白藜芦醇对高糖诱导足细胞损伤的改善作用及机制探讨

[目的]观察白藜芦醇（RSV）对高糖诱导足细胞凋亡的影响及作用机制。[方法]采用体外高糖诱导作为足细胞损伤模型,细胞分为3组：对照组为5 mmol/L低糖培养液（LG）;模型组为30 mmol/L高糖培养液（HG）;RSV干预组：HG+5 μmol/L RSV;HG+10 μmol/L RSV,培养48 h后采用流式细胞术检测足细胞的凋亡情况;DHE探针观察细胞内活性氧自由基（ROS）生成;激光共聚焦检测线粒体膜电位及线粒体内ROS合成;Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（caspase）3、caspase 9的表达情况。[结果]与HG组相比,RSV可呈剂量依赖性的抑制高糖诱导的足细胞凋亡;荧光探针结果显示,RSV干预后细胞内及线粒体ROS生成明显低于HG组;JC-1染色显示,与HG组相比,RSV干预可显著提高线粒体膜电位;Western blot结果显示,随RSV干预浓度的提高,caspase 3、caspase 9表达水平明显下调,差异具有统计学意义（P<0.05）。[结论]RSV呈浓度依赖性的抑制高糖诱导的足细胞凋亡,其保护作用可能与抑制氧化应激,改善线粒体功能障碍相关。     

α-硫辛酸对高糖培养施万细胞线粒体凋亡通路的影响

目的 探讨α-硫辛酸（alpha lipoic acid,ALA）对高糖培养施万细胞氧化应激损伤及线粒体凋亡通路的影响。方法 原代培养并纯化后的大鼠施万细胞为研究对象,分为正常组（5.6mmol/L葡萄糖培养基）、高糖组（50mmol/L葡萄糖培养基）、渗透压对照组（5.6mmol/L葡萄糖培养基+44.4mmol/L甘露醇）,以及高糖内分别加入不同浓度ALA （50、100、200μmol/L）组。流式细胞术检测施万细胞活性氧（ROS）及线粒体膜电位水平,Tunnel法检测施万细胞凋亡率,Western blot法检测bcl-2、bax、cyto C、cleaved-caspase-3及cleaved-caspase-9的表达。结果 与正常组比较,高糖组施万细胞内ROS水平明显增高（P<0.01）,线粒体膜电位下降,bcl-2蛋白表达降低（P <0.01）,bax蛋白的表达增加（P <0.01）,cyto C从线粒体到胞质的释放增加,caspase-9、caspase-3的活化水平增高,细胞凋亡率明显增高（P<0.01）。ALA降低高糖所致的施万细胞内ROS水平的增高（P<0.01）,提高了线粒体膜电位（P<0.01）,上调bcl-2蛋白的表达（P<0.01）,下调bax蛋白的表达（P <0.01）,减少了cyto C从线粒体到胞质的释放（P<0.01,P< 0.05）,降低了caspase-9及caspase-3的活化（P<0.01）,从而抑制了施万细胞凋亡。结论 ALA可以抑制高糖所致的施万细胞氧化应激损伤及线粒体凋亡通路的激活。     

血红素加氧酶-1的表达对氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的影响

目的 本研究探讨血红素加氧酶-1与氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的关系。 方法 培养ECa109食管鳞癌细胞,实验组分别加入正常培养基,含20μmol/L、80μmol/L锌原卟啉(ZnppIX)的培养基培养12h,后更换为含100μg/ml 5-FU组培养;对照组予正常培养基培养;共培养96h后检测各组细胞凋亡情况。 结果 在凋亡早期细胞中(Annexin V⁺/PI^-),20μmol/L ZnppIX组(25.63%±6.52%)及80μmol/L ZnppIX(22.48%±5.59%)组显著高于5-FU组(12.89%±4.42%,P均<0.05)。在中晚期凋亡细胞(Annexin V⁺/PI⁺)中,20μmol/L ZnppIX组(25.17%±5.53%)显著低于5-FU组(39.89%±6.66%)及80μmol/L ZnppIX组(41.95%±2.92%,P均<0.01)。80μmol/L ZnppIX组caspase-3的活化率显著高于正常细胞(P<0.05)。 结论 ZnppIX抑制HO-1表达后,可以显著增加5-FU诱导的Eca109食管癌细胞凋亡率,caspase-3参与了其诱导细胞凋亡的过程。     

苯吸入对骨髓细胞凋亡和组蛋白去乙酰化酶影响

目的 观察苯吸入对小鼠骨髓细胞损伤情况以及去乙酰化酶水平的变化。方法 自制动式苯吸入装置中放8~9周龄CD1雄性小鼠实验组吸入苯,正常对照组吸空气,6h/d,5天/周,300ml/m³及900ml/m³维持12周。末次吸苯后第2天,获取小鼠骨髓单个核细胞,利用流式细胞仪测骨髓细胞凋亡情况及用去乙酰化酶（HDAC）试剂盒测去乙酰化酶（HDAC酶）活性变化。结果 300ml/m³∶实验组小鼠骨髓细胞中早期凋亡细胞（AnnexinⅤ+PI-）比例（13.80%±5.31%）是对照组（8.33%±0.61%）的1.65倍（P<0.05）;晚期骨髓凋亡细胞（AnnexinⅤ+PI+）比例与对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。900ml/m³∶实验组小鼠骨髓细胞中早期凋亡细胞（AnnexinⅤ+PI-）比例（13.10%±5.39%）是对照组（7.16%±2.18%）的1.83倍（P<0.05）;实验组晚期凋亡骨髓细胞（AnnexinⅤ+PI+）比例（7.11%±3.54%）是对照组（4.54%±0.84%）的1.57倍（P<0.05）。（2）900ml/m³苯浓度吸入小鼠组骨髓单个核细胞去乙酰化酶活性[（7.89±2.58）×10^-3A值/微克]是正常对照组[（5.00±1.52）×10^-3A值/微克）]的1.58倍（P<0.05）。结论 苯吸入可致小鼠骨髓细胞产生凋亡坏死。苯吸入致小鼠骨髓细胞组蛋白去乙酰化酶活性升高。     

姜黄素加重结肠癌细胞株HCT-116线粒体损伤和促进细胞凋亡的作用研究

目的 观察姜黄素对结肠癌细胞株HCT-116细胞增殖和凋亡的影响以及对细胞线粒体形态和功能的改变,并探讨其可能的机制。方法 体外培养结肠癌细胞株HCT-116,给与不同浓度的姜黄素（5、10、20、30 μmol/L）处理,细胞计数试剂盒CCK-8观察细胞增殖的变化并筛选出最佳作用浓度。流式细胞术检测细胞凋亡的改变。线粒体膜电位检测试剂盒JC-1检测细胞内线粒体膜电位的变化。电镜和Mito Tracker Deep Red染色观察细胞内线粒体形态结构的变化。三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）和活性氧（reactive oxygen species,ROS）检测试剂盒检测细胞ATP和ROS的变化。分光光度计检测与凋亡密切相关的casppase-3和caspase-9活性变化。最后,Western blot检测结肠癌细胞内caspase-3和caspase-9蛋白水平的变化。结果 姜黄素处理细胞株HCT-116细胞后,细胞的增殖水平受到抑制,且呈浓度-时间依赖性,其半数最大抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC₅₀）为13 μmol/L。姜黄素不仅增加早期凋亡的结肠癌细胞的比例,还使细胞内线粒体膜电位水平下降,且呈浓度依赖性。电镜结果显示姜黄素处理后,细胞内线粒体出现明显的线粒体肿胀,线粒体嵴肿胀、消失、膜破裂和空泡等。Mito Tracker Deep Red染色后显示线粒体数量减少且呈碎片状。细胞内的ATP生产明显下降。另外,姜黄素还增加细胞内caspase-3和caspase-9酶活性和蛋白水平的表达。结论 姜黄素抑制结肠癌HCT-116细胞的增殖,并促进细胞的凋亡,其机制与姜黄素加重线粒体形态和功能的损伤有关。     

18F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效中的关联性分析

目的 本研究旨在探讨¹⁸F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效的关联性。方法 2014年1月~2015年12月,收集笔者医院收治的行新辅助化疗的乳腺癌患者98例。前瞻性分析¹⁸F-FDG PET-CT与乳腺癌新辅助化疗疗效的关联性。结果 与病理无效组相比,病理有效组患者SUV_max0显著增加（9.54±3.11 vs 6.12±3.21,P=0.015）;SUV_max1变化率显著增加（53%±17% vs 29%±11%,P=0.000）;SUV_max2变化率显著增加（61%±21% vs 34%±12%,P=0.000）。与未pCR组相比,pCR组患者SUV_max0显著增加（10.54±4.11 vs 5.87±2.21,P=0.000）;SUV_max1变化率显著增加（57%±17% vs 28%±10%,P=0.000）;SUV_max2变化率显著增加（64%±23% vs 33%±11%,P=0.000）。结论 ¹⁸F-FDG PET-CT可作为评价乳腺癌新辅助化疗效果的一种影像学方式,值得临床进一步推广。     

槲皮黄酮改善心肌细胞肥大过程中对线粒体功能及动力学的影响

[目的]探讨槲皮黄酮对原代心肌细胞肥大、线粒体功能及动力学的影响。[方法]原代培养大鼠心肌细胞,采用血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及槲皮黄酮共同干预细胞48、72 h后,BCA试剂盒检测细胞中蛋白浓度,倒置显微镜分析心肌细胞直径;酶标仪检测心肌细胞内三磷酸腺苷（ATP）及活性氧（ROS）含量,JC-1方法分析心肌细胞线粒体膜电位（MMP）;蛋白免疫印迹（Western Blot）方法测定线粒体动力学相关蛋白视神经萎缩蛋白（OPA1）、动力相关蛋白（Drp1）及磷酸化动力相关蛋白1（p-Drp1）表达量。[结果]与空白组比较,模型组心肌细胞中总蛋白浓度、细胞直径大小及ROS水平显著升高（P<0.05）,ATP和MMP值则显著降低（P<0.05）,Western Blot结果发现OPA1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,p-Drp1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;与模型组比较,槲皮黄酮处理72 h后心肌细胞中总蛋白浓度、细胞直径大小及ROS水平显著降低（P<0.05）,ATP和MMP值则显著升高（P<0.05）,Western Blot结果发现OPA1蛋白表达水平显著增高（P<0.05）,p-Drp1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。[结论]槲皮黄酮对AngⅡ引起的心肌细胞肥大具有保护作用,其作用机制可能与降低心肌细胞线粒体功能障碍、稳定线粒体动力学平衡相关。     

活血温通方对缺氧心肌细胞氧化应激和凋亡的影响

[目的] 观察活血温通方对缺氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用。[方法] 采用H9c2心肌细胞进行缺氧无血清刺激,同时加入活血温通方含药血清和空白血清处理4 h后,检测细胞活力、Caspase 3和Caspase 8活性、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶 （CAT）、丙二醛（MDA）含量,并进行二氢乙啶（DHE）染色观察活性氧（ROS）变化,以及Hoechst染色观察细胞凋亡情况,对比分析各组之间差异。[结果] 与对照组比较,缺氧组H9c2心肌细胞活力、SOD和CAT活性显著下降（P<0.01）,Caspase 3和Caspase 8活性、MDA含量明显升高（P<0.01）,同时累积的ROS含量和细胞凋亡数量增多（P<0.01）。活血温通方含药血清能提升细胞活力、增加SOD、CAT活性（P<0.01）,明显降低MDA水平、Caspase 3和Caspase 8活性（P<0.01）,同时减少ROS累积,抑制心肌细胞凋亡（P<0.01）。[结论] 通过抑制细胞凋亡、减轻氧化应激,活血温通方一定程度上可以保护心肌细胞免受缺氧损伤。     

胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌患者局部组织中浸润淋巴细胞的影响

目的 探讨胸腺五肽对新辅助化疗的乳腺癌组织微环境中浸润淋巴细胞的影响。方法 自2012年1月~2014年1月,前瞻性收集笔者医院收治的接受新辅助化疗的乳腺癌患者80例,将患者随机分为研究组和对照组,所有患者均行新辅助化疗,研究组在新辅助化疗期间给予胸腺五肽,化疗结束后进行手术切除肿瘤组织,留取乳腺癌组织标本,观察乳腺癌组织中和外周血中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞比例、外周血中IL-6、IL-10、TGF-β1水平。结果 与对照组比较,研究组患者乳腺癌组织中CD4⁺T细胞显著降低（21.47%±3.29% vs 23.88%±3.43%,P=0.002）;CD8⁺T细胞显著增高（30.36%±4.38% vs 28.43%±4.16%,P=0.047）;CD4⁺/CD8⁺T细胞显著降低（0.71±0.14 vs 0.84±0.18,P=0.001）。两组患者治疗前外周血CD4⁺T细胞、CD4⁺/CD8⁺T细胞、IL-6、IL-10、TGF-β1等比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,研究组患者术后外周血CD4⁺T细胞水平显著增加（27.67%±4.24% vs 25.09%±3.68%,P=0.005）;CD4⁺/CD8⁺T显著增加（0.83±0.14 vs 0.75±0.18,P=0.029）;IL-6水平显著增高（12.39±2.87 vs 9.24±3.38ng/L,P=0.000）;IL-10水平显著降低（8.49±2.59 vs 12.59±3.65ng/L,P=0.006）;TGF-β1水平显著降低（12.47±3.88 vs 17.76±4.12ng/ml,P=0.000）。两组患者住院时间、切口感染、手术部位出血、复发率和病死率等比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论 胸腺五肽联合新辅助化疗可能有助于改善乳腺癌组织微环境中免疫状态和全身免疫功能。     

平阳霉素诱导人脐静脉血管内皮细胞HUVEC凋亡的作用机制

目的 检测不同浓度平阳霉素(pingyangmycin,PYM)作用24h对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC细胞的生长抑制及凋亡的影响,探讨平阳霉素诱导HUVEC细胞凋亡最佳浓度及有关作用机制。方法 用不同浓度的平阳霉素作用HUVEC细胞24h,以细胞增殖-毒性8检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测比较0.1、10、100、1000μg/ml平阳霉素作用24h后对HUVEC细胞的抑制作用,用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶细胞凋亡检测试剂盒(Annexin-VFITC/PIapoptosis kit)检测不同浓度PYM对HUVEC细胞凋亡作用的影响,蛋白印迹法(Western blot)检测不同浓度平阳霉素作用HUVEC细胞后内质网应激蛋白GRP78和CHOP的表达。结果 CCK-8结果显示随平阳霉素浓度的升高,对HUVEC细胞的抑制作用越明显(P<0.05);然平阳霉素药物浓度100μg/ml和1000μg/ml组相比,差异无显著性统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测显示0.1、1、10、100μg/ml平阳霉素作用24h后细胞凋亡率分别为5.37%±1.63%、12.70%±1.57%、24.70%±6.99%、23.60%±0.80%,坏死率分别为4.87%±2.09%、7.32%±3.88%、39.10%±6.18%、66.30%±0.40%,随药物浓度增加而增高,过高浓度细胞坏死占主导,和对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot法结果显示,平阳霉素各浓度作用24h后促进内质网应激蛋白GRP78和CHOP的表达。结论 平阳霉素在体外能明显抑制HUVEC细胞生长并促进其凋亡,当平阳霉素浓度达到100μg/ml时,细胞以坏死为主;平阳霉素可能通过内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)途径诱导HUVEC细胞凋亡。     

卡立泊来德预处理对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨选择性Na+/H+交换-1拮抗剂卡立泊来德预处理对兔肺缺血再灌注损伤的作用。方法 将24只新西兰大白兔随机分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（IR组）、低钾右旋糖酐组（LPD组）和卡立泊来德组（HOE组）,每组6只。麻醉后开胸,游离左肺门绕过阻断带,分别于30 min内经静脉泵入等量生理盐水、LPD液或含卡立泊来德的新型器官保护液,除Sham组观察180 min外,余3组均结扎左肺门60 min后,再开放观察120 min,建立在体兔肺缺血再灌注损伤模型。于结扎前（即缺血期前）,开放即刻（即再灌注即刻）,再灌注后15、30、60、90和120 min分别抽取股动脉血进行血气分析。再灌注结束后取左肺组织测定肺含水量（lung water content,LWC）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量、超氧化物歧化酶（super oxide dismutase,SOD）活性、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）含量、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）含量和钠氢转运体-1（natrium hydrogen exchanger-1,NHE1）表达量,并进行肺组织病理学观察。结果 同IR组相比,LPD组和HOE组氧合指数（再灌注开始后）和肺组织SOD活性升高,肺组织LWC、MDA含量、IL-6含量、TNF-α含量、NHE1表达量（P<0.05）和肺组织病理学评分降低（P<0.008）;除肺组织病理学评分外（P>0.008）,HOE组余各项指标均较LPD组改善明显（P<0.05),但仍未恢复至Sham组水平（P<0.05）。结论 卡立泊来德可通过减少NHE1蛋白表达以减轻缺血再灌注期间氧化应激和炎症反应,并同时增强组织抗氧化能力,从而有效减轻在体兔肺缺血再灌注损伤。     

Effects of Xianzhen tablet on Na+ - K+ - ATPase and Ca2+ - Mg2+ - ATPase in erythrocytic membranes and viscosity of whole blood in non-insulin-dependent diabetes patients with Qi-Yin deficiency, Kidney deficiency and blood stasis

Objective: To assess the effects of Xianzhen tablet (XZT) on Na⁺-K⁺-ATPase and Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase on erythrocytic membranes, viscosity of whole blood, plasma glucose and clinical manifestations.Methods: Seventy-two cases of non-insulin-dependent diabetes mellitus (NIDDM) patients with deficiency of both Qi and Yin, deficiency of the Kidney and blood stasis were selected, and the effects of treatment on Na⁺ K⁺ -ATPase, Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase, whole blood viscosity, blood sugar and clinical symptoms were observed.Results: In XZT group (test group), activities of Na⁺ -K⁺ -ATPase and Ca²⁺ -Mg²⁺ -ATPase rose significantly (P < 0.01,P < 0.05) after treatment. Viscosity of whole blood and clinical manifestations also improved obviously. The total effective rate in lowering plasma glucose was 77.8% with fasting blood glucose (FBG) and 69. 4% with 2 hours postprandial plasma blood glucose (2°PBG). In the control group, viscosity of whole blood and clinical manifestations had no significant improvement. Its total effective rate in lowering plasma glucose was 41.7% with FBG and 38.9% with 2°PBG.Conclusions: XZT played a certain role in increasing activities of Na⁺ -K⁺ -ATPase and Ca²⁺ -Mg²⁺ -ATPase, decreasing viscosity of whole blood and plasma glucose and improving clinical manifestations. Therefore, XZT was experimentally manifested as an effective drug in treating NIDDM patients with Qi-Yin deficiency, renal deficiency and blood stasis.     

The effect of magnesium on erythrocytic electrolytes in digitalis toxicity

Summary Concentrations of K⁺, Na⁺ and Mg⁺⁺ were measured in plasma (K⁺ _e, Na⁺ _e, Mg⁺⁺ _e) and in erythrocytes (K⁺ _i, Na⁺ _i, Mg⁺⁺ _i) in patients with digitalis toxicity before and after administration of Mg. K⁺ concentration in 24-hour urine was also measured. 70 persons were divided into 5 groups: (1) 11 normal persons as controls; (2) 19 patients with congestive heart failure, in whom Mg⁺⁺ _i and Mg⁺⁺ _e concentrations were found to be lower than that of the control group; (3) 16 patients with digitalis toxicity treated by Mg⁺⁺, whose K⁺ _i concentration increased much quicker, and Na⁺ _i and Na⁺ _i/K⁺ _i decreased remarkably in comparison to non-Mg treatment group; (4) 12 patients with digitalis toxicity not treated by Mg⁺⁺: in these the above-mentioned changes were not significant; (5) 12 patients with arrhythmia of other causes treated by Mg⁺⁺: whose K⁺ _i also increased significantly on the 3rd day after treatment. K⁺ concentration in 24-hour urine was much lower in Mg treatment group than in non-Mg treatment group. Besides, acute digitalis toxicity was observed in experimental dogs. The concentration of K⁺ _i recovered much quicker in Mg treatment group than in control group. These findings indicate that hypomagnesemia may induce digitalis toxicity. In this paper the possible mechanism of the therapeutic effect of Mg in the treatment of digitalis toxicity is discussed.     

Shkbp1缺失对小鼠T淋巴细胞系亚群的影响

目的探讨Shkbp1缺失小鼠(Shkbp-1~(-/-))的血液、骨髓、脾脏中血液细胞分类和T细胞亚群的变化。方法采用Shkbp-1~(-/-)转基因小鼠,经PCR鉴定基因型;利用全自动血液检测仪测定血液细胞分类;采用流式细胞仪检测Shkbp-1~(-/-)和对照组小鼠血液、骨髓、和脾脏中T淋巴细胞亚群。结果血常规结果:中性粒细胞和嗜酸性粒细胞有增高趋势,且有显著差异。淋巴细胞未见显著差异。流式结果显示:对照组血液中CD4~+CD8~+双阳性细胞降低,骨髓中CD3~+、CD4~+升高。但脾脏组织中,其CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+CD8~+双阳性细胞均呈下降趋势。结论 Shkbp1参与血液细胞的成熟分化,影响了免疫细胞数量,本研究为探索Shkbp1如何参与血液细胞的分化奠定了研究基础。     

双哌嗪类化合物的合成及钙通道阻滞活性

为寻求活性更好、毒性更低的新结构类型钙通道阻滞剂,以氟桂利嗪为先导化合物,设计合成了一系列双哌嗪类新化合物,并经光谱证明其结构。初步药理实验结果表明,9个新化合物在⁴⁵Ca²⁺跨膜内流动药理实验中,对大鼠主动脉电压依赖型钙离子通道（PDC）均有钙阻滞活性,且部分化合物的活性强于阳性对照药硝苯吡啶。     

旋覆代赭汤及其拆方对RE大鼠血浆Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影响

[目的] 探讨反流性食管炎(RE)食管黏膜血浆细胞能量代谢与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。[方法] 将120只Wistar大鼠按照随机数字法随机分为10组,每组12只,即正常组、模型组、旋覆代赭汤全方组(全方组)、苦降组、甘升组、升降相因组、去苦降组、去甘升组、去升降相因组和西药组;除正常组外,其余9组行"4.2 mm幽门夹+胃底2/3结扎术"造模。治疗14 d后,即造模后第22天处死,检测各组大鼠血浆Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性。[结果] 实验后各模型组大鼠ATP酶活性低于正常组;全方组、西药组酶活性较好,与正常组差异无统计学意义(P>0.05),与模型组相比有统计学差异(P<0.05);苦降组及去甘升组与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05),与全方组及西药组比较差异有统计学意义(P<0.05);正常组与其他各组比较,均有统计学差异(P<0.05);西药组与全方组比较,差异无统计学意义。[结论] 旋覆代赭汤全方组能提高模型大鼠血浆Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性,改善模型大鼠食管黏膜组织形态学病变,且作用优于各拆方组。     

黄芪甲苷衍生物ASId治疗慢性心力衰竭的机制研究

目的 探讨黄芪甲苷衍生物ASId治疗慢性心力衰竭的作用机制。方法 大鼠、犬提取心肌细胞膜检测酶活性;大鼠结扎冠脉引起心肌梗死后取左心室,利用免疫组织化学检测心肌肥厚信号转导通路的钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）表达情况。结果 ASId对大鼠和犬心肌细胞膜Na⁺/K⁺-ATPase均有抑制作用,其IC⁵⁰分别为（1.58±0.27）×10^?6和（1.41±0.16）×10^?7 mol/L,在受试剂量下（10^?8～10^?5 mol/L）对Ca²⁺/Mg²⁺-ATPase活性无明显抑制作用;免疫组化研究表明,ASId 0.5、1.0 mg/kg可显著降低CaN表达,与模型对照组比较,其表达分别下降73.1%（P＜0.01）、78.0%（P＜0.001）,提示ASId抗心肌肥厚机制与抑制心肌肥厚信号转导通路的重要关键因子CaN有关。结论 ASId治疗心衰机制与Na⁺/K⁺-ATPase抑制产生的即刻心肌收缩效应,以及抗心肌肥厚的远期效应有关。     

维胃方对胃溃疡大鼠胃黏膜MPO、H+-K+-ATP酶活性的影响

[目的]观察维胃方对胃溃疡大鼠胃黏膜髓过氧化物酶(MPO)和H⁺-K⁺-ATP酶的影响,探讨维胃方治疗胃黏膜损伤的可能机制。[方法]采用乙酸烧灼法,建立胃溃疡模型,用比色法测定胃黏膜MPO和H⁺-K⁺-ATP酶活性,并观察胃黏膜组织病理学变化。[结果]从胃黏膜大体标本、切片观察,维胃方中剂量组疗效最佳。与自愈组和模型组比较,维胃方各组胃黏膜MPO活性显著降低(P<0.01或P<0.05),其中以维胃方中剂量组值最小。维胃方各剂量组的H⁺-K⁺-ATP酶活性均高于自愈组(P<0.01或P<0.05),接近正常组(P>0.05),表明维胃方能恢复其活性。[结论]维胃方对大鼠实验性胃溃疡具有明显的保护作用,其机制可能是通过降低大鼠胃黏膜MPO活性,进而减轻炎症介质对胃黏膜的损伤。同时其能修复已损伤的胃黏膜,故能恢复H⁺-K⁺-ATP酶活性。     

Stabilization of membrane bound ATPases and lipid peroxidation by carotenoids from Chlorococcum humicola in Benzo(a)pyrene induced toxicity

Objective

To identify the alteration of the membrane potential and the effect of carotenoid extracts from Chlorococcum humicola (C. humicola) on membrane bound ATPases and lipid peroxidation.

Methods

The total carotenoids were extracted from C. humicola. Four groups of Swiss albino mice were treated as control, Benzo(a)pyrene [B(a)P], total carotenoids, B(a)P + total carotenoids respectively for a period of 60 days. Membrane lipid peroxidation and ATPases (Total ATPases, Ca²⁺- ATPases, Mg²⁺ - ATPases, Na⁺K⁺ - ATPase) were determined in lung, liver and erythrocyte samples.

Results

The activity of total ATPase was found to be significantly increased in the B(a)P treated liver and lung tissue. Erythrocyte membrane also showed higher ATPase activity which was significantly reverted on total carotenoid treatment.

Conclusions

It can be concluded that the changes in membrane potential favour the functional deterioration of physiological system. The overall findings demonstrates that the animals post treated with carotenoid extract from C. humicola may maintains the alterations in membrane bound ATPase and lipid peroxidation in tissues against the carcinogenic chemical and hence aid in establishing the membrane potential action. Therefore C. humicola can be further extended to exploits its possible application for various health benefits as neutraceuticals and food additives.     

CD19+ CD24high CD27+调节性B细胞在儿童传染性单核细胞增多症中的表达及意义

目的 探讨调节性B细胞（Breg）在儿童传染性单核细胞增多症（IM）中的作用。方法 应用流式细胞术检测53例IM患儿外周血T淋巴细胞亚群,CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达情况。用荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA。同时用ELISA方法分析血清IL-10、TGF-β分泌水平。以50例健康儿童为对照。结果 IM急性期组与对照组比较CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显降低（t=19.99,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显增高（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值降低（t=16.79,P<0.01）。IM恢复期组与急性期组比较,CD3⁺ CD4⁺ T细胞明显增高（t=21.54,P<0.01）,CD3⁺ CD8⁺ T细胞明显降低（t=17.47,P<0.01）,CD4/CD8比值增高（t=16.68,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平13.4%±1.87%,与对照组比较显著降低,差异有统计学意义（t=14.61,P<0.01）。IM急性期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平与EBV-DNA病毒载量呈负相关（r=-0.52,P<0.01）。经治疗后IM恢复期组CD19⁺ CD24^high CD27⁺ Breg细胞表达水平18.3%±2.11%与IM急性期组比较显著增高,差异有统计学意义（t=12.61,P<0.01）。IM急性期组血清IL-10较对照组明显降低,差异有统计学意义（t=11.50,P<0.01）。治疗后IM恢复期组IL-10较IM急性期组明显增高,差异有统计学意义（t=9.40,P<0.01）。结论 IM急性期存在明显免疫失衡,即CD3⁺ CD8⁺ T细胞增多,CD4/CD8比值降低,可能与Breg细胞表达减低导致的免疫抑制功能不足有关。