairment of hippocampus synaptic plasticity due to the changing of interneuronal interaction. The injury-induced disruption of synaptic efficacy within the hippocampal circuit may underlie the observed cognitive deficits and symptomatic epilepsy.

     

早期肺康复训练在有创机械通气患者中的应用效果

目的 探讨重症监护室(ICU)内机械通气患者进行院内早期肺康复训练的临床应用效果.方法 采用前瞻性随机对照实验研究,选择2014年1月至2015年9月在海南医学院附属医院重症医学科收治行机械通气的48例患者,根据随机数字表法分为观察组(n=23)和对照组(n=25),对照组采用常规治疗和护理,观察组患者在对照组的基础上每日进行两次肺康复训练,比较两组患者的首次床旁坐位时间、机械通气时间、ICU住院时间、出院时急性生理与慢性健康评分(APACHEII)评分、住院总费用和住院病死率.结果 观察组患者出院时的APACHEII评分、住院病死率分别为(10.0±2.8)分、13.0%,对照组分别为(9.9±3.0)分、16.0%,两组比较差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者首次床旁坐位时间、机械通气时间、ICU住院时间、住院费用分别为(6.2±1.7)d、(6.2+2.3)d、(11.5±3.8)d、(10.7±2.1)万元,较对照组的(12.5±4.6)d、(8.1±3.2)d、(14.7±4.2)d、(13.7±3.5)万元明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 在掌握严格适应证的情况下,机械通气患者行早期肺康复训练是安全有效的,可缩短患者机械通气时间和ICU住院时间,减少住院费用,有利于肺功能的早期恢复.     

硫氧环蛋白过氧化物酶1对矽肺大鼠肺纤维化的影响

目的 探讨硫氧环蛋白过氧化物酶1(Prx-1)对矽肺大鼠肺组织纤维化的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠按抽签法随机分为4组:对照组(生理盐水)、SiO2组(50 mg/只)、SiO2+空慢病毒组(空慢病毒滴度5×107 TU)和SiO2+-Prx-1慢病毒组(Prx-1慢病毒滴度5×107 TU),每组10只.气管内注入SiO2和慢病毒,造模后饲养4周.HE染色观察肺组织形态学变化、免疫组化法检测α-SMA表达,Western blot法检测肺组织Prx-1及Ⅰ和Ⅲ型胶原水平、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平.结果 ① SiO2+Prx-1慢病毒组的Prx-1蛋白表达明显高于SiO2+空慢病毒组,差异有统计学意义(P<0.05);② 对照组大鼠肺组织结构基本正常;SiO2组和SiO2+空慢病毒组大鼠肺泡壁增厚或断裂,细胞性矽结节形成;但SiO2+Prx-1慢病毒组大鼠肺泡壁变薄,矽结节体积减小;③ 与对照组比较,SiO2组α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白 、Ⅲ型胶原蛋白及MDA表达水平均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).SiO2+空慢病毒组的α-SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白及MDA表达水平与SiO2组无明显区别;但与SiO2+空慢病毒组比较,SiO2+Prx-1慢病毒组的α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白 、Ⅲ型胶原蛋白及MDA表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Prx-1能够抑制SiO2诱导的肺组织纤维化,这一作用与降低ROS、抑制肌成纤维细胞分化有关.     

颈交感神经阻滞对糖尿病大鼠脑线粒体功能的影响

目的 观察颈交感神经阻滞对糖尿病大鼠脑线粒体功能的影响.方法 雄性成年大鼠40只随机分为3组:对照组(n=l0,腹腔注射注射等量缓冲液),糖尿病组(n=15,采用STZ糖尿病模型按65 mg/kg剂量腹腔1次注射1％ STZ制备糖尿病大鼠),糖尿病+颈交感神经阻滞组(n=15,按65 mg/kg剂量腹腔1次注射1％ STZ,糖尿病成模后8周给予颈交感神经阻滞治疗).造模后12周水迷宫实验观察各组大鼠的认知功能.并于12周处死大鼠,采用Clark氧电极法测定大鼠海马线粒体的呼吸功能,免疫组化检测海马IL-6、TNF-α的表达.结果 造模后12周,糖尿病组存活12只,阻滞组存活13只.糖尿病组、阻滞组与对照组相比,逃避潜伏期明显延长、穿越平台的次数明显减少(P＜0.05).糖尿病组线粒体呼吸功能为R3(28.51±3.01)、R4(13.93 ±1.16)、RCR(2.09±0.27),阻滞组的为R3(45.26±4.21)、R4(11.99±1.11)、RCR(3.52±0.32),对照组为R3 (66.31 ±5.65)、R4(12.97±3.38)、RCR (4.78 ±0.68),糖尿病组和阻滞组线粒体呼吸功能均较对照组组明显下降,主要表现为R3和RCR值显著降低(P＜0.05);但阻滞组的R3和RCR高于糖尿病组(P＜0.05).在海马CA1区,糖尿病组IL-6、TNF-α表达为(53.32 ±6.29)、(63.21±13.24),阻滞组为(28.14±3.82)、(32.76±5.98),均高于对照组(13.87 ±2.54)、(11.09±8.87) (P ＜0.05).阻滞组明显低于糖尿病组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 颈交感神经阻滞可改善糖尿病大鼠脑线粒体功能,其机制可能与其下调IL-6、TNF-α有关.     

老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达

目的:探讨慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达,以探讨老年抑郁症的发病机制。方法:将20只Wistar老年大鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。实验组大鼠每天强迫游泳20 min,并每周给予电刺激和强光照射各1次,经过21 d应激制作老年大鼠慢性应激抑郁模型,对照组正常喂养,不给予上述处理。采用特异性抗体标记的免疫组织化学方法,检测实验21 d后老年大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达情况,并观察大鼠开场行为和排便情况。结果:①实验组老年大鼠中央格停留时间延长,水平穿越格数减少,修饰行为减少,排便次数增多;②c-fos平均灰度值:实验组(166.56±9.73),对照组(149.62±12.91),有显著差异P=0.000;③阳性细胞数:实验组(41.12±4.72),对照组(31.12±3.25),P=0.000;④caspase-3平均灰度值:实验组(202.59±2.64),对照组(179.74±8.24),有显著差异P=0.000;⑤阳性细胞数:实验组(24.73±2.57),对照组(18.86±1.13),有显著差异P=0.000。结论:慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和caspase-3蛋白表达增加,行为表现异常,可能与慢性应激所致细胞凋亡增强,海马区脑组织损伤有关。     

IL-17A抑制Th2细胞分化减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症

目的 研究IL-17A对哮喘小鼠Th2细胞分化及其相关炎症的作用.方法 24只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘组和IL-17A处理组(n=8).哮喘组和IL-17A处理组予以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏及激发.每次雾化激发前1h,IL-17A处理组给予重组小鼠IL-17A气道滴入.各步对照均予以生理盐水.末次激发后24h处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞总数及分类计数.ELISA检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-17A的浓度.HE和PAS染色及半定量评分评估小鼠肺部病理变化.流式细胞术检测脾脏和支气管淋巴结Th细胞分化.免疫磁珠分选健康小鼠幼稚CD4+T细胞,用Th2极化培养基体外培养,并给予IL-17A或等量PBS干预,检测Th2细胞的增殖、凋亡和分化.结果 哮喘组较对照组,BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数及其比例(P＜0.05)、IL-4、IL-5、IL-17A浓度均显著增高(P＜0.05),IFN-γ浓度显著下降(P＜0.05);支气管、血管周围炎症细胞浸润和杯状细胞化生明显加重(P＜0.01);脾脏和淋巴结Th2细胞分化比例显著增高(P＜0.05).IL-17A处理组较哮喘组,BALF中的细胞总数[(26.00±5.43)×104/mLvs(58.40 ±26.93)×104/mL,P＜0.05]、嗜酸性粒细胞数[(8.04±1.98)×104/mL vs(31.95±12.28)×104/mL,P＜0.05]及其比例[(29.93 ±3.03)％ vs(53.47 ±6.62)％,P＜0.01]显著降低,而中性粒细胞数及其比例无明显变化;BALF中Th2相关因子IL-4浓度[(9.86 ±2.77) pg/mL vs(28.13 ±4.62) pg/mL,P＜0.01]、IL-5浓度[(7.30 ±0.50) pg/mL vs(10.50±1.10) pg/mL,P＜0.01]均显著降低;支气管、血管周围炎症细胞浸润减轻,HE染色半定量评分降低[(2.00 ±0.51)vs(3.12 ±0.64),P＜0.05],杯状细胞化生减少[(0.80 ±0.45)vs(2.40 ±0.55),P＜0.01];脾脏[(2.24±0.44)％vs(4.82±1.83)％,P＜0.01]和淋巴结[(7.05±0.58)％vs(10.57±1.35)％,P＜0.05]中Th2细胞分化比例显著减少.极化培养的幼稚CD4+T细胞,予IL-17A干预后,诱导分化的Th2细胞比例显著减少(P＜0.05),而增殖和凋亡无显著变化.结论 IL-17A有抑制Th2细胞分化,减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症的作用.     

乌灵胶囊增加慢性不可预见性温和应激大鼠海马连接蛋白43的表达改善神经再生（英文）

目的：探讨乌灵胶囊对慢性不可预见性温和应激（chronic unpredictable mild stress , CMS）抑郁模型大鼠海马齿状回脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor , BDNF）、神经再生,以及连接蛋白43（connexin 43 ,Cx43）表达的影响。方法：45只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入对照组（n=15）、模型组（n=15）和乌灵胶囊组（n=15）。模型组和乌灵胶囊组大鼠接受连续3周的CMS,造模期间,乌灵胶囊按100 mg/（kg.d）加入乌灵胶囊组大鼠的膳食中,连续治疗21 d。采用糖水偏爱实验评价大鼠的抑郁程度。抑郁行为测试结束后,取双侧海马组织,用免疫组织化学法检测BDNF与5-溴脱氧尿苷（5-bromodeoxyuridine ,BrdU）的表达;用逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹法检测海马中Cx43 mRNA与蛋白表达。结果：慢性应激大鼠齿状回BDNF阳性表达、新生细胞数及Cx43 mRNA和蛋白表达水平均较正常大鼠明显下降。乌灵胶囊治疗后,CMS大鼠抑郁行为得到改善,异常的海马神经再生恢复,Cx43 mRNA和蛋白表达变得正常,但BDNF表达无明显改变。结论：乌灵胶囊可增加CMS模型大鼠海马神经再生及改善抑郁症状,其机制可能与增加Cx43表达有关,与BDNF无关。