乳杆菌对小鼠宫颈鳞癌U14移植瘤抑瘤作用的研究

目的探讨乳杆菌(Lactobacillus LB)对小鼠宫颈鳞癌U14的抑瘤作用.方法建立KM和615近交系鼠U14移植瘤动物模型,并随机分组,检测实验组与对照组小鼠的瘤体平均重量和抑瘤率.结果与对照组比较,嗜酸乳杆菌(L acidophilus,LA)对两种品系小鼠移植瘤的抑瘤作用,均具有非常显著性差异(P＜0.01);提前给予LA组小鼠,其移植瘤生长速度显著慢于对照组(P＜0.01);LA及干酪乳杆菌(Lcasie,LC)对于小鼠U14移植瘤,亦具有显著抑瘤作用(P＜0.01),但LA与LC两组间抑瘤作用无显著性差异(P＞0.05).结论乳杆菌对小鼠宫颈鳞癌具有显著的抑瘤作用,可有效抑制肿瘤的发生和发展.     

乳酸杆菌与顺铂对小鼠宫颈癌抑瘤作用比较

目的　探讨乳酸杆菌 (LB)及乳酸杆菌与顺铂联合用药对小鼠宫颈癌U14抑瘤作用。方法　建立 6 15近交系U14移植瘤动物模型 ,并随机分四组 :PBS对照组、乳酸杆菌组、顺铂组、乳酸杆菌加顺铂组。检测各组瘤重及抑瘤率。结果　与对照组比乳酸杆菌组抑瘤率为 5 8 0 5 % (P <0 0 5 ) ,顺铂组抑瘤率为 81 4 % (P <0 0 1) ,乳酸杆菌加顺铂组抑瘤率为70 1% (P <0 0 5 )。单独顺铂治疗毒副作用强。结论　乳酸杆菌对宫颈癌具有显著性抑瘤作用 ,与顺铂联合用药治疗宫颈癌抑瘤作用强 ,并可减少毒副反应     

嗜酸乳杆菌作用人巨噬细胞后对其抗宫颈癌细胞作用影响的研究

目的 诱导获得人外周血巨噬细胞(Mф),研究嗜酸乳杆菌作用Mф后对其抗肿瘤效应的影响及机制.方法 自正常人外周血分离获得单核细胞,体外rhGM-CSF诱导培养,观察细胞形态并检测其相关表型;利用MTT法检测所诱导Mф对宫颈癌细胞HeLa的直接抑瘤效应;ELISA法检测其培养上清中TNF-α及IL-12的含量.结果 诱导7 d的贴壁细胞具有典型的Mф形态,流式分析显示为分化成熟的Mф;体外细胞毒实验显示:嗜酸乳杆菌活菌状态和热灭活状态以10:1、1:1与Mф相互作用后能够显著增强Mф对HeLa细胞的杀伤作用(P<0.05).激活后的Mф在一定效靶比为10:1时其肿瘤抑制率最大,与LPS阳性对照相比,其抗瘤活性差异不存在显著性(P>0.05);经嗜酸乳杆菌活菌和热灭活菌作用的Mф能显著提高IL-12和TNF-α两种细胞因子的分泌量,而且存在剂量依赖性,与空白对照组比较差异存在显著性(P<0.05).结论 两种生物状态的嗜酸乳杆菌均能够增强人Mф抗宫颈癌细胞作用.     

阴道内嗜酸乳杆菌的分离培育研究

目的 :分离培育阴道内嗜酸乳杆菌。方法 :通过筛选培养基组份及菌种防冻剂进行乳杆菌的培育和贮存。结果 :不同氮源、碳源及抑菌剂对嗜酸乳杆菌生长的影响及不同防冻剂对菌种活性的影响均有明显差异。结论 :选择适当的培养基和菌种保护剂利于嗜酸乳杆菌的大量生产及贮存。     

咖啡酸锗对小鼠移植瘤U14的抑制作用

有机锗化合物的广泛应用前景使得有机锗化学的研究呈现蓬勃发展趋势,最引人注目的是其作为生物活性物质的应用[1],尤其在1971年,日本学者浅井一彦发现了具有广谱药理活性的有机锗抗癌药物Ge-132[2],从而使有机锗化合物成为寻找高效低毒抗癌药物的研究目标。我们观察了咖啡酸锗对实验性小鼠移植性肿瘤U14的抑制作用,发现咖啡酸锗对U14瘤有较好的抑制作用。1材料与方法1·1动物及分组昆明种杂交小鼠40只,体重(18±1·0)g,雌性,由江西中医学院实验动物中心提供,随机分为4组,分别为生理盐水组,咖啡酸锗高剂量组、中剂量组、低剂量组。1·2药物…     

散结抗瘤方对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

目的：探讨散结抗瘤方体内抑瘤作用及机制。方法：本实验通过建立SRS－82瘤株荷瘤小鼠模型，用该复方煎剂给荷瘤小鼠灌胃，称瘤质量、计算抑瘤率、在电镜下观察瘤块切片，用琼脂糖凝胶电泳方法观察“梯状条带”。结果：中药治疗组与对照组相比瘤质量明显减轻，电镜观察和电泳均发现中药组出现较明显的凋亡特征性改变。结论：该复方在体内有明显的抑瘤效果，在诱导肿瘤细胞凋亡方面亦有明显的疗效。     

嗜酸乳杆菌部分生理特性的研究

目的：对嗜酸乳杆菌生长曲线等生理特性进行研究,初步掌握该菌的生长、繁殖和代谢规律。方法：按国标GB/T4789.35-2003的方法测定菌落总数。以培养时间为横坐标,pH值、滴定酸度和菌落总数对数为纵坐标,绘制菌株（种）生长曲线。通过测定pH值及OD值,确定菌株（种）的最佳培养条件。通过测定活菌数,确定菌株（种）的接种方法及生长促进因子。结果：综合分析生长曲线,确定嗜酸乳杆菌在5%接种量,37℃下最佳收获期为12h～16h;最佳培养条件：初始pH值5.8,37℃培养;选择4种天然廉价物料（添加剂）作为菌株（种）的促生因子,发现对其生长均有促进作用,影响大小依次为：西红柿汁5%〉香菇汁3%〉胡萝卜汁5%〉啤酒5%〉对照。结论：得到嗜酸乳杆菌的最佳生长条件,为菌液培养、冻干粉制备及活菌制剂打下基础。     

抑瘤饮影响小鼠S180移植瘤组织中Bcl-2和Bax表达的动态研究

目的动态研究中药复方制剂抑瘤饮体内对小鼠S180移植肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达的影响。方法BALB/c小鼠右腋皮下接种S180肿瘤细胞24 h后开始,抑瘤饮组小鼠每日灌服抑瘤饮,对照组小鼠每日灌服等量凉开水。分别于第10、20、30、40 d杀鼠取瘤制成切片,免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达,以图像分析系统对染色结果进行测定。结果各时间点抑瘤饮组肿瘤组织中Bcl-2表达均低于对照组,Bax表达均高于对照组。结论抑瘤饮体内抑瘤作用可能与下调肿瘤组织中Bcl-2表达,上调肿瘤组织中Bax表达,促进肿瘤细胞凋亡有关。     

新城疫病毒对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的抑瘤作用

目的 观察新城疫病毒（NDV）对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的抗肿瘤作用。方法 建立人肺腺癌细胞系在裸小鼠体内移植瘤动物模型,瘤体内1次局部注射NDV病毒作抗肿瘤研究,同时设PBS对照。观察5周,绘制肿瘤生长曲线,处死后量瘤并作光电镜观察其病理学改变。结果 NDV对裸小鼠人肺腺癌移植瘤的生长有明显地抑制作用（抑瘤率为71.62%)。NDV组与对照组瘤重均值之间差异显著（P＜0.01）。对照组14％的肿瘤发生肝及肺的转移。电镜下可见肿瘤细胞内NDV粒子出芽。结论 NDV对裸小鼠有俩腺癌移植瘤有明显地抑瘤作用。其抑瘤作用与NDV选择性地在肿瘤细胞内增殖并导致肿瘤细胞凋亡及溶解肿瘤细胞有关。     

扶正抑瘤颗粒药物血清诱导小鼠肝癌细胞凋亡及其机制的研究

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:采用扶正抑瘤颗粒药物血清,温育体外培养的H22小鼠肝癌细胞.流式细胞仪进行细胞周期分析,检测凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构变化;链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(streptavidin-biotin peroxidase complex,SABC)免疫细胞化学法观察凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化.结果:扶正抑瘤颗粒药物血清可影响细胞周期,使小鼠肝癌H22细胞的增殖阻滞在G1/G0期,并可测到凋亡峰,同时可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达(扶正抑瘤颗粒药物血清组与空白对照组比较,P<0.05).结论:扶正抑瘤颗粒可通过影响细胞生长周期,调节Bcl-2和Bax蛋白的表达诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

人阴道乳酸杆菌的抑瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:探讨从本地区健康女性生殖道内分离的三株产过氧化氢乳酸杆菌的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。方法:建立KM小鼠宫颈癌U14移植瘤动物模型,随机分组,以模型组作为阴性对照组,设顺铂(Di-aminodichloroplatin,DDP)、卡介苗(BCG)作为阳性对照组;乳酸杆菌组小鼠腹腔注射乳酸杆菌1010个/只,连续10 d;测定肿瘤抑制率和腹腔巨噬细胞的吞噬率及吞噬指数;MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞的增殖活性。结果:与模型组比较,三株乳酸杆菌处理组小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数均明显增高;小鼠脾脏的T、B淋巴细胞的增殖活性均显著增强;小鼠的U14移植瘤生长均受到抑制。结论:我们分离的三株阴道乳酸杆菌能够明显抑制小鼠宫颈癌U14的生长;能够增强荷瘤小鼠巨噬细胞和淋巴细胞活性,可能是阴道乳酸杆菌抗癌机制之一。     

甲氨喋呤和三磷酸腺苷诱导U937细胞凋亡机制探讨

目的 :探讨甲氨喋吟、三磷酸腺苷诱导髓性白血病细胞系U937细胞凋亡过程中P73mRNA的表达变化 ,以进一步了解P73基因在U937细胞凋亡中的作用。方法 :用上述药物诱导U937细胞凋亡 ,凋亡指标采用细胞形态学、DNA片段电泳、流式细胞术检测DNA含量等方法 ;采用半定量逆转录PCR (RT -PCR)检测P73mRNA的表达变化。结果 :甲氨蝶呤、三磷酸腺苷均可诱导U937细胞凋亡。 5 μmol/L的甲氨蝶呤和0 .2 5g/L的三磷酸腺苷分别作用于U937细胞 6h、2 4h ,光镜下见细胞明显聚集、体积缩小 ,Wright’s Giemsa染色见染色质明显浓缩、核碎裂等现象 ,而对照组未出现上述现象 ;DNA片断电泳见清晰的梯形条带 ;流式细胞仪检测 :5 μmol/L的甲氨蝶呤作用于U937细胞 6h、8h、10h ,细胞的凋亡率分别为 :5 .15 %、11.4 3%、14 .7% ,0 .2 5 g/L的三磷酸腺苷作用于U937细胞 2 4h、36h、4 8h细胞的凋亡率分别为 :2 .33%、11.90 %、35 .4 9% ,而对照组的细胞凋亡率分别为 :0 .0 0 %和 1.0 9% ;半定量RT -PCR结果 :与对照组相比 ,仅三磷酸腺苷处理 4 8h组P73mRNA的表达下调。结论 :在U937细胞凋亡过程中P73的mRNA表达差异无统计学意义。     

塞来昔布对埃克替尼诱导肺腺癌细胞A549凋亡作用的影响

目的 研究埃克替尼与塞来昔布联合应用对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响以及对EGFR、COX-2表达的影响。方法 埃克替尼、塞来昔布单独或联合干预细胞48h后,倒置相差显微镜观察药物干预后细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法测定细胞抑制率;HOECHEST33258荧光染色法和流式细胞术检测细胞凋亡和药物作用周期;免疫荧光检测EGFR和COX-2蛋白表达情况。结果 埃克替尼联合塞来昔布,相比单药组明显出现大量颗粒和空泡,细胞变圆开始脱落;埃克替尼与塞来昔布对A549细胞增殖有明显抑制作用,并呈浓度及时间依赖性,二者联合作用时抑制作用更强（P〈0.05）;埃克替尼与塞来昔布均能诱导细胞凋亡,联合作用后细胞凋亡率更高（P〈0.05）;联合用药与单独用药相比,可使细胞发生明显的G1期阻滞（P〈0.05）,进一步下调了EGFR和COX-2蛋白的表达（P〈0.05）。结论 埃克替尼与塞来昔布联合应用具有协同作用,机制可能与介导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期及阻滞EGFR和COX-2信号途径有关。     

P73基因在长春新碱诱导髓性白血病细胞系U937细胞凋亡过程中的表达

目的 :探讨长春新碱诱导U937细胞凋亡过程中P73mRNA的表达变化 ,以进一步了解P73基因在U937细胞凋亡中的作用。方法 :用长春新碱诱导U937细胞凋亡 ,凋亡指标采用细胞形态学、DNA片段电泳、流式细胞术检测DNA含量等方法 ;采用半定量逆转录PCR(RT -PCR)检测P73mRNA的表达变化。结果 :长春新碱可诱导U937细胞凋亡。 2 0 μg/ml的长春新碱使用于U937细胞 1 8h ,光镜下见细胞明显聚集、体积缩小 ,荧光染色见染色质明显浓缩、核碎裂等现象 ,而对照组未出现上述现象 ;DNA片段电泳见清晰的梯形条带 ;流式细胞仪检测 :长春新碱作用于U937细胞 1 8h ,2 4h ,细胞的凋亡率分别为 1 0 .54 %、35 .1 5 % ,而对照组的凋亡率仅为 0 .93 % ;半定量RT -PCR结果 :在U937细胞凋亡前后 ,P73mRNA的表达差异无显著性。结论 :在U937细胞凋亡过程中P73的mRNA表达差异无统计学意义     

丝裂霉素诱导人膀胱癌细胞凋亡的研究

为进一步探讨丝裂霉素膀胱内灌注治疗膀胱肿瘤的机制，研究了丝裂霉素诱导人膀胱癌 Ｂ Ｉ Ｕ８７ 细胞凋亡的规律。形态学观察具有典型凋亡征象，胞浆浓缩，染色质凝集，核固缩、裂解及凋亡小体。凋亡指数与诱导时间呈正相关（ Ｐ＜ ０．０１）；流式细胞仪 Ｄ Ｎ Ａ 直方图上出现特征性的亚二倍体（亚 Ｇ１ ）峰；凋亡过程中伴 Ｂｃｌ２ 基因的下调，且与诱导时间呈负相关 （ Ｐ＜ ００１）。提示丝裂霉素诱导癌细胞凋亡是腔内化疗的重要机制，降低 Ｂｃｌ２ 的表达可提高膀胱癌腔内化疗的疗效。     

术前区域化疗联合放疗对低位直肠癌细胞凋亡及术后复发的影响

目的:探讨术前区域动脉灌注化疗(Preoperative regional intra-arteral chemotherapy,PRAC)联合放疗在低位直肠癌新辅助治疗中可能发挥的作用.方法:对61例低位直肠癌病例随机分为3组,A组19例进行术前化、放疗,B组15例术前单纯放疗,C组27例术前未行任何化、放疗.采用原位末端标记技术(TUNEL法)检测每例治疗前及手术后的凋亡细胞.所有病例均得到18个月以上的随访.结果:全部施行根治性切除术.A组治疗前后凋亡指数(Apoptosis Indexes, AI)分别为(0.867±0.101)%和(5.389±0.517)%,B组分别为(0.875±0.098)%和(2.757±0.251)%,差异有统计学意义(P<0.01);C组分别为(0.927±0.135)%和(0.877±0.139)%,差异无统计学意义(P>0.05).三组治疗前AI之间无明显差异,三组术后AI之间差异有统计学意义(P<0.01).A组复发率5.26%(1/19),B组13.33%(2/15),C组33.33%(9/27), A组与B组的复发率均低于C组,差异有统计学意义(P<0.05).A组保肛率31.58%(6/19),B组26.67% (4/15),C组3.70%(1/27),A组与B组的保肛率均高于C组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:低位直肠癌 PRAC联合放疗可以促进癌细胞凋亡、降低复发率、提高保肛率,其用于新辅助化疗是安全、合理而有效的.     

bFGF预处理对Iso致大鼠心肌损伤及Fas/FasL系统的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对异丙基肾上腺素(Isoprenaline，Iso)致大鼠心肌损伤心肌细胞凋亡及Fas／FasL系统的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成三组：对照组、Iso损伤纽、bFGF预处理组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测Fas、FasL、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显上调，bFGF预处理组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显下调。结论：bFGF可通过抑制Fas、FasL、Caspase-3的蛋白及mRNA表达，减少心肌细胞凋亡而减轻保护大鼠的心肌损伤。     

三苯氧胺治疗乳腺癌分子机制及其与CDK4、PCNA的关系

目的 探讨三苯氧胺(TAM)治疗乳腺癌分子作用机制及其与细胞周期的关系.方法 TAM作用于ER(-)小鼠乳腺癌MA782细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布;MTT法检测细胞增殖活性;免疫法检测CDK4、PCNA蛋白表达量变化值,同时用病理图像分析软件进行半定量分析.结果 TAM(6、10 μmol/L)在体外能明显抑制MA782细胞生长,诱导细胞凋亡, TAM(6、10 μmol/L)作用于细胞24 h后,细胞凋亡率分别为7.04%﹑19.04%,与对照组比较结果有明显差异, TAM(10 μmol/L)作用于细胞24、48 h后细胞凋亡率从19.04%上升到51.27%,两时间段之间差异显著.免疫组织化学染色结果显示 TAM (2 μmol/L)作用于细胞不同时间后,CDK4、PCNA蛋白表达量无明显变化,而6、10 μmol/L TAM作用于细胞不同时间后,CDK4、PCNA蛋白表达量有不同程度的下降,与对照组相比差异显著(P＜0.05或P＜0.01).结论 TAM诱导MA782细胞凋亡的分子作用机制,可能与TAM下调细胞周期正性调节因子CDK4、PCNA蛋白表达量有关.