司来吉兰对帕金森病模型大鼠结肠α-突触核蛋白和神经元型一氧化氮合酶表达的影响

目的观察司来吉兰(selegiline)对帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠结肠功能障碍及结肠α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)及神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)表达的影响,探讨司来吉兰对PD患者结肠功能障碍的治疗作用及可能机制。方法将72只健康SD大鼠随机分为正常对照组、PD模型组和司来吉兰治疗组,后两组采用颈背部皮下注射鱼藤酮方法制备PD模型。模型组每天给予生理盐水灌胃,治疗组每天给予司来吉兰0.5mg/kg灌胃。分别于治疗后4d、8d测定大鼠1h粪便排出量及含水量,并采用免疫组化法和蛋白质印迹法检测结肠α-Syn和nNOS的表达。结果 (1)与对照组比较,模型组各时间点1h粪便排出量及含水量均减少(均P0.01);与模型组相比较,治疗组各时间点1h粪便排出量及含水量均增加(均P0.05),且治疗8d亚组高于治疗4d亚组(均P0.05)。(2)与对照组比较,模型组各时间点结肠α-Syn、nNOS表达均增加(均P0.01);与模型组比较,治疗组各时间点结肠α-Syn、nNOS表达均降低(均P0.05)。与治疗4d亚组比较,治疗8d亚组的α-Syn、nNOS表达含量降低(均P0.05)。结论司来吉兰能够改善PD大鼠结肠功能障碍,其作用机制可能与其抑制α-Syn、nNOS表达有关。     

司来吉兰联合左旋多巴对帕金森病模型大鼠结肠TH及nNOS表达的影响

目的观察司来吉兰联合左旋多巴对帕金森病模型大鼠结肠中TH及nNOS表达的影响,探讨司来吉兰联合左旋多巴对帕金森病消化系统功能紊乱的可能机制。方法 72只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及联合治疗组,每组均设4d及8d2个时间点。采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备帕金森病模型大鼠,模型制备成功后,联合治疗组每日灌胃1次司来吉兰0.5mg/kg及2次左旋多巴15mg/kg,直至试验时间点。对照组及模型组每只每日均连续灌胃等体积生理盐水至试验时间点。应用免疫组化法S-P法以及Western blotting检测TH及nNOS在对照组、模型组以及联合治疗组大鼠结肠组织中的表达情况。结果造模成功后,免疫组化及Western blotting结果均显示,模型组大鼠结肠中的TH表达较对照组明显减低(P0.05);通过司来吉兰联合左旋多巴治疗后,联合治疗组TH表达显著高于模型组,但仍低于对照组(P0.05),治疗8d时较治疗4d时,TH表达无显著差异(P0.05)。nNOS在模型组中的表达较对照组以及联合治疗组明显增多(P0.05),且联合治疗组中nNOS表达较对照组增多(P0.05),治疗8d时较治疗4d时,nNOS表达无显著性差异(P0.05)。结论帕金森病大鼠结肠组织中的TH表达降低,而nNOS表达增加。司来吉兰联合左旋多巴能缓解PD后TH的降低以及nNOS的升高,能有效缓解帕金森大鼠的肠道功能紊乱。     

探讨蛋白酶体功能障碍对散发性帕金森病发病机制的影响

目的 探讨蛋白酶体功能障碍对散发性帕金森病的发病机制。方法 收集本院2013年7月～2015年7月病例,将存在蛋白酶体功能障碍的帕金森病患者50例作为观察组,未存在蛋白酶体功能障碍的帕金森病患者50例作为对照组,观察2组患者的行为学改变情况,通过RT-PCR、Western blotting分子生物学方法检测患者血液中α-突触核蛋白(α-Syn)表达水平。结果 观察组患者血清的α-突触核蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05)。结论 蛋白酶体功能障碍可能导致散发性帕金森病患者血液中α-突触核蛋白(α-Syn)水平升高,考虑该因素可能是散发性帕金森疾病的危险因素。     

Syn Bax 与 Bcl-2在帕金森病模型大鼠结肠中的表达及意义

目的：检测Syn、Bax、Bcl-2蛋白在帕金森病大鼠模型结肠中的表达及意义,探讨帕金森病消化系统功能紊乱的可能机制。方法采用羟多巴胺（6-hydroxydopamine ,6-O HDA ）损毁大鼠中枢黑质多巴胺能神经元,诱导制备实验性帕金森病大鼠模型。应用免疫组化法S-P法检测Syn、Bax、Bcl-2在帕金森病模型大鼠及正常对照组大鼠结肠组织中的表达情况。结果造模成功后,用免疫组化法S-P法,发现帕金森模型大鼠结肠中的Syn和 Bax表达水平较对照组增加,而Bcl-2表达水平较对照组减少。结论帕金森大鼠结肠组织中的Syn及Bax表达增加,Bcl-2表达减少,为研究帕金森患者肠道功能紊乱的机制提供线索。     

低剂量左旋多巴对帕金森病大鼠纹状体乙酰胆碱M1和M2受体表达的影响

目的探讨低剂量的左旋多巴对帕金森病(PD)大鼠纹状体乙酰胆碱M1、M2受体表达的影响。方法将成功建模的20只PD大鼠随机分为模型对照组、左旋多巴干预7d、14d、21d组(每组5只),另将5只正常大鼠设为空白对照组。采用免疫组化技术测定纹状体乙酰胆碱M1和M2受体的表达情况。结果 M1受体蛋白在帕金森病大鼠中的表达高于空白对照组,药物干预7d、14d后M1受体蛋白表达较模型对照组明显降低(P0.05),但在药物干预21d后M1受体蛋白表达明显回升(P0.05);M2受体蛋白表达在帕金森病大鼠模型对照组较空白对照组明显下降(P0.05),但在用药物进行干预后较空白对照组无明显回升(P0.05)。结论帕金森病大鼠在低剂量的左旋多巴干预后M1受体蛋白的表达是一个动态变化变化过程,而M2受体蛋白的表达在药物干预后较空白对照组无明显变化。     

α-Syn过表达对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺受体D1表达的影响

目的 探讨α-突触核蛋白(α-Syn)过表达对帕金森病(PD)小鼠黑质多巴胺受体D1(D1DR)表达的影响.方法 选取雄性C57BL/6J小鼠16只,随机将小鼠分为PD组和对照组,每组各8只.采用脑纹状体注射α-Syn预成型纤维(α-Syn PFF)法建立PD模型,对照组以相同方法注射PBS.各组小鼠于造模前1周及造模...     

盐酸司来吉兰治疗早期帕金森病的疗效观察

目的 观察司来吉兰治疗早期帕金森病（PD）的疗效和安全性。方法 采用随机空白对照法,将60例已用安坦、金刚烷胺、维生素E联合治疗的早期PD患者分为司来吉兰治疗组和空白对照组,前者在原用药物剂量不变的基础上添加盐酸司来吉兰片5mg/d,疗程8周。采用改良Webster评分评价药物疗效并观察不良反应。结果 司来吉兰组治疗后4周及8周时改良Webster评分较治疗前明显改善（均P〈0．01）,且明显低于空白对照组（均P〈0．05）;司来吉兰组总有效率为76．7％,明显优于空白对照组（P〈0．01）;未见明显不良反应。结论 司来吉兰是一种安全有效的早期PD治疗用药。     

普拉克索对帕金森病运动障碍的影响

目的分析普拉克索对治疗帕金森病运动障碍的临床疗效。方法选择我院收治的60例帕金森病患者为研究对象,随机数字表分为对照组(30例)与观察组(30例),对照组予以左旋多巴、司来吉兰等常规治疗药,观察组在对照组治疗基础上加用盐酸普拉克索,2组患者均治疗8周,治疗后采用帕金森评定量表(UPDRS)Ⅱ、Ⅲ及总体评分量表评价运动功能,并判断疗效。结果治疗前比较,2组UPDRSⅡ、UPDRSⅢ及总评分均差异无统计学意义(P0.05);治疗后,2组各量表评分较治疗前均显著下降,且观察组下降幅度明显高于对照组,组间差异均具有统计学意义(P0.05);对照组总不良反应发生率23.3%,观察组13.3%,差异无统计学意义(P0.05)。结论普拉克索可作为治疗帕金森病患者的加强药,在左旋多巴、司来吉兰等药物基础治疗上,可显著增强其治疗疗效,缓解运动症状障碍,且具有较高的安全性,值得临床推广。     

尼莫地平对帕金森病模型鼠黑质多巴胺能神经元中Bcl-2、P53蛋白表达的影响

目的观察尼莫地平对帕金森病模型鼠多巴胺能神经元中Bcl-2、P53蛋白表达的影响,从而探索尼莫地平对黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法建立大鼠PD模型,分组、分阶段用尼莫地平进行干预,第一阶段为尼莫地平对PD模型的预先干预,第二阶段为成功PD模型的药物治疗(尼莫地平、左旋多巴),其后均由阿朴吗啡(Apomorphine)诱导旋转行为,最后予大鼠黑质细胞进行HE、TH、Bcl-2、P53染色。结果第一阶段:尼莫地平PD模型组(Ⅰ组)和PD模型组(Ⅱ组),成功模型右侧黑质Bcl-2蛋白表达阳性细胞百分比较假手术组(Ⅲ组)和正常对照组(Ⅳ组)低(P<0.05),而P53蛋白表达阳性细胞百分比较Ⅲ组和Ⅳ组高(P<0.05);Ⅰ组右侧黑质Bcl-2蛋白表达阳性细胞百分比高于Ⅱ组(P<0.05),而P53蛋白表达阳性细胞百分比低于Ⅱ组(P<0.05);第二阶段:尼莫地平组、左旋多巴组或二者联用干预组与生理盐水组间右侧黑质Bcl-2、P53蛋白表达阳性细胞百分比无统计学差异(P>0.05)。结论尼莫地平在蛋白合成水平促进了Bcl-2表达、抑制了P53表达,减缓了多巴胺能神经元的凋亡。     

司来吉兰添加治疗帕金森病临床疗效评价

目的：观察司来吉兰添加治疗帕金森病的临床疗效及安全性。方法：采用随机双盲安慰剂对照方法，在复方多巴治疗的基础上添加国产司来吉兰治疗40例帕金森病患，分为司来吉兰治疗组和安慰剂对照组，疗程8周。采用改良的Webster评分量表评估药物疗效并观察不良反应。结果：司来吉兰治疗组治疗前后自身对照Webster评分有明显改善（P＜0．05或P＜0．01），安慰剂对照组于治疗后第4，6周差异有显性意义（P＜0．05或P＜0．01），司来吉兰组疗效优于安慰剂组（P＜0．01），司来吉兰组患治疗的总有效率为80％，与安慰剂组（40％）比较差异有显性意义（P＜0．01）。司来吉兰组患药物不良反应轻微。结论：司来吉兰是一种安全有效 的抗帕金森病辅助药物。     

美多巴联合司来吉兰治疗帕金森病患者临床效果及安全性评价

目的探讨美多巴联合司来吉兰治疗帕金森病患者临床效果及其安全性评价。方法本研究病例来源于2014年8月至2015年8期间我院收治的原发性帕金森病患者86例,依据随机数字表法分为观察组43例与对照组43例。观察组采用美多巴联合司来吉兰治疗,对照组仅采用美多巴治疗。两组疗程均为3个月。结果观察组总有效率(86.05%)高于对照组(67.44%)(P0.05);两组Webster评分治疗后明显减少(P0.05);观察组Webster评分治疗后低于对照组(P0.05);两组MDRSPD评分治疗后明显减少(P0.05);观察组MDRSPD评分治疗后低于对照组(P0.05);两组均未见严重用药不良反应。结论美多巴联合司来吉兰治疗帕金森病患者临床效果显著,且安全可靠。     

鱼藤酮灌胃制备帕金森病小鼠模型的评价及机制

目的探讨经持续鱼藤酮灌胃制备帕金森病小鼠模型及其发病机制。方法将50只老年雄性C57小鼠随机分为模型组和对照组,2组均给予连续灌胃12周,模型组予灌注0．01ml／g鱼藤酮氯仿溶液,对照组则予灌注0．01mg／g氯仿溶液。在灌胃前、灌胃6、12周时对2组小鼠行网格试验、爬杆试验和滚轴试验以检测行为学变化,使用高效液相色谱电化学法（HPLC-ECD）检测纹状体多巴胺（DA）、3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）等神经递质浓度;对肠、胸段脊髓、中脑行α-突触核蛋白（α-Syn）、硫磺素S（ThS）、酪氨酸羟化酶（TH）等免疫组化染色。结果至灌胃12周时模型组行为学变化较对照组均有显著性差异（P〈0．01）,模型组纹状体DA、DOPAC、HVA水平较对照组有显著性降低（P〈0．01）。灌胃6周时模型组小肠内、胸段脊髓处α-Syn的表达水平较对照组明显增加,且ThS表达比例增多,而中脑处a-Syn及TH阳性细胞数无显著性差异;至灌胃12周时模型组中脑处Syn的表达较对照组明显要增多,而TH阳性细胞数较对照组显著性减少（P〈0．05）。结论经持续鱼藤酮灌胃制备的慢性进展性帕金森病小鼠模型模拟了PD缓慢进展的病理过程,其机制可能是小肠神经丛局部的α-Syn多聚体通过类朊蛋白途径沿着神经传导通路播散至脑内。     

司来吉兰添加治疗帕金森病临床疗效评价

目的 观察司来吉兰添加治疗帕金森病的临床疗效及安全性。方法 采用随机双盲安慰剂对照方法,在复方多巴治疗的基础上添加国产司来吉兰治疗40例帕金森病患者,分为司来吉兰治疗组和安慰剂对照组,疗程8周。采用改良的Webster评分量表评估药物疗效并观察不良反应。结果 司来吉兰治疗组治疗前后自身对照Webster评分有明显改善(P<0.05或P<0.01),安慰剂对照组于治疗后第4,6周差异有显著性意义(P<0.05或p<0.01),司来吉兰组疗效优于安慰剂组(P<0.01);司来吉兰组患者治疗的总有效率为80％,与安慰剂组(40％)比较差异有显著性意义(P<0.01)。司来吉兰组患者药物不良反应轻微。结论 司来吉兰是一种安全有效的抗帕金森病辅助药物。     

司来吉兰联合复合多巴治疗帕金森病的有效性和安全性

目的 探讨司来吉兰联合复合多巴治疗帕金森病的疗效和安全性.方法 将89例帕金森病患者随机分为对照组(45例)和治疗组(44例),对照组患者采用复合多巴等药物治疗,治疗组患者加用司来吉兰治疗,6个月为1个观察周期.于用药前及用药后1、3、6个月采用PD统一评分量表(UPDRS)对两组患者进行疗效评定,并观察其不良反应.结果 治疗组患者治疗1个月时与治疗前相比,除UPDRSⅢ评分降低外(P＜0.01),UPDRSⅠ、Ⅱ、Ⅳ评分变化均无统计学差异(均P＞0.05)；治疗3、6个月时与治疗前比较,其UPDRSⅠ～Ⅳ评分均下降(P＜0.01)；治疗3、6个月时与治疗1个月时比较,UPDRS Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ评分降低均降低(P＜0.01,P＜0.05)；治疗6个月时与治疗3个月时相比,其UPDRS Ⅰ～Ⅳ评分均无统计学差异(P＞0.05).治疗3、6个月时,治疗组UPDRSⅠ～Ⅳ评分均明显低于对照组(P＜0.01,P＜0.05).观察期内,两组患者未出现严重不良反应.结论 司来吉兰联用复合多巴可有效改善帕金森病症状,且耐受性好,不良反应少.     

司来吉兰联合复方多巴治疗帕金森病的疗效观察

目的观察司来吉兰联合复方多巴治疗帕金森病的疗效。方法选取我院神经内科治疗的90例帕金森病患者为研究对象,随机分为2组,对照组单用复方多巴治疗,观察组采用司来吉兰联合复方多巴治疗,服用12周后比较2组临床疗效、帕金森病统一评分量表(UPDRS)及改良Webster症状量表评分、非运动并发症发生率。结果观察组总有效率为88.89%,明显高于对照组的60%,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后UPDRS评分及Webster评分较对均照组明显改善,差异有统计学意义(P0.05);观察组睡眠和疲劳、情绪与认知、知觉与幻觉、注意力与记忆力、心血管系统、胃肠道症状、泌尿系统症状、性功能等非运动并发症发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论司来吉兰联合复方多巴治疗帕金森病效果显著,有利于肌强直、静止性震颤、姿势步态障碍、运动迟缓等症状改善,减少症状波动,降低非运动并发症,安全性较高,具有积极的临床意义。     

左旋多巴治疗对实验性帕金森病大鼠黑质纹状体TNF-α表达的影响

目的 研究左旋多巴(L-dopa)治疗对实验性帕金森病(PD)大鼠黑质纹状体肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响.方法 黑质定位注射6-羟多巴胺(6-OHDA)制备偏侧PD大鼠模型,经50～100 mg/kg体重L-dopa灌胃治疗4周后,检测双侧额叶皮质、黑质和纹状体区域TNF-α的表达.结果 6-OHDA损毁侧黑质和纹状体TNF-α含量和阳性细胞面密度分别显著高于健侧(均P<0.05).损毁侧与健侧TNF-α含量的比率随L-dopa治疗用量的增加而增高,且均显著高于对照组(P<0.05).结论 L-dopa治疗进一步加剧了PD大鼠黑质纹状体区域TNF-α的高表达.     

α-细辛醚对KA癫痫大鼠海马组织中Bax、Bcl-2的影响

目的 探讨不同浓度的α-细辛醚对KA癫痫大鼠海马组织中细胞凋亡调节基因Bax、Bcl-2的mRNA及其蛋白表达的影响.方法 红藻氨酸(kainic acid,KA)侧脑室注入SD大鼠制备癫痫模型,随机分为模型对照组(KA组)、α-细辛醚低浓度组(6mg/kg)、中浓度组(12mg/kg)和高浓度组(24mg/kg),另设假手术组为正常对照组,每组10只.α-细辛醚组经腹腔注射连续给药10d后检测大鼠海马组织中Bax、Bcl-2的mRNA及其蛋白的表达.结果 α-细辛醚用药后,大鼠表现为明显的镇静、抗惊厥作用;与正常对照组相比,KA组、α-细辛醚低、中浓度组大鼠海马区Bax的mRNA及蛋白表达升高,差异有统计学意义(P均＜0.05),α-细辛醚高浓度组Bax的mRNA及蛋白表达下降(P＜0.05);与正常对照组相比,Bcl-2的mRNA及蛋白表达KA组显著降低,α-田辛醚中、高浓度组升高(P均＜0.05),低浓度组与对照组相比差异不明显(P＞0.05).结论 KA诱导的SD癫痫大鼠神经元存在Bax、Bcl-2的异常表达,α-细辛醚可能通过降低Bax和提升Bcl-2基因的表达从而减少SD癫痫大鼠神经元凋亡.     

姜黄素通过IGF-1/Akt/FoxO3a通路保护多巴胺能神经元细胞

目的观察姜黄素对鱼藤酮致帕金森(PD)大鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用及其机制。方法清洁级(SPF)雄性SD大鼠80只,随机分为溶剂对照组(空白组)、姜黄素对照组(对照组)、鱼藤酮模型组(模型组)、姜黄素治疗组(治疗组),每组20只。空白组和对照组颈、背部皮下注射葵花油,其余两组在相同部位注射鱼藤酮建立帕金森模型,连续28 d,造模后观察各组大鼠行为学改变并评分。此后对照组和治疗组每天给予姜黄素灌胃,其余两组等量二甲基亚砜灌胃,连续28 d,后将大鼠全部处死。采用原位杂交、免疫印迹(Western blot)法检测黑质部IGF-1、Akt、Fox O3a的表达,采用免疫组化染色法检测黑质部酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞数。结果模型组大鼠TH、IGF-1、磷酸化的Akt(p-Akt)、磷酸化的Fox O3a(p-Fox O3a)表达较空白组和姜黄素组显著降低(P0.05);姜黄素治疗组TH、IGF-1、p-Akt、p-Fox O3a表达高于模型组(P0.05)。结论姜黄素可抑制帕金森大鼠多巴胺能神经元凋亡,其抗凋亡机制可能与激活IGF-1/Akt/Fox O3a通路有关。     

蛋白激酶Cδ参与帕金森大鼠模型中6-OHDA的神经毒性作用

目的研究蛋白激酶Cδ(PKCδ)细胞核转移在帕金森大鼠模型神经元丢失中的病理作用。方法 40只雄性SD大鼠随机分为Sham组(10只)和PD组(30只),立体定位右侧纹状体注射生理盐水或6-OHDA溶液并通过阿朴吗啡(APO)诱导旋转进行模型筛选,免疫组化检测黑质致密部(SNpc)酪氨酸羟化酶(TH)表达情况。采用Western blotting检测PKCδ蛋白表达并通过共聚焦观察PKCδ在细胞核的表达。结果 PD组SNpc部位TH阳性神经元形态发生了病理改变且密度显著下降(P0.05);Western blotting显示PD组SNpc组织中PKCδ及Cleaved PKCδ的表达较Sham组显著上调(P0.05);共聚焦显微镜提示PD组SNpc部位PKCδ与细胞核有共定位。结论 PKCδ的酶解激活及细胞核转位可能参与了PD的神经病理发生。     

“抗帕颗粒”对帕金森病模型鼠α-syn异常聚集的影响

目的探讨"抗帕颗粒"对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型小鼠黑质纹状体区α-突触共核蛋白(α-syn)异常聚集的影响。方法 90只健康雄性C57BL/6小鼠,鼠龄8~12w。随机分为3组,正常对照组30只、PD模型对照组30只、PD模型干预组30只。MPTP腹腔注射40mg·Kg-1·d-1×7制备小鼠PD模型;正常对照组及PD模型对照组予生理盐水1ml·d-1灌胃;PD模型干预组给予"抗帕颗粒"40mg·kg-1·d-1灌胃,连续喂养4个月。比较分析各组4月时黑质纹状体区α-syn聚集情况。结果 (1)正常对照组30只(30/30只)最终均存活,PD模型对照组4个月时存活27只(27/30只),PD模型干预组4个月时存活28只(28/30只);(2)PD模型对照组、PD模型干预组小鼠每次注射MPTP后,先有短暂兴奋(持续7.61±2.17min),表现为四处窜跳;随即出现全身中重度震颤,皮毛及尾巴时有竖立,活动减少,持续24.23±3.89min后震颤消失;随后出现活动减少;(3)黑质纹状体区α-syn免疫荧光双染检测;(3)PD模型对照组较正常对照组明显增多,PD模型干预组较PD模型对照组有所减少,但仍较正常对照组增多;(4)Western blotting检测α-syn蛋白量的表达,正常对照组与PD模型对照组比较,P0.001;与PD模型干预组比较,P0.001;PD模型对照组与PD模型干预组比较,P0.05。结论 "抗帕颗粒"对PD小鼠黑质纹状体区α-syn异常聚集具有一定程度的抑制作用,阻断氧化应激反应可能是这种保护作用的关键机制,有望改善PD治疗现状并在临床进一步推广应用。