黄芪甲苷对病毒性心肌炎小鼠TLR4、NF-κB及TNF-α表达的影响

目的探讨黄芪甲苷对病毒性心肌炎小鼠Toll样受体4(TLR4) mRNA、核因子-κB(NF-κB) mRNA表达及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。方法将80只雄性BALB/c小鼠随机分为柯萨奇病毒感染组(感染组,30只)、黄芪甲苷治疗组(治疗组,30只)和正常对照组(对照组,20只)。感染组和治疗组小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3),建立病毒性心肌炎模型。治疗组于注射病毒后30min开始灌服黄芪甲苷,每日1次×7d;感染组以生理盐水灌胃;对照组用不含病毒的Eagle液腹腔注射、生理盐水灌胃。各组分别在7d、14d各随机抽取8只小鼠处死,HE染色后检测心肌病理积分、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达,ELLSA法检测血清TNF-α的含量。结果感染组心肌病理积分、TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达及血清TNF-α的含量较对照组明显增加(P<0.01),治疗组心肌病理积分、TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达及血清TNF-α的含量较感染组明显降低(P<0.05)。结论黄芪甲苷可以通过调节TLR4、NF-κB及TNF-α在病毒性心肌炎中的表达,减轻心肌损伤。     

大鼠颅脑损伤后脑NF-κB的活性和NF-κB mRNA表达的变化及意义

目的 观察颅脑损伤后不同阶段脑NF-κB的活性和NF-κB mRNA表达的变化,探讨其在颅脑损伤后继发性损伤中意义及相关机制.方法 建立颅脑损伤模型,通过光镜观察颅脑损伤后病灶周围脑组织变化,采用免疫组化方法检测脑组织中NF-κB及TNF-α的表达情况,RT-PCR检测NF-κB mRNA表达情况.结果 颅脑损伤后不同阶段NF-κB蛋白表达及mRNA表达明显高于对照组（P＜0.05）,并且NF-κB表达水平与TNF-α呈正相关关系（r=0.519,P＜0.05）,且与组织炎症损伤程度一致.结论 颅脑损伤后各时间点脑NF-κB呈过度激活状态,与TNF-α水平的变化一致,且病理上颅脑损伤炎症损害严重程度相平行,这可能是颅脑损伤后继发性损伤发生的一个机制.     

糖尿病患者树突细胞中NF-κB活性改变及检测TNF-α意义

目的探讨糖尿病患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平及外周血树突细胞（DC）中NF-κB活性变化的意义。方法无偿献血员10例为正常对照组（N组）,糖尿病患者20例分为IDM组和ODN组各10名。外周血分离单核细胞（PBMC）,加入IL-4、GM-CSF对DC进行诱导培养,同时向ODN组中加入NF-κB特异性低脱氧核苷酸（ODN）培养细胞,采用ELISA法测定血液及培养上清中TNF-α的含量。免疫印迹分析检测DC中NF-κB p65的磷酸化水平,β-actin作为内参。结果糖尿病组患者的血清TNF-α水平显著高于正常对照组（P〈0.001）;培养物上清液TNF-α水平的测定结果为：N组和ODN组显著低于IDM组（P〈0.05）;N组和ODN组水平无显著差异（P〉0.05）;在N组和ODN组DC中NF-κB p65的磷酸化的表达水平显著地低于IDM组（P〈0.05）;N组和ODN组无显著差异（P〉0.05）。结论提示炎症因子TNF-α及NF-κB可能参与糖尿病的病理生理过程。糖尿病患者外周血树突细胞中NF-κB p65的磷酸化水平可以被ODN抑制。     

芦荟提取物对脑缺血再灌注损伤大鼠的梗死面积及TNF-α、NF-κB的影响

目的观察芦荟提取物对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用以及对TNF-α和NF-κB的影响来进一步探讨其作用机制。方法雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、缺血再灌注组、芦荟提取物低、中、高剂量组和阳性对照组,脑缺血2h后再灌注24h时断头处死大鼠,采用Longa评分法,观察脑梗死模型大鼠的活动情况,一部分进行TTC染色和HE染色观察脑梗死体积及病理形态学变化;另一部分采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法、RT-PCR及凝胶电泳技术检测TNF-α和NF-κB的含量及表达。结果芦荟提取物能明显改善模型大鼠神经功能缺损的症状和脑缺血组织的病理形态学,降低TNF-α和NF-κB的含量及其基因表达水平。结论芦荟提取物对实验大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的脑血管保护作用,其机理与抑制相关炎症因子的表达水平有关。     

TNF-α、NF-κBp65、PAI-1在妊娠期糖尿病孕妇血清和胎盘组织中的表达及其意义

[目的]探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)、人核转录因子p65 (NF-κBp65)及纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)在妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇血清及胎盘组织中的表达及其临床意义.[方法]选取2014年2月至2015年5月在本院定期产检并且住院分娩的GDM孕妇47例作为观察组,另外选取同期分娩的正常孕妇47例为对照组,比较两组孕妇血清和胎盘组织中TNF-α、NF-κBp65和PAI-1的表达水平,并分析其临床意义.[结果]与对照组比较,观察组孕妇血清的TNF-α和PAI-1表达水平明显较高,差异具有统计学意义(P均＜0.001),但两组孕妇血清的NF-κBp65水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);观察组孕妇胎盘组织中的TNF-α、NF-κBp65和PAI-1的阳性率显著高于对照组,其差异均有统计学意义(P＜0.05).[结论]GDM孕妇胎盘组织中TNF-α、NF-κBp65和PAI-1水平明显升高,而血清中的TNF-α和PAI-1也明显较高,推测炎症因子TNF-α、NF-κBp65和PAI-1可能参与了GDM的发生与发展.     

胃癌患者手术前后血清LXA4、TNF-α的检测及意义

[目的]检测胃癌患者手术前后血清中脂氧素A4(LXA4)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平,探讨二者在胃癌诊断、进展和预后方面的价值.[方法]酶联免疫吸附试验测定82例胃癌患者及同期30例正常对照者血清中LXA4及TNF-α水平,并对胃癌术前术后以及不同分期的患者血清LXA4、TNF-α水平进行比较.[结果]胃癌患者术前血清LXA4、TNF α水平高于术后及正常对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);术后血清LXA4、TNF-α水平与正常对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅳ期胃癌患者血清LXA4、TNF-α水平高于Ⅰ～Ⅲ期患者(P＜0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期之间血清LXA4、TNF-α水平相比较,差异无统计学意义(P＞0.05).胃癌患者血清LXA4与TNF-α的水平呈正相关(r=0.251,P=0.004).[结论]胃癌患者术前血清的LXA4、TNF-α水平增高,并与胃癌的临床分期呈正相关,LXA4及TNF-α的检测对胃癌的诊断及预后有一定的评估作用.     

血清NF-κB、AngⅡ水平与原发性高血压早期肾损害的相关性

目的探讨血清核因子κB(NF-κB)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平与原发性高血压(EH)早期肾损害之间的关系。方法入选96例原发性高血压患者,另选取同期50例健康体检者做为对照组。采用放射免疫分析法测定尿微量白蛋白(mALB)水平,根据mALB水平将入选高血压患者分为高血压伴肾损害组(A组)56例和高血压不伴肾损害组(B组)40例;同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清NF-κB、AngⅡ水平。结果 A组和B组血清NF-κB、AngⅡ水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,A组血清NF-κB、AngⅡ水平明显更高,差异有统计学意义(P<0.05)。直线相关分析显示,血清NF-κB水平与收缩压、舒张压、mALB呈正相关(r=0.381、0.473、0.346,均P<0.05);血清AngⅡ水平与收缩压、舒张压、mALB呈正相关(r=0.507、0.431、0.375,均P<0.05)。结论 EH患者血清NF-κB、AngⅡ水平明显升高,EH伴早期肾损害患者更明显,提示NF-κB、AngⅡ可能参与了原发性高血压及其合并早期肾功能损害的发生发展。更多     

羧胺三唑对TNF-α诱导的佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞中细胞因子分泌和NF-κB活化的影响

目的 探讨羧胺三唑对TNF-α诱导的佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞分泌促炎细胞因子的影响及部分机制.方法 用弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎模型,分离培养的佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞用20 ng/ml TNF-α刺激并用不同浓度羧胺三唑（10、20、40 μmol/L）处理.ELISA法检测成纤维样滑膜细胞上清中IL-1β和IL-6含量,Western blot法检测NF-KB p65的蛋白表达.结果 经20 ng/mlTNF-α刺激后,成纤维样滑膜细胞分泌IL-1β和IL-6水平,以及细胞核中NF-KB p65的表达显著增加（P＜0.01）.羧胺三唑（20、40 μmol/L）能够显著抑制TNF-α诱导的IL-1β[（417.39 ＋29.80） pg/mlvs.（264.63±9.35） pg/ml,（186.13±25.71）pg/ml,P ＜0.01]和IL-6[（383.45±32.13） pg/ml vs.（248.39±30.51） pg/ml,（189.64±27.86） pg/ml,P＜0.01]分泌,且明显减少细胞核中NF-κB p65的表达（P＜0.01）.结论 羧胺三唑可能通过抑制NF-KB活化来减少TNF-α诱导的佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞中促炎细胞因子IL-1β、IL-6的产生.     

NF-κB／Rel转录因子与白血病

NF-κB／Rel蛋自家族是一类参与炎症、免疫、应激、细胞生长及癌症发生等诸多生物学过程中基因调节的重要转录因子。已经发现许多癌症的发生与之相关。本综述了NF-κB／Rel蛋白在白血病发生及治疗方面的研究进展。NF-κB是正常髓系骨髓细胞转化的调节因子。人类T细胞性白血病病毒Ⅰ型编码的Tax蛋白能通过激活NF-κB而参与人类成人T细胞白血病的发生。一些染色体易位可能影响NF-κB／IκB之间的平衡,从而参与白血病及淋巴瘤的发生。一系列与NF-κB／Rel转录因子相关的白血病化疗药物正在探索之中。     

妊娠高血压疾病胎盘组织中 hTERTmRNA 与 NF-κB、survivin 表达的相关性

目的通过检测不同程度的妊娠高血压孕妇与正常妊娠孕妇胎盘组织中hTERT及NF-κB、survivin的表达,探索妊娠高血压的发病机制方法选取2013~2014年的在我院分娩的孕妇为研究对象,共计90例,其中正常孕妇30例,足月轻度子痫前期孕妇30例,足月重度子痫前期孕妇30例,采用定量实时RT-PCR的方法检测胎盘中hTERT mRNA的水平,采用Westernblot对NF-κB、survivin表达量的细胞进行定量分析。结果与正常孕妇的胎盘组织相比,hTERTmRNA在足月重度子痫前期和足月轻度子痫前期的胎盘组织的表达均显著上升,差异有统计学意义(P<0.05);与正常孕妇的胎盘组织相比,NF-κB、survivin在重度子痫前期胎盘的表达显著降低,而轻度子痫前期孕妇的胎盘组织Survivin的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);在重度子痫前期胎盘组织中,hTERTmRNA与NF-κB和Survivin的表达呈负相关系数分别为R1=-0.793,R2=-0.827,P<0.05。结论对于轻度子痫和重度子痫的病人,hTERTmRNA表达均显著上升、NF-κB和Survivin 的表达均不同程度的下降,推测hTERT及NF-κB和survivin的表达与妊娠高血压的发病过程有密切关系。     

全氟化碳通过下调TLR4/NF-κB信号通路抑制脂多糖刺激A549细胞分泌TNF-α的研究

目的探讨全氟化碳对内毒素诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549细胞)炎症因子TNF-α表达的影响及机制。方法人肺泡Ⅱ型上皮细胞,传代培养后,均分为3组:空白对照组(C组)、脂多糖(LPS)组、全氟化碳+LPS(P+LPS组),P+LPS组在给予LPS同时加入全氟化碳,LPS的终浓度为10μg/ml,全氟化碳的终浓度为12.5%,各组分别孵育30 min、2 h、4 h、12 h、24 h,结束后用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子-κB(NF-κB)、Toll样受体4(TLR4)蛋白表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清中TNF-α的水平。结果 (1)Western blot结果显示,C组人肺泡Ⅱ型上皮细胞上有TLR4蛋白的表达,但表达量较低;LPS组人肺泡Ⅱ型上皮细胞在30 min、2 h、4 h、12 h、24 h点TLR4及NF-κB蛋白的表达量明显高于C组(P<0.05);与LPS组比较,P+LPS组人肺泡Ⅱ型上皮细胞30 min、2 h、4 h、12 h、24 h点TLR4及NF-κB蛋白表达明显下降(P<0.05),C组人肺泡Ⅱ型上皮细胞的TLR4及NF-κB蛋白表达量与P+LPS组相比,无明显差异(P>0.05)。(2)ELISA结果显示,与C组比较,LPS组人肺泡Ⅱ型上皮细胞30 min、2 h、4 h、12 h、24 h点TNF-α均明显升高(P<0.05)。P+LPS组人肺泡Ⅱ型上皮细胞30 min、2 h、4 h、12 h、24 h点TNF-α较LPS组均明显降低(P<0.05)。结论 (1)TLR4可能介导了LPS诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞的炎症反应。(2)全氟化碳减轻LPS诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞的炎症反应,可能与抑制细胞表面TLR4的信号活化,进一步抑制下游NF-κB的转导路径,从而降低TNF-α的产生有关。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者外周单个核细胞肿瘤坏死因子α及NF-κB的表达及关系

【目的】研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者外周血单个核细胞（PBMC）中核因子-κB（NF-κB）以及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达及其之间的关系。【方法】依据睡眠监测的结果,将实验对象分为正常对照组与OSAHS组,进一步将OSAHS组分为轻、中、重组。采用免疫印迹法（Westernblot）测定其PBMC的NF-κB蛋白水平,以逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）对PBMC的TNF-α mRNA半定量,并采用ELISA法检测TNF-α血清水平,而且其中18名进行持续正压气道通气（CPAP）治疗患者测定治疗一月后血清中TNF-α水平。【结果]OSAHS组较对照组PBMC的NF-κB蛋白水平及其TNF-αmRNA水平、TNF-α血清水平的表达有显著性差异,且轻度及中度与重度OSAHS组间PBMC的NF-κB蛋白水平及TNF-α mRNA水平、TNF—α血清水平的表达均有显著性差异。OSAHS患者PBMC的NF-κB蛋白表达与血清TNF—α水平、PMBC的TNF—α mRNA水平两两间均为正相关,而且OSAHS患者呼吸暂停低通气指数（AHI）与PB—MC的NF-κB蛋白表达、血清TNF-α水平、PBMC的TNF-α mRNA水平均呈显著正相关,最低血氧饱和度（LSaO2）与PBMC的NF-κB蛋白表达亦呈显著正相关。【结论】说明在OSAHS患者中转录因子NF-κB是TNF-α的重要上游调节因子,并促进了TNF-α的表达,从而参与了OSAHS的发病机制。NF-κB蛋白水平在一定程度上预示了疾病的严重程度。     

高血压肾损害患者TNF-α水平的变化研究

目的：探讨TNF-α水平在高血压肾损害患者中的变化。方法：根据尿蛋白排泄率将73例高血压患者分为两组：单纯高血压组37例,高血压肾损害组36例,同期选择30名健康体检者作为健康对照组,采用放射免疫法检测各组血清TNF-α水平。结果：高血压组TNF-α水平高于健康对照组（P〈0.05）,其中高血压肾损害组TNF-α水平高于单纯高血压组（P〈0.05）。高血压组患者TNF-α水平与尿蛋白排泄率相关（r=0.703,P〈0.01）,而与血压水平无相关性。结论：高血压肾损害患者TNF-α升高,升高的TNF-α可能参与了高血压肾损害的进展。     

重组人促红细胞生成素对大鼠颅脑损伤后NF-κB表达的影响

目的观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)对创伤性颅脑损伤(TBI)后脑组织NF-κB活性及NF-κB mRNA表达的影响,探讨其在继发性颅脑损伤中的作用。方法 84只雄性SD大鼠建立颅脑损伤模型,随机分为颅脑损伤组(TBI组,n=42)和rhEPO治疗组(TBI-rhEPO组,n=42),于预定时间点行神经功能损伤评分(NSS),通过光镜观察创伤灶及周围脑组织变化,采用免疫组化方法检测脑组织中NF-κB及TNF-α的表达情况,RT-PCR检测NF-κB mRNA表达情况。结果颅脑损伤后12 h至7 d,TBI-rhEPO组NSS始终低于同一时间点TBI组(P<0.05);TBI组大鼠不同阶段NF-κB蛋白表达及mRNA表达明显升高,NF-κB表达水平与TNF-α表达水平呈正相关关系(r=0.519,P<0.05),且与组织炎症损伤程度一致,TBI-rhEPO组不同阶段NF-κB蛋白及mRNA表达均明显低于TBI组(P<0.05)。结论颅脑损伤早期应用rhEPO,可能通过抑制NF-κB活性,降低NF-κB、TNF-α的表达,从而抑制继发性炎症反应,减轻继发性颅脑损伤。     

TNFα对端粒酶活性和hTERT基因表达的调控

端粒酶在端粒延长和细胞保护方面发挥重要作用。端粒酶的限速酶-人端粒酶逆转录酶(hTERT)不仅在端粒自稳,而且在细胞存活、DNA损伤和基因稳定性方面都具有重要作用。肿瘤坏死因子α(TNFα)是正常造血最重要的一种负性调控因子,对于造血细胞分化的异常调控、导致基因不稳定和骨髓造血功能异常方面发挥重要作用。本文就TNFα对端粒酶活性和hTERT基因表达的调控及其相关的机制作一综述。     

降压治疗对原发性高血压患者血压及血清IL-6、TNF-α季节性变异的影响

目的观察降压治疗对原发性高血压患者血压和血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)季节性变异的影响。方法选择2013年夏季就诊于内蒙古医科大学鄂尔多斯临床医学院心内科门诊的原发性高血压患者60例,失访8例,最终研究对象为52例,按照前瞻性随机对照研究方法分为两组,含肾素-血管紧张素-醛固酮系统抑制剂(RASI)组30例,钙通道阻滞剂(CCB)组22例。Epidata 3.1软件建立数据库,两组均在2013年夏季、秋季、冬季及2014年春季来院,采集空腹静脉血,酶联免疫吸附测定法检测血清IL-6、TNF-α浓度,观察两组患者春、夏、秋、冬季血压及血清IL-6、TNF-α浓度的变化。结果两组的收缩压冬季高于夏季[含RASI组:(158±20)mm Hg、(145±12)mm Hg;CCB组:(158±20)mm Hg、(141±9)mm Hg],舒张压冬季高于夏季[含RASI组:(101±13)mm Hg、(93±9)mm Hg;CCB组:(100±4)mm Hg、(90±7)mm Hg],差异均有统计学意义(P均<0.05)。两组血清IL-6浓度冬季明显高于其他季节[含RASI组:春季(44.71±1.93)ng/L,夏季(48.09±7.97)ng/L,秋季(51.62±11.64)ng/L,冬季(60.29±5.64)ng/L;CCB组:春季(52.27±11.38)ng/L,夏季(45.11±8.72)ng/L,秋季(43.86±2.00)ng/L,冬季(71.72±7.79)ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.01);两组血清TNF-α浓度冬季明显高于其他季节[含RASI组:春季(208.85±25.21)ng/L,夏季(237.26±33.51)ng/L,秋季(217.93±23.32)ng/L,冬季(304.22±21.01)ng/L;CCB组:春季(225.99±40.92)ng/L,夏季(231.72±49.80)ng/L,秋季(206.82±32.82)ng/L,冬季(352.07±36.50)ng/L],差异均有统计学意义(P均<0.01);春、夏、秋季比较差异无统计学意义(P>0.05);冬季血清IL-6、TNF-α浓度含RASI组低于CCB组(P<0.05)。收缩压和舒张压是秋季及冬季的血清IL-6、TNF-α增高的独立因素(均P<0.05);气温及TNF-α是冬季血清IL-6增高的独立因素(均P<0.05)。结论原发性高血压患者经口服CCB及含有RASI为基础治疗药物的降压治疗,血压及促炎因子的水平仍然存在季节性变异,冬季高于夏季。以含有RASI为基础治疗药物的降压治疗,可以使冬季的促炎因子水平明显降低。     

核因子κB和肿瘤坏死因子α在正常椎间盘及其退行性变组织中的表达

目的观察核因子κB和肿瘤坏死因子α在椎间盘退行性变组织中的表达情况,并与正常椎间盘组织比较。方法取唐山市第二医院脊柱外科2004-12/2005-05手术切除的30例退行性变椎间盘组织,以10例正常椎间盘组织(创伤手术中摘除的椎间盘组织)作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测所有标本中核因子κB和肿瘤坏死因子α。结果40例全部进入结果分析。椎间盘退行性变组织中核因子κB和肿瘤坏死因子α的表达明显高于正常椎间盘组织[(0.524±0.096),(0.102±0.023)μg/L;(0.367±0.089),(0.096±0.016)μg/L,P<0.01]。结论核因子κB和肿瘤坏死因子α在椎间盘退行性变组织中的表达增高,提示其可能在椎间盘的退行性变中起重要作用。