应用PCR检测406例HBV—DNA与HBVM关系的初步观察

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了４６例患者血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并同时检测乙肝标志物（ＨＢＶＭ），结果表明，急性乙型肝炎和慢性活动性肝炎患者的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率较高。２８名乙肝标志物均为阴性的患者中有２名ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；也性率占７．１４％，表明ＰＣＲ技术比ＨＢＶＭ更为敏感、特异。血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测有助于发现ＨＢｓＡｇ阴性的乙肝患者，这对于筛选献血员，保证血源质量及肝病的早期     

FQ—PCR测定HBV DNA与ELISA检测HBV—M相关性分析

目的探讨HBV DNA含量与HBsAgS／CO值之间的相关性。方法分别用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测100例乙肝患者的HBV DNA含量和乙肝两对半．并记录HBsAg S／CO值。结果100例乙肝患者HBV DNA含量对数值为（4．28±1．89），HBsAg S／CO值为（15．09±6．64），两指标间作相关性分析，r=-0．0156，P〉0．05，无相关性。结论HBV DNA是判断乙肝病毒复制的较准确、较直接的抗乙肝病毒疗效观察指标，而HBsAg S／CO值的高低与疾病的严重程度及疗效无关。     

孕产妇和新生儿血清及初乳中检测HBV—DNA

用PCR法在我院产科门诊做产前检查,乙肝病毒血清学阳性的孕产妇、新生儿对血清及初乳检测HBV－DNA。结果40例产女中19例在孕期检测了HBV－DNA,5例（5／19）为阳性;40例产女血清中11例（11／40）为阳性;40名产妇所生的新生儿血清中1例（1／40）为阳性;40名产妇中14例检测了乳汁HBV－DNA,其中4例（4／14）阳性。说明部分孕产妇血清和乳汁具有传染性,并1例新生儿已宫内感染。结果提示,对乙肝血清学指标阳性的待育或婚前妇女,应从婚前或孕前、孕期和新生儿进行血清及初孕中检测HBV－DNA,以便预防和阻断母婴传播。     

聚合酶链反应检测HBV DNA与乙肝病毒血清标志物的对比研究

聚合酶链反应检测ＨＢＶＤＮＡ与乙肝病毒血清标志物的对比研究袁晓璞，丁雁本文用套式ＰＣＲ检测３１８例患者血清乙肝病毒ＤＮＡ，同时用酶联免疫分析检测乙肝血清标志物二对半，以探讨乙肝病毒的感染与机体免疫反应的关系。材料和方法１．血清标本来源门诊及住院病人，...     

IRMA法及ELISA法检测HBV五项免疫学指标的结果分析

为了解在校大学生HBV血清免疫学标志物分布状况,应用ELISA法（酶联免疫吸附试验）和IRMA（固相放射免疫）法对886名在校大学生进行HBV血清标志物检测,并进行比较,现将结果报道如下。     

多重PCR归化法平行检测HBV和HCV的研究

目的：建立一种多重PCR归化法并应用于对HBV、HCV平行检测。方法：利用PCR反应5′端允许添加非互补序列的原理，运用内外两对引物，经过2轮扩增，使目的产物均带上共有序列，再以共有序列为引物进行扩增，实现多重扩增。比较和筛选四种核酸提取方法。运用正交优化法，优化并确定最佳扩增条件。对28份血标本进行对比试验，并进行质量评价。结果：归化多重PCR方法对于HBV、HCV病毒合并感染患者的诊断敏感性为83.5%，诊断特异性为70.0%，诊断指数为153．3％，诊断效率为72．2％；对HBsAg阳性患者的HBV DNA的诊断敏感性为78．6％，诊断特异性为80．0％，诊断指数为158．6％，诊断效率为79．2％。对抗－HCV阳性患者的HCV RNA的诊断敏感性为75．0％，诊断特异性为90．0％，诊断指数为165．0％，诊断效率为83．3％。结论：多重PCR归化法在多基因扩增或多种病原体的同时平行检测领域具有较大应用潜力。该方法实用、准确、可靠，对HBV HCV的防治具有实际意义。     

ELISA和PCR法筛查无偿献血者结果的分析

通过ELISA法对抗-HCV进行筛查,仍有输血后HCV的感染,这是目前多数输血相关传染病多为丙型肝炎的主要原因.为此,发达国家正在大力推行对病毒核酸的检测,美国、日本等国于1999年先后批准对献血者实施混合血浆的核酸检测.     

HBV感染者血清HBV DNA定量检测临床价值的探讨

为评价HBV感染者血清HBVDNA定量检测的临床价值，我们对636份临床血清标本进行HBVDNA含量、HBV标志物检测。并对它们进行了对比研究，现将结果报道如下。     

乙型肝炎血清标志物RIA与HBV DNA检测结果的比较

乙型肝炎血清标志物ＲＩＡ与ＨＢＶＤＮＡ检测结果的比较王书奎，时宏珍，傅雷，王自正本文用ＲＩＡ检测了急性乙型肝炎、慢性迁延性肝炎和慢性活动性肝炎患者的部分血清学指标，并与ＰＣＲ对ＨＢＶＤＮＡ的检测结果进行比较，以探讨他们在肝炎诊断中的价值。对象和方法２...     

乙肝患者HBV标志物与HBV-DNA定量检测结果分析

乙肝病毒感染后的临床表现形式十分复杂 ,ＨＢＶ血清标志物 (ＨＢＶ -Ｍ)组合 ,其表现模式有 15种以上。近年来随着聚合酶链技术的大力推广与普及 ,许多学者报道存在ＨＢｓＡｇ阴性 ,而ＨＢＶ -ＤＮＡ阳性的ＨＢＶ感染。有人提出仅根据病毒存在与否的定性ＰＣＲ尚难以明确其临床意义[1] 。用荧光定量ＰＣＲ技术对血清ＨＢＶ -ＤＮＡ进行定量测定 ,实现了对核酸信息的分析比较 ,为肝病的诊断和治疗提供了更有效的基因水平信息[2 ] 。本文对 318例乙肝患者血清ＨＢＶ -ＤＮＡ定量测定 ,同时进行乙肝病毒标志物的定量检测 ,以探讨ＨＢＶ -ＤＮ…     

孕产妇和新生儿血清乙肝免疫标志物与HBV—DNA检测结果的比较…

利用ＨＢＶ－ＤＮＡ出现先于血清其它血清学指标理论依据。采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对乙肝免疫标志物至少一项改变的２００例孕产妇、新生儿血清进行ＰＣＲ扩增，结果有１０８份标本ＨＢＶ ＤＮＡ阳性、总阳性率为５４％。其中ＨＢｅＡｇ阳性率８３．３％（７０／８４），ＨＢｓＡｇ阳性率４８％（２４／５０），ＨＢｅＡｂ阳性率１０．５％（２／１９），ＨＢｓＡｂ９．８％（２／２２），可见ＰＣＲ早期诊断，判断其传染性，     

乙型肝炎患者父子间HBV DNA U5样序列的研究

为了探讨乙型肝炎的遗传传递，我们对乙型肝炎患者３８个家系８２个个体检测了血清游离型和外周血单核细胞内整合型ＨＢＶ ＤＮＡ Ｕ５样序列片段和单链ＤＮＡ构象多态性等实验指标。发现男患者及其发病后出生子女Ｕ５样序列检出率均显著高于其发病前出生子女；Ｕ５样序列检出率在ＨＢＰ和其发病后出生子女呈一致性增高；ＨＢＰ与其发病后出生子女可具有完全一致的单链泳动变位结果。     

标本久置对ELISA法检测乙型肝炎表面抗原结果的影响分析

目的：探讨标本久置对ELISA法检测乙型肝炎表面抗原的影响。方法筛选强阳性、弱阳性及阴性标本若干份,用ELISA法对同一标本进行当天和隔日检测。结果强阳性及阴性标本放置前后,乙型肝炎表面抗原检测结果相同,无明显差异,而弱阳性标本放置后,出现假阴性。结论标本久置会使乙型肝炎表面抗原的免疫活性减弱,从而遗漏乙型肝炎表面抗原弱阳性者。     

三种HBV荧光定量PCR检测试剂的比较及结果分析

目的 评估3种HBV DNA荧光定量PCR检测试剂的临床应用性能.方法 通过平行检测1001例临床血清样本及梯度稀释的阳性样本,从定量线性范围、准确性、灵敏度、特异性等方面,比较分析A试剂（磁珠分离法）、B试剂（免核酸提取的＂一步法＂）与目前国内临床广泛应用的优质试剂C的相关性和差异,并与免疫学结果进行比较.结果 767例均有数值的标本中,三种试剂均值差异无统计学意义.但在低病毒载量组中,结果相差较大,A试剂灵敏度最高,B试剂次之,C试剂排后.结论 采用了＂一步法＂免核酸提取的B试剂,核酸得率高,具有较宽的检测范围和定量准确性,操作极其简单,不失为一种上佳的选择.     

应用实时荧光PCR技术检测HBV YMDD变异

目的　应用YMDD变异荧光PCR检测试剂盒检测乙型肝炎病毒 (hepatitisBvirus,HBV)聚合酶基因区的酪氨酸 蛋氨酸 天门冬氨酸 天门冬氨酸基序 (tyrosine methionine asparticacid asparticacid ,YMDD)变异 ,希望能够替代目前使用的测序方法。方法　对 4 7例血清标本使用荧光PCR技术检测YMDD变异 ,其YMDD变异结果与DNA测序结果进行比较。结果　荧光PCR方法测得YMDD野生株 2 8例 ,变异株 19例 ;与DNA测序结果完全一致 ,符合率为 10 0 %。结论　荧光PCR技术检测YMDD变异具有方便、快速、准确的特点。     

PCR微波／双温法检测HBV DNA的研究

乙型肝炎病毒ＮＤＡ在病人血液中的存在是病毒感染的最可靠指标。本文建立ＰＣＲ微波／双温测定病人血液中ＨＢＶ ＤＮＡ，操作简单、灵敏、快速、准确。全部反应同一离心管中完成，减少可能出现的污染，从而极大限度地降低了假阴性和假阳性的产生率，对乙肝患者的确诊具有非常重要的意义。     

国产HBV DNA荧光定量PCR试剂检测准确性的初步分析

目的 评价国产HBV DNA荧光定量PCR试剂检测结果的准确性.方法 美国Roche公司COBAS TaqMan HBV Test对标本的HBV DNA定量为标准,评价国产HBV荧光定量PCR试剂(PG)对不同滴度的标本的检测准确性.结果 在病毒载量分别为10~1、10~2、10~3、10~4、10~5、10~6、10~7(IU/mL)范围内的标本中,国产试剂检测结果与Roche定量结果的相关性分别为:-0.08011、-0.05056、0.105642、0.312181、0.908046、0.866175、-0.23295;结果为阴性(低于检测范围)的比例分别为:60%、30%、33.3%、8.3%、0、0、0.对于病毒载量高于10~7(IU/ml)的标本,国产试剂检测结果全部低于美国Roche定量结果,至少低一个数量级.结论 国产HBV荧光定量PCR试剂线性范围较窄,仅对病毒载量在10~5～10~6(IU/ml)范围的标本检测结果准确,对于低病毒载量,尤其是低于10~3(IU/ml)的标本,结果不可靠,假阴性率较高.而对于病毒载量高于10~7(IU/ml)的标本检测结果也欠准确.因此,建议对病毒载量低于10~4(IU/ml)的标本采用美国Roche试剂检测,对于高于10~7(IU/ml)建议稀释标本后重新检测.     

多色荧光PCR法检测HBV耐药位点突变

目的 利用多色荧光PCR技术,建立一套快速检测HBV耐药位点突变的方法 ,并对临床收集的服药患者血清进行耐药位点检测.方法 建立2个反应体系,每个反应体系包含4个耐药位点.对新建的多色荧光PCR法进行灵敏度和特异性分析,并对30例临床收集的服药患者血清进行耐药检测.结果 构建了多色荧光PCR检测HBV耐药位点的体系,其特异性较好,分析灵敏度可达1×103拷贝/ml.30例样本中检测到YVDD 2例（占6.67%）,YIDD 1例（占3.33%）;1896位点变异5例,占总数的16.67%.其他位点未检测到耐药突变.结论 所构建的多色荧光PCR检测体系为临床医院提供快速、简便的HBV耐药位点突变检测手段.HBV基因前C区的1896位点变异率较高.