食管癌癌变过程中的细胞凋亡及其与细胞增殖的关系

目的 定量检测食管癌癌变过程中细胞凋亡及细胞增殖状况，并分析两者在食管癌癌变过程中的相关性及生物学意义。材料与方法 食管癌标本７１例，分别作病理组织学诊断、ＴＵＮＥＬ检测凋亡、免疫组化检测Ｋｉ－６７的表达以观察细胞增殖状况。结果 食管癌癌变过程中细胞增殖指数及细胞凋亡系数均逐渐升高，两者呈正相关；在食管浸润癌中，随着癌分化程度的降低，细胞增殖指数继续增高，而细胞凋亡指数逐渐降低，两者呈负相关。结论     

骨肉瘤中细胞凋亡和细胞增殖的关系

[目的]探讨骨肉瘤组织中细胞凋亡与细胞增殖的关系。[方法]利用原位末端转移酶法和免疫组织化学技术分别检测骨肉瘤和良性骨肿瘤中凋亡细胞密度和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。[结果]4种亚型骨肉瘤组织中凋亡细胞密度均明显低于良性骨肿瘤组织，而CNA阳性细胞密度明显高于良性骨肿瘤组织；在4种亚型骨肉瘤中凋亡细胞密度和PCNA阳性细胞密度呈明显负相关，而在良性骨肿瘤中两者呈线性正相关。[结论]在骨肉瘤的发生中可能普遍存在细胞凋亡机制的紊乱，可能以低 亡高增殖表现为多，并认为细胞凋亡检测尚难以作为一种独立的预后判断指标。     

基底细胞癌中细胞凋亡和细胞增殖的关系

本文利用原位末端转移酶法和免疫组织化学技术分别检测基底细胞癌(ＢＳ)中细胞凋亡和细胞增殖与ＢＳ发生及其生物学行为的关系。1　材料与方法1.1　材料收集本院和湘雅医院病理科1995～1999年活检ＢＳ标本41例,意外死亡病人的正常皮肤组织8例。所有组织均经10%福尔马林固?..     

c-foS基因表达调控与细胞增殖分化和癌变的关系

c-fos基因属于与生长和分化相关的立即早期基因。通过对该基因表达调控的研究，是揭示细胞增殖、分化和癌变相互关系的重要线索。这方面的研究甚为活跃。     

鼻咽癌细胞凋亡与细胞增殖的原位观察

In order to observe the apoptosis and proliferation of cells in nasopharyngeal carcinoma(NPC) and pericarcinomatous tissue(PCT), 49 cases of NPC and partly PCT were detected by in situ end-labelling (ISEL) technique and proliferating cell nuclear antigen(PCNA) immunohistochemical staining. The results showed that: 1. Massive distribution of ISEL positive cells was frequently exhibited in vesicular nucleus cell carcinoma(VNCC) of NPC, in which no apoptotic pattern character was found. 2. The positive rate and the staining intensity index(SII) of ISEL signals in NPC were higher than that in PCT(P < 0.05); the positive correlation between ISEL SII and PCNA SII was found in NPC(r = 0.341, P < 0.05), whereas the positive rate and the SII of ISEL signals were significantly lower than that of PCNA (P < 0.01). 3. The ISEL SII and the PCNA SII in VNCC were obviously higher than that in poorly differentiated squamous cell carcinoma(PDSCC) (P < 0.01, P < 0.05). Patients with VNCC had a high five-year survival rate. The results suggest that there is a relationship between cellular proliferation and cellular apoptosis in NPC.     

鼻咽癌肿瘤细胞增殖与凋亡关系

目的 了解鼻咽癌肿瘤细胞增殖与产凋亡的关系及ｂｃｌ－２表达在此过程中的作用。方法 ６５例鼻咽癌活检组织及１５例癌旁组织用免疫组化技术检测ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ;ＨＥ染色中作核分裂计数,并将后两者合并为增殖指数;用原位末端标记法（ＩＳＥＬ法）显示４４例鼻咽及１５例癌旁组织中的细胞凋亡。结果 ①鼻咽癌ＰＣＮＡ、核分裂像数、凋亡细胞数均高于癌旁上皮组织,但与组织分型无关;增殖指数与凋亡细胞数呈正相关。②ｂ     

环氧化酶-2的表达与食管癌细胞增殖和凋亡的关系

目的:研究食管癌环氧化酶-2(COX-2)的表达与增殖细胞核抗原以及凋亡的关系.方法:采用免疫组化方法检测96例食管癌组织和20例对照组中的COX-2、bcl-2和PCNA,同时用末端脱氧核苷酸转移介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)进行原位凋亡检测,并计算增殖指数(proliferation index PI)和凋亡指数(apoptotic index AI).结果:96例食管癌组织中的COX-2和bcl-2表达升高,PI为72.20%,AI为8.67%,COX-2、PI和AI与肿瘤的淋巴结转移、血管的浸润以及临床分期密切相关.结论:COX-2通过上调bcl-2促进肿瘤细胞增殖和抑制细胞凋亡参与了食管癌的发生机理.     

核仁素在细胞增殖与细胞凋亡中的作用

核仁素（又称C23）是真核细胞核仁中最主要的一种蛋白质,具有多种生物学功能,它不但直接参与核糖体的生物合成与成熟,还直接或间接参与细胞增殖、生长、胚胎发生、胞质分裂、染色质复制与核仁的发生等过程。最新研究表明,细胞凋亡的发生与核仁素蛋白的断裂和转位改变相关。核仁素双向核定位序列决定其在细胞核与细胞浆之间的物质转运以及细胞核功能的细胞外调节中起重要作用。     

肾脏发生发育中的细胞增殖与凋亡

在组织、器官发育过程中，细胞增殖与细胞凋亡是两个完全不同的细胞过程。细胞增殖是细胞新生的过程，它使细胞数目迅速增多，是组织和器官发育的基础。而细胞凋亡则是细胞退化、死亡的过程。在器官发育、完善的过程中，两者相辅相成，相互协调。在生理情况下，细胞增殖与细胞凋亡之间的平衡决定了组织器官的内稳定状态。无论是在正常或异常的肾脏中，两者在调节肾脏细胞数量中都起着相当重要的作用。     

Ras和p53联合突变及局部体液免疫在食管癌变过程中的作用

目的　探讨 Ras、p53联合突变及局部体液免疫在食管上皮癌变过程中的协同作用。方法　应用直接免疫荧光及 S-P免疫组化染色法对不同食管组织中的 Ig G产生细胞和 Ras、p53进行检测。结果　在食管癌变过程中 Ras、p53联合突变率呈上升趋势 ;在浸润性食管癌中 ,Ras、p53联合突变率与浸润深度、淋巴结转移率呈正比 ,而 Ras、p53阴性同时 Ig G阳性的病例中浸润深度、淋巴结转移率显著降低。结论　在食管癌发生发展过程中 ,抑癌基因 p53和癌基因 Ras的异常改变呈协同作用 ,且 Ig G似可通过抑制 Ras、p53联合突变来抑制肿瘤浸润和转移     

丁酸钠对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的作用

目的: 观察丁酸钠对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的作用。方法: 以1、2.5、5mmol/L丁酸钠处理Eca-109细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,透射电镜观察细胞凋亡的形态,四甲基噻唑氮蓝法检测抑制细胞增殖率,TUNEL法检测细胞凋亡率。结果: Eca-109细胞经丁酸钠处理后:光镜下观察细胞变小、变圆,部分从培养瓶壁上脱落下来;电镜下细胞核体积缩小,染色质浓缩聚集于核膜处;细胞增殖受到明显抑制,1、2.5、5mmol/L丁酸钠处理24h、48h和72h后,细胞生长抑制率分别是13.38%、34.15%、39.02%,14.04%、33.33%、46.49%和31.11%、40.74%、48.15%,与低浓度组比较差异有统计学意义(P<0.05~P<0.01);2.5mmon/L丁酸钠处理24h组与阴性对照组细胞凋亡率分别是5.5%和1.6%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论: 丁酸钠可抑制食管癌Eca-109细胞增殖、促进凋亡,且呈浓度和时间依赖性。     

miR-195在食管癌中的表达及其对食管癌细胞株增殖的影响

目的:探讨microRNA-195 (miR-195) 在食管癌中的表达及其对食管鳞癌细胞Eca109增殖的影响?方法: 采用Taqman 探针实时定量PCR方法检测10对外科手术食管鳞癌标本miR-195的表达,用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-195类似物转染入Eca109细胞,Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测蛋白表达水平?结果:与正常食管上皮相比,食管鳞癌组织miR-195表达明显降低(P < 0.05)?在48?72?96 h,miR-195转染组细胞吸光值明显低于对照组(P < 0.05),且miR-195转染组处于G0/G1期细胞的百分数明显高于对照组(P < 0.05)?Western blot结果显示miR-195转染组Cdc42蛋白水平明显低于对照组(P < 0.05)?结论:miR-195可阻滞Eca109细胞从G1期进入S期,抑制其增殖?     

CAPN4与食管鳞形细胞癌增殖和迁移关系的体外研究

 目的 探讨钙蛋白酶小亚基1(calpain small subunit 1,CAPN4)在食管鳞形细胞癌细胞系中的表达水平,分析其与食管鳞形细胞癌细胞增殖和迁移能力的相关性。 方法 挑选人正常食管上皮细胞系HEEC及食管鳞形细胞癌细胞系EC109与KYSE510,应用Western blot检测细胞系中CAPN4蛋白质水平,应用RNA干扰下调EC109与KYSE510中CAPN4的表达水平,通过CCK-8与Transwell实验分别检测细胞增殖与迁移能力的变化。同时用Western blot检测细胞系中增殖和迁移相关蛋白质水平。结果 CAPN4在EC109与KYSE510中的蛋白质水平显著高于HEEC,下调EC109与KYSE510中CAPN4蛋白质水平后,细胞增殖与迁移能力均显著降低(P<0.05),MMP-2蛋白质水平下调。 结论 CAPN4在食管鳞形细胞癌中高表达,促进食管癌增殖和迁移,并与下游分子MMP-2的表达水平密切相关。     

17-AAG联合紫杉醇对Eca-109食管癌细胞增殖的抑制作用

目的研究17-AAG联合紫杉醇（PTX）对食管癌细胞Eca-109增殖和凋亡的影响。方法予以PTX和17-AAG单独或联合
使用作用于Eca-109细胞株,采用MTT法检测其细胞增殖的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡的变化。结果与对照组
相比,单独使用17-AAG、PTX均能够抑制Eca-109细胞的增殖;0.5 μmol/L PTX联合0.625 μmol/L 17-AAG可抑制Eca-109的生
长,且联合效应明显强于各自单药组（P<0.01）;流式细胞仪检测结果显示：17-AAG将Eca-109 细胞阻滞于G2/M 期,PTX将
Eca-109 细胞阻滞于S 期。17-AAG与PTX 联合用药使Eca-109 细胞阻滞于G2/M 期和S。17-AAG组、PTX组及联合组作用
Eca-109细胞株24 h后其凋亡率分别为4.52%、10.91%、29.88%,显著高于对照组（1.32%）;联合用药后,可形成明显凋亡峰,明显高
于单药组。结论PTX和17-AAG均可抑制食管癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡,两者联合可增强上述作用。
     

NUSAP1在食管癌中与肿瘤细胞增殖和免疫细胞浸润相关性——基于数据库的研究

目的：探讨核仁纺锤体相关蛋白1(nucleolar and spindle-associated protein 1,NUSAP1)在食管癌(esophageal carcinoma,ESCA)中的表达情况、临床意义及功能机制,为ESCA的早期诊断和治疗提供新思路。方法：从GEPIA2和TIMER数据库下载ESCA样本与癌旁样本,进行NUSAP1的表达分析,STRING和Cytoscape软件进行NUSAP1相关基因的PPI网络构建,并进行GO、KEGG及GSEA富集分析。TIMER数据库被用来分析NUSAP1与免疫细胞的相关性。最后通过RT-PCR、Western blot和免疫组化验证NUSAP1在ESCA组织和细胞中的表达,使用慢病毒包被的小干扰RNA转染ESCA细胞,进行NUSAP1的表达敲减。通过CKK-8和Ki67免疫荧光评估NUSAP1对ESCA细胞增殖的影响。结果：NUSAP1在ESCA组织和细胞中高表达。NUSAP1的表达与CDK1、B细胞和巨噬细胞浸润正相关,而与CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、中性粒细胞和树突状细胞浸润负...     

丹酚酸A 对食管癌细胞增殖与凋亡的影响及其机制

目的： 探讨丹酚酸A(salvianolic acid A,SalA)对食管癌细胞KYSE-150 增殖、凋亡的影响及其相关的作 用机制。方法： 将细胞随机分为对照组、10 μmol/L SalA 组、25 μmol/L SalA 组、50 μmol/L SalA 组。采用细胞计数 试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡;采用蛋白质印迹 法检测细胞增殖标志物Ki-67,细胞周期素D1(cyclin D1),细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase, CDK4),CDK6,B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2 相关X(Bcl-2 associated X,Bax),活化半胱氨酸 天冬氨酸蛋白酶(cleaved-caspase-9,cl-caspase-9),cl-caspase-3,磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K),磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,P-Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的表达水平。结果： 与对照组相比,SalA 各浓度组细胞增殖活性均显著降低(均P<0.01);处于G1 期的细胞显著增加,S期细胞显著减少(均P<0.01);细胞凋亡率均显著升高(均P<0.01);SalA 各浓度组细胞中Ki-67, cyclin D1,CDK4,CDK6,Bcl-2,PI3K,p-Akt 和mTOR 的表达水平均显著降低;而p21,Bax,cl-caspase-9 和clcaspase- 3 的表达水平均显著上升,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论： SalA 能抑制食管癌细胞KYSE-150增殖, 诱导细胞G1期阻滞和细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路的激活有关。     

褪黑素联合顺铂对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其机制

目的:观察褪黑素(Mel)联合顺铂(DDP)对人食管癌Eca109细胞生长的抑制作用,并探讨相关的分子机制。方法:通过MTT实验检测Mel与DDP不同浓度分别单用或两药联合处理后食管癌Eca109细胞增殖情况;流式细胞仪检测用药后细胞凋亡情况;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:Mel与DDP联用对食管癌Eca109细胞增殖的抑制率均高于单用Mel与DDP时对食管癌Eca109细胞的抑制率(P<0.05);Mel单独诱导食管癌Eca109细胞凋亡作用不强,但可增强DDP诱导的食管癌细胞凋亡(P<0.01);Mel与DDP联用后食管癌Eca109细胞Bcl-2蛋白表达减弱,Bax蛋白表达增强。结论:Mel可增强DDP对人食管癌Eca109细胞增殖的抑制作用,并具有增强DDP诱导人食管癌Eca109细胞凋亡的作用,其机制可能与上调Bax表达和下调Bcl-2的表达有关。     

尼美舒利、阿司匹林对COX-2不同表达水平的食管鳞癌细胞株的抑制作用

目的比较选择性和非选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂对不同COX-2表达水平的食管鳞癌细胞的抑制作用。方法选取食管鳞癌细胞株EC109和TE-1,采用Western blotting法测定COX-2蛋白表达、MTT法检测细胞增生以及流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡(PI标记),观察阿司匹林及尼美舒利对2株细胞增生、凋亡的作用。结果 Westernblotting结果显示,EC109细胞表达COX-2,TE-1细胞不表达COX-2。选择性COX-2抑制剂———尼美舒利可抑制EC109细胞的增生,抑制率为(17.5±3.3)%~(80.1±3.9)%。尼美舒利仅在0.4 mmol/L时对TE-1细胞有抑制作用,抑制率为(16.2±7.0)%。尼美舒利可使EC109细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡,但对TE-1细胞无上述作用。非选择性COX-2抑制剂———阿司匹林在0~4 mmol/L浓度区间对EC109和TE-1均有抑制作用,并呈剂量依赖关系。阿司匹林作用后,EC109与TE-1的细胞周期均被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(10.55±0.01)%及(8.52±6.65)%。结论食管鳞癌(esophagealsquamous cell carcinoma,ESCC)细胞株中COX-2的表达水平影响了选择性COX-2抑制剂的抑制作用,而对非选择性COX-2抑制剂影响较小。阿司匹林可能通过非COX-2依赖途径从而发挥对肿瘤的抑制作用。     

miR-302b-3p对食管癌EC-109细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的：探讨miR-302b-3p对食管癌EC-109细胞增殖和凋亡的影响,阐明miR-302b-3p抑制食管癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的相关机制。方法：选取体外培养的食管癌EC-109细胞和正常食管上皮HET-1A细胞,采用实时荧光定量PCR法检测EC-109细胞和HET-1A细胞中miR-302b-3p表达水平。对EC-109细胞进行瞬时转染,分为空白对照组（未转染）、miR-NC组（转染miR-302b-3p mimics阴性对照）、miR-302b-3p组（转染miR-302b-3p mimics）、anti-miR-NC组（转染miR-302b-3p inhibitor阴性对照）和anti-miR-302b-3p组（转染miR-302b-3p inhibitor）。MTT法检测各组EC-109细胞活性,流式细胞术检测各组不同周期EC-109细胞百分比和细胞凋亡率,Western blotting法检测各组EC-109细胞中CyclinD1、CDK2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验和Western blotting法检测各组EC-109细胞的荧光素酶活性和细胞中上皮细胞转化序列2（ECT2）蛋白的表达水平。结果：与HET-1A细胞比较,EC-109细胞中miR-302b-3p表达水平明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较,miR-302b-3p组EC-109细胞活性、S期细胞百分比和EC-109细胞中CyclinD1及CDK2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,而G₀/G₁期细胞百分比、细胞凋亡率和细胞中Bax及Cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-302b-3p组细胞活性、S期细胞百分比和细胞中CyclinD1及CDK2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,而G₀/G₁期细胞百分比、细胞凋亡率和细胞中Bax及Cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与miR-NC+ECT2-WT组比较,miR-302b-3p+ECT2-WT组EC-109细胞的荧光素酶活性降低（P<0.05）;与anti-miR-NC+ECT2-WT组比较,anti-miR-302b-3p+ECT2-WT组EC-109细胞的荧光素酶活性明显升高（P<0.05）。结论：miR-302b-3p可抑制EC-109细胞增殖并诱导凋亡,其作用机制可能与靶向调控ECT2蛋白表达有关。