革兰阴性杆菌临床分离株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性研究

目的研究医院感染革兰阴性(G-)杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性特征及耐药机制。方法测定泵抑制剂对MIC的影响,β-内酰胺酶(Bla)的表型鉴定及等电点测定,PCR扩增检测Bla基因及DNA序列测定。结果所试菌对大多数药物的耐药率高,均产Bla,其中42.1%产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、17.5%产头孢菌素酶(AmpC酶)、7.0%产金属β-内酰胺酶,10.5%同时为外排泵阳性菌;8株阴沟肠杆菌的ampC基因与阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因高度同源。结论产Bla是G-杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的主要机制,ESBLs检出率最高;产AmpC酶阴沟肠杆菌的ampC基因均起源于ECLC074的ampC基因;亚胺培南是治疗耐药G-杆菌所致感染最有效的药物,β-内酰胺酶抑制剂复合物和阿米卡星可分别用于治疗耐药非发酵杆菌和持续高产AmpC酶阴沟肠杆菌所致感染。     

多药耐药鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药机制的研究

目的 了解临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)对β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制.方法　从2009年4-8月中山大学附属第三医院住院患者中分离出20株MDRAB,用K-B法测定鲍氏不动杆菌对13种抗菌药物的敏感性,采用PCR及序列分析的方法分析28种β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白carO基因.结果 检测TEM、OXA- 23群、ADC等3种β内酰胺酶基因呈阳性,阳性率分别为100.0％、65.0％、100.0％;其余均阴性,膜孔蛋白carO基因检测均阳性.结论 MDRAB对多种β-内酰胺类抗菌药物耐药主要与产OXA- 23群碳青霉烯和ADC型AmpC酶相关;产OXA- 23型碳青霉烯酶是导致MDRAB对碳青霉烯类耐药的重要原因,与产金属β-内酰胺酶和膜孔蛋白缺失无关.     

老年患者鲍氏不动杆菌分离株耐药性与AmpC酶、β-内酰胺酶基因研究

目的 了解老年患者鲍氏不动杆菌(ABA)分离株耐药性、AmpC酶和β-内酰胺酶基因存在状况.方法 对20株ABA进行药敏、AmpC酶和β-内酰胺酶基因检测.结果 20株老年患者ABA分离株呈多药耐药性,其中AmpC(染色体型)基因阳性17株(85%);TEM基因阳性11株(55%)、PER基因阳性5株(25%),其余基因均阴性.结论 该20株菌β-内酰胺类抗菌药物耐药与产AmpC酶和β-内酰胺酶密切相关.     

鲍曼不动杆菌耐药性及产β-内酰胺酶分析

目的调查我院分离鲍曼不动杆菌的耐药性及产β-内酰胺酶情况。方法用K-B法进行药物敏感性检测,表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,表型筛选法检测高产AmpC酶。结果86株鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率分别为25.6%、9.2%、17.4%和15.1%。对其他10种抗菌药物耐药率（39.5%～67.4%）较高。21株菌（24.4%）检出ESBLs、31株菌（36.0%）检出AmpC酶。结论我院鲍曼不动杆菌耐药率高,应加强药敏检测,指导临床合理应用抗菌药物;其对β-内酰胺类药物耐药与ESBLs、AmpC酶有关。     

产超广谱β-内酰胺酶阳性主要非发酵菌AmpC酶的检测及其耐药性分析

目的 检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性主要非发酵菌的AmpC酶,了解其耐药性.方法 利用头孢西丁三维试验检测受试菌的AmpC酶,双纸片增效试验确证ESBLs.结果 共分离出3351株非发酵菌,其中ESBLs阳性非发酵菌657株,检出率为19.61％,分离的前3位ESBLs阳性非发酵菌依次是铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌和洋葱伯克霍尔德菌,分别占32.72％、24.51％、12.02％;657株ESBLs阳性非发酵菌中,检出同产AmpC酶193株,检出率为29.38％,其中铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、洋葱伯克霍尔德菌为产超超广谱β-内酰胺酶(SSBL)的主要菌株,其在ESBLs阳性菌株中的检出率分别为40.47％、34.78％和37.97％ ;SSBL菌株中铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌,除亚胺培南、美罗培南外,对其他抗菌药物的耐药率均＞50.00％,洋葱伯克霍尔德菌的耐药率较高,均＞50.00％.结论 产SSBL非发酵菌的耐药性强于单产ESBLs菌株,进行ESBLs阳性非发酵菌AmpC酶的检测及其耐药监测,可以指导临床合理使用抗菌药物.     

多药耐药鲍氏不动杆菌ADC型AmpC酶的基因研究

目的 了解多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)中ADC型AmpC酶基因的检出.方法 收集2009年6月-2010年6月分离的39株多药耐药鲍氏不动杆菌,微量稀释法检测细菌对药物的敏感性;PCR扩增和克隆测序分析ADC型AmpC酶基因.结果 39株鲍氏不动杆菌对阿米卡星、多黏菌素E、米诺环素的耐药性分别为5.1％、0、0,对其余抗菌药物的耐药性均＞90.0％,39株鲍氏不动杆菌全部检测到ADC型AmpC酶基因.结论 鲍氏不动杆菌耐药情况十分严重,对头孢菌属的耐药可能与其产ADC型AmpC酶相关.     

泛耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因、膜孔蛋白基因及外排泵基因研究

目的全面了解泛耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺类耐药机制。方法收集2008年1-12月住院患者痰液标本中分离的泛耐药鲍氏不动杆菌20株,用聚合酶链反应(PCR)法,分析33种β-内酰胺酶基因和膜孔蛋白carO基因以及外排泵adeB基因。结果 20株泛耐药鲍氏不动杆菌共检出A类β-内酰胺酶基因TEM-1、C类β-内酰胺酶基因ADC-30、D类β-内酰胺酶基因OXA-23,三者阳性率均为100.0%;B类β-内酰胺酶基因未检出;膜孔蛋白carO基因突变率为100.0%,外排泵adeB基因阳性率为100.0%。结论泛耐药鲍氏不动杆菌株对β-内酰胺类药物耐药与产TEM-1、ADC-30、OXA-23β-内酰胺酶,膜孔蛋白carO基因突变和获得adeABC外排泵3种耐药的机制相关。     

不动杆菌β-内酰胺酶的分类和分布研究

目的 了解不动杆菌所产各种β-内酰胺酶(β-lactamases)分布情况。方法 采用多底物纸片协同法、ESBLs确认试验、纸片拮抗法、AmpC酶检测法检测42株不动杆菌所产各种β—内酰胺酶。结果 42株不动杆菌总β-内酰胺酶检出率为100％，其中产头抱菌素酶2株(4．8％)、诱导型AmpC酶5株(11．9％)、单独产AmpC菌及ESBLs各7株(16、7％)，产AmpC酶及ESBLs2l株(50．0％)，未检出单独青霉素酶、广谱酶和碳青霉烯酶；28株产ESBLs菌株中，纸片协同法阳性仅7株，占25．0％(7/28)，ESBLs确认试验阳性26株，2l株产ESBLs菌株的超广谱β-内酰胺抗生素抑菌环直径为6mm。结论 本组不动杆菌产β-内酰胺酶总检出率很高，以AmpC酶、ESBLs为主，未检出青霉素酶和碳青霉烯酶；本组不动杆菌所产β-内酰胺酶的产量高。     

染色体型AmpC酶在鲍氏不动杆菌烧伤患者分离株中流行

目的 分析鲍氏不动杆菌烧伤患者分离株的AmpC酶分布情况.方法 测定20株分离自烧伤科的鲍氏不动杆菌对20种抗菌药物的敏感性,采用PCR方法进行了染色体型(ADC)和质粒型(DHA)2种AmpC酶基因检测,并对部分阳性产物进行基因测序.结果 20株鲍氏不动杆菌烧伤患者分离株对β-内酰胺类抗菌药物耐药率除左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴坦外均>85%,PCR检测ADC基因19株(95%)呈阳性,而DHA基因均为阴性;部分ADC阳性产物经测序比对与ADC基因EF546445相同.结论 鲍氏不动杆菌烧伤分离株对β-内酰胺类抗菌药物多药耐药非常严重,染色体型AmpC酶ADC在鲍氏不动杆菌烧伤患者分离株中流行.     

多药耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因研究

目的 了解多药耐药鲍氏不动杆菌中β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因的存在与变异情况.方法 收集杭州市余杭区中医院2008年11月-2009年12月住院患者送检标本中分离的鲍氏不动杆菌共30株,先用改良三维试验同时检测头孢菌素酶(AmpC)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和金属β-内酰胺酶(MBL)3类β-内酰胺酶活性,再用聚合酶链反应的方法分析24种β-内酰胺酶基因与膜孔蛋白carO基因.结果 30株多药耐药鲍氏不动杆菌共检出TEM、ADC、OXA-23群等3种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为100.0％、60.0％、80.0％,30号株ADC基因为新亚型;膜孔蛋白carO基因突变率达100.0％.结论 鲍氏不动杆菌对多种β-内酰胺类药物耐药与产TEM、ADC、OXA-23群等3种β-内酰胺酶基因相关外,还与膜孔蛋白编码基因carO突变有关.     

重症监护病房产ESBLs及AmpC酶阴沟肠杆菌耐药性研究

目的监测医院重症监护病房患者感染阴沟肠杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药性特征。方法采用酶提取物三维试验方法检测AmpC酶和检测ESBLs。结果 86株阴沟肠杆菌中检出单产ESBLs 21株、单产AmpC酶20株、同时产AmpC酶和ESBLs株即SSBL阳性株15株,检出率分别为24.4%、23.3%和17.4%;产酶阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药率大部分均高于既非产Ampc酶又非产ESBLs菌株,即SSBL(-)。结论重症监护病房产AmpC酶和ESBLs的阴沟肠杆菌呈多药耐药,对于产AmpC酶阴沟肠杆菌临床经验用药应首选头孢四代抗菌药物,对于产ESBLs酶阴沟肠杆菌临床经验用药,应首选碳青霉烯类抗菌药物。     

痰标本肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶的检测及耐药性探讨

目的 检测下呼吸道合格晨痰标本中肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC酶),分析其耐药性.方法 采用双纸片协同扩散法检测ESBLs,改良三维试验检测AmpC酶,并采用纸片扩散法检测180株肺炎克雷伯杆菌对18种常用抗生素的耐药性.结果 180株分离的肺炎克雷伯杆菌中检出单产ESBLs70株(38.9％),单产AmpC酶22株(12.2％),同时产AmpC酶和ESBLs即超-超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)12株(6.7％).除外哌拉西林/他唑巴坦,单产AmpC酶、ESBLs及SSBLs对其他17种常用抗生素的耐药率均高于不产酶菌株.结论 下呼吸道感染肺炎克雷伯杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生ESBLs和AmpC酶,临床经验用药可选择β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂和头霉素类抗生素,对重症感染首选碳青霉烯类抗生素.     

同产ESBLs及AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的分析儿童感染同产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌的情况及其耐药性,以指导临床合理用药。方法对2009年1月-2010年1月医院就医儿童分离肺炎克雷伯菌122株,采用PCR法检测ESBLs酶基因blaTEM,blaSHV、blaCTX-M-9群,AmpC酶基因blaDHA、blaACT/MIR;K-B纸片琼脂扩散法检测肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果 122株肺炎克雷伯菌中单纯AmpC酶基因阳性菌株7株,阳性率5.7%,单纯ESBLs基因阳性菌株37株,阳性率30.3%,ESBLs和AmpC酶基因同时阳性菌株检出率为9.0%,非产ESBLs和AmpC菌株67株,检出率55.0%;同产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌除了对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其余β-内酰胺类抗菌药物和头孢菌素类高度耐药,产酶菌株耐药率明显高于非产酶菌株。结论儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的情况已经出现,产酶菌株对常用β-内酰胺类抗菌药物耐药率较高,其主要原因是肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶;临床治疗应根据药敏指导合理使用抗菌药物。     

耐药柠檬酸杆菌属β-内酰胺酶检测

目的了解安徽医科大学第一附属医院临床分离的耐药柠檬酸杆菌属产β-内酰胺酶的情况。方法采用琼脂稀释法测定17种抗菌药物对临床分离的52株柠檬酸杆菌最低抑菌浓度（MIC）,用改良三维试验检测31株柠檬酸杆菌ESBLs、AmpC、MBL的产酶情况,再用聚合酶链反应（PCR）法扩增β-内酰胺酶基因。结果31株柠檬酸杆菌对多种抗菌药物耐药,三维试验检出24株菌产ESBLs,3株菌产AmpC酶,2株同时高产AmpC酶和ESBLs,未检出MBL;PCR检出20株菌携带blaTEM基因,1株菌携带blaSHV基因,8株菌携带blaCTX-M-1基因,15株菌携带blaCTX-M-13基因,5株菌携带blaCIT基因。结论31株多重耐药的柠檬酸杆菌同时产〉1种的ESBLs及高产AmpC酶,是其对β-内酰胺类药物耐药的重要原因。     

临床常见多药耐药菌的感染分布及耐药性特点分析

目的 分析多药耐药菌的感染分布和耐药性特点,为临床预防控制和治疗多药耐药菌感染提供依据.方法 采用VITEK-32细菌鉴定仪将临床分离菌鉴定到种,同时进行药物敏感性试验,检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、C类头孢菌素酶(AmpC)和金属β-内酰胺酶(MBL)及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA).结果 多药耐药菌共388株,其中多药耐药鲍氏不动杆菌分离率为19.4%,泛耐药鲍氏不动杆菌为13.2%,泛耐药铜绿假单胞菌为23.7%,产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌为38.9%、大肠埃希菌为45.4%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为59.1%;绝大部分革兰阴性菌耐受>10种常用抗菌药物,肠杆菌科细菌产ESBLs检出率为42.5%,以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,AmpC酶检出率为16.3%,MBL酶检出率为2.2%.结论 革兰阴性菌是多药耐药菌的主要构成菌,对常用抗菌药物几乎全部耐受,MRSA分离率较高不容忽视.     

鲍氏不动杆菌耐药性与产β-内酰胺酶的关系分析

目的 了解鲍氏不动杆菌的耐药性与产β-内酰胺酶的关系.方法 对分离出的细菌采用API 20NE系统进行鉴定,药敏试验采用K-B法,用改良三维试验检测菌株产β-内酰胺酶的情况,用2-巯基丙酸抑制试验筛选金属酶.结果 在150株鲍氏不动杆菌中,头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低(4.0%),其次为亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦和左氧氟沙星(耐药率从20.0%～55.0%),耐药率最高的是头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和阿米卡星,均＞60.0%;在所有菌株中有37株(24.7%)产ESBLs,66株(44.0%)产AmpC酶,16株(10.7%)产碳青酶烯酶,其中12株(8.0%)为金属酶.结论 除头孢哌酮/舒巴坦和碳青酶烯类抗菌药物外,鲍氏不动杆菌对临床常用的其他抗菌药物耐药率均较高,产ESBLs、AmpC酶和金属酶是其对多种抗菌药物高度耐药的主要原因.     

发现1株携带多种β-内酰胺类、氨基糖苷类耐药基因的鲍氏不动杆菌

目的 分析多药耐药鲍氏不动杆菌对β-内酰胺及氨基糖苷类抗菌药物耐药的原因.方法 用三维试验分析多药耐药鲍氏不动杆菌临床菌株所产β-内酰胺酶,并进行初步分类,用聚合酶链反应(PCR)扩增和产物测序方法确认β-内酰胺酶及氨基糖苷类基因,用基因测序证实基因型.结果 该临床菌株产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶,经分子生物学方法证实同时存在TEM、OXA-23、ADC基因型;并同时存在氨基糖苷类aac(3)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰb和ant(3")-Ⅰ基因.结论 发现1株同时存在TEM、OXA-23、ADC、aac(3)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰb和ant(3")-Ⅰ基因的鲍氏不动杆菌.     

耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因检测

目的探讨耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺类获得性耐药基因携带情况,为临床医师正确使用抗菌药物、延缓细菌耐药性快速增长提供实验室参考依据。方法选取2012年1-12月医院分离的20株耐药鲍氏不动杆菌,菌种鉴定采用法国生物梅里埃公司鉴定仪作初步鉴定,并作16S~23SrDNA鲍氏不动杆菌特异PCR扩增检测;全部β-内酰胺类药物获得性耐药基因均采用PCR法;PCR扩增产物DNA测序为Sanger法;测序结果用Chromas2.23直接作BLAST Search网上比对。结果 20株耐药鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类、头孢类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类4大类临床常用药物耐药性均较高,耐药率均>80.0%;检出blaTEM、blaADC、bla OXA-23群、bla OXA-51群β-内酰胺酶基因;并在国内首次检出bla ADC-17型C类β-内酰胺酶基因。结论医院耐药鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类、头孢类药物耐药与携带blaTEM、blaADC、bla OXA-23群、bla OXA-51群β-内酰胺酶基因相关。     

临床多药耐药鲍氏不动杆菌分布及β-内酰胺酶基因型分析

目的调查多药耐药鲍氏不动杆菌的分布及β-内酰胺酶耐药基因的流行情况。方法收集2017年6月-8月安徽省立医院住院患者标本中分离得到的多药耐药鲍氏不动杆菌(Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii,MDRAB)菌株。采用VITEK-2COMPACT全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验。应用PCR法检测β-内酰胺酶耐药基因。结果 71例多药耐药鲍氏不动杆菌主要来自ICU占67.6%,大多来源于痰标本占84.5%。对10种常用抗菌药物耐药率为79.4%～100.0%,其中对头孢菌素类、环丙沙星以及亚胺培南的耐药率均为100.0%。检测出的β-内酰胺酶耐药基因有blaOXA-23(90.1%,64例)、blaTEM(66.2%,47例)、blaKPC(1.4%,1例)和blaSHV(1.4%,1例),其中1例菌株同时携带blaKPC、blaSHV以及blaTEM三个耐药基。结论医院多药耐药鲍氏不动杆菌情况较严重,β-内酰胺酶相关耐药基因广泛存在于多药耐药鲍氏不动杆菌中,多药耐药鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药可能与β-内酰胺酶耐药基因表达相关。     

患者多药耐药鲍氏不动杆菌医院感染临床特征与耐药性研究

目的分析医院感染患者多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)的临床特点和耐药性,对临床抗菌药物应用进行指导,有效治疗鲍氏不动杆菌造成的感染。方法收集2011年1月-2014年6月住院患者伤口分泌物或痰液标本中分离出的鲍氏不动杆菌110株,对MDRAB和非MDRAB的检测结果进行比较;采用SPSS18.0对研究结果进行统计分析。结果共分离出鲍氏不动杆菌110株,其中痰液与咽拭子标本所占比例最高,占90.91%,110株鲍氏不动杆菌中78株为MDRAB,MDRAB中有67株来自ICU患者,占60.90%;78株MDRAB除了对多黏菌素B、米诺环素、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦以及美罗培南的耐药性<45.00%外,对于其他抗菌药物的耐药性均>90.00%;而32株非MDRAB对青霉素与β-内酰胺酶抑制剂复方抗菌药、米诺环素、阿米卡星以及第三代头孢菌素类抗菌药物未发现耐药性;MDRAB患者的用药种数和用药时间均明显高于非MDRAB患者,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论鲍氏不动杆菌的多药耐药性不断上升,应重点加强对ICU的抗菌药物耐药性监测,合理使用抗菌药物,减少耐药性菌株的流行并延缓多药耐药菌株产生。