去白细胞和富白细胞富血小板血浆对软骨细胞增殖迁移的作用

目的探讨去白细胞富血小板血浆(P-PRP)和富白细胞富血小板血浆(L-PRP)对软骨细胞增殖和迁移的作用,为临床合理使用富血小板血浆治疗骨关节炎提供依据。方法 2015年6月至8月,上海交通大学附属第六人民医院骨科共招募20名健康成年献血志愿者,随机数法将其分为两组后分别采集全血制备P-PRP和L-PRP,分别为P-PRP组和L-PRP组。在测定P-PRP和L-PRP中的白细胞、血小板、血小板源性生长因子AB(PDGF-AB)和转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度后,使用其处理人软骨细胞。通过CCK-8实验和Transwell实验分析两者对软骨细胞增殖和迁移的作用。P-PRP和L-PRP之间细胞和细胞因子浓度的差异使用分独立样本t检验分析;胎牛血清(FBS)、P-PRP和L-PRP之间对软骨细胞增殖和迁移作用的差异使用单因素方差分析及Bonferroni事后检验分析。结果 P-PRP组和L-PRP组中的血小板、PDGF-AB和TGF-β1浓度差异无统计学意义,但是两组之间白细胞、IL-1β和TNF-α浓度的差异则有统计学意义(白细胞浓度:t=8.095,P0.01;IL-1β浓度:t=5.342,P0.01;TNF-α浓度:t=5.297,P0.01),均以L-PRP组为高。单因素方差分析提示,FBS组、P-PRP组和L-PRP组之间对软骨细胞增殖和迁移的影响有统计学意义(增殖:F=29.37,P0.01;迁移:F=87.54,P0.01);而Bonferroni事后检验则进一步提示,虽然与FBS相比,P-PRP和L-PRP对软骨细胞增殖和迁移均有促进作用(P-PRP组与FBS相比:增殖P0.001,迁移P0.01;L-PRP组与FBS相比:增殖P=0.010,迁移P0.01),但是两组之间对软骨细胞增殖和迁移作用的差异有统计学意义(增殖P=0.005,迁移P=0.011),P-PRP的效果优于L-PRP。结论 L-PRP中的白细胞可以通过分泌炎症因子对其治疗骨关节炎的疗效产生不利影响。白细胞和炎症因子浓度较低的P-PRP可能更适用于骨关节炎的临床治疗。     

富血小板血浆制备套装的评估研究

目的通过分析富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)中血小板、白细胞和生长因子的浓度,计算回收率和富集系数,并做相关性分析,探讨PRP制备套装的实用性和稳定性。方法取30例符合纳入标准的自愿者自愿捐赠的外周血各40mL,应用山东威高集团医用高分子制品股份有限公司的PRP制备套装制备PRP各4mL。全自动血液分析仪计数全血和PRP中血小板和白细胞浓度,并计算血小板或白细胞回收率及富集系数;并分别测定男、女自愿者血小板及白细胞浓度。ELISA法定量分析激活后全血及PRP中PDGF、TGF-β、VEGF的浓度。结果全血和PRP中血小板浓度分别为(131.40±29.44)×109/L和(819.47±136.32)×109/L,比较差异有统计学意义(t=—27.020,P=0.000);PRP中血小板回收率为60.85%±8.97%,富集系数为6.40±1.06。全血和PRP中白细胞浓度分别为(5.57±1.91)×1012/L和(32.20±10.42)×1012/L,比较差异有统计学意义(t=—13.780,P=0.000);PRP中白细胞回收率为58.30%±19.24%,富集系数为6.10±1.93。PRP中血小板浓度和白细胞浓度分别与全血中血小板浓度(r=0.652,P=0.000)和白细胞浓度(r=0.460,P=0.011)成正相关。男性组和女性组PRP中血小板浓度和白细胞浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。PRP中PDGF、TGF-β、VEGF浓度分别为(698.15±64.48)、(681.36±65.90)、(1071.55±106.04)ng/mL,是全血的(5.67±1.18)、(6.99±0.61)、(5.74±0.83)倍。PRP中PDGF浓度(r=0.832,P=0.020)、TGF-β浓度(r=0.835,P=0.019)、VEGF浓度(r=0.824,P=0.023)均与PRP中血小板浓度成正相关。结论 PRP制备套装可以稳定地制备出富含高浓度血小板、白细胞和生长因子的PRP。     

不同比例激活富血小板血浆对其生长因子浓度及人骨髓基质干细胞增殖的影响

目的 确定激活剂凝血酶与富血小板血浆(PRP)混合的最适比例,并探讨凝血酶与PRP中血小板衍生生长因子.AB(PDGF.AB)和转化生长因子-β(TGF-β)对人骨髓基质干细胞(hBMSCs)增殖的联合作用.方法 按1000 U凝血酶溶于1 mL质量百分比为10%的CaCl2配制激活剂.按PRP与激活剂混合比例为1:1、5:1、10:1、20:1、40:1分为A、B、C、D、E 5组.ELISA法测定各组0、1、8、24、120 h后PRP凝胶中PDGF-AB、TGF-β1的浓度;MTT法评价各组PRP凝胶上清对hBMSCs增殖的影响.结果 PRP与凝血酶混合后,PDGF-AB、TGF-β1浓度立即升高,在激活1 h后达到高峰.B、C、D组PRP凝胶中PDGF-AB、TGF-β1的浓度最高,并明显促进hBMSCs的增殖;而A组则抑制hBMSCs的增殖.结论 PRP对hBMSCs增殖的作用与其所含有PDGF-AB、TGF-β1存在浓度依赖性,而凝血酶可能在一定浓度范尉内主要通过对PRP中生长因子浓度的调控来影响hBMSCs的增殖,但是当凝血酶浓度过高时则抑制hBMSCs的增殖.     

高迁移率族蛋白1在肠道病毒71型手足口病患者中的表达及临床价值

目的:分析不同分期肠道病毒71型(EV71)手足口病(HFMD)患儿高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平的表达变化,研究HMGB1在HFMD重症化中的临床价值及其相关作用机制。方法:将2018年5月至2019年12月西安市儿童医院感染科收治住院的EV71型HFMD患儿共130例纳入研究(研究组),其中普通型90例(轻症组)、重症40例(重症组)。以儿保科同期体检的50例健康儿童纳入对照组,采用Real time-PCR检测各组儿童外周血单核细胞HMGB1 mRNA表达水平,同时用ELISA方法检测血浆HMGB1和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)及白细胞介素-6(IL-6)水平,比较血浆高水平HMGB1和低水平HMGB1患儿重症发生率并分析HMGB1与细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-6(IL-6)间的相关性。结果:HFMD轻症组和重症组患儿和对照组HMGB1 mRNA表达水平和血浆HMGB1含量差异有统计学意义(F=54.629、P<0.001,F=127.924、P<0.001)。受试者工作特征曲线提示,当HMGB1为13090 pg/ml时约登指数最大,对应的敏感度和特异度分别为80.9%和73.5%。高HMGB1患儿重症发生率(44.6%、33/74)显著高于低HMGB1患儿(12.5%、7/56),差异有统计学意义(χ^(2)=26.986、P<0.001)。三组研究对象TNF-α(F=11.284、P<0.001)、TGF-β(F=57.346、P<0.001)及IL-6(F=45.362、P<0.001)差异均有统计学意义,重症组较轻症组患儿升高更为显著(TNF-α:t=7.503、P=0.035;TGF-β:t=9.307、P=0.017;IL-6:t=25.618、P<0.001)。入组HFMD患儿血浆中HMGB1含量与TNF-α、TGF-β及IL-6水平均呈正相关(r=0.642、0.775、0.825,P均<0.001)。结论:HFMD患儿HMGB1水平升高,以重症患儿HMGB1水平升高更显著;HMGB1可能通过调控IL-6、TGF-β和TNF-α等细胞因子参与手足口病重症的发生、发展过程。     

T辅助细胞分泌的细胞因子在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨T辅助细胞(Th)分泌的细胞因子在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义,为食管癌患者寻求合理有效的治疗方案提供理论依据。方法将56例食管癌患者行食管癌切除术后的食管鳞癌标本分成两组,A组:28例,为级和级食管鳞癌标本;B组:28例,为级和级食管鳞癌标本;6例食管炎患者活检组织标本作为对照。检测肿瘤组织的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素10(IL-10)的阳性表达情况。结果A组和B组TNF-α、TGF-β和IL-10阳性表达率均较对照组高(P<0.01);A组TNF-α较B组高,TGF-β和IL-10较B组低(P<0.01)。TNF-α阳性表达率与TGF-β和IL-10的阳性表达率呈负相关(P<0.01),TGF-β阳性表达率与IL-10呈正相关(P<0.01)。生存期<3年患者的TNF-α阳性表达率较生存期>3年患者的阳性表达率低(F=36.25,P<0.01),生存期<3年患者TGF-β和IL-10阳性表达率较生存期>3年患者的阳性表达率高(F=29.29,26.69;P<0.01)。结论食管鳞癌组织通过改变肿瘤组织局部T辅助细胞因子的分泌,破坏了免疫系统的平衡状态,从而使肿瘤组织逃避机体的免疫攻击,并有利于其侵入周围组织。     

前列腺液中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2浓度变化及临床意义

目的 探讨慢性前列腺炎患者前列腺液中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2的浓度变化与慢性前列腺炎类型、发病机制、症状和前列腺液白细胞计数的关系.方法 以Meares-Stamey法行尿液、前列腺按摩液(EPS)细菌培养,结合前列腺液常规检查和NIH-CPSI评分,将100例慢性前列腺炎患者分为细菌组(Ⅱ型11例)、非细菌组(Ⅲa型66例)、前列腺痛组(Ⅲb型23例).放射免疫法测定患者和20例正常对照者前列腺液中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2含量,比较结果并进行相关分析.结果 Ⅱ型前列腺炎患者EPS中IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2检测值明显高于Ⅲa型、Ⅲb型及对照组(P＜0.01),Ⅲa型明显高于Ⅲb型及对照组(P＜0.05),Ⅲb型与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).前列腺炎患者IL-1β与TNF-α、PGE2水平成正相关(r=0.563,r=0.826;P＜0.01).EPS中白细胞计数与IL-8水平成正相关(r=0.547,P＜0.01),与IL-1β、TNF-α、PGE2水平无相关性;IL-1β、PGE2水平与NIH-CPSI疼痛不适症状评分成正相关(r=0.506,P＜0.01);IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2水平与NIH-CPSI评分无相关性(P＞0.05).结论 慢性前列腺炎患者前列腺液IL-1β、IL-8、TNF-α、PGE2表达增高,并参与前列腺的炎症反应,其水平可作为慢性前列腺炎的诊断依据之一,对慢性前列腺炎分型可能有一定临床意义.     

泡球蚴囊液对大鼠肝星状细胞TGF-β1、IL-6及TNF-α表达的影响

目的观察泡球蚴囊液对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)中转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,以初步揭示泡型肝包虫病免疫调节作用的潜在机理。方法以泡球蚴囊液中蛋白成分的浓度代表囊液浓度,分别以0、0.01、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.9、1.7、3.4、6.8及13.5 mg/m L的泡球蚴囊液干预大鼠HSC-T6细胞,作用24 h后收集各组细胞上清,采用酶联免疫吸附法检测上清中TGF-β1、IL-6及TNF-α的浓度。结果以不同浓度泡球蚴囊液(0~13.5 mg/m L)干预后,HSC-T6细胞培养液上清中的TGF-β1浓度几乎不变,各浓度组间两两比较差异均无统计学意义(P0.05)。当泡球蚴囊液浓度≤3.4 mg/m L时,上清中IL-6的浓度趋于平稳,各浓度组间两两比较差异均无统计学意义(P0.05);当泡球蚴囊液浓度为6.8和13.5 mg/m L时,IL-6浓度较0 mg/m L组均升高,差异均有统计学意义(P0.01)。当泡球蚴囊液浓度≤0.2 mg/m L时,上清中的TNF-α浓度趋于平稳,各浓度组间两两比较差异均无统计学意义(P0.05);当泡球蚴囊液浓度为0.4 mg/m L时,TNF-α浓度达到最大,为0 mg/m L组的3.53倍(P0.05);此后随浓度增高TNF-α浓度又逐渐降低,但仍高于0 mg/m L组(P0.05)。结论 IL-6和TNF-α可能在肝星状细胞介导的泡型肝包虫病的纤维化和组织损伤中扮演重要角色,而TGF-β1的作用尚不确定。     

慢性前列腺炎组织中IL-1β、TNF-α和NGF的表达

目的 探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和神经生长因子(NGF)在慢性前列腺炎(CP)发病机制中的作用.方法 162份前列腺标奉取材于周围带,分别进行病理观察及IL-1β、TNF-α和NGF免疫组化分析.结果 31.5%(51/162)的组织病理呈CP改变,其中轻度灶性间质炎44例,轻度灶性间质伴腺体周围炎5例,轻度灶性腺体周围炎2例.IL-1β、TNF-α和NGF在前列腺间质及上皮细胞中均有表达,在CP标本中的表达显著增加(P<0.01).IL-1β和TNF-α之间的表达(r=0.797,P<0.01)、NGF和IL-1β(r=0.674,P<0.01)及TNF-α之间的表达(r=0.714,P<0.01)均存在正相关.结论 CP的发病机制中可能存在神经免疫调节的参与,IL-1β、TNF-α和NGF可能参与了CP的神经免疫调节.     

Wnt/β连环蛋白信号在人真皮成纤维细胞表型转化中的作用及机制

目的 了解Wnt/β连环蛋白信号在人正常真皮Fb向肌成纤维细胞(MFb)表型转化中的作用及机制.方法 采用酶消化法分离培养人正常皮肤真皮Fb.(1)实验1.按随机数字表法将细胞分为4组:对照组,采用无血清DMEM培养液(以下简称培养液)培养;TGF-β1组,用含10 ng/mL重组人TGF-β1(浓度下同)的培养液培养;Wnt3a组,用含150 ng/mL重组人Wnt3a(浓度下同)的培养液培养;TGF-β1+Wnt3a组,用含重组人TGF-β1和重组人Wnt3a的培养液培养.48 h后,分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法,检测Fb β连环蛋白和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表达水平.(2)实验2.按照随机数字表法将细胞分为4组:对照组、TGF-β1组,处理方法均同实验1;SB415286(糖原合酶激酶3β阻断剂)组,用含10 μmol/L SB415286(浓度下同)的培养液培养;TGF-β1+ SB415286组,用含重组人TGF-β1和SB415286的培养液培养.48 h后,分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测Fb α-SMA的mRNA和蛋白表达水平;用免疫荧光细胞化学法检测α-SMA阳性表达情况.各项检测重复3次,对数据进行方差分析及LSD-t检验.结果 (1)实验1.①β连环蛋白的mRNA表达水平:对照组、TGF-β1组、Wnt3a组和TGF-β1+Wnt3a组Fb组间比较,差异无统计学意义(F=0.302,P=0.823).②β连环蛋白的蛋白表达水平:4组比较,差异有统计学意义(F=16.713,P=0.001).与对照组表达水平(0.34±0.11)相比,TGF-β1组、Wnt3a组均显著上调(0.73±0.12、0.82±0.17,t值分别为3.028、3.727,P＜0.05或P＜0.01).TGF-β1+Wnt3a组(1.23±0.21)显著高于其余3组(t值分别为6.911、3.883、3.184,P值均小于0.01).③α-SMA mRNA表达水平:4组比较,差异有统计学意义(F=31.830,P=0.001);与对照组相比,TGF-β1组显著上调,Wnt3a组下调(t值分别为6.759、2.535,P＜0.05或P＜0.01);TGF-β1+Wnt3a组低于TGF-β1组(t=4.532,P＜0.01).④α-SMA蛋白表达水平:对照组、TGF-β1组、Wnt3a组、TGF-β1+ Wnt3a组分别为0.83±0.17、1.43±0.20、0.53±0.12、0.89±0.14(F=16.597,P=0.001).与对照组相比,TGF-β1组显著上调,Wnt3a组下调(t值分别为4.582、2.291,P＜0.05或P ＜0.01);TGF-β1 +Wnt3a组低于TGF-β1组(t =4.123,P＜0.01).(2)实验2.①α-SMA mRNA表达水平:4组比较,差异有统计学意义(F=34.101,P=0.001).SB415286组明显低于对照组(t =2.511,P＜0.05),TGF-β1+SB415286组明显低于TGF-β1组(t=3.587,P＜0.01).②α-SMA蛋白表达水平:4组细胞比较,差异有统计学意义(F =11.381,P=0.003).SB415286组显著低于对照组(t=2.364,P＜0.05),TGF-β1+ SB415286组低于TGF-β1组(t=2.556,P＜0.05).③免疫荧光细胞化学法检测显示,对照组Fb α-SMA表达微弱;TGF-β1组α-SMA表达较对照组显著增强(t =11.198,P＜0.01);SB415286组表达较对照组减少,TGF-β1+ SB415286组表达较TGF-β1组显著减少(t=5.902,P＜0.01).结论 Wnt/β连环蛋白信号可能参与Fb细胞表型转化,并且对TGF-β1所介导的促转化效应起负性调控作用.     

瑞芬太尼对大鼠心肌缺血再灌注时血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度的影响

目的 探讨瑞芬太尼对大鼠心肌缺血再灌注时血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)浓度的影响.方法 雄性SD大鼠32只,体重200～250 g,随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IP组)和瑞芬太尼组(R组),每组8只.I/R组阻断冠状动脉左前降支(LAD)30 min,开放120 min;IP组阻断LAD 5 min,开放10 min,阻断30 min,开放120 min;R组静脉输注瑞芬太尼0.5 μg·kg-1·min-1 20 min,阻断LAD 30 min,开放120 min,此期间静脉输注100 μg/L瑞芬太尼,速率0.5 μg·kg-1·min-1.分别于再灌注120 min取颈内静脉血样,并取左心室心肌组织.ELISA法测定血清TNF-α、IL-Iβ及IL-6浓度,电镜下观察心肌细胞超微结构.结果 与S组比较,其余3组血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度升高(P＜0.01);与I/R组比较,IP组和R组血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均降低(P＜0.01);与IP组比较,R组血清TNF-α和IL-1β浓度降低(P＜0.05).R组和IP组心肌细胞损伤程度轻于I/R组.结论 瑞芬太尼可通过降低血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

两种椎管内药物注射疗法对腰椎间盘突出症患者血清炎性因子的影响

目的观察两种椎管内药物注射疗法对腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)患者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法将120例LDH患者随机分为脊柱微创介入组和骶管封闭组各60例,比较两组JOA、VAS及ODI评分和血清TNF-α、IL-1β和IL-6含量变化。结果治疗后两组JOA评分较治疗前显著提高,VAS评分、ODI评分较治疗前显著下降,且脊柱微创介入组疗效优于骶管封闭组(P0.05)。两组血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均较治疗前明显下降(P0.01),且微创介入组的三项指标浓度均较骶管封闭组显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论两种椎管内药物注射疗法治疗LDH均可取得较好疗效,其可能的机制与降低血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度,抑制神经根周围炎症反应有关。     

肾综合征出血热患者多种免疫促炎因子及抗炎因子变化及其作用

目的探讨肾综合征出血热（HFRS）患者急性期（包括发热期、低血压休克期、少尿期）与恢复期促炎因子和抗炎因子的变化及其作用。 方法检测2016年4月至2017年6月哈尔滨医科大学第四附属医院和黑龙江省农垦红兴隆管理局中心医院收治的30例确诊为HFRS急性期和恢复期患者血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-6（IL-6）和抗炎因子转化生长因子-β1（TGF-β1）、白细胞介素-10（IL-10）的水平,同期检测患者的胱抑素C（Cys-C）、肌酐（Cr）、乳酸脱氢酶（LDH）以及部分凝血活酶时间（APTT）等指标。另选同期13名健康志愿者作对照组,检测TNF-α、IFN-γ、IL-6、TGF-β1和IL-10水平。应用SAS 9.3国际标准统计学编程软件对结果进行分析。 结果HFRS患者急性期IFN-γ（χ²= 4.273、P= 0.0336）、TNF-α（χ²= 16.3562、P < 0.0001）、IL-6（χ²= 9.752、P = 0.0018）和IL-10（χ²= 6.3352、P= 0.0118）水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义。HFRS患者急性期TGF-β1水平显著低于对照组,差异有统计学意义（χ²= 7.822、P= 0.0056）。HFRS患者恢复期TGF-β1水平与对照组接近或略低,差异无统计学意义（χ²= 3.000、P = 0.0833）。HFRS患者发病不同时期Cys-C、Cr、LDH和APTT等指标均于急性期升高,于恢复期下降,与IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-10变化趋势一致。 结论HFRS急性期时IFN-γ、TNF-α和IL-6等促炎因子分泌增加,主要因CD4⁺CD25⁺FoxP3 Treg细胞（调节性T细胞）产生的抗炎因子TGF-β1分泌不足,细胞因子失衡是导致机体免疫病理损伤的重要机制。     

肝移植术病人围术期中性粒细胞Toll样受体2表达与术后SIRS的关系

目的 研究肝移植术病人围术期中性粒细胞Toll样受体2(TLR2)表达与术后全身炎性反应综合征(SIRS)的关系.方法 择期行肝移植术的终末期肝病病人20例,年龄33～58岁,体重52～73 kg,心功能Ⅱ或Ⅲ级,ASAⅢ或Ⅳ级.于麻醉诱导前(T1)、无肝期25 min(T2)、新肝期3 h(T3)、新肝期24 h(T4)时,中心静脉采血样,采用流式细胞仪测定中性粒细胞TLR2表达;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-8(IL-8)浓度;按术后7 d内是否发生SIRS,分为SIRS组与非SIRS组.2组TNF-α、IL-1β和IL-8浓度和TLR2表达进行Spearman相关分析.结果 术后7 d内有10例病人发生SIRS.与T1时比较,SIRS组T4时中性粒细胞TLR2表达上调,T2-4时TNF-α浓度升高,T3,4时IL-1β浓度升高,T3时IL-8浓度升高(P＜0.05或0.01);与NSIRS组比较,SIRS组T4时中性粒细胞表达上调,血清IL-1β浓度升高,T3时血清IL-8浓度升高(P＜0.05或0.01).SIRS组TNF-α浓度与中性粒细胞TLR2表达呈正相关(r=0.607,P＜0.05).结论 肝移植术后病人发生SIRS可能与新肝期24 h中性粒细胞TLR2表达上调有关.     

白介素-10在自身免疫性大鼠前列腺炎中的作用

目的:通过建立实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)大鼠模型,探讨IL-10对EAP的治疗作用及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:30只Wistar大鼠随机分为正常对照组(C组,10只)、EAP模型阳性对照组(P组,10只)和IL-10干预组(I组,10只)。C组给予生理盐水,P组以Wistar大鼠前列腺蛋白提纯液辅以双重免疫佐剂制作EAP模型,I组在诱导EAP模型后应用IL-10干预。HE染色观察各组前列腺组织炎性细胞浸润情况,电镜观察前列腺细胞及细胞周围超微结构的变化,半定量RT-PCR法检测前列腺组织TNF-α和TGF-β1的含量。结果:P组前列腺组织的炎症程度、TNF-α和TGF-β1水平明显高于C组(P<0.05),I组大鼠经IL-10治疗后前列腺组织炎性细胞浸润减轻,TNF-α和TGF-β1水平较P组下降,差异均有显著性(P<0.05)。结论:IL-10可减轻EAP大鼠前列腺组织炎症浸润,降低TNF-α和TGF-β1的表达,对EAP有一定的治疗作用。     

升高的血清TGF-β1反映在慢性肾炎中的免疫抑制

目的：检测血清新蝶呤（neoptin,NP）与白细胞介素10（interleukin-10,IL-10）及转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）的水平,讨论它们在慢性肾小球肾炎（CGN）发病中的作用。方法：比较43例CGN患者与20例健康对照组之间、增生与非增生病理组之间血清NP、IL-10及TGF-β1浓度。检测CGN患者血清NP、IL-10及TGF-β1之间的相关性。结果：（1）CGN患者的血清NP、IL-10及TGF-β1浓度均较对照组明显升高（P〈0.01,P〈0.01,P〈0.05）。（2）NP和IL-10呈正相关（r=0.323,P〈0.05）,与TGF-β1呈负相关（P=-0.306,P〈0.05）;IL-10与TGF-β1呈负相关（r=-0.324,P〈0.05）。（3）血清IL-10在增生性CGN中明显升高,有统计学差异（P〈0.05）;而血清NP及TGF-β1无统计学差异（P〉0.05）。结论：（1）CGN机制主要由体液免疫介导外,细胞介导免疫亦起作用,细胞介导免疫可能主要通过Fc等途经。（2）TGF-β1在肾小球疾病早期可能起免疫抑制作用,并不反映增生程度。（3）血清IL-10在增生型肾炎中明显升高,说明体液免疫在增生型肾炎中起主导作用,能反映增生程度。     

TNF-α对兔胆管成纤维细胞P311/TGF-β1/α-SMA通路的影响及川芎嗪的干预作用

目的:探讨TNF-α对兔胆管成纤维细胞P311/TGF-β1/α-SMA通路的影响及川芎嗪的干预作用。方法:分离、培养正常家兔胆管成纤维细胞并鉴定,将胆管成纤维细胞分别给予TNF-α、TNF-α联合不同浓度的TMP(0.08、0.4、2.0 mg/m L)干预48 h,以无处理的胆管成纤维细胞为空白对照,用CCK-8法检测细胞增殖水平;real-time PCR检测细胞P311、TGF-β1、α-SMA m RNA表达;Western blot检测细胞TGF-β1、α-SMA蛋白表达。结果:与空白对照比较,胆管成纤维细胞经TNF-α处理后,增殖明显增强,P311、TGF-β1、α-SMA m RNA以及TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显上调(均P0.05);TMP对TNF-α的上述效应有抑制作用,并且呈现浓度依耐趋势,其中0.4、2.0 mg/m L的TMP有明显作用(均P0.05)。结论:TNF-α可能通过调控P311/TGF-β1/α-SMA信号通路促进胆管成纤维细胞增殖,TMP能抑TNF-α对该通路的活化,故可能对良性胆道狭窄有防治作用。     

免疫调控因子与骨密度评价绝经后骨质疏松症疗效的研究

目的 观察绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)患者经治疗后其免疫调控因子转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素17 (interleukin-17,IL-17)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及骨密度(bone mineral density, BMD)的变化，探讨免疫调控因子与骨密度的相关性。方法 选取2019年5月至2020年6月在吉林省一汽总医院就诊的PMOP患者88例，收集一般信息，包括年龄、身高、体重、绝经年龄，治疗前及治疗1年后测量的BMD、IL-17、TNF-α和TGF-β1。结果 治疗1年后受试者腰椎和股骨颈BMD升高，差异有统计学意义(P<0.05),全髋BMD轻度升高，差异无统计学意义(P>0.05);IL-17、TNF-α均较治疗前下降，差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1较治疗前升高，差异有统计学意义(P<0.05)。IL-17、TNF-α与BMD呈负相关(分别r=-0.608,r=-0.494),TGF-β1与BMD呈正相关(...     

细胞因子对关节软骨细胞增殖的实验研究

目的探讨细胞因子对关节软骨细胞增殖的影响。方法应用关节软骨细胞体外培养，分别加入IL-1β，TNF-α，TGF-β1，IL-1β和TGF-β1，TNF-β和TGF-β1，采用MTT法观察软骨细胞增殖情况，瑞氏染色观察细胞形态及分裂指数测定。结果细胞因子作用软骨细胞24h，与对照组比较，1ng／ml、10ng／ml TGF-1组，10ng／ml IL-1β和1ng／ml TGF-β1组，高于对照组。细胞因子作用软骨细胞48h，与对照组比较，20ng／ml IL-1β组，1ng／ml、10ng／ml TNF-α组，0．1、1、10ng／ml TGF-β1，10ng／ml IL-1β和1ng／ml TGF-β1组，1ng／ml TNF-α和1ng／ml TGF-β1组，高于对照组。IL-1β，TNF-α作用软骨细胞24h，形态发生改变。培养48h，分裂指数测定10ng／ml TGF-β1组显著高于对照组。结论TGF-岛对体外培养关节软骨细胞有明显促进细胞分裂与增殖作用，IL-1β，TNF-α，作用软骨细胞48h也有促进细胞增殖作用。     

前列腺素E2对大鼠急性胰腺炎IL-10抗TNF-α、IL-1β的免疫干预作用

目的:探讨前列腺素E2(PGE2)免疫干预对急性胰腺炎大鼠血清抗炎因子IL-10与前炎症因子TNF-α及IL-1β的平衡调控作用.方法:将SD大鼠91只随机分4组:假手术组(n=7),ANP组,PGE2前干预和PGE2后干预组(每组n=28);后三组又随机分1 h、3 h、6 h以及12 h时段组(每组n=7),大鼠ANP模型用5%牛磺胆酸钠诱导,PGE2前干预组在ANP模型制作前2 h肌肉注射150μg@kg-1PGE2,PGE2后干预组在ANP模型完成时即刻肌肉注射150μg@kg-1PGF2.采用ELISA检测各组各时段大鼠血清的IL-10、TNF-α与IL-1β含量.结果:PGE2前干预组和后干预组所有时段(1 h、3 h、6 h以及12 h)的TNF-α和IL-1β含量均比ANP组降低,差异有显著性(P＜0.001);PGE2前干预组3 h时段IL-10值比后干预组相应时段升高,而6 h时段IL-10含量比后干预组低,差异均有显著性(P＜0.001).本实验结果显示,大鼠血清IL-10的上升幅度因PGE2的给药时间不同而不同,TNF-α和IL-1β随IL-10上升而下降.ANP组血清IL-10与TNF-α呈正相关(r=0.585,P＜0.01);PGE2前、后干预组呈负相关(r=-0.045,P＜0.01;r=-0.143,P＜0.01).结论:无论是前干预还是后干预,PGE2均能上调大鼠血清抗炎症性因子IL-10,并可下调前炎症性因子TNF-α和IL-1β.     

复方痛风康对高尿酸血症模型大鼠肾功能的保护作用及影响IL-1β、TNF-α、TGF-β_1的研究

目的:探讨以清热利湿化瘀散结法创制的中药复方痛风康对高尿酸血症模型大鼠血尿酸、肾功能、肾组织病理改变的影响,以及对肾脏组织中白细胞介素1(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苯溴马隆组及复方痛风康高、中、低剂量组,共6组。除空白组外,其余各组均以腺嘌呤和酵母膏灌胃,同时各给药组灌胃给予相应的药物,空白组和模型组给予等体积蒸馏水,连续21 d。末次给药后,测定大鼠血清尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;放射免疫法测定大鼠肾脏组织IL-1β、TNF-α、TGF-β1的含量;制作肾组织病理切片,光镜下观察肾组织超微病理学的改变。结果:模型组动物血清UA、BUN、Scr水平升高,与空白组、苯溴马隆组比较,差异有统计学意义(P0.05)。痛风康高剂量组UA含量明显降低,与空白组比较,差异有统计学意义(P0.01)。用药各组与模型组相比BUN、Scr含量均明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。模型组肾组织IL-1β、TNF-α、TGF-β1含量与空白组比较,显著升高(P0.01)。苯溴马隆组、痛风康高、中、低剂量组大鼠肾组织IL-1β、TNF-α、TGF-β1含量较模型组均有所降低。其中痛风康高剂量组大鼠肾组织IL-1β、TNF-α含量与模型组相比,差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。肾脏病理变化以模型组损伤最为明显,各给药组均有不同程度的改善。结论:以清热利湿化瘀散结法创制的中药复方痛风康,在降低高尿酸血症大鼠血清尿酸的同时,可降低炎性因子含量,促使抗炎症因子的产生,从而减轻肾组织炎性反应,对肾脏功能和形态的损伤具有一定的保护作用。