人参皂苷Rg3对人鼻咽癌HNE-1细胞增殖和血管生成的影响

 目的 研究人参皂苷Rg3（ginsenoside Rg3）对人鼻咽低分化鳞癌HNE-1细胞的增殖、迁移及体外血管生成的影响。方法 用不同浓度人参皂苷Rg3处理HNE-1细胞,MTT法检测HNE-1细胞增殖活性;创伤修复实验检测细胞迁移能力;观察HNE-1细胞能否在Matrigel上形成血管网状结构及其特点;体外管道形成抑制试验检测不同浓度人参皂苷Rg3对HNE-1细胞管道形成能力的影响。结果 不同浓度人参皂苷Rg3（50、100、200μg/ml）对HNE-1、CRL-2480细胞均有一定的增殖抑制作用,呈浓度依赖性趋势,无时间依赖性,差异均无统计学意义（P>0.05）;人参皂苷Rg3（25、50、100、200μg/ml）可以显著降低HNE-1细胞迁移速度,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.001）,与浓度呈负相关(r=-0.964;P<0.001);HNE-1细胞在Matrigel上培养能形成血管网状样结构;人参皂苷Rg3能抑制HNE 1 细胞体外管道形成（P<0.01）,其管状结构数量与人参皂苷Rg3浓度呈负相关（r=-0.928;P<0.01）。结论 人参皂苷Rg3有一定的抗HNE-1细胞增殖作用;HNE 1细胞具有血管生成拟态;人参皂苷Rg3能够抑制HNE-1细胞的迁移和体外血管生成拟态的形成。     

人参皂苷Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的：探讨人参皂苷Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞（VEC）增殖的抑制作用,方法：用MTT法检测不同浓度Rg3对VEC,胃癌MKN－45细胞增殖及MKN－45细胞诱导VEC增殖的影响。结果：Rg3浓度为0．0313－0．5mmol/L时,时VEC及MKN－45细胞增殖没有影响（P＞0．05）,经0．313－0．5mmol/L Rg3作用后的MKN－45细胞条件培养液对VEC增殖没有影响（P＞0．05）,Rg3浓度为0．125－0．5mmol/L时,对MKN－45细胞条件培养液诱导的VEC增殖有抑制作用（P＜0．01）,抑制率为13．10％－77．38％,结论：人参皂苷Rg3对胃癌细胞条件培养液诱导的VEC增殖具有抑制作用。     

人参皂苷Rg3的抗肿瘤作用及研究进展

肿瘤是因细胞生长调控机制失控而引起的疾病,严重威胁了人类生命健康。虽然目前有多种疗法用于肿瘤治疗,但是效果均不理想。化疗是目前最常用的治疗方法之一,然而其严重不良反应和产生耐药性影响了化疗药物的治疗效果。人参皂苷Rg3是从人参中分离出来的主要成分之一,其在预防和治疗癌症中起重要作用。人参皂苷Rg3的抗肿瘤机制主要包括诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖、转移和血管生成,以及解除免疫抑制、促进免疫应答。此外,人参皂苷Rg3与化疗联合可协同改善治疗效果和减少不良反应。本文将近年关于人参皂苷Rg3的文献作一综述,以便更全面地了解人参皂苷Rg3在实体肿瘤中的应用。     

人参皂苷Rg3通过Ca 2+ /CaM信号系统抑制胃癌BGC-823细胞增殖及其可能的机制

目的:研究人参皂苷Rg3是否是通过降低钙调蛋白(calmodulin,Ca M)的表达来促进胃癌BGC-823细胞的凋亡及其可能的机制。方法:按加药的不同将BGC-823细胞,分为正常对照组、Rg3(50μg/ml)组、Ad-Ca M组和Rg3(50μg/ml)+Ad-Ca M组。MTT法检测Rg3和/或Ad-Ca M对BGC-823细胞增殖的影响,流式细胞术检测Rg3和/或Ad-Ca M对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响,Transwell实验检测Rg3和/或Ad-Ca M对胃癌BGC-823细胞侵袭能力的影响,Western blotting检测Rg3和/或Ad-Ca M对胃癌BGC-823细胞内Ca M、IκB、Ca MKⅡ和NF-κB表达的影响。结果:Rg3组可以明显促进胃癌BGC-823细胞的凋亡和抑制胃癌BGC-823细胞的增殖和侵袭,而Ad-Ca M组和Rg3+Ad-Ca M组明显抑制胃癌BGC-823细胞的凋亡和促进胃癌BGC-823细胞的生长和侵袭。Rg3组BGC-823细胞内NF-κB和Ca MKⅡ的表达均明显抑制,而IκB的表达明显增强;Ad-Ca M组和Rg3+Ad-Ca M组BGC-823细胞内NF-κB和Ca MKⅡ的表达均明显增强,而IκB的表达均明显抑制。结论:Rg3可能是通过降低Ca M的表达来抑制NF-κB信号通路的活性,进而抑制胃癌BGC-823细胞的增殖和侵袭、促进其凋亡。     

miR-153-3p通过靶向FZD3调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭与迁移

目的：探讨miR-153-3p对胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制。方法：收集2018年5月至2020年6 月宁夏医科大学总医院收治的60例胃癌患者的癌和配对癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系NCI-N87、AGS、SNU-5、SGC7901和胃上 皮细胞 GES-1,qPCR 法检测 miR-153-3p 在胃癌组织与细胞中的表达水平。将 miR-153-3p mimic 及 mimic 对照序列转染至 SGC7901细胞,用CCK-8、克隆形成、流式细胞术、TUNEL、Transwell和划痕愈合实验分别检测上调miR-153-3p对SGC7901细胞 增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。构建裸鼠SGC7901细胞移植瘤模型,观察miR-153-3p对肿瘤生长的影响。通过生物信息学数 据库和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-153-3p与FZD3靶向关系,WB法检测miR-153-3p对FZD3蛋白及Wnt/β-catenin 通路相关蛋白表达的影响。结果：miR-153-3p在胃癌组织和细胞中表达水平分别显著低于癌旁组织和GES-1细胞（均P<0.01）,以SGC7901细胞中表达水平最低。上调 miR-153-3p 显著抑制 SGC7901 细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并提高细胞凋亡率 （均P<0.01）,同时上调细胞中E-cadherin表达而下调N-cadherin、MMP2和MMP9表达（均P<0.01）。在体内实验表明,静脉注射 miR-153-3p mimic显著降低移植瘤体积和瘤组织中Ki-67表达而上调P57表达（均P<0.01）。机制分析表明 ,miR-153-3p 靶向 结合FZD3基因的3′UTR区域,上调 miR-153-3p 会抑制FZD3表达并上调β-catenin、TCF-4和cyclin D1水平（均P<0.01）。结论： miR-153-3p靶向FZD3并通过Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移。     

姜黄素抑制肺癌细胞血管拟态形成机制探讨

目的观察姜黄素对肺癌细胞A549血管拟态生成及细胞内Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达的影响,探讨姜黄素抑制肿瘤血管形成的机制。方法体外培养A549细胞株,0、2.5、5、10、20和40μmol/L姜黄素处理细胞24h,应用MTT法检测姜黄素对细胞增殖的影响,体外血管生成拟态实验检测各组细胞形成血管拟态能力,RT-PCR法检测细胞内β-catenin基因mRNA的转录水平;选取Wnt/β-catenin特异性抑制剂XAV939,蛋白质印迹法检测对照组、姜黄素组和XAV939组血管生成基因VE-cadherin蛋白的表达。结果姜黄素对肺癌A549细胞株有抑制作用,并呈剂量依赖性,IC50值约为17.5μmol/L。与对照组相比,姜黄素含药组血管拟态形成数目减少,呈剂量依赖性;随着姜黄素浓度增加,β-catenin基因mRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义,P值均<0.05。蛋白质印迹法结果示,与对照组相比,姜黄素组VE-cadherin蛋白表达减少,P=0.047;与XAV939组相比差异无统计学意义,P=0.087。结论姜黄素可抑制肺癌细胞的血管拟态形成能力,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活性实现的,这将为临床治疗肺癌提供新的思路。     

人参皂苷Rg3 通过PI3K/AKT 信号系统调控CaM 基因表达促进胃癌BGC-823 细胞的凋亡

[摘要] 目的：探讨人参皂甙Rg3 通过PI3K/AKT信号通路干扰CaM基因的表达及对胃癌BGC-823 细胞凋亡的影响。方法:胃癌BGC-823 细胞的培养与传代完成后,Western blotting 检测胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor-1,IGF-1)和/或Rg3分别作用胃癌BGC-823 细胞后p-AKT和CaM 蛋白表达水平,MTT法检测IGF-1 和/或Rg3 对胃癌BGC-823 细胞增殖的影响,Transwell 法检测IGF-1 和/或Rg3 对胃癌BGC-823 细胞侵袭的影响,流式细胞术检测IGF-1 和/或Rg3 对胃癌BGC-823 细胞凋亡的影响。结果：随着IGF-1 作用时间延长,胃癌BGC-823 细胞中p-AKT蛋白和CaM蛋白的表达水平均明显提高（均P<0.05）;与空白对照组比较,Rg3 组明显抑制胃癌BGC-823 细胞增殖,而IGF-1 组和IGF-1+Rg3 组明显促进胃癌BGC-823 细胞增殖（均P<0.05）;与空白对照组比较,Rg3 组明显降低胃癌BGC-823 细胞侵袭,而IGF-1 组和IGF-1+Rg3 组明显促进胃癌BGC-823 细胞侵袭能力（均P<0.05）;流式细胞术检测显示,与空白对照组比较,Rg3 组明显促进胃癌BGC-823 细胞凋亡,而IGF-1 组和IGF-1+Rg3 组明显抑制胃癌BGC-823 细胞凋亡（均P<0.05）。结论:人参皂甙Rg3 通过阻断PI3K/AKT信号通路来抑制CaM的表达,进而促进胃癌BGC-823细胞的凋亡。     

人参皂苷Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的 :探讨人参皂苷Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞 (VEC)增殖的抑制作用。方法 :用MTT法检测不同浓度Rg3对VEC、胃癌MKN 4 5细胞增殖及MKN 4 5细胞诱导VEC增殖的影响。结果 :Rg3浓度为 0 0 313～ 0 5mmol/L时 ,对VEC及MKN 4 5细胞增殖没有影响 (P >0 0 5) ;经 0 0 313～ 0 5mmol/LRg3作用后的MKN 4 5细胞条件培养液对VEC增殖没有影响 (P >0 0 5) ;Rg3浓度为 0 12 5～0 5mmol/L时 ,对MKN 4 5细胞条件培养液诱导的VEC增殖有抑制作用 (P <0 0 1) ,抑制率为13 10 %～ 77 38%。结论 :人参皂苷Rg3对胃癌细胞条件培养液诱导的VEC增殖具有抑制作用。     

20（S）-人参皂苷Rg3对血管内皮细胞增殖和迁移的抑制作用

 目的 探讨20（S）-人参皂苷Rg3（SPG-Rg3）抗肿瘤诱导新生血管生成的作用机制。方法 采用MTT法、PCNA免疫荧光染色和Boyden小室迁移实验,观察SPG-Rg3对B16黑色素瘤细胞条件培养液（Conditioned Medium of B16 Melanoma Cells, BMCM）诱导的人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响;并通过免疫细胞化学染色法观察了SPG-Rg3对B16黑色素瘤细胞血管内皮细胞生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF）及金属基质蛋白酶-9（Matrix Metalloproteinase-9, MMP-9）表达的影响。结果SPG-Rg3组BMCM的促内皮细胞增殖和迁移作用均明显弱于对照组,且SPG-Rg3浓度为5μg/ml时能够降低B16黑色素瘤细胞VEGF及MMP-9的表达。结论SPG-Rg3通过减少肿瘤细胞分泌细胞因子VEGF和MMP-9,抑制肿瘤细胞对血管内皮细胞增殖和迁移的促进作用,从而间接发挥其抗肿瘤新生血管生成的作用。     

人参皂苷Rh1通过Wnt通路抑制肺腺癌A549细胞增殖的机制探讨

目的:探讨人参皂苷Rh1通过Wnt通路抑制人肺腺癌A549细胞增殖的机制。方法:体外培养A549细胞,加入Rh1（5、10和20 μmol/L）诱导后,采用MTT法检测A549细胞存活率,采用Western blot测定Wnt通路相关蛋白GSK-3β和β-catenin表达情况;利用β-catenin(S37A)慢病毒转染建立Wnt通路激活型A549细胞,进一步研究A549细胞中Wnt通路持续激活对Rh1抗增殖作用的影响。结果:Rh1可以剂量和时间依赖性地抑制A549细胞的增殖,同时Rh1可以剂量依赖性地显著降低A549细胞中的GSK-3β(Ser9)及β-catenin的表达水平。Wnt通路激活型的A549细胞部分抵消了Rh1的抗增殖作用。结论:Rh1可能通过抑制Wnt信号通路来抑制A549细胞的增殖。     

人参皂苷Rg3调控WNT/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞生长的实验研究

目的探讨人参皂苷Rg3通过影响WNT/β-catenin信号通路中关键蛋白β-catenin从而阻断结肠癌细胞生长机制的研究。方法 MTT法检测不同浓度人参皂苷Rg3对人结肠癌细胞系SW480、HCT116细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度人参皂苷Rg3对SW480、HCT116细胞凋亡及磷酸化β-catenin的影响;RT-PCR和Western blot法检测HCT116细胞中β-catenin及c-myc的表达。结果人参皂苷Rg3具有抑制SW480、HCT116细胞增殖和促进凋亡的能力。一定浓度人参皂苷Rg3能够降低β-catenin蛋白的磷酸化程度,下调β-catenin mRNA的表达,下调β-cetanin和c-myc蛋白的表达。结论人参皂苷Rg3具有一定的抗肿瘤活性,可有效抑制HCT116和SW480细胞生长,且这种作用可能是通过下调β-catenin磷酸化来实现的。     

人参皂苷Rg3、索拉非尼和奥沙利铂不同联合方式抗裸鼠肝癌移植瘤血管生成的作用研究

目的 观察人参皂苷Rg3、索拉非尼、奥沙利铂单药及联合对裸鼠人肝癌细胞移植瘤血管生成的作用并探讨其可能机制。 方法 以裸鼠人肝癌转移模型LCI-D20为观察对象,将60只荷瘤裸鼠随机分成8组,分别为人参皂苷Rg3组（A组）、奥沙利铂组（B组）、索拉非尼组（C组）、人参皂苷Rg3+索拉非尼组（D组）、人参皂苷Rg3+奥沙利铂组（E组）、奥沙利铂+索拉非尼组（F组）、人参皂苷Rg3+奥沙利铂+索拉非尼组（G组）和生理盐水对照组（H组）。肿瘤接种第11 d后开始给药,人参皂苷Rg3 5 mg／kg（1天1次）、奥沙利铂5 mg／kg（2天1次）,均用腹腔注射,索拉非尼30 mg／kg（1天1次）灌胃。给药14 d后处死裸鼠,剥离瘤体,检测各组瘤组织中微血管密度（MVD）,免疫组化染色和Western blotting检测各组瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子（HIF）-1α和VEGF受体（VEGFR）-2的表达。 结果 与H组比较,其余各组MVD均较低（P＜0.01）,VEGF蛋白阳性表达率均较低（P＜0.05）,HIF-1α蛋白阳性表达率均下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）;A组、D组、E组的VEGFR-2蛋白阳性表达率显著低于H组（P＜0.05）。与H组比较,仅A组、B组、C组、D组、E组能显著下调瘤组织中VEGF、HIF-1α和VEGFR-2蛋白的表达（P＜0.05）。 结论 人参皂苷Rg3具有一定的抗血管生成作用,其机制可能与下调VEGF、HIF-1α、VEGFR-2及MVD的表达有关。人参皂苷Rg3分别与索拉非尼、奥沙利铂联合可以增强抗血管生成作用,但三药联合时抗血管生成作用反而减弱,提示可能存在其他抗肿瘤机制,值得进一步研究。     

人参皂苷Rg3联合三氧化二砷抑制乳腺癌移植瘤生长及其新生血管形成的研究

目的探讨人参皂苷Rg3（简称Rg3）联合三氧化二砷（As2O3）对裸鼠人乳腺癌移植瘤模型中肿瘤生长及新生血管密度的影响。方法右前肢腋窝皮下移植人乳腺癌MCF-7细胞株的雌性裸鼠28只,随机分成4组：①联合用药组即Rg3（12mg/kg.d）＋As2O3（45μg/kg.d）;②Rg3组（12mg/kg.d）;③三氧化二砷组（45μg/kg.d）;④对照组（0.5m l/d）。自肿瘤接种第5天开始,Rg3隔日灌胃,共25次;三氧化二砷腹腔内注射,每日1次,共35次,期间观察裸鼠的生存质量。停药1周后,脱颈处死裸鼠,检测肿瘤的重量,并计数肿瘤内微血管密度（MVD）。结果 Rg3组、三氧化二砷组、联合用药组对裸鼠人乳腺癌移植肿瘤生长的抑制作用明显,联合用药组抑制肿瘤生长的作用比单一用药组更强,联合用药组MVD明显低于三氧化二砷组及对照组。结论 Rg3与三氧化二砷联合应用具有协同作用,可明显抑制乳腺癌新生血管形成,降低乳腺癌组织内的MVD,进而抑制裸鼠乳腺癌移植瘤的生长,同时降低三氧化二砷的毒副反应。     

人参皂苷Rg3联合三氧化二砷抑制乳腺癌移植瘤生长及其新生血管形成的研究

目的探讨人参皂苷Rg3(简称Rg3)联合三氧化二砷(As2O3)对裸鼠人乳腺癌移植瘤模型中肿瘤生长及新生血管密度的影响。方法右前肢腋窝皮下移植人乳腺癌MCF-7细胞株的雌性裸鼠28只,随机分成4组:①联合用药组即Rg3(12mg/kg.d)+As2O3(45μg/kg.d);②Rg3组(12mg/kg.d);③三氧化二砷组(45μg/kg.d);④对照组(0.5m l/d)。自肿瘤接种第5天开始,Rg3隔日灌胃,共25次;三氧化二砷腹腔内注射,每日1次,共35次,期间观察裸鼠的生存质量。停药1周后,脱颈处死裸鼠,检测肿瘤的重量,并计数肿瘤内微血管密度(MVD)。结果 Rg3组、三氧化二砷组、联合用药组对裸鼠人乳腺癌移植肿瘤生长的抑制作用明显,联合用药组抑制肿瘤生长的作用比单一用药组更强,联合用药组MVD明显低于三氧化二砷组及对照组。结论 Rg3与三氧化二砷联合应用具有协同作用,可明显抑制乳腺癌新生血管形成,降低乳腺癌组织内的MVD,进而抑制裸鼠乳腺癌移植瘤的生长,同时降低三氧化二砷的毒副反应。     

人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞的诱导凋亡作用

目的:探讨人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞的诱导凋亡作用。方法:培养人宫颈癌Hela细胞,不同浓度Rg3处理,HE染色观察细胞形态学改变,CCK-8、流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果:Rg3作用后Hela细胞出现了典型的凋亡形态学变化,包括细胞皱缩、细胞核内染色体浓缩。10、20、40、80μg/ml人参皂苷Rg3处理48小时后Hela细胞的平均生存率为76.3%、57.1%、50.0%、29.8%;流式细胞术(FCM)显示肿瘤细胞凋亡率为16.4%、37.0%、50.0%、69.8%,表明肿瘤细胞在人参皂苷Rg3诱导下发生凋亡。结论:Rg3能抑制Hela细胞增殖,诱导其凋亡,其诱导凋亡作用呈剂量依赖性。     

EYA1 通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制胃癌SGC-7901 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的:探讨EYA1(eyes absent 1)通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制胃癌SGC-7901细胞的恶性进展及其相关机制。方法:收集2016年6月至2018年6月陆军军医大学附属西南医院全军普通外科中心29例胃癌组织及其癌旁组织标本,采用Wb和qPCR实验检测胃癌组织和癌旁组织中EYA1 mRNA和蛋白的表达水平。人胃癌细胞株SGC-7901培养完成后,采用过表达EYA1质粒或siRNA干扰质粒转染胃癌SGC-7901细胞;分别采用MTT、流式细胞术、划痕愈合和Transwell实验检测胃癌SGC-7901细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。结果:胃癌组织中EYA1 mRNA 和蛋白表达水平较癌旁组织均明显降低（P<0.01）;过表达EYA1可明显提高SGC-7901 细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.05）、抑制细胞凋亡（P<0.05）。过表达EYA1 可明显促进PTEN的表达、抑制PI3K/AKT通路的激活（均P<0.05或P<0.01）;但在PTEN干扰后以上作用均受到了明显抑制（均P<0.05或P<0.01）。结论:EYA1可通过促进PTEN的表达抑制PI3K/AKT信号通路,从而抑制胃癌SGC-7901细胞的恶性生物学行为。     

马钱子碱抑制乳腺癌细胞体外血管生成拟态的形成及其可能机制研究

背景与目的：乳腺癌等多种高度侵袭性的肿瘤中存在血管生成拟态（vasculogenic mimicry, VM）现象,可能导致传统的抗血管治疗效果不理想。马钱子碱是马钱子的主要生物碱单体,具有潜在的抗血管生成作用。本研究旨在探讨马钱子碱对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231体外形成血管生成拟态的影响及其可能的作用机制。方法：采用MTT法测定马钱子碱对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用;应用Annexin Ⅴ-FITC/碘化丙啶（propidium iodide,PI）双染流式细胞术检测细胞凋亡情况,以Hoechst 33342/PI（HO/PI）染色进行细胞死亡检测。在Matrigel基质胶上三维培养人乳腺癌细胞,研究在体外是否可以形成血管生成拟态,并观察马钱子碱对这一过程的影响。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测血管生成拟态相关标志分子表达的变化,如血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A）、血管内皮钙黏蛋白（vascular endothelial cadherin,VE-cadherin）、EphA2和基质金属蛋白酶（matrix metalloprotein,MMP）。结果：马钱子碱可有效地抑制乳腺癌细胞增殖,且随药物浓度增加,细胞凋亡与坏死比例增大,细胞死亡率升高;马钱子碱可抑制乳腺癌细胞血管生成拟态的形成,呈剂量依赖性;马钱子碱处理后血管生成拟态标志蛋白（VEGF/VE-cadherin/EphA2/MMP-9/MMP-2）的表达水平明显下调。结论：马钱子碱可以抑制乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖,诱导其凋亡,并抑制其体外血管生成拟态的形成,其机制可能与VEGF/VE-cadherin/EphA2/MMP-9/MMP-2的表达下调有关。     

人参皂苷Rg3对人胰腺癌细胞Pim-3及Bad凋亡蛋白表达的影响

背景与目的：人参皂苷Rg3是一种抗肿瘤中药单体,有研究表明人参皂苷Rg3对肝癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌等肿瘤细胞的浸润具有明显抑制作用。本实验目的是研究人参皂苷Rg3对人胰腺癌细胞株PANC-1中原癌基因Pim-3及磷酸化Bad蛋白pBad（Ser112）、Bad（Serl36）表达的影响。方法：用浓度为0、10、20、40和80μmol／L的人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后,用四甲基偶氮唑盐（MTF）法检测人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制作用;用倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对PANC-1细胞凋亡的诱导作用;用Western blot法检测经不同浓度人参皂苷Rg3处理后的PANC-1细胞中pim-3、Bad、pBad（Ser112）和pBad（Ser136）的表达;定向克隆Pim-3的发夹状寡核苷酸（shorthairpinRNA,shRNA）到真核表达载体形成重组质粒pSilencer3．1-HINeo—Pim-3shRNA．将重组质粒通过脂质体介导转染PANC-1细胞,采用AnnexinV／PI流式细胞分析法检测转染后PANC-1细胞的凋亡．用Westernblot法检测转染后PANC-1细胞的pim-3及pBad（Serl12）的表达。结果：10、20、40和80btmol／L的人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制率分别为20．2％、33．4％、52．8％、65．3％;经10～80μmol／L的人参皂苷Rg3处理后PANC-1细胞呈现明显的凋亡形态学改变,80μmol／L人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后,与正常对照组细胞凋亡率（3．3±2．1）％比较,处理组细胞凋亡率（12．2±1．3）％增加（P〈0．05）;人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后,Bad总蛋白表达没有明显变化。pim-3和pBad（Ser112）的表达均随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱。PANC-1细胞中pBad（Ser136）不表达;Pim-3shRNA转染PANC-1细胞后．与正常对照组比较,转染组早期凋亡率和总凋亡率均增加[（11．5±3．7）％VS．（5．8±2．2）％,P〈0．01;（20．8±2．6）％VS．（13．0±4．1）％,P〈O．05],转染组pim-3及pBad（S     

CGB5对卵巢癌OVCAR-3细胞血管生成拟态形成的影响

目的 探讨β绒毛膜促性腺激素的第5号亚基（chorionic gonadotropin beta polypeptide 5, CGB5）对卵巢癌OVCAR-3细胞血管生成拟态形成的影响。方法 采用慢病毒载体转染的方法,在卵巢癌OVCAR-3细胞中分别转入CGB5过表达载体、空载体、CGB5 siRNA及无关序列siRNA。另将未处理的OVCAR-3细胞作为空白对照,高表达CGB5的绒癌细胞BeWo作为阳性对照。将两种细胞分别注入随机分组的裸鼠右侧腋窝皮下构建皮下移植瘤模型,取肿瘤组织用HE染色及CD34-PAS双染色观察各组中血管生成拟态（vasculogenic mimicry, VM）的形成,并用透射电子显微镜观察各组肿瘤中血管生成拟态的形成。结果 CGB5过表达组的血管生成拟态形成的数量较对照组明显增加,而CGB5干扰组的血管生成拟态形成的数量较对照组明显减少。结论 CGB5能促进卵巢癌OVCAR-3细胞血管生成拟态的形成,这将有望为卵巢癌的治疗提供新的靶标和思路。     

sTie2通过阻抑血管生成拟态抑制结肠癌HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭

目的：探讨可溶性Tie2（soluble Tie 2, sTie2）对结肠癌HCT116细胞血管生成拟态（vascular mimicry,VM）形成、增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法：将重组质粒pBLAST49-hsTie2及对照质粒pBLAST49通过脂质体转染至HCT116细胞,分别形成hsTie2-HCT116细胞和Ctrl-HCT116细胞。通过3D模型培养、SRB法、细胞划痕实验及Transwell法分别检测HCT116细胞的VM形成、增殖、迁移及侵袭能力,采用Western blotting法检测HCT116细胞中VE-cadherin蛋白的表达。结果：pBLAST49-hsTie2重组质粒成功转染至结肠癌HCT116细胞。与Ctrl-HCT116细胞相比,hsTie2-HCT116细胞中VM的形成\[（0.75±0.45） vs （7.50±0.52）个/视野, P<0.01\]及VE-cadherin蛋白的表达\[（1.23±0.08） vs （1.73±0.02）, P<0.05\]显著降低;细胞增殖率也显著降低\[（32.57±4.57）% vs （88.24±21.94）%,P<0.01\];细胞迁移能力\[（0.37±0.07）vs（0.80±0.03）mm, P<0.01\]及侵袭能力\[（57.25±3.17） vs （127.25±6.25）个/视野, P<0.01\] 均显著减弱。结论：sTie2通过阻抑VM形成抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,有望成为既抗血管生成又抗VM形成的双靶向治疗结肠癌的药物。