富血小板血浆对兔骨关节炎软骨中基质金属蛋白酶-13表达的影响

目的 探讨富血小板血浆(platelet-rich plasm,PRP)抑制兔骨关节炎软骨表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达而发挥软骨保护作用。方法 选取30只成年清洁级新西兰大白兔,采用数字表法随机分为对照组、关节炎组、PRP组,每组各10只。关节炎组和PRP组按Hulth法制备后肢左膝关节炎模型,对照组行假手术。造模后第1周开始,各组抽取耳缘静脉血制备PRP 0.2 mL,仅PRP组给予关节腔注射。至第6周处死实验动物,获取各组左膝关节,分别行软骨组织HE染色测量软骨厚度,免疫组织化学染色计数MMP-13阳性细胞数,免疫荧光及Western blotting法检测MMP-13表达量。结果 对照组显示关节软骨形态接近正常,关节炎组软骨破坏明显,而PRP干预组较关节炎组,关节厚度得以保留,MMP-13阳性细胞及其表达量明显受到抑制。结论 PRP可减少MMP-13软骨细胞的数量和抑制MMP-13表达而发挥软骨保护作用。     

补肾益气行血法对人软骨细胞基质金属蛋白酶13表达的影响

目的：观察补肾益气行血中药复方含药血清对MMP-13、II型胶原表达的调控作用及相关意义。方法：将体外培养的人软骨细胞随机分为5组：对照组（正常血清）、低剂量IL-1组（10斗g／m1 IL-1β）、高剂量IL-1组（100Ixg／ml IL-113）、低剂量IL-1加中药组（10μg／ml IL-1p加含药血清）、高剂量IL-1加中药组（100斗g／mlIL-1p加含药血清）,应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）及实时荧光定量PCR,比较补肾益气行血中药复方含药血清在不同剂量IL-1B作用下对MMP-13、II型胶原表达的调控作用。结果：中药含药血清纽均有抑制MMP,13的表达作用,对照纽表达阳性强度高于中药组,中药组II型胶原表达阳性强度高于对照组,统计学均有明显差异。不同剂量IL-1组均能促进MMP-13的表达,对照组阳性强度低于IL-1组,IL-1组II型胶原表达低于对照组,统计学均有明显差异。结论：体外条件下,补肾益气行血中药含药血清能够抑制炎性因子IL-1诱导的MMP-13表达;能对抗MMP-13抑制软骨细胞II型胶原合成,具有保护软骨细胞的作用。     

骨性关节炎中白介素-7及基质金属蛋白酶-13的表达

目的探讨细胞因子白介素－7（IL-7）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在骨性关节炎发生发展中的作用及意义。方法应用免疫组织化学技术及酶联免疫吸附方法对骨性关节炎29例、半月板及交叉韧带损伤患者17例（对照组）检测IL-7及MMP-13在滑膜组织中的表达情况及关节滑液中的蛋白含量,分析检测结果。结果IL-7及MMP-13在骨性关节炎滑膜组织中表达强度及滑液中蛋白含量高于对照组（P〈0．01）,IL-7及MMP—13在滑液中的蛋白含量显著相关（r=0．511,P〈0．01）,且两者与年龄也有相关性（r=0．454;r=0．583,P〈0．01）。结论IL-7及MMP-13与骨性关节炎的发生发展有关,IL-7可能通过刺激滑膜细胞分泌MMP-13发挥关节破坏作用。     

羧甲基壳聚糖抑制白细胞介素-1β诱导软骨细胞基质金属蛋白酶-1,3的表达

目的:探讨羧甲基壳聚糖抑制重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)刺激下的兔软骨细胞合成基质金属蛋白酶-1,3(MMP-1,3)的作用机制。方法:分离、培养兔软骨细胞,用rhIL-1β刺激,同时加入不同浓度的羧甲基壳聚糖(CM-chitosan)或L-精氨酸甲酯(L-NAME),培养24h后,检测上清液中的一氧化氮含量和软骨细胞内的诱导性一氧化氮合酶(iNOS)活力。提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链方法(RT-PCR)检测iNOS,MMP-1,MMP-3的mRNA表达。通过ELISA方法检测上清液中MMP-1,MMP-3的含量。结果:IL-1β能够增加软骨细胞一氧化氮的释放及iNOS的酶活性,诱导细胞iNOS,MMP-1,3的mRNA表达,增加MMP-1,3的分泌。羧甲基壳聚糖对软骨细胞一氧化氮的释放,iNOS酶活力及iNOSmRNA表达均有抑制作用,不同浓度的抑制效果相近;它对软骨细胞的MMP-1,3mRNA的表达及MMP-1,3的分泌也有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。L-NAME对软骨细胞的MMP-1,3mRNA的表达及分泌也有抑制作用,但L-NAME与羧甲基壳聚糖对一氧化氮的影响相似时,羧甲基壳聚糖对MMP-1,3mRNA表达和分泌的抑制作用强于L-NAME。结论:羧甲基壳聚糖抑制软骨细胞合成MMP-1,MMP-3是部分通过降低iNOS表达,减少一氧化氮合成来实现的。     

骨关节炎基质金属蛋白酶1、2、3及其抑制物的表达与软骨退变的关系

目的　探讨骨关节炎关节软骨中基质金属蛋白酶 (MMPs) 1、2、3及其抑制物 (TIMPs) 1、2的免疫组化表达及与软骨退变的关系。方法　 2 2例因骨关节炎行关节置换的软骨组织常规HE染色观察其组织学变化 ,ABC免疫组化法观察关节软骨MMP 1、2、3和TIMP 1、2的表达 ,经图像分析研究MMP 1、2、3和TIMP 1、2与软骨组织学退变的关系 ,5例因股骨颈骨折行关节置换的软骨标本为正常对照。结果　骨关节炎关节软骨出现纤维化、裂隙、变薄 ,软骨细胞数量减少 ;MMP 1、3和TIMP 1在正常软骨无表达 ,在中度退变软骨中表达明显升高 ,在重度退变软骨中表达降低 ,TIMP 1与MMP 1表达升高不平行 ;MMP 2和TIMP 2在正常软骨低表达 ,在中度退变软骨中表达升高 ,在重度退变软骨表达降低 ,但TIMP 2表达升高。结论　在骨关节炎中MMP 1、2、3和TIMP 1、2表达异常 ,引起细胞外基质异常降解 ,是导致关节软骨发生组织学退变的原因之一     

叠加造模后膝关节骨密度改变及软骨基质金属蛋白酶-13的表达

目的目前,骨关节炎（osteoarthritis,OA）的动物模型多根据某一致病因素而设计,而OA是综合因素的临床过程。文中评价叠加法制作OA模型的可行性,探讨造模后膝关节骨密度（bone mineral density,BMD）改变及软骨基质金属蛋白酶-13（matrixmetalloproteinase,MMP-13）的表达。方法实验组30只兔行结扎股静脉并切断腓肠肌内外侧头造模,术后4、8、12周测量膝关节4个目的区（ROI）BMD后处死动物。对照组10只12周处死。取胫骨髁关节软骨作组织学、免疫组化定量分析。结果造模后4周可见软骨面粗糙。8周有滑膜增生,软骨面纤维化、糜烂,簇聚肥大软骨细胞。12周出现软骨面剥脱,骨质裸露,骨赘形成等。造模后4周R2和R3区BMD增高,R4区于8周BMD下降。4周时软骨MMP-13平均光密度（average optical density,AOD）升高是对照组的4倍,后迅速下降,12周仍较对照组高。结论叠加法制作OA模型,效果确实,简单易行。造模后不同目的区BMD有改变,关节不稳、应力改变是其主要原因。MMP-13早期明显升高,提示MMP-13可能主要在OA早期起作用。     

基质金属蛋白酶与骨关节炎发生发展关系的研究进展

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMPs）因需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名,其家族成员具有相似的结构,由5个功能不同的结构域组成。MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13是促软骨基质降解的核心物质,在骨关节炎（osteoarthritis, OA）发生发展过程中发挥了重要的作用。MMPs可通过降解软骨细胞细胞外基质蛋白、促进炎症发生等机制推进OA发展,逐渐受到医疗界的广泛关注。OA是常见的关节退行性疾病,与增龄、代谢、感染、遗传、运动等因素有关,引起患者发生关节酸痛、晨僵、关节活动受限等各种症状,严重影响患者生活质量。这种高度流行的疾病的致病机制尚不清楚,目前还没有有效的疾病改善治疗方法,未来选择性抑制关键酶MMPs或可成为一种有效的治疗方法。针对MMPs在OA中的致病作用,本文对MMPs在OA发生发展中的研究新进展作一综述。     

兔骨关节炎模型的建立以及关节炎软骨组织中MMP-1/-13的表达

目的评价家兔膝关节前交叉韧带切断（ACLT）及内侧半月板前1/3切除制作骨关节炎（OA）模型方法的可行性,同时探索关节炎发病的不同时期,关节软骨中基质金属蛋白酶（MMP）-1,MMP-13的基因表达、蛋白表达水平的变化情况。方法实验组家兔30只行ACLT及内侧半月板前1/3切除术造模,分别于术后4周、8周、12周处死10只,假手术对照组家兔10只于术后12周处死。进行股骨髁关节软骨退变的大体评分;取退变的软骨组织,用实时定量PCR（Real-time PCR）及Western blot印记杂交方法测定软骨组织中MMP-1和MMP-13的mRNA和蛋白表达水平。结果ACLT及内侧半月板前1/3切除术后4周即可见软骨退变,8周和12周时退变进一步加重,对照组无明显软骨退变,不同组动物关节软骨评分有统计学差异。MMP-1的mRNA表达和蛋白表达在正常对照组水平均较低,造模4周开始升高,到第8周及第12周持续升高,且mRNA表达和蛋白表达升高的趋势相同;MMP-13在造模4周时表达开始升高,mRNA表达和蛋白表达趋势相同,造模第8周时持续升高,但在造模第12周时MMP-13mRNA表达和蛋白表达下降。结论家兔膝关节ACLT及内侧半月板前1/3切除制作OA模型的方法简便可行,MMP-1和MMP-13在骨关节炎的发病过程中有不同程度的升高,可以作为OA研究的评价指标。本实验结果提示,在OA发展的过程中,MMP-1和MMP-13的表达不平行,二者调控通路可能存在差异。MMP-13的mRNA表达的变化趋势与其蛋白水平的变化趋势相符合,说明引起MMP-13在OA病程中晚期下降的调控发生在翻译前水平。     

血管紧张素Ⅱ诱导肿瘤细胞基质金属蛋白酶表达的研究进展

血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,ANG Ⅱ）是肾素-血管紧张素系统（renin angiotensin system,RAS）的一个主要生物活性激素,在调控血管内环境稳定中起重要作用.1996年Haznedaroglu等提出局部RAS的表达可影响生理和病理性血细胞产生的假设,经长时间研究[1],证实ANG Ⅱ受体1型（ANG Ⅱ type-1 receptor,AT1 R）在大鼠的造血系统和骨髓基质的CD34^＋ （hematopoieticstem cell,HSC）中表达.ANG Ⅱ可以通过激活CD34^＋细胞上的AT1 R来调节造血干细胞至红系和髓系祖细胞的增殖和分化过程.RAS参与了骨髓生理病理造血.     

姜黄素对骨关节炎软骨细胞增殖及分泌MMP-13、IL-6的影响

目的 探讨姜黄素对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响。方法 选取2018年1～6月在我院骨科接受关节置换的10例骨关节炎患者的关节软骨,设为炎症软骨细胞组(OA组),按是否加入姜黄素分为单纯培养基组(OAa组)与加入姜黄素组(OAb组);另选取因外伤致截肢的4例患者膝关节软骨为对照,设为正常软骨细胞组(N组),按是否加入姜黄素分为单纯培养基组(Na组)与加入姜黄素组(Nb组)。进行软骨细胞培养,配制姜黄素溶液,加入姜黄素溶液(80μmol/L)刺激软骨细胞,采用MTT法检测软骨细胞增殖,测定上清液MMP-13、IL-6水平。结果 OAb组吸光度值明显低于OAa组(P0.05),Nb组吸光度值较Na组下降,但差异无统计学意义(P0.05)。OAb组上清液MMP-13、IL-6水平均低于OAa组(P0.05),OA组MMP-13、IL-6水平均高于N组(P0.05)。结论 姜黄素对OA软骨细胞增殖及释放MMP-13、IL-6均有明显抑制作用,可保护关节软骨细胞,减轻炎症反应。     

乳腺癌基质金属蛋白酶13蛋白的表达及其与预后的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶13(MMP-13)在乳腺癌中的表达情况及其与临床预后的关系.方法:采用组织芯片及免疫组化SP法检测了183例乳腺癌组织中MMP-13的表达水平,分析乳腺癌组织中MMP-13的表达情况与临床病理因素之间的相关性,并结合完整的10年随访资料探讨MMP-13与乳腺癌预后的关系.结果:乳腺癌组织中MMP-13的阳性表达率(54.1%)显著高于良性乳腺疾病(13.3%,P＜0.01).MMP-13的表达与临床TNM分期、淋巴结转移状态、组织学分级密切相关(P＜0.01),而与肿瘤大小、年龄、月经状态、病理类型以及雌孕激素受体状态无关.MMP-13高表达组10年生存率低于低表达组(P＜0.01).结论:MMP-13在乳腺癌中表达水平升高,其高表达预示预后不良.     

IL-1β对人冠脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶-3及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的探讨炎症因子IL-1β对人冠脉平滑肌细胞表达平滑肌细胞基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的影响。方法①应用20μg/L浓度的IL-1β刺激人冠脉平滑肌细胞,分别在共同培养0、2、4、8、24、36 h后收集细胞;②应用不同浓度的IL-1β（0、5、20、40μg/L）刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养6 h后收集细胞;③应用实时荧光定量PCR的方法检测细胞内MMP-3和TIMP-1基因的表达量。结果同剂量IL-1β刺激下,MMP-3的表达量在2 h时就开始发生上调,8 h达高峰,而后开始下降;在不同剂量IL-1β刺激下,MMP-3的表达量在实验剂量范围内随着IL-1β的剂量加大呈上升趋势。而TIMP-1表达量在2 h时就开始发生下调,8 h达最低,而后开始上升;在不同剂量IL-1β刺激下,TIMP-1的表达量在实验剂量范围内随着IL-1β的剂量加大呈下降趋势。结论炎症因子IL-1β能促进冠脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标记物MMP-3、TIMP-1的表达,可能是炎症在急性冠脉综合征的发生发展中起重要作用的机制之一。     

基质金属蛋白酶与骨关节炎

为了探讨基质金属蛋白酶在骨关节炎发病过程中的重要作用,对近年来关于骨关节炎与基质金属蛋白酶发病机制的国内外文献进行了广泛查阅、总结、分析,发现基质金属蛋白酶分泌调节异常在骨关节炎的软骨退变降解和软骨细胞的破坏过程中起重要作用,说明基质金属蛋白酶参与骨关节炎的病理过程,且其与金属蛋白酶抑制剂的分泌调节平衡将会成为今后骨关节炎治疗的重点研究方向之一。     

大鼠肢体缺血再灌注后关节软骨基质金属蛋白酶-13表达及其意义

目的 观察大鼠肢体缺血再灌注后关节软骨中基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达变化,探讨其在关节软骨损伤中的作用.方法 采用Wistar大鼠左后肢缺血再灌注动物模型,动物分为假手术组、缺血8 h组、缺血再灌注后3、7、14、30、60 d组.用免疫组化S-P法测定关节软骨MMP-13和Ⅱ型胶原(COLⅡ)的表达和分布变化,并观察缺血再灌注后胫骨关节软骨光镜和电镜的病理学变化.结果 假手术组及缺血8 h组关节软骨基质较均匀、致密;缺血再灌注组关节软骨表面凹凸不平,软骨基质疏松,骨细胞排列紊乱,以30 d和60 d组最为明显.软骨中的MMP-13在缺血再灌注3 d后显著高于假手术组和缺血8 h组(P＜0.01),以14 d为最高;而COLⅡ却显著低于假手术组和缺血8 h组(P＜0.01),呈进行性降低.结论 肢体缺血再灌注后关节软骨内MMP-13表达增多,导致软骨基质中COLⅡ持续降解减少、关节软骨胶原网络结构破坏,可能是断肢再植后关节功能恢复不理想的重要原因之一.     

聚肌苷酸-聚胞苷酸对人髓核细胞基质金属蛋白酶-1、13表达的影响

目的 探究聚肌苷酸-聚胞苷酸[polyinosinic-polycytidylic acid,Poly(I:C)]对人髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPC)基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)-1、13表达的影响.方法 取人椎间盘组织,采用酶消化法分离并体外培养NPC.不同时间不同剂量的Poly(I:C)刺激NPC,利用qPCR和Western blot方法检测MMP-1、13的mRNA和蛋白质表达情况;siRNA分别沉默TLR-3、RIG-1和MDA-5后,Poly(I:C)刺激NPC,qPCR检测MMP-1、13的mRNA表达情况.结果 分离培养的NPC 5~6 d后,贴壁生长;Poly(I:C)刺激NPC后,MMP-1、13的mRNA和蛋白质表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA沉默TLR-3后,MMP-1、13的mRNA 表达水平受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA沉默RIG-1和MDA-5后,MMP-1、13的mRNA 表达水平不受影响(P>0.05).结论 Poly(I:C)通过TLR-3受体途径促进NPC表达MMP-1、13.     

吸烟对大鼠气道上皮细胞基质金属蛋白酶9表达的影响

目的 通过研究不同吸娴量、吸烟持续时间及戒烟对大鼠气道上皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA及其蛋白表达水平的影响,探讨吸烟及戒娴与COPD气道重塑的关系.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、长期大量吸烟组、短期大量吸烟组、长期小量吸烟组和长期大量吸烟后戒烟组,每组各8只大鼠.分别采用原位杂交和免疫组织化学方法 检测各组大鼠气道上皮细胞中MMP-9 mRNA及蛋白的表达水平.结果 (1)各吸烟组大鼠均出现了肺气肿的病理学改变,长期大量吸烟组最严重.(2)长期大量吸烟组[(22.01±2.86)PU,(20.81±2.46)PU]、长期小量吸烟组[(6.92±2.71)PU,(8.84±1.80)PU]、短期大量吸烟组[(14.94±3.46)PU,(13.68±2.00)PU]及戒烟组[(19.00±3.36)PU,(14.82±1.74)PU]大鼠气道上皮细胞MMP-9 mRNA及其蛋白的表达水平均明显高于对照组[(0.88±0.88)PU,(2.80±1.66)PU,P均<0.01].(3)长期小量吸炯组、短期大量吸烟组和戒炯组大鼠气道上皮细胞MMP-9 mRNA及其蛋白的表达水平低于长期大量吸烟组(P均<0.05).结论 吸烟引起大鼠气道上皮细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达水平升高,随吸烟时间和量的增加其表达增加,戒烟后其表达可下降.提示吸烟可以引起气道破坏和重塑;戒烟可减轻气道重塑,是防治COPD的有效措施之一.     

白介素-1和血小板源性生长因子对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的：观察白介素-1和血小板源性生长因子对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响及其作用机制。方法：用酶谱分析法检测MMP-9蛋白水平，采用电泳迁移率变动分析法测转录因子AP-1结合活性，用RT-PCR法检测MMP-9的mRNA水平。结果：白介素-1(20ng／ml)和血小板源性生长因子(20ng／ml)联合使用显著增加MMP-9蛋白表达，提高AP-1结合活性，使MMP-9的mRNA水平明显增高。结论：白介素-1和血小板源性生长因子联合使用可刺激MMP-9生成。     

γ干扰素对低密度脂蛋白免疫复合物诱导U937细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的:探讨γ干扰素(IFN-γ)对低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)诱导U937细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响.方法:采用不同浓度的LDL-IC诱导不同浓度的IFN-γ预处理的U937细胞,通过RT-PCR分析MMP-1 mRNA表达水平的变化.结果:正常U937细胞MMP-1表达量低.LDL-IC可增强U937细胞MMP-1mRNA的表达,而单独IFN-γ处理对MMP-1表达无影响;LDL-IC对经IFN-γ预处理的U937细胞作用效果较未经处理的更强(P<0.01),并具剂量效应.结论:IFN-γ可增加LDL-IC诱导的U937细胞MMP-1表达,加速动脉粥样硬化的发生、发展.     

病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-2,-13及组织金属蛋白酶抑制剂-2的表达

目的:探讨病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的表达及意义.方法:采用免疫组织化学SP法,检测40例病理性瘢痕组织、15例正常皮肤组织中MMP-2,MMP-13及TIMP-2的表达情况,并分析3者之间的关系.结果:病理性瘢痕组织中MMP-2(70.0%),MMP-13(67.5%)及TIMP-2(80.0%)的表达水平较正常皮肤显著增高(26.7%,0%,20.0%),且在病理性瘢痕组织中MMP-2、MMP-13的表达与TIMP-2均呈正相关(r分别为0.491,0.454,χ2值分别为7.15,5.99,P<0.05).结论:MMP-2,MMP-13及TIMP-2的高表达可能与病理性瘢痕的形成有关.