硬膜外应用虎纹镇痛肽-Ⅰ对大鼠外周神经挤压再生模型脊髓背角c-fos表达影响的研究

目的通过观察硬膜外给予虎纹镇痛肽-Ⅰ对大鼠外周神经挤压模型机械痛阈与脊髓背角c-fos表达的影响,探讨虎纹镇痛肽-Ⅰ对再生神经神经性疼痛的影响。方法雄性Wistar大鼠60只随机均分成3组,A组为坐骨神经挤压模型组;B组为坐骨神经挤压模型+虎纹镇痛肽-Ⅰ治疗组;C组为假手术组。分别制成模型后,术后21d起检测机械刺激阈值及c-fos表达计数。结果A、B组各项指标与C组比较有显著差异;A组与B组比较c-fos表达阳性细胞计数及机械痛阈均有显著差异。结论虎纹镇痛肽-Ⅰ能有效减轻再生神经的神经性疼痛程度,促进神经的完善修复。     

大鼠FK506套管模型与自体神经移植模型脊髓背角c-fos表达的比较研究

目的建立大鼠外消旋聚乳酸/FK506（PDLLA/FK506）复合套管模型和大鼠外周神经自体神经移植神经再生模型,观察对比各模型神经恢复过程中机械痛觉超敏的变化及脊髓背角c-fos表达的改变,探讨两种神经再生模型中神经再生与神经性疼痛的联系。方法雄性Wistar大鼠60只随机分成3组,每组20只。A组为自体神经移植再生模型组;B组为PDLLA/FK506套管修复模型组;C组假手术组。分别制成模型,术后24d起检测机械刺激阈值,术后27d起计数c-fos阳性细胞。结果 A、B组各项指标与C组比较有显著差异（P〈0.05）;A组与B组比较c-fos表达阳性细胞计数及机械痛阈无显著差异。结论两种模型再生神经生长进入去神经支配区域时,均出现支配区域的痛觉超敏和疼痛相关行为,神经性疼痛程度无差异。     

大鼠自体神经移植与外周神经挤压再生模型脊髓背角c-fos表达的比较研究

目的建立大鼠外周神经挤压神经再生模型和大鼠外周神经自体神经移植神经再生模型,观察对比各模型神经恢复过程中机械痛觉超敏的变化及脊髓背角c-fos表达的改变,探讨两种神经再生模型中神经再生与神经性疼痛的联系。方法雄性Wistar大鼠60只随机均分成3组,A组为坐骨神经挤压模型组;B组为自体神经移植模型组;C组为假手术组。分别制成模型后,术后18d起检测机械刺激阈值及c-fos表达计数。结果A、B组各项指标与C组比较有显著差异;A组各指标与B组有显著差异。结论两种模型再生神经生长进入去神经支配区域时,均出现支配区域的痛觉超敏和疼痛相关行为,神经性疼痛的发生时间、强度以及恢复均有不同,并和神经再生情况相关,提示神经性疼痛是评估神经功能恢复的一个重要的参数。     

大鼠PDLLA/NGF套管模型与自体神经移植模型脊髓背角c-fos表达的比较研究

目的建立大鼠PDLLA/NGF(外消旋聚乳酸/神经生长因子)复合套管模型和大鼠外周神经自体神经移植神经再生模型,观察对比各模型神经恢复过程中机械痛觉超敏的变化及脊髓背角c-fos表达的改变,探讨两种神经再生模型中神经再生与神经性疼痛的联系。方法雄性Wistar大鼠60只随机分成3组,A组为自体神经移植再生模型组;B组为PDLLA/NGF套管修复模型组;C组假手术组。分别制成模型后,术后18d起检测机械刺激阈值及c-fos表达计数。所有数据采用均值±标准差(x±s)表示,组间采用t检验,用SPSS11.0软件进行统计分析,P<0.05为有统计学差异。结果A、B组各项指标与C组比较有显著差异;A组与B组比较c-Fos表达阳性细胞计数及机械痛阈无显著差异。结论两种模型再生神经生长进入去神经支配区域时,均出现支配区域的痛觉超敏和疼痛相关行为,神经性疼痛程度无差异。     

神经病理性疼痛大鼠脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白表达的研究

目的 观察神经病理性疼痛(NPP)大鼠脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白的表达,探讨补体活化在NPP发病机制中的作用.方法 84只健康雄性SD大鼠随机分为7组:正常对照组、假手术1、3、7天组和慢性坐骨神经压迫损伤(CCI)1、3、7天组(n=12).CCI组大鼠左侧坐骨神经松结扎,假手术组暴露左侧坐骨神经,不做其他处理.分别于建模后1、3、7天测定大鼠热痛阈值和机械痛阈值,并通过RT-PCR、免疫比浊和免疫组化等方法 观察大鼠脊髓背角C3 mRNA及蛋白表达情况.结果 CCI组大鼠坐骨神经结扎后1天即出现明显的机械和热痛过敏,结扎后3天和7天动物处在高水平的痛敏状态.假手术组大鼠未见明显的行为学变化.脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白的表达水平,CCI组大鼠在坐骨神经结扎后1、3、7天升高,且激活程度呈上升趋势,而假手术组与正常对照组间无明显差异.结论 NPP大鼠脊髓背角补体C3 mRNA及蛋白呈高表达状态,补体的这种变化可能在NPP的发生发展中发挥作用.     

鞘内注射氢水对病理性疼痛大鼠脊髓背角p38MAPK和TNF-α影响的实验研究

目的探讨在坐骨神经窄缩引起的神经病理性疼痛模型(CCI)中鞘内注射氢水的镇痛效果以及对脊髓背角p38MAPK、TNF-α的影响。方法将30只SD大鼠随机均分为三组:假手术组、CCI对照组(予以鞘内注射生理盐水)和实验组(予以鞘内注射氢水)。于复制CCI术前半小时以及术后第1³天鞘内注射药物,剂量为0.1 ml/kg。于复制CCI术前2 h以及术后第43天鞘内注射药物,剂量为0.1 ml/kg。于复制CCI术前2 h以及术后第4¹0天测定大鼠右足机械痛阈值;术后第10天检测损伤侧脊髓背角p38MAPK、TNF-αmRNA水平。结果与假手术组比较,CCI对照组和实验组机械痛阈值显著降低(P<0.01)。CCI对照组与实验组比较CCI术后第410天测定大鼠右足机械痛阈值;术后第10天检测损伤侧脊髓背角p38MAPK、TNF-αmRNA水平。结果与假手术组比较,CCI对照组和实验组机械痛阈值显著降低(P<0.01)。CCI对照组与实验组比较CCI术后第4⁶天两组机械痛阈值有统计学差异(P<0.05),术后第76天两组机械痛阈值有统计学差异(P<0.05),术后第7¹0天两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CCI对照组比较,实验组在CCI术后第10天损伤侧脊髓背角TNF-α及p38MAPK水平表达降低。结论鞘内注射氢水可降低CCI动物模型损伤侧脊髓背角的p38MAPK和TNF-α水平,从而减轻CCI疼痛模型术后神经病理性痛。     

高频正弦波振动对吊尾大鼠脊髓c-fos蛋白表达变化的改善作用

目的 观察高频正弦波振动对吊尾大鼠脊髓c-fos蛋白表达的影响. 方法 选取Sprague-Dawley雌性大鼠30只,按随机数字表法分为3组:模拟失重t4 d组、模拟失重+高频振动14d组及正常对照组,每组各10只动物.采用大鼠尾部悬吊法建立模拟失重模型,用免疫组织化学技术观察吊尾大鼠脊髓L5-6节段c-fos蛋白的表达. 结果 正常对照组大鼠,大多数c-fos阳性神经元位于脊髓Ⅳ和Ⅵ～Ⅶ板层.模拟失重14d后,脊髓Ⅳ、Ⅵ和Ⅶ板层内的阳性神经元数量及Ⅵ～Ⅶ板层内阳性神经元总数均明显多于正常对照组(P＜0.05)和模拟失重+高频振动组(P＜0.05).而模拟失重+高频振动组大鼠脊髓阳性神经元的总数及板层分布模式与正常对照组大鼠无统计学差异. 结论 高频正弦波振动对模拟失重状态下大鼠脊髓神经元c-foS蛋白表达的改变具有明显的改善作用.模拟失重后肌梭传人通路中脊髓神经元活动的增强可能与肌梭传人冲动减少有关.     

Tat-LK15介导siRNA干扰大鼠脊髓背角nNOS表达对神经病理性疼痛的治疗作用

目的 探讨细胞穿透肽Tat-LK15介导siRNA干扰大鼠脊髓背角神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达对神经病理性疼痛的治疗效应.方法 采用Tat-LK15介导FAM-siRNA转染原代大鼠脊髓背角神经元细胞(RN-dsc),于倒置荧光显微镜观察其转染效果.健康雄性SD大鼠50只,随机分为5组(n=10):正常组、假手术组、神经病理性疼痛组(SNL组)、Tat-LK15-nNOS siRNA组(TS组)和Tat-LK15-NC siRNA组(TN组).采用脊神经结扎法(SNL)制作神经病理性疼痛模型,正常组不予任何处理,假手术组仅暴露脊神经;SNL组、TS组、TN组构建SNL模型同时鞘内置管,于第7天开始每天分别鞘内注射10μl生理盐水、10μl含5μg siRNA的Tat-LK15-nNOS siRNA和Tat-LK15-NCsiRNA,持续7d.建模前1d及建模后3、7、10、14d测定各组大鼠机械缩足反应阈值(PWMT)及热缩足反应潜伏期(PWTL).第14天测定结束后取L4-6节段脊髓,采用q-PCR及Western blotting检测脊髓背角nNOS表达水平.结果 倒置荧光显微镜观察显示,Tat-LK15可成功介导siRNA转染原代大鼠脊髓背角神经元.与假手术组比较,SNL组建模后第3天起PWMT降低、PWTL缩短,脊髓背角nNOS mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),正常组上述指标与假手术组比较差异无统计学意义;与SNL组比较,TS组第10、14天时PWMT增高、PWTL延长,脊髓背角nNOS mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),TN组上述指标与SNL组比较差异无统计学意义.结论 Tat-LK15可成功介导nNOS siRNA转染脊髓背角神经元,沉默nNOS基因的过度表达,对SNL大鼠神经病理性疼痛具有一定的治疗作用.     

马尾神经压迫性损伤对大鼠骶髓神经营养因子-3表达的影响

目的：探讨马尾神经压迫性损伤后不同时间骶髓神经元中神经营养因子-3的表达变化。方法：复制马尾神经压迫性损伤模型。于术后不同时间（1、7、21 d）,将动物过量戊巴比妥钠麻醉,心脏灌注后取骶髓（S2-3）,固定及切片后,用兔抗NT-3抗体行免疫组化ABC法染色。观察并测量各组骶髓神经元NT-3的阳性神经元数。结果：NT-3免疫阳性反应产物主要在骶髓神经元胞浆着色。腹角的NT-3阳性神经元数在脊髓挤压伤后7 d组和21 d组较正常组和24 h组明显增高（P〈0.05）;背角的NT-3阳性神经元数从术后24 h至术后7 d进行性减少,而术后21 d时则增加并高过正常水平（P〈0.05）。结论：NT-3不仅参与脊髓的正常生理活动,而且可能与脊髓挤压伤的早期修复有关。     

骨癌痛模型大鼠痛行为与脊髓星形胶质细胞活化的关系

目的 观察前列腺癌骨转移疼痛模型大鼠的痛行为学与腰段脊髓背角星形胶质细胞活化的关系.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为3组,每组20只.A组(模型组):于胫骨骨髓腔内注射10μl前列腺癌细胞;B组[氟代柠檬酸(FCA)处理组]:建立模型后2周,鞘内单次注射氟代柠檬酸;C组(对照组):左侧后肢胫骨注射10/μl Hanks液.术后1、3、5、 7、 10、14、21d检测大鼠后肢足底机械性触诱发痛[测定大鼠足底缩爪阈值(PWT)]和热痛敏[测定大鼠对热刺激的反应潜伏期(HRL)],对部分动物进行灌流固定,取大鼠模型侧后肢胫骨,HE染色观察骨结构的破坏情况.并取脊髓L4-L6节段,采用免疫荧光组织化学法观察脊髓内星形胶质细胞的表达及活化情况.结果 C组大鼠术后各时间点机械性触诱发痛和热痛敏无显著差异;在术后的前7d,与C组大鼠相比,A、B组PWT的差异无统计学意义,第10d起A、B组大鼠的PWT低于C组.给予FCA后2d(术后第14天),B组PWT显著高于A组,但随着时间的延长,B组PWT有逐渐降低的趋势.大鼠后肢胫骨HE染色可见术后14d时A组胫骨骨小梁广泛破坏.免疫荧光组织化学染色结果显示,C组大鼠术后各时间点胶质细胞活化水平无显著差异,A组和B组大鼠在术后的前7d与C组大鼠相比无显著差异,此后A组大鼠的星形胶质细胞活化水平持续升高,而B组大鼠星形胶质细胞维持在较低的活化水平.结论 星形胶质细胞的活化水平与前列腺癌骨转移痛模型大鼠痛行为密切相关.     

亚甲蓝与阿霉素磁性明胶药物微球镇痛作用的比较

目的 比较亚甲蓝、阿霉素磁性明胶微球靶向阻滞家兔脊髓背角的镇痛作用,并探讨其机制.方法 雄性新西兰兔40只,随机分为假手术组,空白微球5mg、15mg对照组,亚甲蓝微球5mg组、15mg组,阿霉素明胶磁性微球5mg组、15mg组.在外磁场引导下向蛛网膜下腔注射微球,连续观察注药后家兔下肢的电痛阈、运动功能及体感诱发电位变化.结果 亚甲蓝磁性微球15mg组和阿霉素磁性微球15mg组家兔的痛阈显著升高(P＜0.01),体感诱发电位N1波潜伏期明显延长,但前者仅持续12天,而后者持续30天仍未见消失.所有家兔运动功能评分未见明显改变.结论 亚甲蓝与阿霉素磁性明胶微球镇痛作用明显,具有"感觉-运动"分离作用,因此是一种有效的治疗顽固性疼痛的靶向神经损毁剂.     

腘窝坐骨神经阻滞与椎管内麻醉在足部手术中的应用

目的 探讨腘窝坐骨神经阻滞与椎管内麻醉在足部手术中的应用效果.方法 将足部手术患者52例分为A、B两组,每组26例.A组行椎管内麻醉;B组在神经刺激器定位下行腘窝坐骨神经阻滞.记录并比较两组麻醉操作时间及麻醉起效时间、不良反应、麻醉及围术期患者主观不适情况.结果 B组麻醉操作时间及麻醉起效时间长于A组,且无全身不良反应发生.A组部分患者出现心血管系统副反应以及恶心呕吐,但与B组比较无统计学差异(P>0.05).A组术中紧张和穿刺不适感例数高于B组(P<0.05).A组1例出现术后头痛,B组2例出现穿刺部位疼痛.A组对麻醉不满意患者多于B组.结论 椎管内麻醉与坐骨神经阻滞均能提供良好的麻醉效果,经腘窝坐骨神经阻滞全身不良反应发生少,为足部手术提供了更多的麻醉选择.     

不同年龄大鼠坐骨神经损伤后睫状神经营养因子对脊髓组织中Caspase3表达的影响

目的　观察睫状神经营养因子 (CNTF)对天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶 (Caspase3)在坐骨神经损伤后不同年龄大鼠脊髓组织中表达的影响。方法　幼年、成年、老年Wistar大鼠各 2 70只 ,随机分为正常组 (1 8只 )、CNTF组 (1 2 6只 )和生理盐水组 (1 2 6只 )。CNTF组和生理盐水组切出长 2mm右侧坐骨神经 ,用硅胶管连接近、远侧神经残端制作神经再生小室 ,CNTF组再生小室内注入 2 5 μg/ml重组CNTF1 5 μl,生理盐水组再生小室内注入生理盐水 1 5 μl,CNTF组和生理盐水组分为术后 1、3天和 1、2、4、8、1 2周组。利用免疫组织化学、Westernblotting检测脊髓Caspase3的分布与表达强度变化 ,进行Caspase3活性测定。结果　损伤后各年龄组伤侧脊髓Caspase3蛋白表达增强 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ,以前角运动神经元变化最为明显 ,幼年、成年、老年CNTF组Caspase3表达较生理盐水组减弱 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ;各组对侧未伤侧与正常组比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。幼年、老年及成年生理盐水组于损伤侧脊髓Caspase3活性升高 ,各时相点幼年大鼠Caspase3活性高于老年及成年 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ,幼年、成年、老年CNTF组Caspase3活性低于生理盐水组 (P <0 .0 5或 0 .0 1 )。生理盐水组及CNTF组对侧未伤侧Ca     

实验性糖尿病大鼠周围神经病变的研究

本研究采用体重在200g左右的雄性Wistar大鼠,随机分为两组:对照组8只,实验组9只;用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。成模两月时行摇尾试验,测定坐骨神经运动传导速度及坐骨神经局部血流量,并分离腓肠神经,光镜下行腓肠神经形态学定量分析。结果显示;实验组大鼠热痛阈值,坐骨神经运动传导速度及坐骨神经血流量显著低于对照组(P<0.01),腓肠神经有髓鞘神经纤维数量、密度、神经轴索及髓鞘大小显著低于对照组(P相似文献   

健侧骶神经根移位修复大鼠骶丛撕脱伤

目的 探讨采用健侧骶神经根移位修复骶丛撕脱伤的可行性.方法 选用体重200～300 g的成年SD大鼠30只,随机分为不吻合组、健侧L6-患侧L6吻合组和健侧L6-患侧L5吻合组,每组10只.大鼠右侧为实验侧,左侧为对照侧.术后观察各组大鼠的存活情况,对受试大鼠进行BBB评分.双侧股二头肌、小腿三头肌及胫骨前肌称重并进行肌肉横截而HE染色的埘比研究;电镜观察吻合口远端神经牛长情况;坐骨神经功能指数(SFI)、肌电图检查评价吻合的可行性.结果 术后12周吻合组BBB评分比不吻合组高(P<0.01).吻合组右侧的股二头肌、小腿三头肌、胫前肌与不吻合组相比均有不同程度恢复.其中L6-L5吻合组效果较L6-L6吻合组好.三组肌群恢复速度在L6-L6吻合组内有差异,其中近侧股二头肌恢复效果相对较好,吻合口远端神经电镜观察可见大量再生有髓神经纤维.肌电图显示于三组肌肉可记录到波幅,其中以近侧股二头肌及小腿三头肌峰值较大,远侧胫前肌峰值较小.结论 健侧骶神经根移位加自体神经移植或健侧骶神经移位与患侧神经根直接吻合均能蕈建截瘫大鼠骶丛神经的部分功能,其中健侧骶神经移位与患侧神经根直接吻合组效果优于健侧骶神经根移位加自体神经移植组.

Abstract：

Objective To evaluate the efficiency of normal sacral nerve root transposition in repair of the sacral plexus root avulsion. Methods A total of 30 adult SD rats were chosen and divided into three groups,ie,group A(the sciatic nerve received no repair),group B(the autologous sacral plexus root nerve was bridged with the right L6 nerve root by the translocation of the left L6)and group C (the right L5 nerve root nerve was bridged by the translocation of the left L6),10 rats per group.The left side of the rats was used as the control side and the right one as the experimental side.Twelve weeks after operation,the rats in each group were selected for the histomorphological observation of the nerves under the microscope and the electron microscope.The models were evaluated by observing the survival rates of the rats,BBB scores,electron microscope weight and muscle fiber CSA(cross section area)of double biceps femoris,triceps surae and tibial muscle. Results Twelve weeks after operation,the BBB scores in groups B and C was higher than that in group A,with statistical difference(P<0.01)between three groups.A remarkable improvement was found in the ratio of weight and muscle fiber CSA of double biceps femoris,triceps surse and tibial muscle.The repair efficiency in the group C was better than that in the group B.In the group B,the biceps femoris,triceps surae and tibial muscle recovered at different degrees.The biceps femoris recovered the best,when a great deal of myelinated nerve fiber regeneration was observed under the microscope and the electromicroscope.Electromyography revealed the volatility in the muscles of three groups,with larger peak value for the proximal biceps femoris and the triceps muscle but smaller peak value for the distal anterior tibial muscle. Conclusions L6 transposition combined with auto-graft of nerve root or without the auto-graft can reconstruct the partial function of the sciatic nerve in the paraplegia rats,when the latter has the better effect.