肿瘤坏死因子-α对人髓核间充质干细胞衰老的影响

[目的]探索肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)对人髓核间充质干细胞的衰老的影响。[方法]分离培养第三代正常人髓核间充质干细胞（human nucleus pulposus mesenchymal stem cells, HNPMSCs）,分为空白对照组和TNF-α组,分别加入无血清培养基与TNF-α浓度为100 ng/ml的无血清培养基干预48 h。镜下观察细胞形态,并用细胞衰老β半乳糖苷酶试剂盒染色,对细胞衰老情况进行观察;CCK-8检测第1、3、5、7、9、11、13、15 d后的细胞增殖活性;Western Blot检测衰老相关蛋白P53、P16表达情况。[结果]镜下观察及β半乳糖苷酶染色均可见TNF-α组细胞呈衰老状态。CCK-8检测,随时间推移两组细胞CCK-8检测光密度（optimal density, OD）值均显著增加（P<0.05）。相应时间点两组间比较,第1～7d,两组间的人NPMSCs增殖活性OD值的差异无统计学意义（P>0.05）;而第9～15 d,TNF-α组的人NPMSCs的OD值均显著低于空白对照...     

SIRT1与髓核细胞衰老调控

椎间盘退变(IDD)的生物学机制极其复杂,是一系列脊柱退变性疾病的病理基础.随着髓核细胞衰老,IDD过程中伴有细胞数量减少及细胞生物学表型改变,复制性衰老和应激诱导性衰老均为髓核细胞衰老的可能机制,但具体信号转导通路尚未明确.研究已证实沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)在DNA损伤修复、细胞周期控制、抵抗氧化应激和延长细胞寿命等方面起着重要作用,可能通过调节热量限制、抑制凋亡和氧化应激等机制发挥生物学活性作用.SIRT1对IDD过程的潜在作用受到关注.该文就细胞衰老在IDD中的作用、细胞衰老发生机制、SIRT1对细胞衰老的调控作用等研究进展作一综述.     

缺氧诱导因子1α调控wnt/β-catenin信号通路对常氧条件下大鼠髓核细胞衰老的作用及机制

【摘要】 目的：探究缺氧诱导因子1α（HIF-1α）调控wnt/β-catenin信号通路对常氧培养下大鼠髓核细胞衰老的影响及作用机制。方法：取5只4周龄雌性SD大鼠,提取鼠尾髓核原代细胞进行研究。（1）将髓核细胞分为5组：转染对照组[用磷酸盐缓冲盐水（PBS）处理髓核细胞]、空载腺病毒组（用空载腺病毒处理髓核细胞）、过表达HIF-1α组（用载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞）、空载siRNA组（用空载siRNA处理髓核细胞）、敲减HIF-1α组（用siRNA敲减HIF-1α处理髓核细胞）,在常氧下培养48h后,免疫蛋白印迹（western blot,WB）检测HIF-1α和衰老相关基因p53、p21、p16,β-gal染色检测细胞衰老,评估常氧条件下HIF-1α对于髓核细胞衰老的影响。（2）取髓核细胞,分为空载腺病毒组、过表达HIF-1α组、空载siRNA组、敲减HIF-1α组,处理方式同前,在常氧下培养48h后,WB检测HIF-1α、GSK-3β和β-catenin通路的表达。取髓核细胞,分为对照组（用PBS处理髓核细胞）、过表达HIF-1α组（用载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞）、XAV-939组（用XAV-939处理髓核细胞）、XAV-939+过表达HIF-1α组（用XAV-939+载过表达HIF-1α质粒的腺病毒处理髓核细胞）,WB检测HIF-1α、p53、p21、p16和wnt/β-catenin的表达,β-gal染色检测细胞衰老,以检测HIF-1α与wnt/β-catenin信号通路的关系以及对髓核细胞衰老的影响。结果：（1）腺病毒转染HIF-1α后,与转染对照组和空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组HIF-1α表达增加（P<0.05）。小干扰RNA转染HIF-1α后,与转染对照组和空载siRNA组相比敲减HIF-1α组HIF-1α表达降低（P<0.05）。WB结果显示,与空载腺病毒组相比过表达HIF-1α组HIF-1α表达增加（P<0.05）,而p53、p21和p16表达降低（P<0.05）,与空载siRNA组相比敲减HIF-1α组HIF-1α表达降低（P<0.05）,而p53和p16表达增加（P<0.05）。β-gal染色显示,在常氧条件下培养48h,与空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组衰老细胞降低（P<0.05）,与空载siRNA组相比,敲减HIF-1α组衰老细胞数量则增加（P<0.001）。（2）与空载腺病毒组相比,过表达HIF-1α组β-catenin表达升高（P＜0.01）,同时GSK-3β表达降低（P＜0.05）。与空载siRNA组相比敲减HIF-1α组β-catenin表达降低（P＜0.0001）,同时GSK-3β表达升高（P＜0.05）。与对照组相比,XAV-939组β-catenin表达降低（P<0.001）,p53、p21和p16的表达升高,XAV-939+过表达HIF-1α组β-catenin表达降低（P<0.05）,p21表达升高（P<0.05）。与过表达HIF-1α组相比XAV-939+过表达HIF-1α组衰老细胞数增加（P<0.001）,与对照组相比过表达HIF-1α组的细胞核内β-catenin表达更多,而XAV-939组和XAV-939+过表达HIF-1α组则相对较少（P<0.05）。结论：HIF-1α通过激活wnt/β-catenin信号通路抑制常氧条件培养下大鼠髓核细胞的衰老。     

炎症标志物TNF-α、hs-CRP在肝癌患者预后评估中的作用

目的 探讨肝细胞癌（HCC）患者手术前后外周血肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和高敏C-反应蛋白（hs-CRP）检测的临床意义。方法 检测201例HCC患者手术前后及70例健康对照者TNF-α和hs-CRP的水平,分析TNF-α和hs-CRP水平与临床病理特征的关系。结果 HCC患者术前TNF-α和hs-CRP水平显著高于健康对照者（P<0.05）,手术1周后TNF-α和hs-CRP水平较术前显著下降（P<0.05）。术前TNF-α和hs-CRP水平与HCC的Edmondson分级、TNM分期、肿瘤的大小、有无门静脉癌栓、有无肿瘤包膜密切相关（P<0.05）。hs-CRP水平还与有无腹水明显相关（P<0.05）。当确诊为HCC复发时,TNF-α和hs-CRP水平也明显高于术后水平（P均<0.01）。结论 术前TNF-α和hs-CRP水平与HCC临床病理特征有关,可作为HCC预后和复发的预测因子。     

核转录因子-κB与锌指蛋白A20在瘢痕疙瘩的表达

目的 检测核转录因子-κB( nuclear factor-κB,NF-κB)和锌指蛋白A20 (zinc finger protein,ZFP A20)在瘢痕疙瘩组织中的表达,了解NF-κB信号通路的激活情况及其与瘢痕疙瘩形成的相互关系.方法 应用免疫组织化学染色技术、反转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测16例瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中NF-κB p65和ZFP A20的蛋白表达及mRNA表达.结果 人正常皮肤组织中NF-κB p65的表达低于瘢痕疙瘩组织;ZFP A20的表达高于瘢痕疙瘩组织(P＜0.05).结论 NF -κB信号通路异常及ZFP A20的表达降低可能参与瘢痕疙瘩的形成.     

TNF-α及TNF-α抗体对破骨细胞V-ATP酶的影响

目的研究不同浓度的TNF-α及TNF-α抗体对破骨细胞上V-ATP酶表达量的影响。方法体外诱导小鼠RAW264.7细胞分化为破骨细胞,通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞生成情况。然后将破骨细胞分为对照组、TNF-α干预组及TNF-α抗体干预组,TNF-α干预组、TNF-α抗体干预组分别用低、中、高三种浓度的TNF-α、TNF-α抗体干预48 h。用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)、Western blot检测破骨细胞V-ATP酶的mRNA和蛋白表达水平。结果 TRAP染色检测提示有多核破骨细胞生成。TNF-α处理组V-ATP酶mRNA表达水平显著高于对照组(P0.001);TNF-α抗体处理组V-ATP酶mRNA表达水平显著低于对照组(P0.001)。同时,TNF-α处理组V-ATP酶蛋白表达水平显著高于对照组(P0.05);TNF-α抗体处理组V-ATP酶蛋白表达水平显著低于对照组(P0.05)。结论 TNF-α可提高破骨细胞V-ATP酶的表达;TNF-α抗体可抑制破骨细胞V-ATP酶的表达。上述提示TNF-α可能通过提高破骨细胞V-ATP酶的表达从而增加破骨细胞的骨吸收作用。     

七氟醚对心脏瓣膜置换术患者NF-κB和TNF-α表达的影响

目的 观察七氟醚对心脏瓣膜置换术患者核因子κB(NFκB)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响,探讨其心脏保护作用的可能机制.方法 30例拟行心脏瓣膜置换术患者,随机均分为七氟醚组(S组)和对照组(C组).用流式细胞仪检测围术期血NF-κB活性,用酶联免疫法(ELISA)检测围术期血浆TNF-α浓度.结果 心肺转流(CPB)后两组NF-κB活性和TNF-α水平均较CPB前显著增加(P＜0.05).CPB后各时点NF-κB和TNF-α水平,C组显著高于S组(P＜0.05).结论 七氟醚可能通过抑制NF-κB的表达与活性,进而降低TNF α浓度,减轻了CPB时的全身炎症反应而发挥心脏保护作用.     

白藜芦醇对腰神经根周围自体髓核移植大鼠背根神经节TNF-α和IL-1表达的影响

【摘要】 目的：观察白藜芦醇对腰神经根周围自体髓核移植大鼠脊髓背根神经节（DRG）中肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-1（IL-1）表达的影响。方法：SD大鼠48只,随机分为脂肪+生理盐水组（A组）、髓核+生理盐水组（B组）、髓核+地塞米松组（C组）、髓核+白藜芦醇组（D组）,每组12只。所有大鼠行椎板切除开窗,暴露左侧的硬脊膜及L4、L5背侧神经根,其中B、C、D组制作腰神经根周围自体髓核组织移植动物模型,A组制作腰神经根周围自体脂肪组织移植动物模型。术后第7天各组随机处死6只大鼠并取材,剩余大鼠D组给予腹腔注射白藜芦醇,C组腹腔注射地塞米松,A、B组则给予等量生理盐水腹腔注射,1次/d,连续5d,术后第14天取材。对两个时间点各组大鼠的L4、L5脊髓DRG行HE染色、TNF-α和IL-1免疫组化染色,光镜下观察并计算阳性细胞数,所得数据用SPSS 17.0统计软件进行分析。结果：A组无明显炎性反应,B、C、D组术后7d时DRG内细胞间组织增宽,呈明显充血和水肿,神经节细胞尼氏小体消失,空泡变性,核消失,炎性细胞大量浸润,微血管扩张,部分髓鞘呈空泡样变;术后14d时B组炎性表现仍较明显,C组和D组相对B组神经根节内的病理变化较轻,尼氏小体略有减少,少量空泡变性及炎性细胞浸润,髓鞘变化也较轻。B、C、D组与A组相比,术后7d、14d时背根神经节细胞TNF-α和IL-1表达均显著增加（P<0.01）;14d时,C、D组与B组相比,TNF-α和IL-1表达显著降低（P<0.01）,C组与D组相比无统计意义（P>0.05）。结论：髓核自体移植至脊髓DRG周围可造成神经根局部炎症反应,白藜芦醇可以降低其背根神经节细胞TNF-α和IL-1的表达,从而减轻炎症反应。     

七氟醚对心脏瓣膜置换术患者NF-κB和TNF-α表达的影响

目的：观察七氟醚对心脏瓣膜置换术患者核因子-κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子a（TNF-α）的影响，探讨其心脏保护作用的可能机制。方法：30例拟行心脏瓣膜置换术患者，随机均分为七氟醚组（S组）和对照组（C组）。用流式细胞仪检测围术期血NF-κB活性，用酶联免疫法（ELISA）检测围术期血浆TNF-α浓度。结果：心肺转流（CPB）后两组NF-κB活性和TNF-α水平均较CPB前显著增加（P〈0．05）。CPB后各时点NF-κB和TNF-α水平，C组显著高于S组（P〈0．05）。结论：七氟醚可能通过抑制NF-κB的表达与活性，进而降低TNF—α浓度，减轻了CPB时的全身炎症反应而发挥心脏保护作用。     

结肠癌组织TNF-α及p55与肿瘤细胞分化程度的相关性研究

为探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及其受体p55在结肠癌组织中的表达水平,以及其与肿瘤细胞分化程度的相关性,对32例结肠癌标本,采用免疫组化方法染色,观察TNF—α与其受体p55阳性率及表达强度,并分析其与肿瘤细胞分化程度的关系。结果显示,结肠癌组织TNF—α及受体蛋白p55表达阳性率分别为80．7％及67．7％,多为中等强度表达,TNF-α及p55表达与肿瘤细胞分化程度呈负相关。结果表明,TNF-α及其受体蛋白p55在结肠癌组织中存在高表达现象,其可能通过影响肿瘤细胞分化发挥抗肿瘤作用。     

锌指蛋白A20抑制脂多糖诱导大鼠腹膜间皮细胞NF-κB活化、CD40表达及TNF-α的分泌

目的：探讨锌指蛋白A20（zinc finger protein A20）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠腹膜间皮细胞（RPMCs）炎症反应的影响.方法：分离及培养RPMCs,将细胞随机分成对照组、LPS组、转染A20组、空载体组.脂质体转染A20质粒（pGEM-T easy-A20）至RPMCs 24 h后分别在LPS刺激不同时间点收获细胞提取蛋白及细胞上清液.用Western blotting 检测细胞A20和IκBα（inhibitor of nuclear factor-κB-α）蛋白的表达;RT-PCR检测CD40和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA的表达;用ELISA法检测培养上清液TNF-α蛋白水平.结果：与LPS组及空载体组相比,转染A20组RPMCs IκBα蛋白无明显降解（P＆lt;0.05）;CD40、TNF-α mRNA表达及细胞培养上清液TNF-α蛋白水平均明显降低（P＆lt;0.05）;与对照组相比,差异无统计学意义（P＆gt;0.05）.结论：A20可抑制LPS诱导的RPMCs核转录因子-κB（NF-κB）活化及炎症反应.     

红景天苷通过JAK2/STAT3通路抑制退变髓核细胞的炎症反应和凋亡

目的观察红景天苷对退变髓核细胞凋亡和炎症反应的影响,并探究其与JAK2/STAT3信号通路的关系。方法通过氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)培养建立退变髓核细胞模型,退变细胞分别予浓度为10μg/mL、30μg/mL和50μg/mL的红景天苷培养液。后续实验选择30μg/mL浓度进行,分为Control组、OGD组、红景天苷组、AG490(JAK2/STAT3信号通路抑制剂)组和红景天苷联合AG490干预组。RT-PCR法检测髓核细胞蛋白聚糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原(Col2a1)表达水平;Western blot检测红景天苷对髓核细胞p-JAK2和p-STAT3蛋白水平的影响;ELISA检测上清液中炎症相关因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平,流式细胞术检测髓核细胞的凋亡。结果与Control组相比,OGD组Aggrecan和Col2a1 mRNA表达明显降低,炎症相关因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平明显上调。与OGD组相比,红景天苷组显著抑制细胞凋亡以及炎症相关因子TNF-α、IL-1β和IL-6的释放,同时,我们发现,AG490组和红景天苷联合AG490干预组上述指标均明显降低,其中红景天苷联合AG490干预组各检测指标较AG490组略低。红景天苷联合AG490干预明显改善髓核细胞的凋亡和炎症反应,并抑制JAK2和STAT3的磷酸化水平。结论红景天苷可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路的活化而减轻退变髓核细胞炎症因子的产生和细胞凋亡。     

TNF-α拮抗剂(Etanercept)治疗脊髓损伤作用机制的实验研究

目的探讨TNF-α拮抗剂Etanercept(依那西普)对继发性脊髓损伤的治疗作用和可能机制。方法建立大鼠脊髓挫伤模型,损伤后1 h对大鼠行腹腔注射5 mg/kg Etanercept或生理盐水(损伤对照组);假手术组(20只大鼠)仅行椎板切除术而无脊髓损伤,1 h后给予腹腔注射1 ml生理盐水。结果在脊髓损伤急性期(12 h、1 d、3 d),Etanercept治疗组TNF-α的蛋白表达强度明显弱于损伤对照组。与对照组相比,Etanercept治疗组TNFR1的表达在损伤后6、12 h均下降,TNFR2仅在损伤后6 h下降。损伤对照组大鼠在脊髓损伤后后肢运动功能明显受限,而Etanercept治疗组大鼠在脊髓损伤后2、4、8周,后肢BBB评分显著升高。结论 Etanercept可能通过抑制TNF-α/TNFR通路,减轻了脱髓鞘变性,促进了运动功能的恢复。     

PP2A在肝枯否细胞NF-κB活化中的调控作用及其效应机制

目的 探讨蛋白磷酸酶2A (PP2A)的表达在肝枯否细胞(KC)核因子-κB(NF-κB)活化中的作用,对KC核因子-κB活化的表达调控机制进行理论探索.方法 采用胶原酶灌注和percol密度梯度离心法分离得到高纯度大鼠KC,分为内毒素(LPS)及二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)+LPS分别与KC体外共培养组及一个阴性...     

TNF-α介导绝经后骨质疏松症发病机制的研究进展

肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)作为免疫系统和骨骼系统共有的细胞因子,可刺激免疫细胞活化,促进炎性因子分泌,加剧炎症反应的作用,直接或间接促进骨吸收的作用,通过多环节多途径调节绝经后骨质疏松症的发生发展,可作为监测绝经后骨质疏松症的指标,也有望成为有效治疗绝经后骨质疏松症的药...     

椎间盘髓核细胞老化的微环境因素研究现状

<正>椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)继发的脊柱不稳与椎管狭窄是引起腰腿痛的主要原因~([1])。老化的髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)在退变的椎间盘组织中广泛聚集,这些老化的NPCs能诱导并加速IDD~([2])。与细胞程序性凋亡不同,老化细胞仍有代谢活性,却停止分裂增殖,同时上调炎症因子和基质降解酶的表达,通过形成老化分泌表型(senescent-associated secretory phenotypes,SASP)来恶化邻近细胞生存的微环境~([2])。髓核组     

库存红细胞增强脂多糖诱导的外周血单个核细胞炎症反应机制的研究

目的：研究库存红细胞对内毒素（LPS）诱导的外周血单个核细胞（PBMC）释放炎性细胞因子的影响及其机制。方法：分离健康献血员的PBMC,分为PBMC组、PBMC＋SN50组、PBMC＋LPS组、PBMC＋LPS＋SN50组、PBMC＋d1组、PBMC＋d1＋SN50组、PBMC＋d1＋LPS组、PBMC＋d1＋LPS＋SN50组、PBMC＋d35组、PBMC＋d35＋SN50组、PBMC＋d35＋LPS组、PBMC＋d35＋LPS＋SN50组和PBMC＋d21＋LPS组。取保存第1、21、35天（d1、d21、d35）的悬浮红细胞,离心,取上清,与新鲜分离的PBMC混合孵育20h（不加库存红细胞各组用完全1640培养基培养）,库存红细胞上清的体积为PBMC培养体系总体积的20％。加SN50各组于培养体系中加入核因子-κB特异性抑制剂SN50,培养4h后,加LPS各组加入100ng／L LPS刺激24h,收集各组细胞培养上清,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度的变化;收集PBMC与库存红细胞上清及LPS共同孵育各组的PBMC,免疫印迹法检测核因子-κB抑制剂-α（IκB-α）的蛋白水平及磷酸化水平的变化,以PBMC和PBMC＋LPS组作为对照。结果：随库存红细胞保存时间的延长,PBMC中IκB-α的磷酸化水平逐渐升高,而蛋白水平随之逐渐下降;悬浮红细胞上清能增强LPS诱导下PBMC分泌TNF-α的作用,但能被SN50抑制。结论：NF-κB信号通路参与了库存红细胞增强LPS诱导的PBMC炎症反应的作用,阻断NF-κB的活化可以抑制这一增强作用。     

维生素C对TNF-α及血清剥夺诱导的人髓核细胞凋亡的作用

目的探讨维生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剥夺诱导人椎间盘髓核细胞凋亡中的作用及机制。方法取脊柱矫形手术患者的髓核组织,消化法获得正常髓核细胞,取第3代细胞按不同处理因素分为Vit C作用组(A组)、TNF-α诱导组(B组)和血清剥夺组(C组),每组再分为以下亚组:A组分为A1组(基础培养液)、A2组(100μg/m L Vit C)、A3组(200μg/m L Vit C);B组分为B0组(对照组)、B1组(100 ng/m L TNF-α)、B2组(100μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α)、B3组(200μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α);C组分为C0组(对照组)、C1组(FBS浓度由8%降低为2%)、C2组(2%FBS+100μg/m L Vit C)、C3组(2%FBS+200μg/m L Vit C)。各组作用24 h后,采用流式细胞术检测各组膜联蛋白V、碘化丙啶双染后髓核细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测p53(基因编码相对分子质量为53×103的蛋白质)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Sox9和糖胺多糖(Aggrecan)m RNA表达。结果 A组:与A1组比较,A2、A3组的Vit C均能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05),但A2、A3组间比较差异无统计学意义(P0.05);A2、A3组的Vit C可促进髓核细胞Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Sox9 m RNA表达,且A3组促进作用显著大于A2组(P0.05)。B组:与B0组比较,B1组TNF-α促进了髓核细胞凋亡,增加了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05);与B1组比较,B3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而B2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,差异均有统计学意义(P0.05)。C组:与C0组比较,C1组2%FBS能诱导髓核细胞凋亡,但降低了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P0.05);与C1组比较,C3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而C2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS m RNA表达,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Vit C能延缓或降低髓核细胞凋亡、促进细胞外基质合成与分泌,200μg/m L Vit C可延缓或降低100 ng/m L TNF-α和2%FBS诱导的凋亡,而100μg/m L Vit C则促进其诱导的凋亡。     

锌指蛋白A20对兔腰椎间盘退变影响的实验研究

目的 探讨锌指蛋白A20对兔腰椎间盘退变的影响.方法 取3月龄新西兰大白兔26只,体质量2.0～2.5 kg,经腹细针穿刺法制备L3、4、L4、5、L5、6椎间盘退变模型,其中24只术后4周MRI检查明确造模成功,随机分为4组(n=6),于目标椎间盘中分别注射锌指蛋白A20过表达腺病毒(过表达A20组)、空载体腺病毒(...