超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱快速分析复方守宫散化学成分及血中移行成分

目的 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（ultra-performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight-tandem mass spectrometry, UPLC-Q-TOF/MS）对复方守宫散中化学成分及其血中移行成分进行定性分析,为该制剂的体内有效物质研究提供参考。方法 采用沃特世超高效液相色谱仪（ACQUITY UPLC）和沃特世高分辨质谱仪（Waters Synapt G2-Si QTOF）获得复方守宫散原药样品溶液、混合对照品溶液、空白血浆和含药血浆的液相色谱-质谱信息,再通过比对UNIFI（沃特世科学信息平台）质谱数据库中化合物信息以及部分对照品的提取离子流色谱图、质谱碎片裂解信息,鉴定出目标化合物。结果 共识别出复方守宫散中77个化学成分（主要有皂苷类25个、黄酮类13个、醌类12个）,采用对照品对其中6个成分进行了验证;通过比对空白血浆和含药血浆,发现复方守宫散中绿原酸、槲皮素、虎杖苷、人参皂苷Re等27个成分为入血成分。结论 具有高分辨率、高灵敏度的UPLC-QTOF/MS能够快速分析复方守宫散化学成分及其血中移行成分。     

基于超高效液相-四级杆-飞行时间串联质谱的白花蛇舌草注射液主成分分析

目的 探讨全国范围内白花蛇舌草注射液物质基础的差异性。方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF-MS）对16批样品进行测定,对采集的数据以保留时间和质荷比作为变量,进行主成分分析（PCA）。结果 通过PCA发现不同企业生产的样品自身差异较小,相互之间差异较大;通过载荷图分析筛选出对分组影响比较大的7种标记物。结论 全国范围内不同厂家生产的白花蛇舌草注射液不仅颜色差异较大,其内在的物质基础也存在明显的差异,这种差异主要体现在黄酮类和有机酸类成分的量上。     

基于高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱联用技术的高血压病血浆代谢组学分析

目的 研究高血压患者和健康志愿者的血浆代谢组变化,寻找高血压病的特征代谢物,揭示高血压病的生物学本质。方法 根据临床高血压病的诊断标准,选择典型病例10例,健康志愿者12例,以高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱联用技术(HPLC-ESI-TOFMS)分析高血压病患者和健康志愿者的血浆代谢物谱,以Mass-Profiler进行数据的匹配、对齐,将数据结果以文本文件贮存,用于模式识别分析,利用Simca-P 11.0软件进行主成分分析和偏最小二乘判别分析,寻找血浆内差异代谢物,并做出相关代谢途径的可能解释。结果 主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS DA)方法处理高血压患者和健康志愿者的血浆代谢物谱数据显示,两组HPLC-ESI-TOFMS谱数据可以明显分开,与健康志愿者作比较,高血压病患者机体相关代谢发生显著变化,体内部分氨基酸代谢和磷脂代谢明显异于健康志愿者。结论 HPLC-ESI-TOFMS结合模式识别的代谢组学方法具有研究复杂条件下机体病理生理变化的优势,为理解高血压病的生物学本质和诊断该类疾病提供了科学依据。     

固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱联用分析荷叶中的生物碱

目的 建立固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱（SPE-RRLC-Q-TOF）联用技术分析荷叶中的生物碱类化合物的方法。方法 样品采用1%盐酸超声提取,经固相萃取（SPE）小柱净化,再用氨水-甲醇进行洗脱,洗脱液浓缩后用甲醇定容。选用Welch Materials C₁₈柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,在正离子模式下,经快速分离液相-飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF）分析。结果 分离并检测了9种生物碱。结论 快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱结合阳离子交换固相萃取柱前处理技术,可以快速准确鉴定荷叶中的生物碱成分。     

液相色谱-电喷雾串联质谱法分析大肠癌患者尿液色氨酸及其代谢产物

目的：通过液相色谱-电喷雾串联质谱（LC-ESI-MS/MS）测定尿液色氨酸及其代谢产物浓度,探讨大肠癌患者体内色氨酸代谢变化及其与机体免疫之间的关系。方法通过 LC-ESI-MS/MS法测定大肠癌患者和健康者（对照组）尿液色氨酸代谢物浓度,并通过犬尿氨酸/色氨酸比值来评估代谢过程中的酶活性。结果大肠癌患者尿液犬尿氨酸、3-羟基犬尿氨酸（HK）、羟基氨茴酰酸（HAA）、吲哚-3-乳酸（ILA）、吲哚-3-丙酸（IPA）、邻氨基苯甲酸（AA）浓度显著升高（P＜0．05,P＜0．01）;而大肠癌患者尿液犬尿烯酸浓度较对照组显著下降（P＜0．05）;大肠癌患者犬尿氨酸/色氨酸比值较对照组显著提高（P＜0．01）。结论大肠癌患者尿液色氨酸代谢发生紊乱,色氨酸代谢物检测或可为大肠癌发病机制、预测和防治研究奠定基础。     

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法快速鉴别生晒参中的皂苷类成分

目的采用超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱联用技术,快速全面鉴别生晒参中人参皂苷类成分。方法色谱分离采用Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18色谱柱;流动相为水(含0.1%甲酸,A)和乙腈(含0.1%甲酸,B),梯度洗脱。质谱定性采用高分辨飞行时间质谱,电喷雾双喷离子源(Dual AJS ESI),负离子模式。结果11 min内对生晒参中的95个皂苷类成分进行了鉴别。结论本研究为目前生晒参的质量控制提供了可行的依据。     

基于气相色谱-质谱的肥胖抵抗大鼠尿液代谢组学研究

目的对肥胖抵抗大鼠尿液进行代谢组学分析,研究高糖高脂饮食对非肥胖型代谢紊乱的影响,探讨非肥胖型2型糖尿病的发病机制。方法建立肥胖抵抗大鼠模型,取静脉血,测其生化指标,同时对尿液进行气相色谱-质谱分析,得到的数据进行代谢组学分析。结果除羰基戊二酸(RSD=11.77%)外,其他14种代谢物的相对标准偏差(RSD)均在10%以内,R2Y和Q2值分别为0.929和0.905;与对照组相比,肥胖抵抗组大鼠尿液中能量代谢过程的相关代谢物羟基乙酸、苏氨酸、丝氨酸、丁二酸、延胡索酸、2,3-二羟基-丁酸、苹果酸、羰基戊二酸减少,同时与肠道菌群代谢相关的代谢物对羟基苯甲酸、葡萄糖醇、反式乌头酸、果糖、葡萄糖、肌醇含量也明显减少。结论饮食干预16周之后,肥胖抵抗组大鼠能量代谢过程中的主要代谢物发生异常,基于GC-MS的代谢组学分析方法能较为全面的反应能量代谢状况,发现差异代谢物,可用于非肥胖型2型糖尿病发病机制的研究。     

基于LC-MS的系统性红斑狼疮小鼠的代谢组学研究

[目的]从代谢组学角度研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)模型小鼠MRL/1pr与昆明种对照小鼠C57BL/6J尿液中代谢物差异,寻找代谢标记物,以探讨SLE的发病机制.[方法]应用高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用系统(HPLC-Q-TOF/MS),对SLE模型小鼠和对照组小鼠的尿液样本进行代谢图谱分析.应用Mass Hunter提取色谱峰信息,MPP(Mass Profiler Professional)软件筛选处理数据,数据模式识别方法采用有监督模式的偏最小二乘法(Partial Least Squares,PLS).[结果]SLE模型小鼠和对照组小鼠代谢特征存在明显差异.根据PLS分析的载荷图和VIP值,进一步筛选对数据分型具有显著影响的离子,鉴别得到9个代谢标记物.[结论]对照代谢路径发现,氨基酸代谢异常是造成组间代谢差异的主要原因,这为从代谢途径研究SLE小鼠发病机制提供了实验依据.     

超高效液相色谱四极杆串联飞行时间质谱法筛查上海市生活饮用水和地表水中的雌激素水平

 目的 建立应用超高效液相色谱四级杆串联飞行时间质谱法快速筛查上海市生活饮用水和地表水中天然或人工合成的雌激素的方法。方法 分别采集上海市不同地点生活饮用水、黄浦江与苏州河不同河段地表水水样各1 L,每点设2个平行,取500 mL水样经Oasis HLB固相萃取柱(500 mg,Waters)萃取,70%甲醇淋洗,10 mL体积分数为10%的甲醇乙酸乙酯溶液洗脱待测物,用Waters ACQUITYUPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm)分离,在MS和MS/MS模式下,采用负离子模式电喷雾离子源对常见雌激素进行Q TOF MS分析。 结果 5种常见雌激素(雌三醇、β 雌二醇、17α 乙炔雌二醇、雌酮、己烯雌酚)在0.001～0.1 μg/mL范围内线性关系良好,检出限(S/N=3)为0.11～0.25 ng/L,定量限(S/N=10)为0.38～0.84 ng/L,在添加水平分别为5、50 ng/L时,平均回收率为58%～115%,RSD为1.4%～13.9%,5种雌激素测定其相对分子质量(Mr)与理论值的误差在（-1.7～2.8）×10-3之间。生活饮用水中未检出上述5种雌激素,而黄浦江和苏州河的各个河段的水样中均检测出雌三醇(0.8～10.5 ng/L)和雌酮(1.6～5.6 ng/L)。结论 本方法灵敏度高、定性准确,适用于生活饮用水和地表水中雌激素的筛查。流经上海市不同河段的黄浦江和苏州河水样中均检测出ng/L级的雌三醇和雌酮,应当在今后的监测中引起重视。     

2型糖尿病患者血清与粪便的代谢组学研究

目的 研究2型糖尿患者与健康者血清和粪便的代谢组学差异,分析差异代谢物与2型糖尿病之间的相关性.方法 选择2018年1月至2019年3月在昆明医科大学第二附属医院内分泌科住院的2型糖尿病患者53例,以及同期常规体检健康对照人群30例,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱技术对两组研究对象的血清代谢物及30例糖尿病患者...     

云克治疗骨股头缺血性坏死的疗效观察

目的 探讨云克治疗股骨头缺血性坏死的疗效。方法根据患者的临床症状、X线平片及99,Tc—MDP骨SPECT显像来确定疗效。结果42例股骨头缺血性坏死的患者经云克治疗后,症状、X线平片及99m—MDP骨SPECT显像结果多有不同程度的好转,完全有效者4例（10％）、疗效显著者18例（43％）、好转者17例（40%）,无效者3例（7％）,治愈率为52％（22／42）,总有效率为93％。结论云克作为治疗骨科疾病的新型药物,对于股骨头缺血性坏死的治疗具有重要的临床价值。     

激素性兔股骨头坏死的动物模型研究

目的研究内毒素脂多糖（LPS）＋甲基强的松龙（MPSL）兔股骨头坏死模型的组织学、Micro-CT及免疫组化特点。方法22只新西兰兔静脉注射LPS10μg/kg,24h后肌注MPSL20mg/kg,1次/d,共3d。存活动物6周观察Micro-CT骨计量学、组织病理学等项目,并与20只未用药新西兰兔对比。结果LPS＋MPSL造模后动物死亡2只,存活动物的骨坏死率为80.0%（16/20）,骨陷窝空虚率为（33.6±2.4）%;Micro-CT骨计量学各项指标显著低于对照组,组织病理学显示造模组出现明显骨坏死灶。结论LPS与MPSL联合应用可有效建立骨坏死模型。     

激素性股骨头缺血性坏死全髋关节置换疗效观察与分析

目的:观察激素性股骨头缺血性坏死全髋关节置换术后疗效。方法:对解放军总医院1986年3月至1996年3月间的激素性股骨头缺血性坏死全髋关节置换患者进行术后随访观察,取创伤组作对照。采用Harris髋关节功能评分并进行X线评价。结果:激素组松动率较高,2组松动率具有显著差异(P<0.05)。激素组翻修率3.6%,创伤组无一例翻修。结论:激素性股骨头缺血性坏死全髋关节置换疗效相对较差。     

激素所致股骨头缺血性坏死的影像学诊断

激素所致股骨头坏死的发病率目前已明显高于股骨颈骨折等外伤所致的股骨头坏死。笔者将搜集的36例激素所致股骨头坏死进行了影像学分析,探讨了激素所致股骨头坏死的发生机理和早期影像学诊断及选择性血管造影的表现等,为临床防治提供理论依据。     

系统性红斑狼疮合并无菌性股骨头坏死的危险因素分析

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者发生无菌性股骨头坏死(ONF)的相关因素。方法以37例女性SLE合并ONF患者为SLE-ONF组,随机选择同期住院的74例无ONF的女性SLE患者和30例无ONF的皮肌炎/多肌炎(DM/PM)患者作为对照组,对各研究因素进行单因素统计分析以及多因素Logistic回归分析。结果单因素分析结果显示:膝关节疼痛、贫血、狼疮疾病活动积分(SLEDAI)、抗核小体抗体(AnuA)、抗SSB抗体、血浆凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、突然停用激素、激素起始量大于60mg/d,治疗第1个月内激素平均日用量大于60 mg/d以及第2、3月激素平均日用量,第4～6月激素平均日用量,第10～12月激素平均日用量与SLE患者发生ONF相关联(P<0.05或0.01),其中抗SSB抗体阳性与ONF的发生呈负相关性(P=0.001);各阶段的激素用量在SLE-ONF组与PM/DM组之间差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:高水平的AnuA、抗SSB抗体阳性、膝关节疼痛、突然停用激素、激素起始剂量大于60mg/d与SLE患者发生ONF相关联(P<0.05)。结论糖皮质激素和SLE疾病本身都是发生ONF的重要因素。     

股骨头坏死的MRI应用研究

股骨头坏死是一种多病理机制,最终达到同一转归,导致骨髓细胞缺血和骨细胞坏死的多因素疾病[1-3].股骨头坏死是一种难治的疾病,多见于20～50岁的患者.我院应用干细胞移植治疗早期股骨头坏死,中晚期患者应用干细胞移植结合血管束植入、钻孔减压、死骨病灶清除、滑膜部分切除、取髂骨植骨,取得了较好的临床效果.     

Idiopathic osteonecrosis of the femoral head in the elderly

Idiopathic osteonecrosis of the femoral head (ION) is a disease prevalent in adulthood, and its development in elderly persons is known to show a low incidence. To clarify its characteristics in elderly patients, radiological and histological examinations were performed on 18 patients aged 60 years or older histologically diagnosed as having ION. On roentgenography, three characteristic points were observed, 1) progress of collapse in the femoral head within a short period (12 cases, 66.7%), 2) narrowing in the joint space within a short period (6 cases, 33.3%), and 3) rapid destruction and resorption of the femoral head (4 cases, 22.2%). The lesion expanded to the acetabular region, and a course similar to that of so-called rapidly destructive coxarthrosis (RDC) was developing in 3 cases (16.7%). However, in these 3 cases, changes in the acetabular region were mild, compared with ordinary RDC, and they were considered different from common RDC. These radiological characteristics were found more clearly in women than in men. In the histopathological examination, severe degeneration in the cartilage of the femoral head was found, while wide infiltration of repairing tissue into the necrotic area was seen from the early stage. When necrotic trabecula were collapsed markedly and degraded severely, then destruction and resorption of bone expanded to non-necrotic regions in some cases. Osteogenic sclerotic line (the demarcation line), which has been often seen in ordinary ION, was not developed in most cases. These characteristics were more prominent in women.     

股骨头坏死保头治疗的研究进展

股骨头坏死是骨科常见的难治性疾病，尤其非创伤性股骨头坏死高发于中青年患者（平均年龄38岁），如不治疗，80％的患者将在4年内出现股骨头塌陷和骨性关节炎。尽管人工关节技术日趋成熟，但由于此类患者年龄偏小、活动量较大，人工关节置换术的远期疗效并不理想。因此，股骨头坏死的保头治疗具有特别重要的意义。     

Etiological and clinical analysis of osteonecrosis of the femoral head in Chinese patients

Background Many potential causative factors are related to the initiation and progression of osteonecrosis of the femoral head.The aim of this research was to investigate the etiology and clinical feat...