乙型肝炎病毒X蛋白单克隆抗体的制备及肝癌组织中相应抗原…

应用基因工程技术制备的１７０００乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ蛋白（ＨＢｘＡｇ）免疫动，成功地备了抗－ＨＢｘ单克隆抗体，以此抗体对原发性肝癌（ＨＣＣ）组织，慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）肝组织行相应抗原检测，并同时进行乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢｃＡｇ）的检测。在ＨＣＣ标本中ＨＢｘＡｇ在癌内及癌周肝组织中的阳性率分别为５６％及４８％，ＨＢｓＡｇ为１６％及７４％。ＨＢｃＡｇ仅见于癌     

丙型肝炎病毒感染者肝组织中丙型肝炎病毒RNA原位杂交研究

应用原位杂交（ＩＳＨ）方法检测了１２例丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者肝组织中ＨＣＶ ＲＮＡ，以研究丙肝病毒的定位及其与肝细胞病变的关系。结果：１２例患者中９例（７５％）阳性，阳性信号主要位于肝细胞浆中；切片经ＲＮＡ酶消化后进行杂交，阳性信号消失但ＤＮＡ酶预处理对结果无明显影响；阳性细胞可位于炎症坏死灶附近，但也可与炎症反应无明显关系。结果表明原位杂交方法对研究ＨＣＶ生物学特性及致病机制有一定价值。     

原发性肝癌和乙型,丙型肝炎病毒感染的相关性

作者收集了６４例肝癌患者的血标本，分别进行了乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒的血清学检测，测得结果表明原发性肝癌病人与乙型、丙型肝炎病毒及二者混合感染有着密切的关系。     

丙型肝炎病毒感染与原发性肝癌的关系——不同人群血清HCV RNA的调查

本文以聚合酶链反应(PCR)对重庆地区各种慢性肝病(CLD,n=182)和献血员(n=35)血清HCV RNA的存在状况进行了初步调查。结果发现:①HCV RNA在原发性肝癌(PHC)、肝硬化(LC)、慢性肝炎(CH)及献血员中的检出率分别为36.6％(34/93)、31.7％(20/63)、15.4％(4/26)和2.9％(1/35);②多数HCV RNA阳性CLD(41/58)与HBsAg或HBV DNA双阳性,单纯HCV RNA阳性见于15.1％(14/93)PHC、3.2％(2/63)LC和3.8％(1/26)CH。此资料提示约20％PHC可能与HCV-HBV双重感染有关,约15％PHC可能与单独HCV感染有关。     

肝硬变和肝癌组织内乙型和丙型肝炎病毒核酸的表达

肝硬变和肝癌组织内乙型和丙型肝炎病毒核酸的表达王春杰，王文亮，王伯潭我们应用地高辛贰元－１１－ｄＵＴＰ标记ＨＣＶ５＇非编码区（５＇－ＮＣ）ｃＤＮＡ及ＨＢＶＸ基因为探针，采用原位分子杂交法对５０例肝硬变和４１例肝细胞癌进行ＨＣＶＲＮＡ及ＨＢＶＤＮＡ定位...     

原发性肝癌患者及慢性乙肝病毒携带者肝组织中乙型肝炎病毒X基因的变异

目的:探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因及其变异与原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生、发展的关系。方法:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法,检测22例乙型肝炎表面抗原(hepatitis Bsurface antigen,HBsAg)阳性的HCC患者及15例慢性乙肝病毒携带者(chronic asymptomatic carrier,CAC)患者肝组织中HBVX基因,并对PCR产物进行基因测序,同时检测5例无HBV携带者正常肝脏组织中HBV X基因。结果:22例HCC患者癌组织及15例CAC患者肝组织中HBVX基因检出率分别为68.18%和46.67%,5例正常肝脏组织中均未检测到HBVX基因,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组织及HBV携带者肝组织中HBV X基因检出率差异无统计学意义(P>0.05)。肝癌组织及携带者肝组织中HBV X基因发生1 762T/1 764A双突变率分别为93.33%和2/7,肝癌组织中双突变率高于携带者肝组织(P=0.004 3),未发现1 762T及1 764A单独发生突变。结论:HCC患者肝组织中HBV X基因检出率高,肝癌组织中发生1762T/1764A双突变的频率高,HBV X基因及1762T/1764A双突变与HCC的发生可能有重要关系。     

丙型肝炎抗原在肝炎、肝癌组织中的表达

肝细胞癌手术标本３０例及肝炎肝穿刺标本１５例，作丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）免疫组化研究。第一抗体为ＨＣＶ核心抗原单克隆抗体；检测系统为ＡＢＰＡＰ法。结果肝癌组５例（１７％）、肝炎组３例（２０％）阳性；总阳性率１８％。阳性信号为散在性，胞浆型。肝癌组阳性的５例均见癌旁组织阳性，其中３例同时有散在性癌细胞表达。     

肝癌发生中乙肝病毒感染与黄曲霉毒素暴露的作用

目的研究肝癌发生中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与黄曲霉毒素（ＡＦ）的作用。方法在肝癌高发区,对７３７例乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性和６９９例ＨＢｓＡｇ阴性人群进行了１０年前瞻性研究,同时按１∶５的病例对照模式,随机对队列中３０例肝癌和相应的１５０例非肝癌人群进行血清中黄曲霉毒素Ｂ１白蛋白加成物（ＡＦＢ１Ａｌｂ）测定。结果（１）ＨＢｓＡｇ阳性组平均年肝癌发生率为８２４．１３／１０万,明显高于对照组的７０．９７／１０万,相对危险度（ＲＲ）为１１６１,其他肿瘤发病率两组间差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。（２）肝癌组人群血清中ＡＦＢ１Ａｌｂ阳性率为７６．７％,明显高于对照组的４８．７％,比值比（ＯＲ）为３４７,肝癌组人群血清中ＡＦＢ１Ａｌｂ的浓度也明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论ＨＢＶ感染及ＡＦ暴露是肝癌发生的重要病因因素,两者可能具有协同致癌作用     

B1细胞与乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒的感染

病毒性肝炎的发病机制迄今为止尚未完全明确,乙型肝炎病毒(HBV)及丙型肝炎病毒(HCV)所致肝炎可能是肝脏细胞免疫防御反应病毒入侵的结果。B1细胞是新近认识的一种B细胞亚群,CD5分子是其特征性分子标志。CD5+B1细胞是机体防御肝炎病毒入侵的重要天然免疫细胞。CD5+B1细胞与机体内HBV感染的慢性化密切相关。CD81与CD5间通过分子串话机制直接参与HCV对宿主细胞的感染。     

肝癌患者肝组织中丙型肝炎病毒的基因分型

用逆转录－聚合酶链反应检测了４２例肝细胞癌患者肝组织中的丙型肝炎病毒ＲＮＡ，对１８例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用ＨＣＶ非结构区－５（ＮＳ５区）型特异性引物进一步做了ＰＣＲ分型。     

424例不同人群血清抗－HCV的调查研究

用ＥＩＡ法检测４２４例患者血清抗－ＨＣＶ．结果表明，云南的肝病和非肝病患者ＨＣＶ感染率不低．在肝病中以慢活肝、重肝和肝硬化感染率高，肝癌感染率也不低．这提示ＨＣＶ感染在这几种肝病的发病中有一定作用．本资料也表明在肝病患者中ＨＣＶ感染似无性别差异，感染率随年龄增长而呈递增趋势，以５０岁以上ＨＣＶ感染率最高。因此云南省丙肝的研究和防治值得重视．     

慢性乙型肝炎合并肝癌患者树突状细胞负载乙型肝炎病毒抗原后表型和功能的研究

目的研究慢性乙肝合并肝细胞癌(HCC)患者外周血髓样树突状细胞(mDC)负载乙型肝炎病毒(HBV)抗原后表型和功能的变化。方法用成分血分离机采集21例肝细胞癌患者和4名健康人的外周血单核细胞(PBMC),用无血清AIMV培养基加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)和白细胞介素(IL)4等因子诱导mDC分化、发育和成熟,同时加入HBcAg或HBsAg致敏mDC,通过流式细胞仪分析mDC表面分子的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测mDC培养上清中IL12、IL10的含量,通过自体混合淋巴细胞反应(AMLR)比较抗原致敏后mDC刺激淋巴细胞增殖的能力。结果在肝细胞癌患者中,(1)经HBcAg致敏的mDC表面分子CD80、CD86、CD40、HLADR的表达率(55%±26%、80%±13%、70%±13%、73%±24%)明显高于无抗原致敏组mDC(29%±25%、35%±18%、44%±26%、45%±23%,P<005);经HBsAg致敏的mDC仅HLADR的表达率(63%±15%)高于无抗原致敏组(45%±23%,P<005),其他表面分子差异无统计学意义。(2)在AMLR中经HBV抗原致敏的mDC刺激淋巴细胞增殖的能力明显高于无抗原致敏组(P<005),而且HBcAg的致敏效果优于HBsAg的致敏效果(P<005)。(3)经HBcAg致敏的mDC分泌IL10和IL12的量(236pg/ml±95pg/ml,733pg/ml±212pg/ml)明显高于经HBsAg致敏的mDC(35pg/ml±9pg/ml,135pg/ml±63p     

EB病毒转化的丙型肝炎病人外周血B淋巴细胞中丙型肝炎Ⅱ型？…

目的 观察丙型肝炎病人外周血Ｂ细胞长期存活状态下其中是否仍有丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）存在。方法 用ＥＢ病毒感染并使ＨＣＶ阳性外周血Ｂ细胞转化,获得含ＨＣＶ的外周血永生化Ｂ细胞（ＬＣＬ）。而后,每月应用套式ＲＴ－ＰＣＲ检测一次培养细胞和上清中的ＨＣＶ－ＲＮＡ,并用酶切法进行ＨＣＶ基因分型,电镜和免疫电镜观察ＨＣＶ在该细胞中存在的部位及其形态结构特征。结果 经连续１年检测,ＨＣＶ在传代细胞中持续存在,培     

丙肝病毒核心抗原的检测在诊断丙肝中的意义

目的：通过分别检测丙肝病毒抗体（HCV-Ab）、丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）和定量检测HCV-RNA,探究丙肝病毒核心抗原检测对于丙型肝炎诊断的意义。方法对36例丙肝抗体阳性患者和120例丙肝抗体阴性患者同时检测HCV-Ab、HCV-cAg和HCV-RNA。丙肝抗体检测采用间接ELISA法,丙肝核心抗原检测采用双抗体夹心ELISA法,丙肝HCV-RNA检测采用荧光PCR法定量检测。结果36例丙肝抗体阳性组中,HCV-cAg阳性28例,HCV-RNA阳性25例。120例丙肝抗体阴性的门诊肝炎患者中HCV-cAg阳性有2例,HCV-RNA阳性有1例。结论 HCV-cAg检测可以缩短HCV抗体检测窗口期,特异性高,操作简便,可将二者联合起来,提高丙型肝炎病毒的检出率及准确度。     

戊型肝炎重叠乙型肝炎感染的研究

目的探讨戊型肝炎（HEY）重叠乙型肝炎感染的状况及戊型肝炎病毒对乙肝患者的影响。采用RT-PCR检测HEV-RNA,用荧光定量PCR检测HEV与HBV重叠感染组（Ⅲ组）和单纯HBV感染组（Ⅰ组）的HBV DNA含量,比较HEV对HBV复制有无影响,检测三组病人临床症状和体征的差异,并对他们预后时间作了比较。Ⅲ组与Ⅰ组HBV DNA含量基本一致,ALB、GGT在三组病人中均无显著性差异。ALT、AST、TBIL及一部分临床症状、体征在三组病人间有显著性差异。HEV对HBV的复制无影响．但HEV感染会加重乙肝患者肝脏损害和临床症状,并可推测HEV对乙型肝炎发展可能有促进作用。     

实时荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒

目的探讨实时荧光定量PCR（FQ—PCR）技术检测丙型肝炎病毒（HCV）RNA载量与抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶（ALT）异常的相关性。方法用FQ—PCR检测115份疑似HCV感染的病人血清HCV—RNA，ELISA法检测抗-HCV，全自动生化分析仪测定ALT。结果以80拷贝／ml血清为标准，115份标本中HCV—RNA阳性率为54．8％（63／115）；抗-HCV阳性率为53．9％（62／115）；ALT异常率为40．9％（47/115）。HCV—RNA载量与抗-HCV（＋）例数呈正相关（r=0．986，P〈0．01）。HCV—RNA载量与ALT异常例数（r=0．94，P〈0．01）、含量（r=0．624，P〈0．01）呈正相关。结论HCV—RNA载量升高，抗-HCV阳性率相应增加，ALT高于正常值（40U／L）的异常率和浓度也增高，均呈正相关。FQ—PCR法可作为临床检测丙型肝炎的确诊方法之一。