不同时期卡介苗免疫治疗对结核病大鼠疗效和CD4+CD8+双阳(DP)T细胞的影响

目的探讨不同时期给予卡介苗(BCG)免疫治疗对结核病化疗效果和T细胞严群的影响。方法80只PPD皮试阴性SD大鼠随机分成(1)化疗开始同步加BCG治疗组;(2)化疗1月后加BCG治疗组;(3)单纯化疗对照组;(4)模型效果判断组。各组于实验开始接受结核杆菌(Mtb)攻毒;第1个月末处死模型效果判断组全部大鼠作病理学和结核杆菌细菌学检查,其他各组于第1个月末接受抗结核化疗,其中第1组化疗开始加用BCG治疗,第2组化疗1个月后加用BCG治疗。观察各组大鼠死亡率;检测各组大鼠于Mtb攻毒前和Mtb攻毒后1、2、3、5个月末的外周血中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、DPT细胞含量,第2、5个月末加查淋巴细胞绝对计数。结果(1)Mtb感染后1个月内1、3、4组各死亡2只大鼠,第2组死亡1只大鼠。化疗开始后4个月治疗期死亡率:化疗一开始即同步加BCG治疗组22.2%(4/18)高于化疗1月后加BCG治疗组(0/19),P<0.05;化疗对照组为5.6%(1/18),(2)结核病鼠表现为CD4/CD8比值(可伴CD4⁺细胞)降低、CD8⁺(可伴DP)细胞升高,P<0.05或P<0.01;这种改变可在化疗后1-2个月内恢复到接近正常水平。(3)化疗开始同步加用BCG组治疗1个月时表现为T淋巴细胞(CD3⁺)、CD4⁺T细胞百分率显著降低,而淋巴细胞绝对计数和CD8⁺、DPT细胞百分率升高,P<0.05或P<0.01;治疗2个月后CD3⁺、CD4⁺T细胞恢复到正常范围而仍保持CD8⁺、DPT细胞较高水平。(4)化疗1个月后再加用BCG组在加用BCG后表现为CD3⁺、CD4⁺细胞百分率不降低而CD8⁺、DP细胞升高。结论淋巴细胞总数显著升高而T细胞占总淋巴细胞百分率显著降低是化疗开始同步加BCG治疗组第一个月死亡率升高的一个重要免疫学特征。DP细胞是抗结核保护性免疫相关细胞。BCG作结核病的免疫治疗应在化疗1个月后开始。     

CD4^＋CD25^＋T细胞与免疫性疾病

90年代初，Sakaguchi和助手研究T细胞介导的免疫抑制，表明小部分（约10％）CD4^＋T细胞组成性表达IL-2（CD25），是体内控制自身反应T细胞的关键。剔除了CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞的小鼠CD4^＋T淋巴细胞输注到无胸腺的裸鼠后，     

日本血吸虫感染小鼠CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋ T细胞的动态变化及其意义

目的分析小鼠脾细胞中CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋T细胞在日本血吸虫感染后的动态变化,探讨CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋T细胞与血吸虫感染的关系。方法常规逸出尾蚴,感染小鼠24只,随机分为4组,同时设立阴性对照。感染后第3、6、9、12周分批处死小鼠,取脾脏制备单细胞悬液,用FITC-CD4和PE-CD25单抗进行细胞表面染色,洗涤后,经打孔液和固定液处理,再用PE-cy5-Foxp3抗体进行核内染色,流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋调节性T细胞的变化。结果小鼠感染血吸虫后第3、6、9、12周脾细胞中CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋T细胞百分率分别为（2.57±0.13）%、（1.77±0.21）%、（1.10±0.05）%和（0.83±0.04）%,呈逐步下降趋势（P〈0.05）;CD4＋CD25-Foxp3＋T细胞百分率分别为（0.25±0.007）%、（0.27±0.13）%、（0.38±0.15）%和（0.35±0.07）%,差异无统计学意义（P〉0.05）。未感染小鼠脾细胞中CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋T细胞百分率分别为（2.63±0.09）%、（3.13±0.47）%、（2.78±0.19）%和（2.82±0.12）%,差异无统计学意义（P〉0.05）;CD4^＋CD25^-Foxp^3＋T细胞百分率分别为（0.35±0.10）%、（0.43±0.13）%、（0.30±0.08）%和（0.31±0.09）%,差异无统计学意义（P〉0.05）。感染组与未感染组相比从第6周开始脾细胞中CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋T细胞百分率显著下降（P〈0.05）,CD4^＋CD25^-Foxp^3＋T细胞百分率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋T细胞在日本血吸虫感染中具有免疫抑制作用,与血吸虫虫卵肉芽肿慢性病变具有相关性。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4^＋CD25^＋highCD127lowTreg和CD4^＋CD25^＋Treg水平测定及分析

目的观察系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血CD4^＋CD25highCD127low调节性T细胞（Treg）和CD4^＋CD2^＋5Treg水平变化。方法用流式细胞术检测15例活动期SLE患者（SLE组）及20例健康查体者（对照组）外周血淋巴细胞亚群及CD4^＋CD25highCD127lowTreg、CD4^＋CD2^＋5Treg水平。结果 SLE组外周血中T细胞、B细胞及NK细胞比例与对照组比较无显著差异;SLE组外周血CD4^＋CD25highCD127lowTreg和CD4^＋CD2^＋5Treg水平均显著高于对照组（P〈0.05）。结论活动期SLE患者外周血中CD 4^＋CD25 highCD127 lowTreg和CD 4^＋CD 2^＋5 Treg水平显著升高;此是否与应用免疫抑制剂致患者发生自身免疫逃逸有关尚待进一步探讨。     

供体凋亡细胞输注对胰岛移植糖尿病大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的影响

目的探讨供体凋亡细胞输注对诱导胰岛移植免疫耐受大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的影响。方法糖尿病SD大鼠23只,随机分为4组,分别输注Hanks液（Hanks组）、供体正常脾细胞（正常细胞组）、供体坏死脾细胞（坏死细胞组）及供体凋亡脾细胞（凋亡细胞组）。输注后第7天行同种异体胰岛移植,测血糖,观测胰岛移植物存活时间,流式细胞仪检测受体大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的比例变化。结果预输注供体凋亡脾细胞能显著延长同种异体胰岛移植物存活时间（中位生存时间达31天）,预输注凋亡细胞组CD4^＋CD25^＋T细胞比例明显高于其他各组（P均〈0．05）。结论供体凋亡细胞输注能够诱导同种异体大鼠胰岛移植免疫耐受,CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞可能在其中发挥重要作用。     

1型糖尿病患者外周血中CD4^＋CD25^＋与CD8^＋CD28^-调节性T细胞水平的研究

流式细胞仪检测1型糖尿病（T1DM）患者外周血CD4^＋CD25^＋与CD8^＋CD28^-调节性T细胞的水平,发现其外周血CD4^＋CD25^＋T淋巴细胞水平[（2．02±0．43）％]显著低于2型糖尿病（T2DM）组[（6．79±1．75）％]和健康对照（NC）组[（7．84±1．45）％],而CD8^＋CD28^-调节性T细胞水平三组间无差异。     

支气管哮喘大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的研究支气管哮喘（简称哮喘）大鼠模型支气管肺泡灌洗液（BALF）、血液、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化,及地塞米松对CD4^＋CD25^＋T细胞的影响。方法50只SD大鼠随机分为5组,空白对照（A）组,哮喘（B）组,地塞米松1（C）组、地塞米松2（D）组,地塞米松3（E）组。A组第1天给予腹腔注射生理盐水1ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化。B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原1ml（卵蛋白1mg＋灭活百日咳杆菌9×10。个＋氢氧化铝干粉100mg）混悬液,第15～21天给予1％的卵蛋白雾化30min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0．2mg／kg、1mg／kg、2mg／kg。采用流式细胞仪检测的方法,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响。结果B组BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞表达占CD4^＋T细胞的百分比分别是（42．21±5．62）％、（12．69±2．70）％、（11．15±1．05）％,A组结果分别是（18．76±5．85）％、（6．21±1．73）％、（7．85±2．13）％。B组与A组比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）;C组、D组、E组BALF中CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的百分比表达分别是（10．49±4．03）oA、（13．28±5．12）％、（7．51±5．39）％,显著低于A组和B组,（P〈0．05,P〈0．01）;外周血中,C组（6．03±1．43）％、D组（4．88±0．95）％与A组（6．21±1．73）％比较,差异无统计学意义,E组（3．49士0．62）％与C组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。脾脏中,c组（7．25±1．82）%、D组（8．63±3．18）％与A组（7．85±2．13）％比较,差异无统计学意义,E组（3．38±1．37）％与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一。地塞米松可以抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的表达。BALF内CD4^＋CD25^＋T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞变化可了解肺部情况。     

强直性脊柱炎患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T细胞检测及其意义△

目的检测CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T细胞在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）患者外周血的表达，并分析其与CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的相关性。方法 以21例AS患者外周血为研究组，20例类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者和24名正常人外周血作为对照组，采用三色直接荧光素标记法和多参数流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T细胞、CD4^＋CD25^high细胞及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的比例，同时检测外周血C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）、血沉（ESR）、免疫球蛋白、补体等水平以及HLA—B27并进行相关性分析。结果与正常对照组相比，AS患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T及CD4^＋CD25^＋FOXP3＋T细胞百分率降低（均P〈0．05）。CD4^＋CD25^＋细胞百分率升高（P〈0．05）；CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T细胞与CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞呈正相关（r=0．589，P=0．021），与CRP、ESR、血小板及免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和补体（C3、C4）、BASDAI、HLA-B27等均无明显相关性（均P〉0．05）。AS患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T细胞、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞和CD4＋CD25^highT细胞的百分率与RA患者外周血比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论AS患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T细胞降低，且与CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞呈正相关，提示在调节性T细胞研究中CD127具有替代FOXP3的可能性。     

抗病毒治疗对慢性丙型肝炎CD4^＋CD25^＋调节性T细胞频率和功能的影响

目的研究抗病毒治疗前后慢性丙型肝炎患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）频率和功能的变化。方法筛选HLA—A2阳性慢性丙型肝炎患者31例，给予聚乙二醇化干扰素α-2a（相对分子质量为40000）180μg每周1次皮下注射，联合口服利巴韦林。分别在治疗前和治疗结束随访24周时应用流式细胞仪检测患者CD4^＋CD25^＋ Treg细胞占外周血CD4^＋T细胞的频率，应用液闪计数仪检测其对HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的抑制作用，ELISA法检测细胞培养上清γ干扰素（IFN-γ）水平的变化情况。结果治疗结束随访24周，患者外周血CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（9．6±3．0）％，明显低于治疗前的（11．0±2．3）％（t=2．028，P〈0．05）；持续病毒学应答（SVR）组CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（8．9±2．7）％，明显低于未获得SVR患者组的（10．4±2．3）％（t=3．324，P〈0．01）。抗病毒治疗后CD4^＋CD25^＋ Treg细胞抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。治疗后患者IFN-γ水平为（3959±577）pg／ml，明显高于治疗前的（1965±326）pg／ml（t=16．1，P〈0．01）；获得SVR患者组IFN-γ（6824±568）pg／ml，明显高于未获得SVR患者组的（2219±286）pg／ml（t=29．853，P〈0．001）。结论慢性丙型肝炎患者随着HCV RNA水平的下降，CD4^＋CD25^＋Treg细胞频率降低，抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。     

结核性与恶性胸腔积液中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及相关因子的检测

目的检测结核性胸腔积液及恶性胸腔积液中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布与可溶性白介素-2受体（sIL-2R）及转化生长因子β1（TGF-β1）浓度，并探讨良恶性胸腔积液患者的局部免疫机制。方法47例结核性胸腔积液及34例肺癌并恶性胸腔积液患者于第1次抽液时留取胸腔积液，ELISA法检测sIL-2R及TGF-β1的浓度，Ficoll梯度离心分离单个核细胞，抗体标记后应用流式细胞仪分析CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占淋巴细胞的比例。结果47例结核性胸腔积液与34例肺癌并恶性胸腔积液中C04^＋CD25^＋调节性T细胞占淋巴细胞的比例分别为（8．74＋0．6）％、（21．1±2．3）％，有显著性差异（P〈0．05）；结核性胸腔积液与恶性胸腔积液中sIL-2R浓度分别为（563．2±92．61）ng／ml，（390．12±101．12）ng／ml，有显著性差异（P〈0．05）；恶性胸腔积液中TGF-β1的水平（88．4±16．7mg／L），显著高于结核性胸腔积液组（40．3±3．6mg／L），结核性胸腔积液中sIL-2R、TGF-β1浓度与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占淋巴细胞的比例均无明显相关关系（P〉0．05）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞，sIL-2R及TGF-β1可作为判定结核或恶性胸腔积液的辅助诊断指标。     

Reproducibility of different methods to measure the endothelial function

This study compares the reliability and reproducibility of flow-mediated dilatation (FMD) and peripheral arterial tonometry (PAT) to assess endothelial function. Eighteen volunteers with coronary heart disease underwent simultaneous testing of FMD by means of brachial artery ultrasound scanning and PAT with the EndoPAT 2000. The subjects underwent both tests twice with an interval of 30 minutes and the same protocol was repeated 2 days later. The within-day variability was lower for the FMD measurements than for the PAT measurements (10% versus 18%; p < 0.05). The between-day variability was similar (11%). A significant correlation was found between PAT and FMD (r = 0.57, p < 0.001). The typical errors of measurements for FMD were lower than those for PAT. In conclusion, in this study, FMD demonstrated the best reliability for the within- and between-day and separate day measurements when compared to PAT.     

差之毫厘谬以千里——垂体瘤诊断的专家与"砖家"

"看病找专家,根治疾病"几乎是每一个患者的愿望.但是看到"瘤子"就切并不是一个好主意,相反可能给人带来终生的遗憾.本期发表了王硕等[1]医师"原发性甲状腺功能减退症导致继发性垂体增生31例临床分析"一文.文中谈及甲状腺激素分泌减少反馈性地引起促甲状腺素(TSH)分泌增加和垂体TSH细胞增生易误诊为垂体瘤的问题.报告中31例原发性甲状腺功能减退病例中25例有垂体增大,3例垂体MRI呈现垂体瘤样改变,1例示鞍上扩展.     

Permeability of the small intestine to substances of different molecular weight

The permeability of the rabbit small intestine has been studied by measuring the plasma clearances of water-soluble molecules over the molecular weight range 60-33,000. An inverse relationship has been demonstrated between permeability and molecular weight.The significance of these findings in relation to current concepts of the ;pore hypotheses' is discussed, and the possible physiological and pathological implications are considered.