应用聚合酶链反应检测沙眼衣原体

晚近研究表明,沙眼衣原体的感染率和危险性已超过淋球菌而居性传播疾病之首。我国也证实存在泌尿生殖系的沙眼衣原体感染。但是,沙眼衣原体常缺乏特异症状,且易形成隐匿性感染,致使临床诊断和监控甚为困难。我们应用聚合酶链反应(RCR)检测沙眼衣原体标本112份,现将结果报告如下。1 材料和方法     

PCR法，单克隆抗体免疫荧光法检测女性生殖道沙眼衣原体结果比较

沙眼衣原体 (ＣＴ)是性传播疾病和眼结膜炎的主要病原微生物。本文采用ＰＣＲ技术及单克隆抗体 (ｍＡｂ)免疫荧光技术联合应用 ,检测女性宫颈炎患者生殖道沙眼衣原体感染情况 ,将两种方法进行比较 ,并用细胞培养法加以验证 ,现将结果报道如下。1　材料与方法1 1　检测对象选择 2 0 0 0年 3～ 5月我院妇科门诊宫颈炎患者 143例 ,年龄 17～ 5 0岁。每个检测对象均记录姓名、年龄、职业、文化程度、月经史、孕育史、妇科检查结果等。1 2仪器和试剂　①ＰＣＲ引物及设备 :ＰＣＲ检测试剂盒由西安拜奥生物技术公司提供。引物设计位于沙眼衣原体特…     

单克隆抗体免疫荧光法检测孕妇生殖道沙眼衣原体

沙眼衣原体(CT)是性传播疾病和眼结膜炎的主要病原微生物，孕妇生殖道CT感染与胎膜早破、早产、产后盆腔炎、新生儿肺炎与结膜炎等疾病有关。由于沙眼衣原体感染无典型的 临床症状，而往往不被注意［1］，因此，在临床上建立敏感特异的CT检测方法意义 重大。本文采用单克隆抗体免疫荧光法测定CT，以了解孕妇生殖道CT感染情况，为临床提供 诊断依据，现报道如下。     

单克隆抗体免疫荧光法检测孕妇生殖道沙眼衣原体

沙眼衣原体(CT)是性传播疾病和眼结膜炎的主要病原微生物，孕妇生殖道CT感染与胎膜早破、早产、产后盆腔炎、新生儿肺炎与结膜炎等疾病有关。由于沙眼衣原体感染无典型的 临床症状，而往往不被注意［1］，因此，在临床上建立敏感特异的CT检测方法意义 重大。本文采用单克隆抗体免疫荧光法测定CT，以了解孕妇生殖道CT感染情况，为临床提供 诊断依据，现报道如下。     

PCR技术检测淋球菌沙眼衣原体解脲脲原体应用浅析

鉴于临床对检验技术愈来愈迫切要求建立快速、特异、敏感的实验诊断方法。在PCR应用技术不断扩展检验范围的基础上,笔者采用该技术对202例来自我院门诊性病科就诊人员进行淋球菌(Gonocoeus,NG)、沙眼衣原体(Chlamydia Trachomatis,CT)、解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticam,UU)检测,以了解淋球菌性尿道炎(GU)和非淋球菌性尿道炎(NGU)的感染情况。为临床及早诊断提供可靠的检测手段。     

聚合酶链反应在诊断常见性传播疾病病原体中的应用

性传播疾病(sexually transmitted dis-ease,STD)是妇科门诊常见的疾病,近年来STD的报道有所增加,有关从临床检验学方面的报道也有增加。在西方国家,沙眼衣原体(chlanydia trachomatis,CT)已成为STD中最常见的一种病原体,淋病奈瑟菌(Neis-seria gonorrhoeae,NG)仅次于CT,而在中国,NG仍是STD最常见的一种病原体,但CT的感染呈迅速上升趋势。在STD治疗中,对病原体的明确断显得尤为重要,而在既往检测STD病原体的方法中均有明显不足。我们应用聚合酶链反应(Polymerasechairr reaction,PCR)检测190例STD病原体。现将结果报道如下。     

孕妇和新生儿沙眼衣原体无症状感染的调查

沙眼衣原体(CT)几乎是一种人类专有的寄生微生物.国外以沙眼衣原体为病原的性传播疾病(STD)逐年上升,尽管STD病种较多,但就患者数量而言,现当属CT最为流行,且女性感染不太引起人们注意,是因为它缺乏特异性临床症状或仅有白带增多.鉴于孕妇和新生儿沙眼衣原体无症状感染率尚少报道,我们采用聚合酶链反应(PCR)技术对临产前孕妇和新生儿进行了检测,报告如下.1 资料与方法     

大连地区性传播疾病门诊患者泌尿生殖道沙眼衣原体的研究

应用ＰＣＲ法对大连地区性传播疾病门诊患者感染情况进行了研究。在２０１份性传播疾病标本中，总的沙眼衣原体感染率为２６．９％。不同的性病ＮＧＵ、淋病、尖锐湿疣的感染率分别是３０．０３％，２７．３％，１６．７％，三者之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。性传播疾病门诊患者的感染率明显高于健康人（Ｐ＜０．００１）。结果提示我们，三种性病均可伴发沙眼衣原体感染，且感染机会相仿；性病患者是沙眼衣原体感染的危险因素之一。这一结果为性传播疾病的防治提供了参考依据     

男性淋病患者泌尿生殖道衣原体感染的调查

目的　调查男性淋病患者不同感染时期其合并沙眼衣原体感染的状况 ,为性传播疾病的预防、控制提供参考依据。方法　应用聚合酶链反应技术检测了 34 9例男性淋病患者及 5 3例健康男性 (对照组 )。结果　病例组和对照组衣原体感染率分别为 2 8 1% ,3 8% (P <0 .0 0 1)。处于不同时期的男性淋病患者衣原体感染率分别为 31 3% ,2 6 3% ,2 0 0 %(P >0 .0 5 )。结论　男性淋病患者不同的病程时期均可以合并沙眼衣原体感染且有较高的感染率 ;淋病患者是沙眼衣原体感染的危险因素之一     

B超配合聚合酶链反应检查诊断HbBart＇s胎儿水肿综合征的研究

α－地中海性贫血Ⅰ的纯合子，称ＨｂＢａｒｔ＇ｓ胎儿水肿综合征，较为少见。１９８８．０５～１９９４．１２临床超声检查发现ＨｂＢａｒｔ＇ｓ胎儿水肿综合征３８例，说明本病在粤西地区并非少见。罹病胎儿均有腹水，部份病例并有胸水；肝、脾肿大；以及巨大、苍白和易碎裂的胎盘。本组病例均经脐血或双亲血液作了ＤＮＡ聚合酶链反应检查确诊     

生理状态下外周血白细胞穿孔素基因表达的荧光定量PCR检测

目的:建立穿孔素(perforin,PFR)基因表达的绝对定量实时PCR检测技术。方法:应用实时定量PCR方法检测25名健康运动员生理状态下处周血PFR mRNA的表达。主要结果和结论:应用实时定量PCR方法能够对健康受试者外周血白细胞自发性PFR mRNA表达进行定量分析,相关系数r=1。     

Line-Gene实时荧光定量PCR不同结果分析模式对检测结果的影响

目的 探讨实时荧光定量PCR不同结果分析模式对检测结果的影响。方法 用Line-Gene FQD-33A型荧光定量PCR检测系统检测本院门诊和病房乙肝病人血清HBV DNA 77份,分别用最大二阶导数法和样点拟合法进行结果分析。结果 发现两种分析方法的总体相关性较好(r=0.978)。但HBV DNA拷贝数含量<10~5时,两种模式的相关性差(r=0.706),此时,最大二阶导数法得出的数值要比样点拟合法低(t=2.61,P<0.05),且易出现假阴性结果。结论 虽然样点拟合法步骤较多,但其结果更可靠,因此进行结果分析时,建议使用样点拟合法。而且当样本中HBV DNA拷贝数<10~5时只能使用样点拟合法进行结果分析。     

输血传播病毒-DNA聚合酶链方法的建立及应用

目的：建立输血传播病毒（ＴＴＶ）－ＤＮＡ聚合酶链反应方法并应用于新疆地区不同人群ＴＴＶ感染的检测。方法：根据已报道的ＴＴＶ基因痛列（ＤＤＢＪ序列号：ＡＢ００８３９４）,通过引物设计软件ＳＱＮＣＥ和ＯＬＩＧＯ在其ＯＲＦ１区设计一对ＰＣＲ引物,扩增产生一个３１５ｂｐ的扩增片段,产物经ＢｇⅠⅡ酶切分别产生一个２１９ｂｐ和９６ｂｐ的酶切片段。结果：用建立的ＰＣＲ方法在１５例维存尔族转氨酶升高的非甲－非庚型     

三对引物同时PCR检测大肠杆菌的方法及在分子流行病学研究中的应用

在大肠杆菌（ETEC）肠毒素基因内合成三对引物，建立了三对引物同时PCR检测ETEC的方法，一次PCR即可扩增出627bp(LTh),240bp(STIa)和169bp(STIb)三种肠毒素基因片段，可同时鉴别LTh,STIa,STIb,LTh-STIa,LTh-STIb五种基因型的ETEC，与非ETEC对照菌无交叉反应，最小检出量为10cfu，显示了很高的特异性和敏感性，摸索出一种简便的腹泻粪便标本处理方法，并应用于山东省六县市ETEC感染的初步调查，为国内ETEC腹泻的分子流行病学研究提供了基本数据和较先进的诊断工具。     

应用荧光定量聚合酶链反应检测血清、肝组织中HBV-DNA含量观察HGV感染对慢性乙型肝炎HBV复制的影响

目的　探讨庚型肝炎病毒 (HGV)感染对慢性乙型肝炎 (CH B)患者乙型肝炎病毒 (HBV)复制的影响。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、过氧化物酶与抗过氧化物酶复合物 (PAP)法免疫组织化学、荧光定量PCR(FQ PCR)技术对 5 6例CH B患者血清HGV RNA、肝组织HGV Ag、血清及肝组织中HBV DNA含量分别进行了检测 ,并将血清HGV RNA与肝组织HGV Ag的表达、HGV RNA ,HGV Ag阳性与阴性患者HBV DNA含量进行了对比研究。 结果　血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性分别为 8例 (1 4 3 % )、1 0例 (1 7 9% )。血清HGV RNA阳性与肝组织HGV Ag表达显著相关 (P <0 .0 1 ) ,但部分肝组织HGV Ag阴性患者亦有血清HGV RNA表达。血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性与阴性患者血清及肝组织中HBV DNA含量均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　HGV感染对CH B患者HBV复制无影响。肝脏是HGV的复制场所 ,但可能亦有肝外组织器官中复制。HGV至多具有微弱的致病性 ,但仍然需要进一步研究。     

原位聚合酶链反应对胃癌和胃炎组织内幽门螺杆菌的检测

组织化学染色是检测幽门螺杆菌较灵敏的方法，但迄今为止所有组织化学方法均不特异，特别是在细菌数量较少或经治疗后，更易造成假阴性结果。为此，我们建立了原位聚合酶链反应方法，使用它对胃组织内的幽门螺杆菌进行检测。     

潜艇人员口腔卫生对口腔幽门螺杆菌和复发性口腔溃疡发病的影响

目的　通过对潜艇艇员口腔卫生和口腔幽门螺杆菌感染的调查 ,探讨复发性口腔溃疡(recurrent oral ulcer,ROU)在潜艇人员中发生率高的原因和幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori,H.pylori)在潜艇艇员复发性口腔溃疡发病中的意义。方法　对 36 4名潜艇艇员进行口腔卫生和 ROU患病情况调查 ,并通过 1min尿素酶试剂盒检查所有艇员口腔幽门螺杆菌感染情况。随机抽取 6 0例 ROU患者 (A组 )和 6 0例非 ROU艇员 (B组 ) ,通过聚合酶链反应 (polymerase chain reaction,PCR)对其口腔粘膜病损区 (A组 )或正常口腔粘膜 (B组 )、牙菌斑 H.pylori进行检测 ,并通过胃镜检查两组中胃病患病情况。结果　 36 4名潜艇艇员中 ,口腔卫生优良率仅为 2 2 .0 % (80 /36 4 ) ,ROU 的发生率高达 6 6 .8% (2 4 3/36 4 ) ,艇员口腔幽门螺杆菌 1m in尿素酶试剂盒检测阳性率 76 .6 % (2 79/36 4 )。A组中 ,5 2例口腔粘膜病损区、4 4例正常口腔粘膜、4 9例牙菌斑 H.pylori检测阳性 ,阳性率分别为 86 .7% ,73.3%和 81.7% ,与B组相比差异具有高度显著性 (P<0 .0 1) ;A组中 5 8例胃镜检查有不同程度的慢性胃炎 ,B组仅 2 2例 ,两组相比差异有非常显著性 (P<0 .0 1)。结论　口腔 H.pylori与 ROU的发病有关 ;潜艇环境口腔卫生较差导致口腔 H.pylo     

MecA、Nuc基因在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测中的应用

目的通过对180株金黄色葡萄球菌临床分离株MecA、Nuc基因的检测,以期选择出一种适合临床的并能简便、快速、准确检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA）的方法。方法细菌鉴定及药敏采用全自动细菌鉴定和药敏分析仪。MecA、Nuc基因检测采用荧光定量聚合酶链反应（fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）法。结果FQ-PCR对180株金黄色葡萄球菌MecA、Nuc基因检出率为75.0%,全自动细菌鉴定和药敏分析仪对180株金黄色葡萄球菌的MRSA检出率为72.8%,2种检测方法比较差异无统计学意义（P＞0.05）。全自动细菌鉴定和药敏分析仪对MRSA的检测正确率为94.8%。结论FQ-PCR检测MRSA正确率高,只需要1～2 h即可完成。该方法快速、简便、准确,值得推广应用。     

基于实时定量PCR技术的秀丽隐杆线虫肠道食物菌鉴定方法

目的：建立基于实时定量PCR技术的秀丽隐杆线虫肠道食物菌鉴定方法。方法采用实时定量PCR （ real-time quantitative polymerase chain reaction ,qPCR）分别对1、20、50只线虫进行肠道食物菌检测,分析成虫期和衰老期线虫肠道食物菌的变化情况。结果 qPCR可检测到单只线虫肠道食物菌含量,可准确反映不同样本之间肠道食物菌含量的变化。结论基于qPCR技术的线虫肠道食物菌鉴定方法可对线虫肠道食物菌进行准确定量,具有成本低、灵敏度高、特异性好的优势。