T-细胞急性淋巴细胞白血病的κ轻链基因重排

免疫球蛋白(Ig)和T-细胞受体(TCR)基因重排是检测淋巴系统增殖性疾病克隆性的灵敏方法。已经证明了Ig重链TCRβ和γ基因探针对急性白血病缺乏谱系特异性,而传统认为Ig轻链基因重排是B—细胞谱系的一项很特异的指标。本文报道了1例T-细胞急性淋巴细胞白血病(ALL)患者,其TCRβ链基因发生重排,意外的是Igκ轻链基因也发生重排,未发现Ig重链基因重排。其中T-细胞ALL的κ轻链基因重排尚属首例报道。     

淋巴增生疾患中的免疫球蛋白和T细胞受体基因重组及原位免疫表型

作者在45例淋巴增生疾患的活检标本中按照WF进行组织形态分类、用免疫组织化学染色(Slg、CD-10、CD-19、CD-22、CD-21、CD-24、CD-9、HLA-DR、CD-3、CD-8、CD-4、CD-5、CD-1、CD-38、Leu7、Leu8及CD-15抗体)、及用DNA探针(Ig重链、Igκ轻链、Igλ轻链、TCRγ及TCRβ)作Southern Blot分析。结果免疫表型为B系的19例、T系3例,另3例不能确定。用DNA杂交技术,19例B系均有Ig重链重组,2例蕈样霉菌病有TCRβ基因重组,另1例免疫组织化学定为     

非放射法测定急性淋巴细胞白血病Ig和TCR基因重排

确定Ig 和TCR 基因重排已成为诊断急性淋巴细胞白血病的一个组成部份。标准的Southern 印迹技术是用对应于IgH 和TCRβ基因J 区的放射性同位素标记的DNA 探针作印迹杂交后,通过放射自显影确定有无该基因的重排。本文总结了用生物素标记的DNA 探针作Southern 印迹分析25例B 前体细     

MDS转化为AML-M0一例

目的为诊断微小分化型急性髓细胞白血病(AML-M0)提供现实依据。方法报告一例骨髓增生异常综合征(MDS)转化为AML-M0的临床过程。结果 MDS虽经有效治疗,但多数仍转化为白血病,其中以AML为主。结论 AML-M0的诊断在细胞形态学及化学染色的基础上必须应用细胞表型免疫分析等现代手段确诊。     

慢性B淋巴细胞白血病患者免疫球蛋白Fab段基因克隆及其可变区序列分析

目的：分析慢性B淋巴细胞白血病患者外周血单个核细胞免疫球蛋白Fab段基因。方法：提取慢性B淋巴细胞白血病患者外周血单个核细胞RNA,选用与Ig FR1 5′和CH1Cμ3′或CL区（Cκ／Cλ）3′互补的多对引物,通过RT－PCR扩增Ig Fab段基因,进行克隆和序列测定,并通过DNAtools和计算机网络对其可变区基因同源性进行分析和基因家族归类。结果：7例患者中4例外周血单个核细胞扩增出轻链基因,3例扩增出重链基因。所扩增的4条轻链基因均属于κ轻链,3条重链均为μ链基因。利用DNAtools分析软件,对轻链和重链分别进行同源性比较,3条重 链可变区基因差异较大,轻链可变区基因具有一定的同源性。对所扩增的Ig基因进行归类,结果4例患者的轻链均属于VκⅠ亚组;3例患者的重链中2例属VH3家族,1例为VH5家族。结论：慢性Ｂ淋巴细胞白血病患者存在独特的决定簇和相似决定簇。     

关于骨髓增生不良综合征的分类建议

当FAB协作组于1976年提出急性白血病之形态学分类时指出,尚有一类骨髓增殖异常综合征(dysmyelopoietic syndromes)或骨髓发育异常,综合征(myelodysplastic syndnomes,MDS)需要与急性粒细胞白血病相鉴别,包括“原始细胞增多的难治性贫血”及“慢性粒-单核细胞白血病”。这些病例在转化成较急性时鉴别更加困难。1981年本协作组在伦敦对30例这类病人的标本进行了形态学观察,将MDS分成五类。其中半数是原来诊断     

恶性血液病中涉及AML1的染色体易位

累及AML1基因的染色体平衡易位已报道20余种,其中12种易位所致的融合基因已被确定。伴AML1易位的恶性血液病异质性很大：①表现为不同的形态学亚型及免疫表型,包括急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、骨髓增生异常综合征(MDS)和慢性粒细胞白血病急性变(CML- BC)；②部分对化疗敏感,预后较好；部分为治疗相关或有核辐射接触史,预后不良。     

儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的流式细胞术分析

目的 根据白血病细胞的异常免疫表达,建立流式细胞术检测儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)微小残留病(minimal residual disease,MRD)的方法 ,探讨流式细胞术检测MRD在儿童ALL个体化治疗中的意义.方法 用流式细胞术以多种四色荧光抗体组合对健康儿童骨髓进行检测,建立健康儿童骨髓细胞双参数点图分析模板.对75例ALL初诊患儿的骨髓细胞进行MRD筛选,找出在双参数点图上的位置明显区别于正常骨髓细胞的免疫表型组合作为MRD监测的有效免疫表型组合,对其中60例患儿诱导治疗结束及后续治疗中的骨髓标本用这些有效免疫表型组合进行MRD监测.同步进行细胞形态学检测和PCR检测29种融合基因、IgH/T淋巴细胞受体(TCR)基因重排.结果流式细胞术检出69例(92.0%)可用于MRD监测的有效免疫表型组合,PCR检出21例(28.0%)可用于MRD监测的融合基因或IgH/TCR基因重排;诱导治疗结束后及后续治疗中有25份骨髓标本细胞形态学未检出白血病残留细胞,流式细胞术检测仍有0.021%～4.130%的白血病残留细胞.结论 流式细胞术检测儿童ALL MRD能较好地评估临床缓解期间ALL患儿体内残留白血病细胞的数量,其覆盖面和速度优于PCR检测方法 ,敏感性高于形态学检测方法 .     

儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的流式细胞术分析

目的 根据白血病细胞的异常免疫表达,建立流式细胞术检测儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)微小残留病(minimal residual disease,MRD)的方法 ,探讨流式细胞术检测MRD在儿童ALL个体化治疗中的意义.方法 用流式细胞术以多种四色荧光抗体组合对健康儿童骨髓进行检测,建立健康儿童骨髓细胞双参数点图分析模板.对75例ALL初诊患儿的骨髓细胞进行MRD筛选,找出在双参数点图上的位置明显区别于正常骨髓细胞的免疫表型组合作为MRD监测的有效免疫表型组合,对其中60例患儿诱导治疗结束及后续治疗中的骨髓标本用这些有效免疫表型组合进行MRD监测.同步进行细胞形态学检测和PCR检测29种融合基因、IgH/T淋巴细胞受体(TCR)基因重排.结果流式细胞术检出69例(92.0%)可用于MRD监测的有效免疫表型组合,PCR检出21例(28.0%)可用于MRD监测的融合基因或IgH/TCR基因重排;诱导治疗结束后及后续治疗中有25份骨髓标本细胞形态学未检出白血病残留细胞,流式细胞术检测仍有0.021%～4.130%的白血病残留细胞.结论 流式细胞术检测儿童ALL MRD能较好地评估临床缓解期间ALL患儿体内残留白血病细胞的数量,其覆盖面和速度优于PCR检测方法 ,敏感性高于形态学检测方法 .     

免疫分型在单株丙球蛋白血症中的应用评估

目的探讨免疫分型、血清免疫球蛋白的定量检测在单株丙球蛋白血症诊断中的价值。方法收集118例单株丙球蛋白血症患者进行血清蛋白电泳(SPE)、免疫固定电泳(IF)、免疫球蛋白(Ig)定量及血清轻链(κ、λ)检测。针对免疫分型阳性、Ig定量阴性患者进行分析。结果免疫分型阳性、Ig定量阴性患者56例,其中游离轻链型6例(κ轻链型2例,λ轻链型4例),未分泌型1例;免疫分型阳性、Ig定量阳性的患者62例。结论 IF技术对单株丙球蛋白血症的诊断及分型具有重要意义,可以结合血清Ig及轻链的定量检测等其他实验室诊断。     

原发性骨髓增生异常综合征的癌基因表达

作者分析原发性骨髓增生异常综合征(MDS)患者癌基因表达及其与血细胞形态学、遗传学和临床的关系。130例MDS患者,中数年龄77岁,男75例,女55例。其中,难治性贫血69例,铁粒幼细胞性贫血21例,慢性粒—单核细胞白血病14例,难治性贫血伴幼稚细胞增多24例,难治性贫血伴幼稚细胞增多转化型12例。应用印迹杂交技术和光密度分析,检     

老年急性白血病的形态特征及细胞化学和免疫表型研究

目的进一步探讨老年急性白血病(AL)形态特征、细胞化学及免疫分型的表达。方法采用细胞形态学、细胞化学染色及流式细胞术直接免疫荧光标记法对134例老年AL患者进行分型,同时以172例非老年AL患者为对照并进行比较。结果(1)老年急性非淋巴细胞白血病(AML)比例(78.3%)明显多于非老年AML比例(41.3%),差异有统计学意义(P0.05);(2)老年AL骨髓原始细胞中位数明显低于非老年组(P0.05);(3)老年组AML继发于骨髓异常增生综合征(MDS)比例(37.1%)明显多于非老年组比例(5.6%),差别有统计学意义(P0.05);(4)老年AL显示有3种免疫表型:纯系免疫表型74.7%;多系免疫表型16.2%;"裸型"9.1%。(5)AML中,老年组CD14+(23.0%)、CD64+(27.9%)、CD61+(19.6%)和CD41+(23.0%)表达率明显高于非老年组CD14+(6.7%)、CD64+(2.5%)、CD61+(1.3%)和CD41+(0.0%)的表达率,差别均有统计学意义(P0.05);(6)急性淋巴细胞白血病(ALL)中,老年组CD19+的最多见,表达率94.1%。结论综合分析老年AL形态学、细胞化学及免疫分型表达等特点,确定白血病细胞的来源和分化程度。对提高AL诊断的准确性、指导老年AL个体化治疗及判断预后均有重要意义。老年AL独特的形态学、免疫表型等可能是老年AL预后不良的原因之一。     

慢性粒细胞白血病淋巴系原始细胞危象(LBC):检测疗效和残留病变时bcr和免疫球蛋白重链(IgH)基因分子分析的关联

L-BC约占慢粒(CML)急变的1/3,且大多数显示B-细胞发育,形态及表型特点与B-谱系急性淋巴细胞白血病(ALL)相同。分析两型肿瘤相关性DNA重组即22号染色体上断裂点簇集区(bcr)和IgH基因重排。可以鉴别Ph′+细胞群和L-BC细胞。尽管这种重排发生在相对狭窄的基因组区,但病人之间每次杂交方式的序列变异常常不同,因此,bcr和IgH异常片段可作为独特的肿瘤标志。作者利用Southern印迹杂交技术。分析了4例发生一次或多次淋巴或混合性BC的CML病人慢性或急性期DNA标本,旨在检测疾病发展中的Ph′+细胞和原始细胞克隆。     

无染色体异常的FAB L3型B-细胞急性淋巴细胞白血病

根据FAB分类,急性淋巴细胞自血病(ALL)在形态学上分为L1、L2和L3三型,前两者的表型具有很大的异质性,作者对5例形态学为L3型ALL的免疫表型、细胞遗传学进行了研究。结果发现,所有病人白血病细胞同时表达la(HLA-DR)、CD19、CD20、CD21、CD24、CD31和表面Ig、2例表达CD10、3例表达CD71。而所有病人的CD1、CD2、     

免疫球蛋白基因重排分析在淋巴瘤诊断中的初步应用研究

用免疫球蛋白重链Ｊ区（ＪＨ），Ｋ轻链及λ轻链Ｃ区（ＣＫ，Ｃλ２）基因探针及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，对２２例非何杰金氏淋巴瘤进行分析。结果显示１３例尿Ｂ细胞淋巴瘤均出现重链基因重排，其中１０例有Ｋ或λ轻链基因重排；３例Ｔ细胞淋巴瘤中，１例出现重链，１例出现Ｋ轻链基因重排。１例分类未明淋巴瘤出现重链基因重排。５例未作免疫表型分析的淋巴瘤中有４例出一现重链，３例出现Ｋ轻链，１例出现λ轻链基因重排。     

异常免疫表型模式在急性髓系白血病微小残留检测中的应用

目的用多参数流式细胞术区分急性髓性白血病细胞与正常骨髓原始细胞免疫表型,建立急性髓系白血病细胞异常免疫表型模式和流式细胞术检测急性白血病微小残留病的方法。方法选择正常骨髓标本和急性髓性白血病患者骨髓标本,用流式细胞术分析髓系原始细胞免疫表型特征。并将标记抗原用于分析初发白血病细胞免疫表型,以寻找急性髓系白血病细胞异常免疫表型模式和确定用于微小残留病检测的抗体组合,更好地提示患者复发情况。并将流式细胞术结果、骨髓细胞形态学结果和PCR融合基因检测结果进行比较。结果分析20例非恶性血液系统恶性疾病患者的骨髓标本中髓系原始细胞的免疫表型,CD117阳性髓系原始细胞占2.51%±0.84%,CD34阳性髓系原始细胞占1.21%±0.83%,均有特定免疫表型特征。检测346例非早幼粒细胞白血病的急性髓性白血病患者免疫表型特征,异常免疫表型有314例,占90.80%,其中跨系表达抗原主要包括CD7(31.21%)、CD56(23.70%)、CD19(13.87%),跨阶段共表达的抗原包括CD34/CD64(2.89%)、CD14/CD117(1.16%),抗原表达强度变化或抗原缺失主要包括原始粒细胞不表达HLA-DR(4.62%)、CD13(7.51%)或CD33(12.14%),以及单核细胞不表达CD14(5.20%)。早幼粒细胞白血病患者31例,有异常免疫表型的仅占16.7%,低于非早幼粒细胞白血病的急性髓性白血病。根据白血病异常免疫表型模式,与PCR结果符合度高,能很好地提示白血病进展。结论急性髓性白血病细胞具有明显不同于正常来源原始细胞的异常免疫表型特征,适合采用流式细胞术进行微小残留病检测,并能反映体内白血病细胞负荷和病情变化。     

近四倍体急性淋巴细胞白血病形态学特点及其临床特征

目的探讨近四倍体急性淋巴细胞白血病(NT-ALL)的临床表现、形态学改变及其预后。方法分析1例NT-ALL患者的血涂片、骨髓象、免疫表型、遗传学等结果,结合相关文献分析NT-ALL的性质。结果该例NT-ALL患者以急腹症为首发表现,根据骨髓形态学、免疫表型被确诊为急性B淋巴细胞白血病(B-ALL),染色体为近四倍体核型(81-103染色体)。结论成人NT-ALL比较罕见,形态学特点与经典急性淋巴细胞白血病(ALL)有所不同,原幼淋巴细胞体积大或巨大,细胞核形态多不规则,核仁大,有空泡且预后差,这可能与近四倍体核型异常有关。     

进展为急性白血病的骨髓增生异常综合征的原始细胞性质

大约25—50%的骨髓增生异常综合征(MDS)进展为急性髓细胞白血病,因而推测由 MDS 转化的白血病的原始细胞为髓细胞系,但近来也有2例MDS 转化为急性淋巴细胞白血病和2例转化为双标志型白血病(淋巴细胞-髓细胞)的报告。作者为了研究 MDS 进展为急性白血病时的原始细胞性质,对9例由 MDS 转化的急性白血病患者作了形态学、细胞化学及单克隆抗体(McAb)检测等观察。试验所用的一组 McAb 能识别不同分化发育阶段的粒细胞、单核细胞,不同标志的淋巴细胞,某些血小板抗原及红     

急性双表型白血病细胞形态学和免疫表型的研究

目的探讨骨髓细胞免疫表型在急性双表型白血病中的诊断价值及其与骨髓细胞形态学的比对研究。方法对190例急性白血病患者采用流式细胞仪四色免疫荧光直接标记技术检测细胞免疫表型,通过骨髓细胞形态学分型进行分析。采用流式细胞术四色免疫荧光直接标记技术与CD45/SSC设门分析技术检测11例双表型急性白血病患者,根据欧洲白血病免疫分类协作组(EGIL)积分标准进行免疫学分型。结果 190例急性白血病中被免疫分型诊断为急性髓系白血病88例(占46.3%),急性淋系白血病88例(占46.3%),未分化白血病3例(占1.6%),与骨髓细胞形态学和组织化学诊断具有高符合率。190例急性白血病中被免疫分型诊断为急性双表型白血病11例(占5.8%),其中髓系与B系共表达的抗原7例(占3.7%),均共同表达cCD79a和cMPO,胞膜抗原CD19和CD10表达量较高;髓系与T系共表达的抗原3例(占1.6%),均共同表达cCD3和cMPO,胞膜抗原CD5和CD7表达量较高;髓系、B系与T系均表达的抗原1例(占0.5%)。此外,急性双表型白血病患者高表达CD34胞膜抗原(占81.8%),提示预后不良。结论急性双表型白血病发病率较低,骨髓细胞免疫表型对诊断及鉴别双表型急性白血病有特异性,以髓系和B系抗原共表达为主。采用骨髓细胞形态学和流式细胞术联合检测急性双表型白血病可提高诊断准确性,能有效地指导临床制订治疗方案和进行预后判断。     

骨髓淋巴造血组织肿瘤的形态学和免疫表型分析

目的探讨骨髓活检(BMB)中淋巴造血组织肿瘤的临床病理特征和免疫表型特点,提高诊断水平。方法 19例骨髓的淋巴造血组织肿瘤行苏木精-伊红染色法(HE)染色、过碘酸雪夫氏染色法(PAS)染色、网状纤维染色及免疫组化PV9000法系列抗体标记。结果 4例骨髓增生异常综合征(MDS)均显示造血组织增生,有小巨核细胞和原始细胞异常定位;2例急性髓系白血病(AML)有显著原始粒细胞或原始红细胞增生;2例慢性粒细胞白血病(CML)显示粒系细胞增生为主,各阶段粒细胞均可见到;3例浆细胞性骨髓瘤(PCM)和8例非霍奇金淋巴瘤(NHL)均系骨髓肿瘤性增生,两者的HE形态结合免疫组化标记能够诊断和鉴别诊断。结论 MDS诊断主要依赖病理形态学,免疫组化标记没有太大帮助;对AML、CML、PCM和NHL的诊断而言,除病理形态学观察外,各类肿瘤组织免疫组化表型分析有重要参考价值。