补肾健脾活血三类复方对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及CRF基因表达的影响

为从分子水平来阐明药物对肾阳虚证的主要调节点。采用逆转录多聚酶链反应化学发光定量法、放射免疫及细胞免疫技术，观察补肾，健脾，活血三类复方分别对下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺轴受抑制模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子ｍＲＮＡ表达，神经内分泌和免疫功能的影响。     

探讨阴中求阳与阳中求阴对谷氨酸单钠大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴的影响

目的：研究弓状核（ＡＲＣ）毁坏后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（ＨＰＡＴ）轴的变化以及与肾阴肾阳的内在联系。方法：给出生后（第２、４、６、８、１０天）大鼠每天皮下注射左旋谷氨酸单钠（ＭＳＧ）４ｍｇ／ｇ损毁下丘脑ＡＲＣ，成年后分别以左归丸与右归饮灌胃（每天５ｇ／ｋｇ）。结果：ＭＳＧ大鼠下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）阳性细胞及垂体前叶促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）分泌细胞数量明显多于生理盐水组，染色较深；肾上腺束状带紊乱不齐细胞数量增多，血窦扩张充血明显；胸腺萎缩，淋巴细胞增殖反应明显低于生理盐水组；血浆皮质酮及血浆ＡＣＴＨ和下丘脑ＣＲＨ等浓度高于生理盐水组。左归丸组上述病理生理变化得到明显改善，右归饮则无此作用。结论：ＨＰＡ轴功能亢进伴细胞免疫功能低下的病理生理过程可能属肾阴虚证范畴。     

健脾益气对神经内分泌免疫网络影响的实验研究

为了观察健脾益气对神经内分泌免疫网络的调节作用，本实验用皮质酮（１０ｍｇ／ｋｇ）造成大鼠下丘脑—垂体—肾上腺—胸腺（ＨＰＡＴ）轴抑制模型，观察健脾益气代表名方四君子汤（ＳＪ）对ＨＰＡＴ轴的影响。结果表明皮质酮大鼠下丘脑单胺类递质的含量明显增高，血浆ＡＣＴＨ、ＣＯＲＴ含量明显降低，体内与体外淋巴细胞增殖反应明显受抑，自然杀伤细胞活性下降，淋巴细胞诱生的ＩＬ—２和γ—ＩＦＮ水平明显降低。２００％四君子汤灌胃（１０ｇ／ｋｇ）能有效改善神经和免疫功能，而对内分泌系统作用不明显。桃红四物汤（ＴＨ）对皮质酮大鼠ＨＰＡＴ轴无影响     

右归饮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调素mRNA表达的影响

目的：从分子水平探讨肾阳虚证的本质以及补肾中药的作用机理。方法：用醋酸可的松造成肾阳虚模型,以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）半定量法,测定肾阳虚大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴CaMmRNA的表达,以及补肾中药右归饮对其的影响。结果：肾阳虚大鼠下丘脑、肾上腺CaMmRNA水平升高,垂体组织CaMmRNA水平没有显著变化,右归饮能够降低下丘脑组织CaMmRNA水平,但对肾上腺影响不显著。结论：下丘脑中CaMmRNA水平升高与肾阳虚证有关,下丘脑CaMmRNA水平的降低是补肾中药右归饮改善肾阳虚症状的作用机理之一。     

蛇床子香豆素对肾阳虚模型大鼠腺垂体──肾上腺皮质轴功能的影响

目的：探讨蛇床子香豆素补肾壮阳作用机理。方法：采用醋酸氢化可的松复制肾阳虚模型大鼠，用蛇床子素和蛇床子总香豆素（ＴＣＲ）给药，并用阳性对服药物作对照，测定大鼠血浆皮质酮（Ｂ）、促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）、肾素（ＰＲＡ）、血管紧张素－Ⅱ（ＡＴⅡ）和醛固酮（ＡＬＤ）的浓度。结果：与正常组比较，模型组的Ｂ和ＡＣＴＨ浓度明显降低（Ｐ＜０．０１），３个用药组与模型组比较，Ｂ和ＡＣＴＨ显著升高（Ｐ＜０．０１）。但各组间的ＰＲＡ、ＡＴ－Ⅱ和ＡＬＤ浓度均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：蛇床子素和ＴＣＲ具有保护和增强腺垂体－肾上腺皮质轴功能的作用。     

补阳还五汤对单侧输尿管结扎大鼠肾皮质PDGF-B表达的影响

目的：探讨补阳还五汤及其拆方对ＰＤＧＦＢ的调节作用。方法：采用单侧输尿管结扎的大鼠模型,观察由不同剂量的活血药和黄芪组合而成的补阳还五汤及其原方对大鼠肾皮质血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）Ｂ链ｍＲＮＡ表达的影响。结果：补阳还五汤可显著抑制ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ的表达,该方活血药仅高剂量时对ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达有明显的抑制,不同剂量的黄芪对ＰＤＧＦＢ表达的影响有显著差异,活血药与黄芪之间存在交互作用。结论：补阳还五汤可通过抑制ＰＤＧＦ的表达而延缓肾小管间质纤维化的发展,保护残余肾功能。     

补肾中药对肾阳虚大鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴Fos蛋白表达的影响

目的：研究c-Fos蛋白在肾阳虚发病中的作用及补肾中药的调整作用。方法：应用免疫染色技术检测肾阳虚大鼠下丘脑－垂体－肾上腺轴c-Fos蛋白的表达。结果：肾阳虚大鼠下丘脑视交叉上核和肾上腺组织中c-Fos阳性细胞数显著升高,补肾中药能够抑制肾阳虚大鼠下丘脑我叉上核和肾上腺组织c-Fos的升高。结论：下丘脑视交叉上核和肾上腺c-Fos蛋白的过度表达可能是肾阳虚证的病机之一,补肾中药可通过抑制下丘脑视交叉上核和肾上腺组织中c-Fos的表达,而改善下丘脑－垂体－肾上腺轴的功能,起到治疗作用。     

探讨服中求阳与阳中求阴对谷氨酸单钠大鼠下丘脑—垂体— …

目的：研究弓状核（ＡＲＣ）毁坏后下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（ＨＰＡＴ）轴的变化以及与肾阴肾阳的内在联系。方法：给 出生后（第２、４、６、８、１０天）大鼠每天皮下注射左旋谷氨酸单钠（ＭＳＧ）４ＭＧ／Ｇ损毁下丘脑ＡＲＣ,成年后分别以左 右归饮灌胃（每天５ｇ／ｋｇ）结果：ＭＳＧ大鼠下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素（ＣＲＨ）阳笥细胞及垂体前叶肿肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）分泌细胞数量明显多于生理盐水组,     

三类中药复方对侧脑室内注射IL-1大鼠下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴反应状态的影响

目的：探索补肾、健脾、活血三类中药复方对免疫因子引起下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴反应状态的不同影响。方法：采用侧脑室注射白细胞介素－1β（IL－1β），观察大鼠下丘脑单胺类神经递质、血浆促肾上腺皮质激系（ACTH）、皮质酮（CORT）的含量，建立下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴对免疫因子的反应状态，以此来观察三类中药对这一反应状态是否有不同的影响。结果：侧脑室内注射IL－1β能使下丘脑去甲肾上腺素（NE）含量明显下降；血浆ACTH、CORT浓度明显升高，与国外文献报道相似。补肾的右归饮能使因侧脑室注射IL－1β而降低的下丘脑NE含量进一步降低、能使升高的血浆ACTH、CORT含量进一步明显升高；健脾的四君子汤也有这一作用趋势；活血的桃红四物汤则无明显差异。结论：补肾中药能提高机体下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴对免疫因子的反应性或反应能力，活血中药则无这一作用。     

仙灵脾减轻外源性糖皮质激素抑制神经内分泌免疫作用的临床与实验研究

目的：研究仙灵脾对外源性糖皮质激素抑制下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（ＨＰＡＴ）轴作用的保护效应。方法：临床选择需用强的松治疗的患者６５例，随机分为复方强的松组（强的松与仙灵脾合方）与强的松组，观察用药前后皮质醇和促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）及淋巴细胞增殖反应的变化；动物实验用皮质酮皮下注射造成大鼠 ＨＰＡＴ轴抑制模型，观察仙灵脾对 ＨＰＡＴ轴相关指标的影响。结果：血浆 ＡＣＴＨ、皮质醇和淋巴细胞增殖反应两组患者治疗前均无明显差异，治疗后强的松组明显下降，复方强的松组明显上升（ Ｐ＜ ０． ０５）。实验动物表现为下丘脑单胺类递质被激活；垂体、肾上腺、胸腺重量减轻；室旁核、正中隆起 ＣＲＨ神经细胞与神经纤维减少，肾上腺束状带与胸腺皮质萎缩；自然杀伤细胞细胞毒活性及淋巴细胞产生ＩＬ－２、γ－干扰素水平降低（Ｐ＜０．０５）；仙灵脾组上述各项指标较皮质酮组明显改善（Ｐ＜０．０５）。结论：仙灵脾具有减轻外源性糖皮质激素副作用的神经内分泌免疫学效应。     

局部埋耳针治疗顽固性足跟痛123例

目的：探讨补肾药对免疫系统的作用方式。方法：用３类复方对皮质酮大鼠分别在７天与１４天实验里，进行对神经内分泌及免疫系统不同作用方式的研究。结果：无论７天或１４天，健脾组的免疫系统均得到保护，而神经内分泌系统却未有明显作用，说明健脾药是对免疫系统的直接作用；补肾组虽７天实验尚未见对各系统有何影响，至１４天实验才显示对神经内分泌免疫系统的全面作用。结论：补肾药是先作用于神经内分泌系统，而后才影响于免疫     

以药测证对肾虚证基因网络和信号转导的研究

总结了从细胞内的小的信号转导通路组成的网络到中等的下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺（HPAT）轴网络和涵盖全身,联络多个重要系统的大的神经内分泌免疫（NEI）网络,提出人体受到外界干预而形成的“病”或“证”,亦都是以众多的分子网络变化为基础。描绘了信号转导通路的方式、能力、研究信号转导通路变化的方法,提出“以药测证”是按系统生物学方法研究证的干预手段。作者采用补肾复方以药测证发现肾阳虚证涵盖着NEI调节网络,而且直接作用于NEI网络的调控中枢-下丘脑。采用从补肾复方中提取的有效组分——淫羊藿总黄酮（EF）,发现它通过NEI网络的下行通路激活免疫系统,能激活生长激素轴、性腺轴、淋巴细胞凋亡3个方面的网络机制发挥分子网络效应;也观察到EF调控基因网络表现出多种多样的方式,在淋巴细胞凋亡和增殖的网络机制中重塑对立的凋亡相关基因及增殖相关基因平衡;能会聚与整合共刺激分子、转化生长因子及多个原癌基因,成为启动促增殖、抗凋亡的上游因子网络;使NIK／IKK／IκB／Rel／NFκB信号转导通路中对立的IκBα与NFκB同时升高,既维持NFκB适度升高,又保证NFκB呈强者态势发挥其分子调控网络中的枢纽作用,并由此观察到肾虚证HPAT轴上有序的基因网络调控路线图谱。     

补肾、健脾和补肾健脾方对尾部悬吊大鼠钙、磷代谢的影响

目的:观察补肾、健脾和补肾健脾3方对模拟失重大鼠钙、磷代谢的作用,比较其促进骨矿化能力的异同.方法:大鼠随机分为正常对照、悬吊、补肾、健脾和补肾健脾共5组.后4组大鼠头低位-30度尾部悬吊连续21 d模拟失重,补肾、健脾和补肾健脾组大鼠从实验第1天开始依次按2.4,3.2,5.7g·kg-1·d-1给予补肾方、健脾方和补肾健脾方灌胃,其余各组大鼠灌服等容积的生理盐水.实验第22天取材,双能X射线骨密度仪测左侧胫骨骨密度,全自动生化分析仪检测血和尿中钙磷含量,EDTA法检测粪钙和饲料钙含量.结果:较之正常对照组,悬吊组大鼠左侧胫骨骨密度显著降低(P＜0.01),血钙和血磷含量、钙的表观吸收率明显降低(P＜0.01),尿钙、尿磷、粪钙含量明显增高(P＜0.01);较之悬吊组,补肾健脾组大鼠左侧胫骨骨密度、血钙和血磷含量、摄入钙量、钙的表观吸收率明显升高(P＜0.01),尿钙、尿磷、粪钙含量明显降低(P＜0.01),补肾组和健脾组大鼠左侧胫骨骨密度、血钙升高(P＜0.05),钙的表观吸收率均明显升高(P＜0.01),补肾组大鼠血磷含量明显升高(P＜0.01),尿钙、尿磷含量显著降低(P＜0.01),粪钙含量降低(P＜0.05),健脾组大鼠血磷和摄入钙量增加(P＜0.05),尿钙、尿磷和粪钙含量降低(P ＜0.05,P＜0.01);较之补肾健脾组,补肾组和健脾组大鼠左侧胫骨骨密度、血钙含量降低(P＜0.05),补肾组大鼠钙的表观吸收率明显降低(P＜0.01).结论:补肾、健脾和补肾健脾3方均能改善模拟失重引起的钙磷代谢异常,健脾方在促进钙吸收和维持血钙处于正常水平方面对补肾方具有协同增效作用.     

基于体内自组装胶束形成机制探究羊脂油炙淫羊藿对大鼠温肾助阳的增效作用

淫羊藿传统炮制方法为羊脂油炙,具有增强淫羊藿温肾助阳的作用。该文采用腹腔注射氢化可的松法建立大鼠肾阳虚模型,以大鼠体征,血清睾酮、皮质酮含量,组织病理学检查等为评价指标,研究在辅料羊脂油的作用下,淫羊藿总黄酮在体内自组装形成胶束后对肾阳虚大鼠的增效作用。肾阳虚大鼠灌胃淫羊藿总黄酮和总黄酮胶束后,2组大鼠与模型组相比,体征及各项生化指标趋于正常,下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴功能紊乱得到有效改善。实验结果表明,淫羊藿总黄酮及其自组装胶束都具有温肾壮阳的作用,其中以炙淫羊藿增强效果为佳。证明在羊脂油作用下,淫羊藿总黄酮可在体内自组装形成胶束,改善下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及主要性腺组织睾丸的病理状况,发挥增强淫羊藿温肾助阳的功效,进一步揭示了淫羊藿炮制辅料羊脂油的增效机制。     

六味地黄汤对皮质酮所致小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱的调节作用及其拆方研究

目的：研究比较六味地黄汤全方(LW)及其拆方三补(地黄、山茱萸、山药)和三泻(茯苓、泽泻、牡丹皮)对下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴的调节作用。方法：以肌肉注射外源性皮质酮(CORT)导致小鼠HPO轴功能紊乱为模型，用放射免疫分析法检测血清雌二醇浓度及下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量，用Western blot检测垂体促黄体生成素(LH)水平。结果：肌注CORT导致小鼠体重下降、卵巢重量减少，血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降，口服LW(5、10、15g／kg)对CORT所致的血清雌二醇、垂体LH及下丘脑GnRH水平下降具有不同程度的改善作用。LW及大、中剂量(9．6、6．4g／kg)三补对模型小鼠卵巢重量减轻的趋势无明显改善作用，而三泻及小剂量三补(3．2g／kg)却使小鼠卵巢重量进一步下降，单独应用三补和三泻对CORT处理小鼠血清雌二醇和垂体LH水平无明显调节作用。结论：外源性CORT导致小鼠HPO轴功能紊乱，LW对CORT所致的HPO轴功能紊乱具有改善作用，三补和三泻的作用不如LW，单独应用时存在产生不良反应的可能性。     

抗毒补心胶囊对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:观察抗毒补心胶囊对环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:注射CTX形成免疫低下小鼠模型,ig给予不同剂量的抗毒补心胶囊(4,8 g.kg-1)和阳性对照药香菇多糖片(10 g.kg-1),以小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,外周血白细胞数及淋巴细胞转化率为观察指标。结果:ig给予抗毒补心胶囊4 g.kg-1后小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和淋巴细胞转化率分别为(63.2±10.9)%和(47.33±6.18)%,ig给予8 g.kg-1的为(57.4±10.2)%和(43.07±6.23)%。抗毒补心胶囊对CTX致小鼠外周血白细胞减少有明显提升作用(P<0.05),并能明显改善CTX所致小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和淋巴细胞转化率的降低(P<0.05)。结论:抗毒补心胶囊能增强CTX致免疫功能低下小鼠免疫功能,对免疫失衡机体具有保护作用。     

电针强壮穴对衰老模型大鼠T细胞免疫调节功能的影响

目的:研究电针强壮穴对D-半乳糖衰老模型大鼠T细胞免疫功能的影响,探讨电针对免疫衰老的调节机制。方法:3月龄SD大鼠50只,随机分为青年对照组、模型组、电针组、免疫抑制组、免疫抑制并电针组,除对照组以外,其余大鼠皮下注射D-半乳糖40d制作衰老模型。电针组、免疫抑制并电针组取"关元"后三里"穴进行电针治疗,每次15min,每周6次;免疫抑制组、免疫抑制并电针组于电针治疗第26、27天时,分别按50mg/kg给大鼠腹腔注射环磷酰胺,造成免疫抑制状态。噻唑蓝比色法检测脾脏T淋巴细胞增殖指数,酶联免疫吸附法检测脾脏T细胞分泌白介素-2(IL-2)和白介素-2受体(IL-2R)水平,流式细胞术检测CD8~+T细胞表面CD28分子(即CD8~+CD28~+T细胞)密度。结果:与对照组比较,模型组脾脏T细胞增殖指数明显降低(P<0.01),T细胞诱生IL-2、IL2 R分泌水平及CD8~+CD28~+T细胞表达也明显降低(P<0.01);与模型组相比,电针组上述各指标均明显升高(P<0.01)。经免疫抑制处理的免疫抑制组与模型组相比,上述各指标均明显降低(P<0.05,P<0.01);但经电针治疗的免疫抑制并电针组与免疫抑制组比较,上述各指标均明显升高(P<0.05,P<0.01);免疫抑制并电针组与模型组比较,除IL-2显示差异有统计学意义(P<0.05)外,其余指标无统计学意义差异(P>0.05);免疫抑制并电针组与电针组比较,除CD8~+CD28~+T细胞表达外,其余各指标的差异(P>0.05)。结论:电针强壮穴能调节T细胞免疫,延缓衰老,并能降低环磷酰胺对T细胞免疫的抑制效应,其作用途径可能是提高T细胞增殖能力、T细胞分泌IL-2及其受体水平,以及提高CD8~+T细胞表面分子CD28表达等。     

活血化瘀经典古方对家兔血小板聚集性的影响

本实验在体外外用花生四烯酸诱导家兔血小板聚集，观察８个活血化瘀古方对血小板聚集性的影响。结果：各古方均有不同程序的抑制血小板聚集作用，其中以膈下逐瘀汤、身痛逐阏汤和少府逐瘀汤作用最强，其次是补阳还五汤和血府逐瘀汤。提示：此８个活血化瘀古方的抑制血小板聚集作用可能是治疗血瘀证的机制之一。