大鼠视网膜急性缺血损伤中脑红蛋白的表达

目的探讨大鼠急性缺血性视网膜损伤中脑红蛋白（NGB）基因的表达及变化。方法随机将50-60日龄Wistar大鼠70只分为7组,左眼造模,制成高眼压诱导的视网膜急性缺血损伤模型,分别在眼压升高1、5、10、15、20、30、60 min迅速取视网膜,对侧眼作为自身正常对照直接取视网膜。提取视网膜组织总RNA,用半定量RT-PCR进行检测。结果检测中可见缺血1 min组,NGB mRNA表达较对照组迅速增加（P=0.017）,缺血5 min达高峰,与对照组比较差异有统计学意义（P=0.000）;10-15 min开始降低,但仍然保持在高水平（10 min,P=0.001;15 min,P=0.038）;20-30 min已迅速降低,但仍高于对照组（20 min,P=0.269;30 min,P=0.402）;60 min相对于对照组水平略有降低,与对照组比较差异无统计学意义（P=0.384）。结论大鼠视网膜急性缺血损伤后NGB mRNA表达增强,提示NGB可能在视网膜缺氧的适应性调节过程中起了重要作用。     

脑红蛋白在糖尿病大鼠视网膜中的表达

目的探讨脑红蛋白(NGB)在糖尿病大鼠视网膜中的表达与分布。方法将SD大鼠随机分为对照组和糖尿病组。糖尿病组大鼠采用链脲佐菌素一次性腹腔内注射建立糖尿病模型。定期处死大鼠,应用免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜组织中NGB的表达变化。结果糖尿病大鼠视网膜中的NGB分布逐渐增加后趋于稳定。结论 NGB在糖尿病大鼠视网膜表达较对照组明显增加,提示NGB可能在糖尿病状态下为视网膜神经细胞供氧,减轻糖尿病视网膜缺氧造成的损害。     

脑红蛋白在大鼠眼球中分布的免疫组织化学研究

目的 探讨脑红蛋白（NGB）在正常大鼠眼球中的分布。方法 用免疫组织化学ABC法研究了NGB在正常大鼠眼球中的分布和定位。结果 NGB主要存在于视网膜中，在虹膜、睫状体和视神经中亦有一定量的表达，在眼球内的其他组织中则没有表达。该蛋白在所有神经元中均有高强度的表达，但不存在于视网膜的色素细胞层中。其中，在视网膜的丛状层和光感受器的内节中分布最多，这与视网膜的耗氧部位线粒体的亚细胞定位基本一致。结论 NGB可能是一种与血红蛋白和肌红蛋白很相似的呼吸蛋白，在视网膜的氧供和氧消耗中起非常重要的作用，可能与许多视网膜缺血缺氧疾病的发生发展有关。     

脑红蛋白在高原视网膜疾病中表达的研究进展

脑红蛋白是继血红蛋白和肌红蛋白之后发现的第3类携氧球蛋白,主要分布在脑和视网膜及内分泌组织中,与这些组织的氧供有着密切的关系。在视网膜中主要表达于丛状层和光感受器的内节中。在高原缺氧环境中,兔眼球钝挫伤后视网膜脑红蛋白（NGB）的表达较平原及亚高原环境中增加,推测NGB可能作为一种内源性的机制在低氧环境下保护视网膜神经细胞,使其免受或减少低氧损伤。在高原环境下,有关NGB表达的研究为高原视网膜疾病的诊治指出了新的方向。就NGB在高原视网膜疾病中表达的研究进行综述。     

脑红蛋白与视网膜

最近德国科学家Burmester等发现神经组织中存在一类携氧球蛋白，把这类主要在脑、视网膜及内分泌组织中表达的第3类携氧球蛋白称为脑红蛋白（NGB）。此蛋白可在缺氧条件下为神经组织供氧5～31min，且具有加速氧向神经组织转运的功能。NGB在低氧预适应过程中起重要作用：NGB的含量越低对缺氧的耐受性越差。NGB基因表达的调控至少有3条信号转导途径参与。视网膜的相对耗氧量高于全身各组织器官，缺氧将直接导致视觉传导过程的严重障碍。NGB的发现，为视网膜缺氧的研究指出了新方向，为缺氧性视网膜损伤的防治提供了新的思路。     

高原环境下兔眼球挫伤后视网膜脑红蛋白的表达调控研究

目的研究高原环境下兔眼球挫伤后视网膜脑红蛋白（NGB）的表达水平调控,探讨高原环境下眼球挫伤的损伤修复机制及救治。方法在高原环境用重击法造成2月龄健康北京青紫蓝兔眼球挫伤,随机分为吸氧组和非吸氧组,吸氧组动物模型在自制氧箱中以35％氧浓度每天持续给氧10h,于伤后12h、1d．3d,7d、14d分别摘取眼球,40g/L多聚甲醛固定．石蜡包埋切片,免疫组化检测NGB,比较吸氧组和非吸氧组NGB表达水平的不同。结果高原环境下兔眼球钝挫伤后吸氧组较非吸氧组NGB表达低,在3d和7d时差异有统计学意义（P〈0．05）。结论高原环境下兔眼球挫伤后通过吸氧可调控视网膜NGB的表达水平,伤后1d内视网膜处于应激期,吸氧等措施可减轻应激损伤,1～14d吸氧可大大促进视网膜损伤修复。     

高原环境吸氧对兔视网膜脑红蛋白表达的影响

目的 探讨高原环境下吸氧对免视网膜脑红蛋白(neuroglobin,NGB)表达水平的影响.方法 在高原环境下将30只北京青紫蓝兔分为吸氧组(实验组)及非吸氧组(对照组),每组各15只.分别于吸氧后12 h、1 d、3 d、7 d及14 d摘除眼球,40 g·L-1多聚甲醛固定,石蜡包埋切片,免疫组织化学检测2组兔NGB表达水平.结果 实验组兔吸氧后12 h、1 d、3 d、7 d、14 d NCB的平均灰度值分别为175.32±2.82、170.81±1.35、161.89±1.16、157.79±2.57、184.11±1.88,对照组相同时间点分别为168.86±1.57、159.65±2.79、152.13±0.39、139.57±1.83、153.09±0.76.实验组兔在吸氧后12 hNGB的表达与对照组差异无统计学意义,吸氧后1 d、3 d、7 d及14 d NGB的表达较对照组弱,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).各时间点实验组氧饱和度值均高于对照组,吸氧后1 d、3 d、7 d时2组间差异均有统计学意义(均为P＜0.05),3 d时最明显.结论 高原环境下吸氧可降低NGB的表达,促进视网膜缺氧损伤修复.     

脑红蛋白在视网膜中的研究现状

脑红蛋白（Ngb）是最近发现于哺乳动物大脑中的一类携氧球蛋白,在视网膜组织中脑红蛋白有比其他部位更高程度的表达,虽然视网膜的耗氧量大于脑,但视网膜对缺血缺氧的忍受时间却远远大于同样情况下大脑所能忍受的时间。同其他中枢神经元一样,脑红蛋白在视网膜上的表达升高也与缺氧有关,提示Ngb在视网膜氧的摄取和利用过程中起着重要作用。     

大鼠急性视网膜缺血节细胞死亡时脑红蛋白的表达

目的 研究大鼠视网膜急性缺血中视网膜节细胞(RGCs)死亡时脑红蛋白(Nsb)的表达.方法 实验研究.采用特异性结扎大鼠视网膜动脉的方法造成视网膜急性缺血模型,按照结扎时间不同(0、15、30、60 min)分为A、B、C、D组,每组10只大鼠,均以左眼为实验眼.每组随机选取3只大鼠视网膜用于免疫印迹法检测,4只大鼠视网膜做HE染色节细胞计数及免疫组化染色荧光强度分析,3只大鼠做免疫电子显微镜观察.采用单因素方差分析对不同结扎时间Ngb蛋白定量及RGCs数目进行统计学分析,采用KSD-t检验进行两两比较.结果 视网膜完全结扎后,A、B、c、D组Ngb蛋白表达量分别为1.439±0.014、2.023±0.134、1.416±0.030及1.073±0.064;RGCs计数结果分别为4368±124、4296 ±96、4132±104、3973±115,组间比较差异有统计学意义(F=79.548,10.191,P<0.05).B组表达最高,之后逐渐降低,C组接近正常,此时与A组比较RGCs数量开始减少,D组Ngb的表达已明显低于A组,与A组比较RGCs数量进一步减少.在视网膜各层中,Ngb的表达以RGCs层为最高,其次为内丛状层与外丛状层.RGCs中Ngb主要分布在胞质,C组线粒体外室和线粒体嵴也发现有Ngb表达,而内核层及外核层细胞的胞质内始终未见Ngb的表达.结论 Ngb在大鼠RGCs急性缺血死亡时表达快速升高,主要表达于RGCs的胞质内,与RGCs的生存状态关系密切.     

大鼠视网膜细胞间隙连接蛋白Cx43的表达

目的:探讨细胞间隙连接蛋白connexin43(Cx43)在BN大鼠视网膜中的分布特点.方法:以雄性挪威棕色大鼠(Brown Norway)为研究对象,应用免疫组化方法观察Cx43在BN大鼠视网膜中的分布特点.结果:正常视网膜内界膜,视神经纤维层以及神经节细胞层明显表达,神经节细胞表达的主要位置是细胞质和细胞膜,色素上皮细胞全层表达,内外颗粒层及内外层状层无表达.结论:正常视网膜的Cx43主要分布在内界膜,神经纤维层,视网膜节细胞层和视网膜色素上皮层.     

Expression of neuroglobin in ocular hypertension induced acute hypoxic-ischemic retinal injury in rats

AIM: To investigate the expression of neuroglobin (Ngb) in the retina of rats with ocular hypertension induced acute retinal hypoxic-ischemic injury. METHODS: Seventy Wistar rats were divided into 7 groups randomly. The experimental model was induced by elevation of intraocular pressure via anterior chamber canula insertion in the left eyes and the fellow eyes were preserved as normal controls. The retinal tissues were taken at 1, 5, 10, 15, 20, 30 and 60 minutes after hypoxic-ischemia injury. Protein was extracted, and then analyzed by Western-blot method. SPSS was used for statistical analysis. RESULTS: The time-depended expressions of Ngb were observed. The level of Ngb increased rapidly at 1 minute after ischemia and reached to the peak at 5 minutes, which had significant difference from that of control group (P<0.05). It kept in high level during 5-15 minutes (P<0.05), then decreased after 20 minutes till 60 minutes. There were no significant differences between experimental and control group in the latter period (P＞0.05). CONCLUSION: The expression of Ngb in retinal tissue increased rapidly after hypoxic-ischemic injury in rats, suggesting that Ngb may play an important role in the process of acute retinal hypoxic-ischemic injury.     

脑红蛋白在眼科的研究现状

脑红蛋白(neuroglobin,NGB)是继血红蛋白和肌红蛋白之后发现的第三类神经系统特异的携氧球蛋白,与氧有很高的亲和力,具有重要的神经保护功能.近来发现NGB在视网膜内的含量是大脑的100倍,高表达的NGB对眼部组织的缺血缺氧、氧化应激损伤有一定的保护作用,在眼科疾病的发生发展中亦具有重要的研究价值.本文主要针对NGB的眼内分布、神经保护机制及其在视网膜光化学损伤、糖尿病视网膜病变、青光眼等眼科疾病中发挥的作用进行综述.     

Taurine uptake in isolated retinas of normal rats and rats with hereditary retinal degeneration

Kinetic analysis reveals two processes for the uptake of taurine in the isolated rat retina. One process, designated as a high affinity uptake mechanism, has an apparent Michaelis constant (K_m) of 50 μm and a maximum velocity of uptake (V_max) of 0·3 nmol/mg dry wt/min. The other process, designated as a nonsaturable uptake mechanism, has a rate constant of 0·53 nmol/mg dry wt/min/mm taurine in the medium. Retinas from normal rats, studied at ages 22–180 days, and from Royal College of Surgeons (RCS) rats with normal or reduced numbers of photoreceptor cells, studied at ages 22–45 postnatal days, show both mechanisms at a time when photoreceptor cell function is detectable in vivo with the electroretinogram (ERG). Retinas from 180-day-old photoreceptorless RCS rats retain the nonsaturable uptake mechanism for taurine but do not show the high affinity uptake mechanism at a time when the number of photoreceptor cells is greatly reduced and no photoreceptor function can be detected with the ERG. The high affinity uptake mechanism is selectively lost in isolated normal rat retinas with mechanical disruption of photoreceptor cells and is inhibited to a greater extent than the nonsaturable mechanism by ouabain and reduced temperature. These studies support the idea that the high affinity uptake mechanism for taurine in rat retinas depends on the presence of viable photoreceptor cells.     

CD81在正常大鼠视网膜色素上皮层的表达

目的:观察CD81在正常大鼠视网膜色素上皮层(retinal pigment epithelium,RPE)的表达。方法:用抗CD81抗体EAT2对正常大鼠RPE组织切片及体外培养RPE进行免疫组织化学染色,H121对RPE组织进行CD81蛋白的Western blot分析。结果:正常大鼠视网膜的色素上皮细胞膜表面呈CD81的阳性染色,体外培养的大鼠RPE也呈CD81阳性表达;Western blot分析RPE层蛋白出现CD81阳性条带。结论:正常大鼠的RPE层可以表达CD81。     

Effect of estrogen on electroretinographic responses in streptozotocin-induced diabetic female rats

The aim of this study is to investigate the effects of estrogen on functional changes in the retinas of streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats by using an electroretinography. Female rats were randomly divided into four treatment groups: (1) Control (sham operation and vehicle administration); (2) STZ (sham operation and STZ administration); (3) OVX (ovariectomy and vehicle administration); and (4) OVX + STZ (ovariectomy and STZ administration). Full-field electroretinograms (ERGs) were recorded before OVX and STZ administration and 4 and 12 weeks after STZ administration. At 4 weeks after STZ administration, although there were no differences in the STZ and OVX groups compared with the Control group, the amplitude of the cone-response was significantly lower in the OVX + STZ group than in the Control group (P = 0.013). At 12 weeks after STZ administration, this response showed a similar tendency in the STZ and the OVX + STZ groups. At 12 weeks after STZ administration, the implicit times of OP3 and OP4 and of the cone-response were significantly delayed in the STZ and OVX + STZ groups (OP3: P = 0.030 and 0.050, OP4: P = 0.0060 and 0.0053, cone-response: P = 0.014 and 0.039), compared with in the Control group. Thus, the retinal functions in STZ-induced diabetic female rats were aggravated by OVX. OVX-induced estrogen deficiency resulted in earlier changes in the amplitudes of cone-response, especially in the diabetes, although this is a transient effect and it is difficult to explain. Recognizing the early neurosensory change would enable a better understanding of the effect of estrogen in the retina.     

正常大鼠视网膜显微傅里叶变换红外光谱分析

目的 应用显微傅里叶变换红外光谱（显微FT-IR）技术研究正常大鼠视网膜组织的化学组成。方法在显微FT-IR仪下选取正常Wistar大鼠视网膜冰冻切片上同一部位的感光细胞外节、外核层和内丛状层，分别测定反射吸收光谱。通过分析各化学基团振动吸收峰的来源和吸收强度，研究视网膜此三层结构的化学组成及差异。结果外节层CH2基团（2925cm^-1、2853cm^-1）、C-O基团（1738cm^-1和=C-H基团（3014cm^-1）的吸收值均最高。外核层酰胺I带（1660cm^-1）、PO；基团（1243cm^-1和1089cm^-1）吸收值最大。内丛状层CH2、C-O和=C-H基团的吸收介于前两者之间，而酰胺I带、PO2^-基团吸收最少。结论显微FT-IR技术可原位分析视网膜组织，在分子水平为其化学组成提供了大量可靠的信息。