颞叶癫痫大鼠缝隙连接蛋白32表达变化的实验研究

目的 建立大鼠颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)模型,观察大鼠缝隙连接蛋白32(connexin32,Cx32)的表达变化,进一步探讨TLE发病机制.方法 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠88只,随机为正常对照组(n=8)、手术对照组(n=40)和红藻氨酸(KA)致痫组(n=40),其中手术对照组和KA致痫组又按术后3 h、6h、12、24h和7 d分为5个亚组.每组8只.通过免疫组织化学染色检测各组cx32蛋白的表达变化.结果 KA致痫后3 h大鼠的颠叶皮层区及海马区Cx32阳性表达逐渐增多,并持续上升,时程越长阳性表达越多,平均光密度值越高(P<0.01).KA致痫后各时间点cx32平均光密度值明显比对照组增多,差异有显著性(P<0.05);手术对照组与正常对照组相比,Cx32平均光密度值差异无显著性(P>0.05).KA致痫后大鼠颞叶皮层区及海马区均有Cx32阳性表达,海马区Cx32平均光密度值明显比颞叶皮层高(P<0.05 o结论cx32可能参与颞叶癫痫的发生发展过程,提示cx32特异性的抑制剂有可能为颞叶癫痫的临床治疗开辟新的前景.     

耐药性颞叶癫痫患者脑组织中Cdc42的表达

目的研究耐药性颞叶癫痫患者脑组织中细胞分裂周期蛋白42（Cdc42）的表达,探讨其在耐药性颞叶癫痫形成中的意义。方法在重庆市癫痫病防治中心建立的耐药性颞叶癫痫患者术后脑组织库中抽取20例患者的脑组织,用免疫组织化学、免疫荧光分别检测其中Cdc42的表达,并与性别相同、年龄近似的对照组进行比较。结果免疫组织化学检测到病例组、对照组颞叶,病例组海马、对照组海马平均吸光度（A）值分别为0．038±0．016,0．020±0．005．0．049±0．009,0．025±0．009,t检验提示病例组与对照间差异有统计学意义（P〈0．01）。免疫荧光法观察病例组、对照组颞叶,病例组、对照组海马荧光强度分别为18．3±2．5,11．8±2．9,23．8±3．3,10．1±2．6,病例与对照组间同样存在统计学差异（P〈0．01）。结论Cdc42在耐药性颞叶癫痫患者的颞叶皮质及海马中表达增强,提示其参与了耐药性颞叶癫痫的形成。     

难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层金属基质蛋白酶-9的表达

目的研究成人难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层中金属基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨其在难治性癫痫发病中的作用机制。方法收集新桥医院神经外科手术切除的成人难治性颞叶癫痫颞叶皮层标本24例,与15例正常对照皮层比较,运用RT-PCR、明胶酶谱法和免疫组织化学方法检测MMP-9在致痫灶中的表达分布。结果在难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层中,MMP-9在mRNA、酶活性较对照组明显升高(P<0.05)。免疫组化结果显示,在正常皮层中MMP-9弱至中等强度表达于神经元上,偶见胶质细胞表达,而在致痫灶中强表达于锥体神经元和星形胶质细胞上,免疫染色强度明显高于正常皮层[染色强度值:(2.13±0.56)vs(1.52±0.69);相对光密度值:(55.60±7.20)vs(37.10±8.70);P<0.05]。结论难治性颞叶癫痫患者颞叶致痫皮层中MMP-9表达增高可能与癫痫发病密切相关,有可能成为新的难治性癫痫的药物靶点。     

难治性颞叶癫痫患者的病理学研究

目的 探讨难治性颞叶癫痫患者线粒体改变与神经元变性之间的关系.方法 30例难治性颞叶癫痫患者的临床资料、海马病理学改变进行比较分析.结果 光镜:神经元缺失,电镜下可见线粒体肿胀明显,内、外膜崩解,嵴变形断裂消失,部分线粒体呈空泡变.结论 神经元变性坏死程度与发病年龄有关,可认为脑损伤发生年龄越小,残存神经元数量越少,线粒体的改变与神经元的变性坏死程度有一定联系,其具体联系还需进一步研究.     

颞叶癫痫患者脑内细胞凋亡研究

目的：通过检测顽固性颞叶癫痫患者手术切除标本中的细胞凋亡情况来探讨细胞凋亡在癫痫发病中的作用及癫痫的发病机制。方法：选取15例颞叶癫痫患者和5例非癫痫患者手术标本，利用TUNEL方法检查标本中细胞凋亡情况。结果：经统计学分析实验组TUNEL阳性细胞平均百分率（52．2％）与对照组（4．0％）相比有显著性差异（P〈0．05）。结论：细胞凋亡在癫痫的起始发病和不断演化过程中都起着重要作用。     

颞叶癫痫患者脑内细胞凋亡研究

目的:通过检测顽固性颞叶癫痫患者手术切除标本中的细胞凋亡情况来探讨细胞凋亡在癫痫发病中的作用及癫痫的发病机制。方法:选取15例颞叶癫痫患者和5例非癫痫患者手术标本,利用TUNEL方法检查标本中细胞凋亡情况。结果:经统计学分析实验组TUNEL阳性细胞平均百分率(52.2%)与对照组(4.0%)相比有显著性差异(P<0.05)。结论:细胞凋亡在癫痫的起始发病和不断演化过程中都起着重要作用。     

药物难治性颞叶癫痫的外科治疗

目的：分析药物难治性颞叶癫痫的手术治疗以及定位评估。 方法：术前应用神经影像学、脑电图检查等综合评估定位定侧,选择病例外科手术治疗。 结果：按照Engel标准评定,40例中,EngelⅠ级25(62.5%),Ⅱ8(17.3%),Ⅲ级6(14.8%),Ⅳ级1(2.5%)。本组无死亡病例。 结论：对于药物难治性颞叶癫痫,多种检查方法联合应用能准确定位致痫灶,多种手术方法应用可以取得较好的疗效。     

43例颞叶癫痫的误诊分析

目的探讨颞叶癫痫的诊断方法,从而提高颞叶癫痫的正确诊断率,防止误诊误治。方法对一组43例颞叶癫痫的误诊病例作回顾性总结分析。结果全组病例经过详细的追问病史,通过CT、磁共振成像(MR I)和脑电图的全面检查,综合评价而得以正确诊断,给予相应的正规治疗,均取得完全控制症状的效果。结论提高对本病认识水平,详细追问病史,认其做好CT、MR I和脑电图检查,综合分析,可提高对本病的正确诊断率,从而可防止误诊误治。     

难治性颞叶癫痫的显微手术治疗

目的 探讨难治性颞叶癫痫的显微手术治疗.方法 对25例难治性颞叶癫痫患者采用视频脑电图、MRI、正电子发射型计算机断层显像(PET) CT进行术前致痫灶定位,结合术中皮层及深部电极定位,均给予颞前叶、海马-杏仁核切除术.结果 术后随访半年至一年,Engle Ⅰ级20例(80%),Ⅱ级3例(12%),Ⅲ级2例(8%).结论 联合视频脑电图、MRI、正电子发射型计算机断层显像(PET)、发作期临床表现综合术前定位致痫灶,显微手术切除前颞叶、海马-杏仁核结合皮层热灼能安全、有效的治疗颞叶难治性癫痫.     

颞叶癫痫相关突触后致密物蛋白质的蛋白质组学筛选研究

目的 筛选颞叶癫痫(TLE)相关突触后致密物(PSD)蛋白分子.方法 建立氯化锂-匹罗卡品颞叶癫痫大鼠模型;收集颞叶癫痫组(TLE组)、非颞叶癫痫组(非TLE组)以及正常对照组(Norm)3组的新鲜全脑组织,联合应用蔗糖密度梯度离心和膜顺序提取技术提取PSD;进行双向凝胶电泳,并通过PDQuest图像分析软件比较分析,筛选TLE组特异性和差异性表达的蛋白质点;选取部分差异蛋白质点进行取MALDI-TOF-MS质谱鉴定;应用Western验证部分所鉴定蛋白质在PSD中的表达状况.结果 与Norm和非TLE组比较,TLE组中存在40个差异表达蛋白质点,表达上调的主要有热休克蛋白27(HSP-27)、果糖二磷酸醛缩酶(FBA)、肌酸激酶(CK)、甲状腺受体相互作用蛋白6(TRIP6)、髓鞘碱性蛋白S(MBP)、LIM结构域(LIM);表达下调的主要有细胞骨架蛋白、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶(PPIase)、分选连接蛋白3(SNX3)、乌头酸水合酶(ACO)、甘油醛三磷酸脱氢酶(GAPDH)、琥珀酸辅酶A连接酶(SCOAL).HSP27和微管蛋白α、SNX3在TLE、非TLE和Norm 3组PSD中均免疫染色阳性.结论 TLE组PSD蛋白质差异性表达可能是脑损伤后可塑性反应的结果,但其表达量改变的程度可能与颞叶癫痫形成有关,可视为促/抗TLE形成的重要候选分子.     

伴听觉症状的家族性颞叶外侧癫痫的临床特点及LGI1基因突变检测

目的 研究伴听觉症状的常染色体显性遗传颞叶外侧癫痫(ADLTE)一家系相关基因富亮氨酸胶质瘤失活基因1(LGll)的突变,探讨该综合征的临床特征及基因基础.方法 对该家系进行详细的病史询问和遗传学调查,采集患者和家属血液,按受累同胞对配对法对LGIl基因的8个外显子分别设计引物,用聚合酶链反应(PCR)结合DNA测序,检测该家系中有无LGIl基因外显子突变.结果 家系中所有患者符合国际抗癫痫联盟2001年新癫痫综合征标准中ADLTE典型表现,头颅MRI正常,PCR结合DNA序列分析LGIl基因8个外显子未发现突变.结论 该家系临床表现与ADLTE相同,但其发病不是由已知的LGIl基因外显子突变所致.     

颅内电极长程记录在颞叶癫痫定位中的应用

目的 探讨颅内电极长程记录在颞叶癫痫定位、定侧中的应用,评价其临床价值.方法 2006年1月至2010年10月北京天坛医院神经外科60例经颅内电极定位的颞叶癫痫患者,电极类型采用硬膜下条状、栅状以及深部电极,手术方式包括颅骨钻孔电极植入、立体定向深部电极植入和骨瓣开颅电极植入.结果 额-颞皮层电极植入34例,额-颞前-颞枕交界电极植入7例,双颞皮层电极植入7例,深部电极联合颞叶皮层电极植入7例,颞前-颞枕交界电极植入3例,条状电极联合栅状电极植入2例.手术方式包括前颞叶切除术50例,联合额叶致痫灶切除7例,联合胼胝体切开1例,颞后枕新皮层痫灶切除联合海马杏仁核切除2例.结论 颅内电极长程记录是一种有效的检查方法和重要的定位手段,可应用于无创评估方法难以定位、定侧的颞叶癫痫.

Abstract：

Objective To explore the application of intracranial electrodes (IE) for temporal lobe epilepsy ( TLE) surgery and assess the clinical utility of intracranial video electroencephalography (IVEEG). Methods The clinical data of 60 TLE patients undergoing implantation of IE were reviewed retrospectively. Cortical subdural strip, grids and depth electrodes were implanted by sphenotresia, bone disc craniototny or stereotactic technology. Results The implanted electrodes were as follows; frontaltemporal lobe cortical strip (n = 34), frontal-anterior temporal-occipitotemporal lobe cortical strip (n =7),bilateral temporal lobe cortical strip (n = 7), combined temporal lobe strip & depth (n =1) , anterior temporal-occipitotemporal junction cortical strip (n=3) and combined strip & grid (n=2). The following procedures were performed: anterior temporal lobectomy ( ATL) (n =50), combined ATL & frontal focal cortical resection (n = 7), combined ATL & callosotomy (n = 1 ) and combined neocortex epileptogenic focus resection & amygdalohippocampectomy ( n = 2 ). Conclusion IVEEG is effective and important for the localization of epileptogenic focus in patients with intractable temporal lobe epilepsy.     

颞叶癫癎的亚类分型及其临床和病因学特征的研究

目的分析和总结颞叶癫痫的临床分型、病因特征及其临床意义。方法根据临床、脑电图特征和神经影像学资料对190例颞叶癫痫进行临床分型和病因分析。结果颞叶内侧型癫痫患者172例,其中62．2％的患者出现上腹部异样感等先兆;67．4％的患者出现自动症,以口咽自动症多见;脑电图显示前或前中颞区癫痫样放电;病因依次为海马硬化、颅内感染、脑肿瘤、脑血管病、脑外伤等。颞叶外侧型癫痫患者10例,均出现幻听等先兆;脑电图显示后或中后颞区癫痫样放电;病因依次为脑外伤、脑肿瘤、皮层萎缩等。8例患者未能分型。结论颞叶癫痫是一组临床常见、病因复杂、表现多样的癫痫综合征,临床分型是选择治疗手段的前提。通过患者临床特征和一些非侵入性检查手段可以对大部分颞叶癫痫进行内外侧分型诊断。     

海马苔藓纤维出芽及突触重组与颞叶癫痫的相关性研究

目的探讨颞叶癫痫（TLE）海马出芽苔藓纤维（MF）突触的超微结构特征在其发病机制中的作用以及神经轴突诱向因子netrin-1表达与MF突触重建的关系。方法锂-匹罗卡品诱导大鼠TLE,Timm组化染色标记出芽MF突触末端,在电镜下观察新生突触的超微结构特征。用原位杂交方法检测netrin-1在大鼠海马的表达。结果出芽MF突触主要是轴棘型非对称性突触,偶可看到出芽轴突和兴奋性颗粒细胞体形成突触联系。癫痫状态（SE）后7d,在海马齿状回颗粒细胞层可见netrin-1mRNA表达上调,并持续至SE后28d。其表达的时空顺序和海马MF出芽以及突触重组相一致。结论出芽MF突触的超微结构特性支持重组突触形成重复的兴奋性环路;神经轴突诱向因子netrin-1在出芽MF的靶向性生长和突触重组过程中可能起重要作用。     

颞叶癫痫手术时的皮质脑电描记

提要报告1980年10月至1992年6月间,在皮质脑电描记下手术治疗颞叶癫痫55例,前颞叶切除50例,杏仁核、海马切除5例。皮质脑电描记结果说明,颞叶癫痫的痫灶绝大多数来源于颞叶外侧皮质和颞叶内侧结构。术中皮质脑电描记可提供痫灶的精确部位和范围。     

海马萎缩与颞叶癫痫

目的　对仅有海马萎缩 (硬化 )的颞叶癫痫的诊断和手术治疗作一探讨。方法　对 2 4例病人术前进行的EEG、MRI、SPECT检查及手术治疗进行回顾性分析。结果　 2 4例病人均行前颞叶、杏仁核、前海马切除 ,其中对 3例位优势半球语言区的致痫灶作了多处软脑膜下横切术 (MST) ,术后随访 12个月以上 ,癫痫发作消失者 18例(75 % ) ,发作减少者 6例 (2 5 % ) ,无 1例出现语言障碍。结论　海马萎缩可通过MRI检查量化分析 ,手术治疗可获得满意效果。