抑癌基因WT1研究状况

Ｗｉｌｍｓ’瘤是儿童最常见的恶性实体瘤，ＷＴ１基因是从Ｗｉｌｍｓ’瘤克隆出的第一个公认的抑癌基因。本文综述了ＷＴ１基因的结构、功能、表达、表达调节、突变等方面的研究状况。     

WT1基因在肾母细胞瘤中研究进展

肾母细胞瘤，又称Ｗｉｌｍｓ瘤、肾胚胎瘤，是２～５岁儿童最常见的恶性实体瘤之一，发病率约为 １／１０，０００。 ＷＴＩ基因［１］是世界上继视网膜母细胞瘤抑制基因（ＲＢ１）之后被成功克隆的第二个抑癌基因，它首先发现存在于肾母细胞瘤和一些先天性泌尿系畸形中，本文就ＷＴＩ基因在肾母细胞瘤中的作用研究进展和一些可能的发生机制作一综述，以供参考。１ＷＴ１的分子生物学研究进展 遗传学分析肾母细胞瘤抑制基因（ＷＴ基因）定位在染色体１１Ｐ１３（ＷＴ１）、１１Ｐ１５（ＷＴ２）和１６ｑ（ＷＴ３）。目前研究较多的是ＷＴ１…     

成人Wilms＇瘤4例报告及文献复习

为引起临床工作者的重视，报告４例成人Ｗｉｌｍｓ＇瘤，并结合文献对成人Ｗｉｌｍｓ＇瘤的诊断、治疗及预后等问题进行讨论。认为本病的临床表现和病理改变易与肾癌相混淆，可以将有无原始肾小管形成作为本病与其他肿瘤胚胎成分鉴别的依据；采取综合分析方法对本病的术前诊断是有益的；对所有各期成人Ｗｉｌｍｓ＇瘤均应采取积极的治疗。     

成人Wilms‘瘤4例报告及文献复习

为引起临床工作者的重视，报告４例成人Ｗｉｌｍｓ＇瘤，并结合文献对成人Ｗｉｌｍｓ＇瘤的诊断、治疗及预后等问题进行讨论。认为本病的临床表现和病理改变易与肾癌相混淆，可以将有无原始肾小管形成作为本病与其他肿瘤胚胎成分鉴别的依据；采取综合分析方法对本病的术前诊断是有益的；对所有各期成人Ｗｉｌｍｓ＇瘤均应采取积极的治疗。     

成人肾外性的肾母细胞瘤1例报告

成人肾外性的肾母细胞瘤１例报告乔志正，魏恒祥，刘殿国肾母细胞瘤（Ｗｉｌｍｓ）瘤）是小儿腹膜后间隙常见肿瘤，成人极少发病，肾外性的肾母细胞瘤更是罕见。我院曾收治１例，现报告如下：患者男，２２岁。１９９４年５月１３口入院，２月前无意发现左腹部无痛性包块，...     

小儿胚胎性肿瘤印迹基因TSSC 5突变的筛查

基因组印迹是指亲代来源依赖性基因表达 ,不遵循孟德尔遗传规律。1998年Ｌｅｅ等[1] 在人类染色体 11ｐ15 5区分离出新印迹基因ＴＳＳＣ5 (ｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇｓｕｂ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌｔｒａｎｓ ｆｅｒａｂｌｅｆｒａｇｍｅｎｔ,ＳＴＦｃＤＮＡ 5 )。为探讨该基因与胚胎性肿瘤形成的关系 ,我们对ＴＳＳＣ 5基因突变进行检测。资料和方法1.一般资料 :我院 1996年 3月至 2 0 0 1年 2月收治肝母细胞瘤 2 3例 ,Ｗｉｌｍｓ瘤 30例 ,恶性畸胎瘤 2例 ,横纹肌肉瘤2例 ,4例正常胚胎组织作为对照。所有患者均留取外周抗凝血 5ｍ…     

转染Caspase-1基因对人胃癌细胞株生物学特性影响的研究

目的　探讨转染Ｃａｓｐａｓｅ１ 基因对胃癌细胞生物学特性的影响。方法　将人凋亡基因Ｃａｓｐａｓｅ１的重组逆转录病毒导入胃癌细胞株Ｘ１０８,对转染阳性细胞的体外增殖、细胞培养液中ＣＥＡ 含量及裸鼠致瘤性进行分析。结果　导入的Ｃａｓｐａｓｅ１ 基因使细胞增殖周期发生变化,Ｇ１ 期细胞数目增多,Ｓ期细胞数目减少。转染细胞培养液ＣＥＡ含量有下降趋势。胃癌细胞株Ｘ１０８Ｃａｓｐａｓｅ１ 体外生长速度明显受抑,裸鼠体内致瘤性降低,肿瘤生长缓慢。结论　Ｃａｓｐａｓｅ１ 不能促使Ｘ１０８ 胃癌细胞凋亡,但可以使其增殖受抑,肿瘤细胞的恶性程度降低。     

野生型p53基因导入对膀胱癌细胞生长抑制和H－ras基因表达调控

通过逆转录病毒载体将外源野生型ｐ５３基因导入膀胱癌细胞ＢＩＵ－８７和ＥＪ，使细胞在体外标准培养条件下生长速率降低，丧失裸鼠致瘤性。细胞周期分析显示Ｇ０＋Ｇ１细胞比率明显增高，已证明，ＢＩＵ－８７和ＥＪ细胞都有ｒａｓ基因突变和表达扩增。进一步研究发现，转染的细胞内Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ表达低于非转染细胞。结果提示，增加细胞内野生型ｐ５３基因表达量能抑制突变的ｒａｓ基因表达，从而抑制膀胱癌细胞的恶性增殖。     

肾母细胞瘤WT1mRNA的表达及其与组织分化的关系

作者利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｄｏｔ ｂｌｏｔ分子杂交，检测了１３例肾母细胞瘤、２例正常儿童肾、１例胚胎肾ＷＴ１ｍＲＮＡ的表达。通过ＷＴ１ｍＲＮＡ水平的比较及其与细胞学类型的分析，提示ＷＴ１ｍＲＮＡ的表达与肾母细胞瘤的组织分化有关，ＷＴ１ｍＲＮＡ的低表达可能是导致后肾间细胞异常分化，间质细胞优势型肾母细胞瘤形成的重要因素。     

小儿肾母细胞瘤患者细胞免疫状况与生物学特征的关系

应用单克隆抗体碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ法）检测３５例小儿Ｗｉｌｍｓ瘤患者外周血总Ｔ细胞（ＣＤ３＋）、Ｔ辅助／诱导细胞（ＣＤ４＋）、Ｔ抑制／杀伤细胞（ＣＤ８＋）。按ＮＷＴＳ标准，对患者进行临床分期、组织学分型、组织分化程度等病理学分类。把患者的免疫状况与其形态学特征联系分析，结果显示：晚期肿瘤、胚细胞型、组织分化差的不顺利型细胞免疫抑制明显较重（Ｐ＜０．００１），预后也明显较差。提示小儿Ｗｉｌｍ瘤细胞免疫状况与其生物学特征有一定内在关系。     

MTS1基因产物P16蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达

ＭＴＳ１基因产物Ｐ１６蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达陈强王新生董胜国李玉军孙显露申东亮ＭＴＳ１（ｍｕｌｔｉｐｌｅｔｕｍｏｒｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ１）因子是新近发现的一种多肿瘤抑制基因，能负性调节细胞周期，并与多种人类肿瘤的发生、发展密切相关［１］。为探讨...     

Fas配体基因在肾细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨Ｆａｓ配体（ｒａｓ ｌｉｇａｎｄ,ＦａｓＬ）基因在肾细胞癌中的表达及临床临床。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及免疫组织技术化学分别检测ＦａｓＬ ｍＲＮＡ及蛋白在５１例肾细胞癌中的表达。结果 ５１例肿瘤 ３２例ＦａｓＬ基因阳性表达。其中１、２、３级肿瘤中ＦａｓＬ的阳性表达率分别为２５．０％、６３．６％、８８．２％,１、２、３、４期肿瘤肿瘤中Ｆａｓｌ的阳性表达率分别为３１．６     

转人白细胞介素—2基因瘤苗诱导大鼠的抗肿瘤作用

经逆转录病毒载体将ｈＩＬ２基因导入大鼠Ｗａｌｋｅｒ瘤细胞ＷＴ２５６中，ＰＣＲ－ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ检测证实ｈＩＬ２基因已整合到ＷＴ２５６细胞基因组中，检测细胞培养上清证实转基因细胞具有分泌ｈＩＬ２活性。     

体内基因转移建立多药耐药性人膀胱癌裸鼠荷瘤模型

目的 建立人膀胱癌多药耐药性裸鼠荷瘤模型。方法 应用逆转录病毒上清液裸鼠皮下移植瘤内及瘤周注射法转移ｍｄｒ１基因,腹腔注射化疗药物观察肿瘤模型的耐药性,免疫组化检测肿瘤细胞Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ＧＰ）的表达,ＲＴ－ＰＣＲ检测肿瘤内ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ的表达量。结果 携带ｍｄｒ１基因的逆转录病毒上清液注射后肿瘤模型产生多药耐药性,经过滤和离心浓缩的病毒上清液６０％细胞表达Ｐ－ＧＰ,是病毒原液基因转移率的２倍     

Fas表达水平与抗Fas治疗生物学效应的关系

目的　研究细胞表面Ｆａｓ 表达水平与抗Ｆａｓ 治疗生物学效应之间的关系。　方法　将低表达Ｆａｓ 的膀胱癌细胞系ＥＪ细胞通过脂质体介导的方法转染Ｆａｓ 基因,并用流式细胞直接免疫荧光术检测Ｆａｓ 的表达;采用鼠抗人Ｆａｓ 单克隆抗体ＤＸ２ ＩｇＧ１κ诱导转染Ｆａｓ 基因的和未转染Ｆａｓ 的ＥＪ细胞的细胞凋亡作用,并用碘化丙啶染色流式细胞术检测。　结果　转染Ｆａｓ 基因后的ＥＪ细胞Ｆａｓ分子表达明显增加,Ｆａｓ 分子表达率从２６ ．１１ ％ 增加到６８．６９％ ;鼠抗人Ｆａｓ 单克隆抗体ＤＸ２ ＩｇＧ１κ诱导的转Ｆａｓ 基因的ＥＪ细胞凋亡数明显增多,达６６ ．３％ ,而未转基因的ＥＪ细胞凋亡较少,仅７ ．４％ 。　结论　人类恶性肿瘤细胞系对Ｆａｓ 抗体触发凋亡信号的敏感性主要依赖于细胞表面Ｆａｓ 的表达水平。     

原癌基因c-jun、c-fos 在小鼠胚泡着床前后的表达

为了解胚泡着床前后ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ表达的动态变化。采用逆转录聚合酶链反应方法检测小鼠子宫内膜原癌基因ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ的表达。结果表明：（１）小鼠正常内膜有一定的ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ基因的表达；（２）胚泡着床前（孕３天）的内膜ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ基因的表达明显高于正常内膜（Ｐ＜０．００１）；（３）着床后，孕５与孕７天内膜ｃ ｆｏｓ、ｃ ｊｕｎ基因的表达低于着床前，至孕７天已低于正常水平（Ｐ＜０．００１）。提示原癌基因ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ与小鼠胚泡着床有关。     

Fas在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达

采用免疫组化、原位杂交、反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法检测正常睾丸及精原细胞瘤组织中Ｆａｓ蛋白及ＦａｓｍＲＮＡ的表达,以明确Ｆａｓ在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达情况。材料与方法　精原细胞瘤石蜡标本为１９８７年至１９９７年本所病理室存档蜡块,均经病理确诊。正常睾丸组织蜡块共７例,病理切片证明均有正常睾丸发育。正常新鲜睾丸组织１例,来源于意外伤亡的健康青年,液氮冻存。免疫组化方法检测Ｆａｓ蛋白表达所用的一抗为亲和纯化的兔抗人Ｆａｓ多克隆抗体,Ｆａｓ（Ｃ２０）（购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ生物技术…     

PML生长抑制因子过表达抑制前列腺癌细胞生长和致瘤能力的实验研究

为探讨ＰＭＬ（Ｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃｌｅａｋｅｍｉａ）生长抑制因子对人前列腺癌细胞的作用，采用ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ介导基因转染技术将ＰＭＬ基因和Ｇ４１８抗性基因联合导入体外培养的人前列腺癌细胞，经Ｇ４１８筛选、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ杂交检测出ＰＭＬ蛋白过表达细胞克隆，经体外生长抑制试验和裸鼠体内致瘤能力试验，观察ＰＭＬ过表达对前列腺癌细胞体外生长和裸鼠体内致瘤能力的影响。结果证实ＰＭＬ基因被成功地导入前列腺癌细胞中并得到高效表达。过表达ＰＭＬ蛋白的细胞体外生长能力和裸鼠体内致瘤能力明显低于对照细胞。提示ＰＭＬ生长抑制因子过表达能够有效地抑制前列腺癌细胞的体外生长和裸鼠体内的致瘤能力。     

野生型P53基因导入对膀胱癌细胞生长抑制和H—ras基因表达调控

通过逆转录病毒载体的将外源野生型Ｐ５３基因导入膀胱癌细胞ＢＩＵ－８７和ＥＪ，使细胞在体外标准培养条件下生长速率降低，丧失裸鼠致瘤性。细胞周期分析显示Ｇ０＋Ｇ１细胞比率明显增高，已证明，ＢＩＵ－８７和ＥＪ细胞都有ｒａｓ基因突变和表达扩增。     

反义c－Ha－rasDNA对人胃癌转化细胞致癌性的抑制

作者人工合成了一条１５聚反义ｃ－Ｈａ－ｒａｓＤＮＡ，此反义ＤＮＡ与ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因转录起始区域的序列互补。其可以在转录和翻译水平上阻断ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因表达，使胃癌转化细胞的一些恶性表型（包括生长速度、软琼脂中集落形成，裸鼠致瘤性和分化程度）发生逆转。在反义ＤＮＡ的５’－端共价连接一个补骨脂素基团后，其生物学活性显著增强，和靶基因序列不完全配对的对照寡聚核苷酸链不具有上述肿瘤抑制效应。结果提示：反义ＤＮＡ及其衍生物是进行肿瘤基因治疗有效工具之一。