回医烙灸对兔膝骨关节炎软骨细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的 观察回医烙灸对兔膝骨性关节炎软骨细胞Bcl-2(B-cell lymphomas,B淋巴细胞-2蛋白)和Bax(Bcl-2 AssociatedXprotein,B淋巴细胞-2的相关X蛋白)的表达的影响.方法 将新西兰兔30只,随机分为正常对照组、模型对照组和回医烙灸组,每组各10只.采用Hulth造模方法制备兔膝骨性关节炎模型.回医烙灸组在造模4周后,在膝关节局部行回医烙灸疗法,1次20 min/次,治疗4周.正常对照组和骨关节炎模型组不予干预.3组动物8周后处死,进行标本的大体形态学和光镜检测,Bcl-2、Bax蛋白的表达采用免疫组化方法进行检测.结果 回医烙灸组关节软骨的组织学评分、软骨细胞Bax的表达灰度低于模型组(P＜0.05),软骨细胞Bcl-2的表达灰度高于模型组(P＜0.05).结论 回医烙灸疗法可以调节兔膝骨性关节炎软骨细胞Bcl-2和Bax的表达平衡,从而延缓膝骨性关节炎软骨的退变.     

回医烙灸疗法对大鼠腰椎间盘退变模型软骨细胞凋亡的影响

目的 :观察回医烙灸疗法对大鼠腰椎间盘退变模型软骨细胞凋亡及相关凋亡因子的影响。方法 :将SD大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组、模型对照组和回医烙灸组,每组各10只。采用针刺间盘方法制备大鼠腰椎间盘退变模型。回医烙灸组在造模4周后,在腰椎局部行回医烙灸疗法,每周2次,每次20 min,干预6周。正常对照组、假手术组和模型组不予干预。4组动物干预8周后处死取材,软骨细胞凋亡用TUNEL法检测,Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达采用免疫组化方法进行检测。结果 :回医烙灸组凋亡指数明显低于模型对照组(P0.05);回医烙灸组和正常对照组、假手术组比较,差异无明显统计学意义(P0.05)。回医烙灸组间盘软骨组织Bax和Caspase-3的阳性细胞平均数低于模型组(P0.05),软骨组织Bcl-2的阳性细胞平均数高于模型对照组(P0.05)。结论 :回医烙灸疗法可以减少大鼠腰椎间盘退变模型软骨细胞的凋亡,并可以调节软骨细胞凋亡相关因子的表达,从而延缓腰椎间盘的退变。     

丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨陛关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的探讨丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法将健康Wistar大鼠80只随机分为4组,分别为丹紫康膝组,西药组,模型组,正常组。除正常组外,其他组予以改良Hultll造模法造成大鼠膝骨性关节炎模型,于造模6周后对各组进行干预,干预4周后肉眼观察大鼠膝关节大体形态,抽取关节液检测一氧化氮（NO）含量,TUNEL法检测关节软骨细胞凋亡率。结果肉眼观察下见模型组造模膝关节软骨明显退变,局部溃疡,关节边缘增生,正常组膝关节软骨光滑润泽,丹紫康膝组和西药组可见造模膝关节有新生软骨生成;膝关节滑膜液NO含量正常组较其余3组低（P〈0．05）,丹紫康膝组和西药组NO含量较模型组低（火0．05）;丹紫康膝组和西药组细胞凋亡率明显低于模型组（P〈0．05）,丹紫康膝组、西药组、模型组细胞凋亡率均较正常组高（P〈0．05）。结论丹紫康膝冲剂能降低大鼠膝关节关节液NO含量．从而抑制由N0介导的关节软骨细胞凋亡。     

烙灸疗法通过增加软骨细胞中PI3K和mTOR的表达治疗兔膝骨性关节炎的研究

目的 探明烙灸疗法对兔膝骨性关节炎软骨细胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)和哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)的基因和蛋白质表达水平的影响。方法 将实验动物随机分为3组，空白对照组、模型对照组以及烙灸组，每组各10只。采用Hulth造模方法制备兔膝骨性关节炎模型。烙灸组在造模4周后开始干预，在膝关节局部进行烙灸疗法，每天20 min,每天1次，治疗4周；对照组不予干预。各组动物在实验的8周后处死，通过HE染色观察病例变化；采用Western-blot检测PI3K和mTOR蛋白的表达；采用RT-qPCR方法检测PI3K和mTOR mRNA的表达。结果 烙灸组膝关节软骨的Mankin的评分、软骨细胞中PI3K和mTOR的mRNA和蛋白质表达均高于模型对照组(P<0.05)。结论 烙灸疗法可以提高兔膝骨性关节炎模型中软骨细胞PI3K和mTOR的表达，抑制软骨细胞的过度凋亡，从而减少膝骨关节软骨的退变。     

骨碎补总黄酮对实验性兔膝骨性关节炎软骨及滑膜的影响

目的研究骨碎补总黄酮对兔膝骨性关节炎的治疗效果,探讨其防治骨性关节炎的可行性。方法32只新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组、骨碎补总黄酮组和维固力组。以关节制动法建立兔膝骨性关节炎模型。成模后灌胃给药,8周后镜下观察骨碎补总黄酮对动物模型关节软骨、滑膜组织形态学及基质金属蛋白酶-3表达的影响。结果骨碎补总黄酮组与模型对照组比较滑膜及软骨组织形态学改变明显较轻（P〈0.01）,滑膜、软骨组织中基质金属蛋白酶-3表达减少（P〈0.01）;骨碎补总黄酮组与维固力组相比,各指标间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论骨碎补总黄酮能够减轻兔膝骨性关节炎的软骨退行性变和滑膜炎症,其作用机制可能与调节基质金属蛋白酶-3表达有关。     

六味地黄丸对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的 观察六味地黄丸对兔骨性关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响。方法 将36只日本大耳兔随机分组为正常对照组(A组)，OA模型组(B组)，OA治疗组(C组)。用石膏管型伸直位固定B组及C组24只兔左后腿膝关节，A组不予固定。A、B组每天喂以正常饲料，C组2周后予喂以投药后的混合饲料，8周后制备标本并处死动物。采用原位末端标记(TUNEL)及细胞色素C免疫组化分别观察软骨细胞的凋亡状况。结果 用药组软骨细胞凋亡指数明显低于OA模型组。结论 六味地黄丸能有效抑制细胞色素C的释放，减缓软骨细胞凋亡。     

关节腔注射三氧对兔膝骨性关节炎病理改变的影响

目的通过建立兔膝骨性关节炎的模型,了解膝关节腔注射三氧对骨性关节炎软骨病理改变的影响。方法成年新西兰兔40只随机分为5组,每组8只,即正常对照组（A组）,模型对照组（B组）,20μg／ml三氧治疗组（c组）,40μg／ml三氧治疗组（D组）,60μg／ml三氧治疗组（E组）。采用Videman法对B、c、D、E组家兔进行兔膝骨关节炎模型复制。造模6周后将空气1ml注入B组家兔左膝关节腔内作为对照,将20、40、60μg／ml浓度的三氧1ml分别注入C、D、E组兔左膝关节腔内,每3d1次,治疗2次后,处死动物,观察兔膝关节软骨形态学变化及进行病理积分统计。结果B组肉眼外观及病理显示关节软骨有明显破坏,病理积分较A组明显升高（P〈0．01）,C、D两组病理改变较B组显示关节软骨有所修复,病理积分较B组降低（P〈0．05）,E组与B组比较病理改变无明显变化,病理积分的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论20、40μg／ml浓度的三氧关节腔注射可促进早期兔膝骨性关节炎关节软骨的修复,有利于减轻及阻止骨性关节炎的发展;而60μg／ml浓度三氧关节腔内注射对已损伤的软骨无修复作用。     

回医烙灸对大鼠腰椎间盘退变模型软骨基质的影响

目的:观察回医烙灸疗法对大鼠腰椎间盘退变模型软骨细胞外基质的影响。方法:将SD大鼠40只,随机分为正常对照组、假手术组、模型对照组和回医烙灸组,每组10只。采用针刺间盘方法制备大鼠腰椎间盘退变模型。回医烙灸组在造模4 w后,在腰椎局部行回医烙灸疗法,每周2次,每次20 min,干预6 w。正常对照组、假手术组和模型组不予干预。4组动物干预8 w后处死取材,采用分光光度法检测椎间盘蛋白多糖,II型胶原纤维、MMP-3、TIMP-1蛋白的表达采用免疫组化方法进行检测。结果:回医烙灸组蛋白多糖和II型胶原纤维阳性细胞数明显高于模型对照组(P0.05)。回医烙灸组间盘软骨组织MMP-3的阳性细胞数低于模型对照组(P0.05),软骨组织TIMP-1的阳性细胞数高于模型对照组(P0.05)。结论:回医烙灸疗法可以减少大鼠腰椎间盘退变模型软骨组织基质的降解,并可以调节软骨基质降解相关因子的表达,从而延缓腰椎间盘的退变。     

外膝眼透刺内膝眼温针灸对膝骨性关节炎兔软骨组织Bax、Bcl-2表达的影响*

目的观察外膝眼透刺内膝眼温针灸对膝骨性关节炎兔软骨组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法按随机数字表法将18只新西兰兔随机分为正常对照组（正常组）、膝骨性关节炎组（模型组）和温针内、外膝眼穴组（温针组）。4%木瓜蛋白酶关节腔注射法制作膝骨性关节炎模型。温针组在造模后行内外膝眼穴温针灸治疗20 min，隔天1次，每2 周为1个疗程，中间休息2 d，共治疗4个疗程。模型组和正常组不予任何治疗。RT-qPCR法和Western Blotting法检测软骨组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA和Bax、Bcl-2蛋白表达。结果①温针灸干预后，新西兰兔的精神、食欲、膝关节活动能力等均明显改善。②模型组与正常组比较，膝关节软骨组织Bax mRNA和蛋白表达均显著升高（P<0.001，P<0.01），Bcl-2 mRNA和蛋白表达均明显降低（P<0.001，P<0.001）；温针组与模型组比较，温针组Bax mRNA表达显著降低（P<0.05），Bcl-2 mRNA和蛋白表达均明显升高（P<0.05，P<0.05）。结论温针内、外膝眼穴能下调软骨细胞促凋亡基因Bax 、上调抗凋亡基因Bcl-2 的表达，抑制软骨细胞凋亡通路的信号转导。     

鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞增殖及凋亡调节作用的实验研究

目的观察鹿茸多肽对骨性关节炎细胞增殖和凋亡的保护、调节作用。方法建立兔骨性关节炎模型,体外分离培养软骨细胞,以假手术组细胞为正常对照组细胞,造模组细胞为骨关节炎软骨,分别加入6．25μg／mL鹿茸多肽为低剂量组,加入12．5μg／mL鹿茸多肽为中剂量组,加入25μg／mL鹿茸多肽为高剂量组,通过流式细胞仪检测骨性关节炎细胞增殖及凋亡。结果与正常对照组比较,模型组G0／G1期细胞比例显著降低（P〈0．01）,G2／M和S期细胞比例明显升高（P〈0．05）。鹿茸多肽对骨关节炎软骨细胞周期各时相并无明显的调控作用,可明显降低早期凋亡细胞比例,且有一定的量效关系。结论鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞的早期凋亡有明显抑制作用。     

玻璃酸钠合用姜黄素对兔膝骨关节炎的影响

目的:探讨关节内注射姜黄素加玻璃酸钠对骨关节炎软骨细胞代谢和凋亡的影响。方法:制作兔骨性关节炎模型,随机分成对照组、玻璃酸钠(SH)组、姜黄素合用(SH)组和关节炎(OA)组,每组10只。经过使用姜黄素9mg/(kg.week)合用玻璃酸钠2mg/(kg.week)和玻璃酸钠2mg/(kg.week)和生理盐水0.5ml关节腔注射治疗4周后,采用RT-PCR检测四组的Collagen-typeⅡ(CL-2)、matrix metalloproteinase-9(mmp9)、cyclo-oxygenase-2(cox-2)、Integrin-β1的基因表达情况;采用Tunel法检测软骨细胞的凋亡情况。结果:姜黄素加SH组的CL-2和Integrin-β1的基因表达均比OA组和SH组高(P0.05),cox-2和mmp9的基因表达低(P0.05)。而细胞凋亡实验也证实了这一点,软骨破坏姜黄素加SH组比OA组和SH组轻(P0.05)。结论:玻璃酸钠可以减轻软骨细胞炎症、营养软骨,而合用姜黄素可以协同玻璃酸钠减轻软骨炎症,保护软骨。     

隔物温和灸对膝骨性关节炎家兔软骨细胞及滑膜组织病理学的影响

目的研究隔物温和灸对膝骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)家兔软骨细胞及滑膜组织病理学改变的影响,探讨其治疗膝OA的作用机制。方法以36只家兔作为实验动物,随机分为正常组、模型组、药物组和隔物温和灸组。正常组不予处理,模型组、药物组和隔物温和灸组均采用关节制动的方法建立膝OA模型。模型组造模后不予处理,药物组给予仙灵骨葆胶囊的药粉混入饲料中定量喂饲,隔物温和灸组采用隔物温和灸治疗,观察各组治疗后软骨细胞及滑膜组织病理学的改变。结果在软骨积分方面,隔物温和灸组明显优于药物组(P0.01);在软骨及滑膜组织病理学方面,隔物温和灸组和药物组均能有效减轻膝OA家兔软骨退行性改变及滑膜炎症,抑制软骨细胞的增生及炎性细胞浸润。结论隔物温和灸及仙灵骨宝胶囊均能改善膝OA家兔软骨退行性改变及滑膜炎症,起到治疗膝OA的作用,其作用机制可能与减轻软骨细胞的增生及炎性细胞浸润有关,但以隔物温和灸疗效较显著。     

改良Hulth模型复制膝不同时期骨关节炎的实验研究

目的：通过观察改良Hulth法造模后不同时期兔膝关节的大体和病理特点及对各期血清NO含量和软骨细胞凋亡的检测．研究其复制不同时期骨关节炎的可行性，并探讨骨关节炎的发病机制。方法：取成年新西兰大白兔16只，雌雄各半．随机分组．将其右膝关节作为实验侧，作膝关节前交叉韧带切断、内侧半月板切除，左膝作为对照侧。分别于造模后2，6．10，14周时观察膝关节的大体和组织病理学特点，采用Mankin评分进行评定。检测血清NO含量和软骨细胞凋亡率。结果：对照各组各时间点Mankin评分无统计学差异（P〉0．05），造模各组与对照组，造模各组间Mankin评分有统计学差异（P〈0．01）;正常组和造模2周组与造模6周、10周、14周组血清NO含量有统计学差异（P〈0．01），造模6周、10周及14周组间无统计学差异（P〉O．05）；经x^2检验各时间点软骨细胞凋亡率有统计学差异（P〈0．01）。结论：改良Hulth模型14周内可以成功复制膝不同时期骨关节炎，造模2周即有早期骨关节炎改变，6周为中期，10周为晚期，14周为极晚期骨关节炎改变。血清NO造模6周前急剧升高，后进入平台期。而随着病理分级进展，软骨凋亡率相应增加。     

温针灸对兔膝关节退变模型血清MMP-1和MMP-13水平的影响

目的观察温针灸治疗兔膝关节退变模型前后血清基质金属蛋白酶1、13（MMP-1,MMP-13）及软骨形态的变化,探讨温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理。方法 30只雄性兔随机分为模型组、温针灸组和西药组,每组10只,采用右后肢伸直位固定制作兔膝关节退变模型。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测造模前、治疗前和治疗后兔血清中MMP-1,MMP-13水平,参考彭太平法观察膝关节组织形态学变化。结果治疗2周后,大体和光镜观察模型组膝关节软骨变薄,出现明显的关节软骨损伤,温针灸组可明显改善关节软骨组织学结构。各组治疗前较造模前血清MMP-1、MMP-13的浓度均显著升高（P〈0.05）;治疗两周后,与模型组比较,温针灸组MMP-1、MMP-13水平降低（P〈0.05）,但与西药组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论温针灸能治疗KOA的软骨损伤,可能与降低MMP-1和MMP-13表达有关。     

止痛健骨方对兔膝骨关节炎模型滑膜及软骨修复的影响

目的：观察止痛健骨方对兔膝骨关节炎模型滑膜及软骨修复的影响。方法建立兔膝骨关节模型,将兔随机分为正常对照组,模型对照组,骨刺宁组,止痛健骨低、中、高组共6组,每组6只,止痛健骨低、中、高剂量组分别给予4.48、8.96、17.92 g/kg止痛健骨方灌胃,骨刺宁组给予0.504 g/kg骨刺宁胶囊灌胃,正常对照组、模型对照组给予蒸馏水灌胃,每次10 mL/kg,每日1次,连续给药4周,检测各组兔右膝关节屈曲活动度、关节滑膜厚度及软骨未钙化厚度/钙化厚度,以及膝关节滑膜液炎性细胞,并进行比较。结果实验4周后,模型对照组较正常对照组膝关节屈曲活动度、软骨未钙化厚度/钙化厚度明显减少,关节滑膜厚度、滑膜液炎性细胞明显增加（P＜0.05）。与模型对照组比较,止痛健骨低、中、高剂量组膝关节屈曲活动度、软骨未钙化厚度/钙化厚度均明显增加,关节滑膜厚度、滑膜液炎性细胞减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论止痛健骨方能抑制滑膜增生,增加非钙化软骨厚度,延缓软骨退变,增加关节屈曲活动度,这可能是其治疗膝骨关节炎的作用机制。     

脉冲电磁场对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡及凋亡调控蛋白的影响

目的 探讨脉冲电磁场对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡及凋亡调控蛋白的影响。方法 将24只新西兰大白兔随机分为正常组、模型组和脉冲电磁场组,每组8只。除正常组外,其他两组动物均行右前交叉韧带切断术,术后6周,脉冲电磁场组用低频脉冲电磁场干预,每次40 min, 1次／d,每周5 d,共干预2周。干预结束后,取右股骨内外侧髁软骨进行HE染色（观察软骨全层结构和细胞形态）及Mankin评分、软骨细胞凋亡检测、凋亡调控蛋白（caspase-3和caspase-8）免疫组化检测。取右胫骨平台全层软骨提取总蛋白,采用Western blot检测caspase-3和caspase-8蛋白表达水平。结果 脉冲电磁场组Mankin评分高于正常组（P<0.01）,但低于模型组（P<0.01）。脉冲电磁场组软骨细胞凋亡指数较正常组高（P<0.01）;但低于模型组（P<0.05）。免疫组化及Western blot检测:脉冲电磁场组caspase-3表达水平比正常组升高（P<0.01）,但低于模型组（P<0.01）。脉冲电磁场组caspase-8表达水平比正常组升高（P<0.01）,但与模型组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 脉冲电磁场能通过下调caspase-3表达的机制抑制软骨细胞凋亡,从而抑制兔膝骨关节炎关节软骨退变。     

电子灸治疗仪治疗膝骨关节炎的临床疗效观察60例

目的:观察艾灸治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:选择60例符合条件的膝骨关节炎患者随机分为传统艾灸治疗组和电子灸治疗仪对照组,2组各30例,均连续治疗4 w,3次/w,共12次。分别于治疗前、治疗2 w、治疗4 w,患者膝关节疼痛及功能评定总分WOMAC量表积分变化作为临床观察指标。结果:治疗4 w后2组患者膝关节疼痛WOMAC评分较治疗前均显著降低,治疗组总有效率86.7%、对照组总有效率63.3%,组间WOMAC指数评分差异有统计学意义(P0.05)。结论:传统艾灸可以有效的缓解膝关节疼痛并改善膝关节功能,且疗效优于电子灸治疗仪组,传统艾灸是一种较为有效及理想的治疗膝骨关节炎的方法。     

针灸综合治疗方案对膝关节骨性关节炎的疗效分析

目的观察针灸综合治疗方案对膝关节骨性关节炎的临床效果。方法将108例膝关节骨性关节炎患者随机分为观察组和对照组,每组各54例,对照组采用单纯针刺方法进行治疗,观察组采用温针灸联合电针的综合疗法进行治疗,治疗周期均为4周,治疗结束后对两组疗效进行比较。结果观察组临床总有效率为96.30%,显著高于对照组的79.63%,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论温针灸联合电针综合疗法治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效显著,值得推广。     

骨碎补对兔膝骨关节炎关节软骨细胞凋亡相关因子作用实验研究

目的：采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测方法,观察骨碎补对实验性兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响并进行理论分析。方法：将24只成年新西兰大耳白兔,随机分为6组,空白组6只。模型组6只,治疗组（骨碎补组）6只,对照组（维固力组）6只。兔左后肢伸直位管型石膏固定6周得到兔膝OA的模型。用药4周后,以耳缘静脉空气栓塞法处死各组动物取下每只家兔左后肢股骨髁,取下的关节软骨用于RT—PCR检测。采用SPSS13．0软件包对RT-PCR结果进行方差分析和Pearson相关分析,P〈0．05有统计学意义。结果：MMP3mRNA、BAXmRNA：模型组较空白组的表达水平明显上升,差异有显著性（P〈0．05）;对照组较模型组的表达水平有所下降,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较模型组的表达水平明显下降,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较对照组的表达差异无显著性。bcl-2mRNA：模型组较空白组的表达水平明显下降,差异有显著性（P〈0．05）;对照组较模型组的表达水平有所上升,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较模型组的表达水平明显上升,差异有显著性（P〈0．05）;治疗组较对照组的表达差异无显著性。结论：单味中药骨碎补对防治OA有重要作用。